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Concepto de Microbiologa
Historia
Definicin de Microbiologa
Ciencia que estudia los microorganismos
Microscopio
Tcnicas de cultivo puro en laboratorio
Etc.
Descubrimiento de los
microorganismos
Antonij van Leeuwenhoek:
Microscopio simple
Descubrimiento de los microorganismos
(animlculos en agua de estanque, 1675)
Describe bacterias
Describe protozoos
Robert Hooke:
Microscopio compuesto
Describe hongos filamentosos (1667)
Leeuwenhoek y su
microscopio simple
Clasificacin de los
microorganismos
Antes del descubrimiento de los MO se crea
que los seres vivos conocidos eran animales
y plantas. Los reinos animal y vegetal podan
separarse de forma precisa; mientras que los
conocimientos sobre los MO eran escasos.
Para evitar clasificaciones arbitrarias,
Ernest Haeckel, en 1866, propuso el reino de
los PROTISTAS, que inclua a las algas,
hongos, protozoarios y bacterias.
PROTISTAS
Algas
Protozoarios
Hongos
Bacterias
Historia de la Microbiologa
El debate sobre la
generacin espontnea
Ideas asumidas desde Aristteles
Redi (1668): experimentos que descartan la
microorganismos
pleomorfismo y monomorfismo
Su resolucin dependi de cultivos puros (laboratorio
de Robert Koch)
lleva su nombre
Medios de enriquecimiento y medios diferenciales
(Beijerink, Winogradsky)
individuos enfermos
El microorganismo debe aislarse del husped
enfermo en cultivo puro
El microorganismo crecido en cultivo puro, al
inocularse en animales sanos, induce en ellos
la enfermedad
De estos animales experimentales inoculados
y ya enfermos, se puede volver a aislar el
microorganismo
Postulados de Koch
Asepsia, quimioterapia
La introduccin de anestesia (mediados
neumococos
Desarrollo de la asepsia
Antibioterapia
Fleming (1929): extracto crudo de penicilina
Desarrollo de la antibioterapia
Diferencias
PROCARIOTAS
Genforo
un solo cromosoma
ADN c.d.
no membrana nuclear (no
hay ncleo autntico)
no histonas
Replicacin: no mitosis
Org. citoplasma
EUCARIOTAS
Nucleoplasma
varios cromosomas
ADN cadena doble lineal
existe membrana nuclear
(hay ncleo autntico)
histonas
Replicacin: mitosis
Org. citoplasma
no orgnulos de tipo
eucaritico
no citoesqueleto
orgnulos (mitocondrias,
cloroplastos, retculo
endoplsmico, aparato de
Golgi, lisosomas...
existe citoesqueleto,
corrientes citoplmcias
Ribosomas de tipo 80S
Comparacin de clula
procaritica y eucaritica
Un tamao tpico:
0,5 x 3 micras
Tamao pequeo:
consecuencias metodolgicas
Hay que recurrir a microscopios y
normalmente a tinciones
La inmensa mayora de los estudios se
realiza con poblaciones enormes, de las
que se sacan promedios
Es muy raro estudiar un individuo cada
vez
Formas tpicas
Cocos
Bacilos
Espirilos
Vibriones
Otras formas:
Filamentos
Anillos casi cerrados
Con prolongaciones (prostecas)
Agrupaciones bacterianas
Un solo plano de divisin
De dos clulas:
Diplococos
diplobacilos
ESTRUCTURAS DE LA CLULA
PROCARITICA
Cpsula
Pared celular*
Membrana citoplasmtica*,
Citoplasma, incluye: genoma (nucleoide) ,
integrales
Las capas mucilaginosas son flexibles y
perifricas
Glucoclix: capas superficiales compuestas
de polisacrido
Sirven para adhesin entre clulas, y
colonizacin de nichos. En muchas
patgenas sirven, adems, para protegerse
de agentes antibacterianos
cpsulas polisacardicas
heteropolisacridos aninicos
heteropolisacridos neutros (levanos,
dextranos, pentanos, celulosa)
alginatos
cpsulas polipeptdicas (en Bacillus)
antibacterianos
Adhesin a sustratos
Papeles de la cpsula en la
adhesin a sustratos
A sustratos inertes, microcolonias de la
corrosin de caeras
formacin de placa dental y caries
formacin de biopelculas en catteres y prtesis
Pared
celular
Peptidoglucano: composicin
qumica
La unidad disacardica que se repite es:
N-acetilglucosamina (NAG)...
...unida por enlace (14) con...
... N-acetilmurmico (NAM)
El PG de bacterias Gram
negativas
Normalmente:
1 capa de PG.
Las distintas cadenas se unen por enlaces peptdicos
directos entre el grupo -NH2 del m-DAP de una cadena
con el COOH de la D-ala de otra cadena
Malla floja con grandes poros: 50% NAM carece de
tetrapptidos
En espiroquetas, el diaminocido en posicin N
Relaciones estructura-funcin
en el peptidoglucano
Gran rigidez aguanta las fuerzas osmticas del
El grado de entrecruzamiento
El enlace (14) es muy compacto. La alternancia de NAM y
NAG uno de los polisacridos ms estables que existen
La alternancia de aa en L y en D estabilidad adicional
(cadenas laterales al mismo lado, puentes H)
cidos miclicos
PGarabinogalactanocidos miclicos
Resistencia a desecacin
Resistencia a agentes antibacterianos
Detergentes
Oxidantes
cidos
y bases
Membrana citoplasmtica
Nucleoide
Representado por el
cromosoma de la bacteria
(ADN), de tira nica y
circular
Plsmido
Elementos genticos (ADN)
extracromosmicos
con
capacidad de replicacin
autnoma
Espora
Cuerpos esfricos, ovoides refringentes incluidos en
la clula vegetativa (clula madre).
Constituidos por iones Ca++ y cido dipicolnico, que
le confieren elevado poder de resistencia a las
condiciones hostiles
Pueden ser deformantes o no deformantes
Espora
Flagelos
Lofotricas
Monotricas
Peritricas
Fimbrias
Son apndices filamentosos rectos y rgidos, ms cortos y ms
finos que los flagelos, compuestos por la pilina
Existen dos tipos principales de pili: adhesivas y sexuales
Reproduccin
Se
reproducen
por
biparticin o fisin binaria,
en la que a partir de una
clula madre se originan
dos clulas hijas idnticas
a la primera. El tiempo
requerido para formar 2
clulas a partir de una se
denomina
tiempo
de
generacin, que puede ser
de minutos, horas o das.
Nutricin microbiana
Autotrofa y heterotrofa.
Macronutrientes y micronutrientes.
Nutrientes universales y particulares.
Fijacin de N2. Factores de crecimiento
Conceptos
Energa de radiaciones fototrofa
Fermentaciones: regeneracin de
NAD+ y productos de fermentacin
Productos principales
cido lctico
Etanol, CO2
Etanol, succnico, actico,
Butilenglicol, CO2
Acetono-butrica
butanol, CO2, H2
Necesidad de oxgeno
Bacterias aerobias: aquellas que necesitan O2 para su
Necesidad de temperatura
Psicrfilos (0 - 20C)
Necesidad de pH
La regulacin del pH interno de los MO se realiza por un sistema
Conceptos bsicos
Nutricin: captacin del medio de las
Conceptos bsicos
Macronutrientes: C, H, O, N, P, S, K, Mg
Micronutrientes (elementos traza): Co, Cu, Zn,
Mo, etc
El mundo microbiano es de una sorprendente
diversidad metablica. Algunos metabolismos
solo han evolucionado en procariotas.
Ejemplos:
Clases de nutrientes
Universales, requeridos en esta forma por
Factores de crecimiento
Factores de crecimiento
El agua
Fuentes de agua:
El CO2
El CO2 le hace falta a todos los procariotas
Fosfatos
El P suele requerirse en forma de
fosfatos
extracelulares (secretadas) en
Gram-positivas
periplsmicas en Gram-negativas
fosfatos inorgnicos
teicoicos de Gram+)
Mg (estabiliza ribosomas, membranas y
cidos nucleicos; cofactor en reacciones con
ATP; en clorofilas y bacterioclorofilas)
Ca (cofactor de enzimas como proteinasas)
Fe (en citocromos, FeS-protenas; cofactor en
enzimas)
Oligoelementos o micronutrientes
Nutrientes particulares
Elementos N y S pueden ser cubiertos de
Curva de crecimiento
GENTICA BACTERIANA
GENOMA BACTERIANO
- Macromolcula circular cerrada covalentemente formada
por 2 cadenas de nucletidos unidas por puentes de H.
- La nueva cadena se forma en el mismo sitio en que se
produjo la rotura del ADN bicatenario.
- El crecimiento de la molcula se produce en forma
bidireccional a partir de inicio de la replicacin.
- Interviene ADN polimerasa y debe existir en citoplasma
precursores en forma de sal trifosfato.
PLSMIDOS Y EPISOMAS
- Elementos genticos constituidos por ADN de doble
cadena superenrrollado y cerrado covalentemente.
- Los Episomas pueden integrarse al genoma
bacteriano, quedando bajo su control de replicacin.
- Plsmidos codifican bsicamente 3 grupos de genes:
los de replicacin, los de caract. fenotpicos, los de
formacin de pili.
- En E. coli es bien conocido el plsmido del factor F
(fertility) que se puede transferir y adems integrarse
en el cromosoma-episoma.
ELEMENTOS TRANSPONIBLES:
TRANSPOSONES
Los genes en los seres vivos no son estticos, pudiendo en
VARIACIN GENTICA
Conj. de mecanismos por lo que las bacterias pueden
Mutaciones en el ADN.
Adquisicin de nuevos genes: transformacin, conjugacin,
transduccin y transposicin.
TIPOS DE MUTACIONES
Pueden ser puntuales, en una sola base o por sustitucin,
Gly
Lys
Arg
Leu
Val
Tyr
AU G C AG AAAAG G C U G G U C U U C
Met
Gly
Lys
Arg
Leu
Val
Isoleu
Gly
Lys
Arg
Leu
Val
Tyr
AU G C G AAAAG G C U G G U C U AC
Met
Arg
Lys
Gly
Trip
Ser
RECOMBINACIN GENTICA
Surge cuando dos elementos genticamente distintos se
combinan en uno. Comprende tres procesos: Transformacin,
conjugacin y transduccin.
La TRANSFORMACIN es la adquisicin de nuevos genes por
parte de algunas especies bacterianas. Fue descubierta por
Griffith en 1928 estudiando la infeccin gonoccica en ratones.
Griffith comprob que la virulencia del neumococo guardaba
relacin con la presencia de una cpsula polisacrida.
La transformacin puede ser natural o artificial. Algunas
bacterias patgenas que se transforman en forma natural son
Streptococcus peumoniae, Neisseria gonorrhoeae y
Haemophilus influenzae.
El desarrollo de la transformacin artificial fue esencial para el
avance de la tecnologa del ADN, tambin llamada ingeniera
gentica.
RECOMBINACIN GENTICA
La CONJUGACIN transferencia de ADN cromosmico o
plasmdico, desde una bacteria donadora a una receptora,
mediante contacto fsico.
En bacterias Gram(-) la transferencia de ADN se hace a
travs del pili.
En bacterias Gram(+), las dadores de ADN forman protenas
de contacto (adhesinas) en la superficie celular para
receptores de superficie (un cido lipoteicoico) de las
clulas carentes de plsmidos, que obran como inductoras
de adhesinas mediante la sntesis de feromonas
(Streptococcus faecalis).
Se han hallado plsmidos R (resistencia a los antibiticos)
conjugadores en Gram(+) como Streptococcus,
Streptomyces y Clostridium.
RECOMBINACIN GENTICA
La TRANSDUCCIN, transformacin de ADN mediada por
bacterifagos. stos pueden infectar a las bacterias con
replicacin masiva de los mismos ciclo ltico- o bien
integrarse en su genoma ciclo lisognico, hacindose en
este ltimo caso ms lenta la liberacin de los fagos.
La integracin del fago puede hacerse en un lugar
predeterminado del cromosoma o bien al azar.
La transduccin generalizada o no especfica es la que
generalmente se produce en el ciclo ltico. Cualquier
secuencia genmica puede quedar unida a la del virus y
convertirse en infectante para otras bacterias.
La transduccin especializada tiene lugar preferentemente
durante el ciclo lisognico y en la misma se transfiere uno o
varios genes concretos. Un ejemplo , es el de fago lambda
en E. coli.