I Les diffrents milieux

A Dfinition
B Les milieux solides
C Les milieux liquides

II Les diffrents types densemencements

A Ensemencements sur milieux solides
1 Les botes de ptri
II Les milieux en tubes
B Les ensemencements en milieux liquides

En microbiologie, il existe diffrents moyens didentifier

des bactries.
On utilise diffrents milieux, avec des compositions et
aspects divers, que ensuite nous ensemenons avec
plusieurs mthodes.

Milieu BCP avant et aprs ensemencement

Les milieux solides sont obtenus partir de milieux

liquides, auxquels on ajoute un glifiant: le plus souvent
de lagar ou de la glose.
Parmi ces milieux, certains sont couls en botes de
Ptri ou en tube avec une teneur en glose denviron 15
g/L, alors que les gloses molles ou semi-solides, ont
une teneur de 3 5 g/L et prsentent une consistance
intermdiaire.
Bote GNO

Tube Citrate
de Simmons

Ces milieux sont la plupart du temps des bouillons

nutritifs ordinaires. Ils ont trois composants principaux:
les peptones, les extraits de viandes et les extraits de
levures.
Les peptones sont des hydrolysats enzymatiques de
protines animales ou vgtales riches en acides
amins et en peptides.
Les extraits de viandes apportent des sels minraux,
des vitamines, des protines peu dgrades et des
glucides.
Les extraits de levure eux reprsentent une source
dacides amins et des vitamines hydrosolubles.

On peut aussi utiliser des billes de verres que lon dpose

sur le milieux avec des gouttes de suspension. Puis, on
agite la bote et on enlve les billes.

Il existe aussi lensemencement laide dun rteau, qui

consiste faire un beurrage du milieu. On dpose un
volume dfini sur la glose, et avec ce quon appelle un
rteau, on tale toute la suspension sur la glose.

Enfin, souvent utilis pour le dnombrement des colonies,

on peut faire un ensemencement en masse. On dpose
une goutte de suspension dans une bote de ptri vide, et
ensuite, on coule la glose par-dessus. Il faut agiter pour
bien que la suspension se rpartisse.

La plupart des ensemencements solides en tubes, se

font part des stries en surfaces le long de la glose.
Pour certains milieux soit il suffit juste dune piqre
centrale dans la glose, ou alors, en plus des stries, il
faut ajouter une piqre centrale pour complter
lensemencement.
Certains milieux, on les ensemence avec une piqre
centrale, et on remonte ensuite en tournant dans tout le
tube ( Viande Foie, Mevag).
Milieu Mannitol
Mobilit Nitrat avant
et aprs ensemencement

Il existe deux types d'ensemencement en milieu liquide :

Soit on ralise d'abord une suspension, c'est dire que
l'on prlve des colonies sur une glose que l'on place
dans de l'eau distille puis on prend quelque goutte de
cette suspension que l'on met dans notre milieu
ensemencer l'aide d'une psipette.
Soit on a dj un bouillon nutritif ordinaire,
cette fois la suspension na pas tre faite, on prend
directement des gouttes du bouillon.

Milieu hypersal

En somme, il existe donc diffrents types de milieux

avec leur diffrents ensemencements, mais ce sont
les plus couramment utilis. En effet, il y a de
nombreux types de milieux avec des
ensemencement divers.
Il existe par exemples diffrentes galeries API, qui
sont plusieurs micro cupules avec chacune un
caractre pouvant permettre lidentification dune
bactrie.
Pour pouvoir identifier une bactrie, il faut connatre
ses exigences, pour connaitre les milieux
ensemencer, car parmi les diffrents milieux solides
et liquides, chacun on leurs propres proprits:
synthtique, empirique, slectif,

www.dmipfmv.ulg.ac.be/bacvet/m/cours3VMB/TP/m
ilieux.doc
http://pedagogie.actoulouse.fr/svt/serveur/labo/techniques/5steril.html
http://books.google.fr/books?id=MQheAQlLRVAC&
pg=PA14&lpg=PA14&dq=bouillon+nutritif+ordinaire
&source=bl&ots=BcidHi1qlB&sig=Gm-6_9xUzFjaQ2MiS4w3cES0E&hl=fr&ei=sRG1SfLyDuTSjAeY17z
YBQ&sa=X&oi=book_result&resnum=1&ct=result