Transferencia de masa

En un proceso de bioreaccin, los sustratos son consumidos y los productos son

formados por accin de un microorganismo, partes catalticas de un
organismo, por ejemplo enzimas.
Los sustratos tpicos para una clula viviente son la fuente de carbono como son
los azcares y el aceite, fuentes de nitrgeno como amonaco y aa, aceptores de
electrones como el O2.
Los productos pueden ser toda clase de compuestos orgnicos, biomasa y CO2 .
Para una velocidad ptima de reaccin, el microorganismo, el investigador
acadmico el proceso industrial de ingeniera deben ser tal que la transferencia
de sustratos a la enzima superficie celular ( el sitio de reaccin dentro de la
clula), y la remocin de P hacia afuera de la enzima u organismo sea lo ms
rpida posible, y preferiblemente que no haya etapas limitantes en la velocidad
de la reaccin.
Esta transferencia involucra una serie de etapas. La etapa ms lenta es la que
determinar la velocidad de transferencia de masa total, y su valor debe ser
comparado con la etapa de reaccin cintica ms lenta, para ver si la
transferencia de masa afectar el comportamiento del proceso total o no.
Enfocaremos reacciones que involucran clulas enteras. En biotransformaciones
enzimticas, las clulas estn ausentes y el N de etapas de transferencia de
masa disminudo, pero se pueden aplicar los mismos conceptos.

Cadena de etapas de transferencia de masa para un sustrato nutriente desde

una burbuja de gas, gotas de lquido, partculas slidas hacia el sitio de reaccin
dentro de la clula.

Etapas en la transferencia de masa

1- Transferencia (principalmente por difusin) de sustratos desde la fase
gaseosa, fase lquida slida a la interfase lquida acuosa.
2- Transporte (por una combinacin de difusin y conveccin) a travs de una
pelcula delgada de fase acuosa que rodea a la burbuja de gas, gotas de lquido,
partculas slidas.
3- Transporte (por conveccin turbulencia) a travs de la fase lquida a una
capa delgada que rodea al microorganismo a partculas (aglomerados, pellet,
carrier de inmovilizacin) que contiene a un grupo de organismos.
4- Transporte (difusivo) a travs de esta capa a la superficie celular.
5- Transporte (pasivo por difusin y / o activo con transporte de enzimas), por
fuera de la membrana celular a un sitio dentro de la clula donde la reaccin tiene
lugar.
Los productos formados hacen el camino inverso.

Fermentadores con y sin agitacin mecnica: modos de

contacto gas - lquido

Reactores mecnicamente agitados

Efectos de las limitaciones de la transferencia

Si una etapa de transferencia de masa es ms lenta que la etapa de reaccin
cintica clave, esto limitar la formacin de un P deseado a partir de un dado
sustrato.
Como resultado, se pueden observar dos efectos tanto con clulas libremente
suspendidas con organismos inmovilizados dentro de agregados de clulas
partculas slidas.
La velocidad de reaccin total es menor que la mxima terica, y el output del
proceso es menor que el deseado. Ej: en la formacin de cido glucnico a
partir de glucosa por una bacteria aerbica gluconobacter oxidans.
La velocidad total de la reaccin est determinada por la velocidad a la cual el
oxgeno es transferido a la fase lquida.
Otro Ej es el suministro limitado de azcar a clulas inmovilizadas debido a la
poca difusin dentro de un carrier de inmovilizacin.
La velocidad total de produccin es a menudo reducida reversiblemente.
Hay Ej de sistemas donde la capacidad biosinttica de una clula se daa
irreversiblemente despus de exponerse a una limitacin de transferencia de
oxgeno (fermentacin de penicilina).
La selectividad de la reaccin es alterada. Por Ej el oxgeno sirve como un
aceptor de electrones en la formacin de las levaduras de panadera a partir de
glucosa.

En ausencia de oxgeno los electrones se dirigen al piruvato resultando la

formacin de etanol y CO2 , en vez de producir ms levaduras.
Otro Ej son los cultivos de Bacillus subtilis para la produccin de acetona y 2,3
butanodiol. La relacin de estos dos productos depende de la [O2] disuelto, y
de la relacin entre velocidades de transferencia y consumo de O2 .De nuevo el
dao puede ser reversible irreversible.

Transferencia entre fases

La transferencia de oxgeno a partir de una burbuja de aire al microorganismo en
un bioproceso aerbico es una etapa de transporte relativamente lenta. El
oxgeno y otros gases solubles que se dispersan en soluciones acuosas ( como
hidrocarbonos hasta 4 tomos de carbono), pueden depleted caer rpidamente
cuando son consumidos. Si no se los reemplaza a la misma velocidad alta la
situacin ser nefasta para el microorganismo. La transferencia de material
lquido - lquido lquido slido es comparable con la transferencia de masa
gas lquido.
Un Ej. Es el crecimiento sobre hidrocarbonos superiores (> 6 tomos de C). La
fase aceitosa est presente en la forma de pequeas gotas y la resistencia a la
transferencia de masa est a un lado de la capa acuosa limitante.
Tambin el intercambio de material entre una fase slida (partculas de sustrato,
partculas que contienen microorganismos) y la fase lquida obedece a principios
similares.

Transferencia dentro de una nica fase

Dentro de una burbuja de gas gotas de aceite hay el movimiento suficiente para
garantizar una transferencia rpida de molculas a la interfase con la fase acuosa,
tal que la resistencia est del lado acuoso de la interfase. Si la distancia en toda la
fase lquida es muy larga, puede ocurrir una resistencia de transporte. Esta
situacin se da en biorreactores largos donde el lquido se mezcla de una forma
sub ptima. En la industria es importante tener en cuenta esta limitacin sobre el
sistema de reaccin microbiana.
Las limitaciones de transferencia de masa dentro de una fase slida puede ocurrir
con partculas de biocatalizadores que contiene microorganismos inmovilizados, ya
sea como un bio film superficial unido a un carrier, dispersadas a travs del
material del carrier.
El microorganismo usualmente filamentoso puede estar como aglomerado pellet.
Un sustrato que entra a la partcula pellet puede consumirse tan rpido que nada
entra al interior de la partcula, por lo tanto la eficiencia del catalizador es casi
mxima.
Adems la reaccin puede declinar debido a un producto inhibitorio txico, por lo
tanto no se puede mover lo suficientemente rpido.

Transferencia a travs de la membrana celular

El microorganismo por si mismo puede considerarse como una fase separada
(slida lquida). El transporte a travs de la envoltura celular (pared y
membrana) ouede ser limitado, dependiendo del tamao y propiedades fsicas
(hidrofobicidad, carga elctrica) de la molcula y si el organismo est equipado
con un mecanismo de transporte especfico no.
Se distinguen tres mecanismos:

Difusin libre: transporte pasivo regido por una gradiente de concentracin.

Difusin facilitada: usa una protena carrier.
Transporte activo: el transporte se hace tambin con una protena carrier con el
aporte de energa libre.

El dimetro de las clulas microbianas es muy pequeo (1 a 5 micras) tal que la

difusin dentro de la clula es ms rpida que el transporte a travs de la
envoltura celular. Adems en clulas eucariotas hay orgnulos intracelulares
(vacuolas, mitocondrias) que pueden representar otra barrera al transporte.
Sin embargo en trminos cuantitativos este tipo de transporte es mucho ms
rpido que la velocidad de consumo dentro de la clula, y normalmente no limita la
velocidad total en la cadena de etapas del transporte.

Ecuaciones de transferencia de masa

La ecuacin de Fick establece que la transferencia de masa, J, de un componente
en una sola fase ser proporcional al gradiente de concentracin en la direccin
del transporte.
J = -D dC / dx
Cuando se considera la transferencia de masa en una fase slida, D es la
difusividad efectiva, una funcin del coeficiente de difusin, la porosidad del
slido y la forma de los canales dentro del slido.
Para la geometra de una hoja plana de una capa limitante con espesor d en un
fludo estacionario, la relacin entre el flujo de masa y la diferencia de
concentracin, sera:
J= D C / d
D / d es el coeficiente de transferencia de masa, y la inversa d / D se interpreta
como la resistencia contra el transporte.

C es la fuerza impulsora para la transferencia.

Para una situacin de estado no estacionario, la solucin de un balance de masa
para una de dimetro dx resulta:
D 2C / x2 = C / t
D: coeficiente de difusin difusividad efectiva (m2 / seg)
C: concentracin en la fase lquida (mol / m

x: distancia (m)
t: tiempo (seg)
Estas ecuaciones se pueden usar para calcular la transferencia de masa para un
proceso por difusin. Como pre requisito se pide que el transporte convectivo est
ausente, pero esto es muy raro. Lo usual es encontrar una combinacin de
difusin y conveccin con la fase de transferencia.
Como problema adicional tenemos que el patrn de velocidad del flujo lquido no
es conocido. As para una transferencia de masa gas lquido y lquido partcula
en reactores reales se prefiere una aproximacin ms emprica.

Transferencia de masa entre fases lquido gas lquido

slida

Se aplica la teora de las dos pelculas que dice que el flujo de masa en ambas
fases debe describirse en forma separada, mientras que la transferencia total se
determina por dos pasos en serie a travs de la pelcula, segn la figura siguiente:

El flujo de masa de la transferencia gas

lquido est descripto por:
Jg =kg (p- p) Transporte en la pelcula gaseosa
Jl = kl (Ci - C) Transporte en la pelcula lquida
Jg : flujo de masa molar a travs de la pelcula
gaseosa (mol / m2 seg)
kg : coeficiente de transferencia de masa en la
pelcula lquida (m / seg)
Las concentraciones a ambos
lados de la interfase pi y Ci no
son idnticas, pero ambas
estn relacionadas por el
coeficiente de Henry, H:

p: presin (bar Nt / m2 )

p=HC

kl : coeficiente de transferencia de masa de la

plcula lquida (m / seg)

En la prctica no es posible
medir los valores interfaciales,
por lo tanto se trabaja con un
flujo de masa como una
funcin de las concentraciones
en ambas fases:
]=K (C * - C)

pi :presin del lado de la interfase gaseosa

Jl : flujo de masa molar a travs de la plcula
lquida (mol / m2 seg)

Ci :concentracin de la interfase del lado lquido

(mol / m3 )
C: concentracin en la fase lquida

H: coeficiente de Henry (bar m3 / mol)

K: coeficiente de transferencia de masa total (m / seg)
C *: concentracin de saturacin en el equilibrio en la fase lquida (mol / m3 )
C: concentracin en la fase lquida (mol / m3 )
Donde:
C * = p / H es el valor de saturacin en la fase lquida.
(C * - C): fuerza impulsora total
K: coeficiente de transferencia de masa total que resulta de la suma de las
resistencias de la transferencia.
1/ K = 1 / (H kg) + 1/ kl
Esta ecuacin general puede simplificarse como: 1 / (H kg) 1 / k (la resistencia de
la pelcula de la fase gaseosa es despreciable comparada a la resistencia de la
pelcula lquida).
Usualmente la transferencia de masa se expresa por unidad de volumen del
reactor, ms que por unidad de rea interfacial por que no es fcil de determinar.
La velocidad de transferencia de masa volumtrica se expresa por:
] a = kla (C* - C)

(2)

a: rea interfacial gas lquido por unidad de volumen (1 / m) rea por unidad
gas slido ms el volumen de lquido rea por unidad gross del volumen del

Kla: coeficiente volumtrico de transferencia de masa (1 / seg). Cuando

consideramos la transferencia de oxgeno del gas al lquido, el producto Ja se
llama OTR, velocidad de transferencia de oxgeno.
Para estimar un valor de Kla seguro se deben hacer suposiciones sobre C* ( p) y
C.
Para un reactor en escala laboratorio:(< 10 l de volumen operativo)
La fase lquida se supone que est bien mezclada
por lo tanto C es cte en todo el lquido. Sin
embargo en planta piloto en una escala >
(> 100 l) no sucede lo mismo, hay
variaciones de concentracin que se deben
tener en cuenta.
Suposiciones para la fase gaseosa:
1. p = pin constante, hay poca no existe
depletion de la entrada de gas. Es verdadero
para reactores pequeos con un flujo de gas
alto y relativamente poca transferencia.
pin :presin del gas a la entrada (bar)
2. p = pout constante, la fase gaseosa est
perfectamente mezclada. Se aplica a sistemas
pequeos, pero la velocidad de transferencia
es alta comparado al flujo de la fase gaseosa.

pout : presin del gas a la salida (bar)

3. p vara dentro del reactor, para reactores pequeos la p se expresa por su valor
promedio logartmico. En reactores grandes con un mezclado adecuado la
presin hidrosttica determina p, y en tanques grandes con mezclado pobre se
deben usar modelos complejos.
El valor de H y C* son una funcin de la composicin del lquido y la temperatura
(los gases son en general menos solubles a T altas). La ley de Henry implica que
C* depende linealmente con la p.

Transferencia de masa gas lquido en sistemas reales

Como es experimentalmente difcil determinar los valores de kl y a por separado,
se usa kla como un solo parmetro.
Diferenciamos los dos tipos dominantes de reactores que se pueden usar:
Columna de burbujas air lift reactors y reactores tanque agitados. En cada caso
las propiedades del lquido influyen en la magnitud de la transferencia de masa.
Ej:
Un lquido con gran coalescencia de burbujas. La transferencia de masa es lo ms
pobre.
Un lquido sin coalescencia da la mayor velocidad de transferencia de masa.
Columna de burbujas: el gas entra por unos orificios del distribuidor. Si el caldo
es coalescente y no viscoso, las burbujas tomarn rpidamente su dimetro
promedio de equilibrio de 6 mm.

Cuando la velocidad del flujo de aire es lo suficientemente alta el tanque es

operado en un flujo de rgimen heterogneo y el hold up es una funcin de la
velocidad superficial del gas (flujo de gas por unidad de rea de la seccin
transversal del tanque), corregida por diferencias de presin (p0 es la presin de
referencia de 1 bar):
= 0.6 (vg po / p)

(1)

0.7

Vg : velocidad superficial de gas (m / seg)

p0 : presin de referencia (bar)
p: presin (bar)
Se ha verificado experimentalmente para el coeficiente de transferencia de masa,
la siguiente relacin:
kla = 0.32 (Vg pO / p)

0.7

En lquidos no coalescentes, ej: soluciones inicas y algunos caldos de

fermentacin, las burbujas que se originan por el distribuidor suben pero no se
mezclan con otras burbujas, por lo que el tamao es < que 6 mm. El rea
interfacial, y por lo tanto el kla ser > cuando las burbujas ms grandes estn
presentes.
Si las burbujas son ms grandes ellas se dispersan y toman el mismo valor de
equilibrio como en lquidos coalescentes. En este tipo de reactores con un
volumen > 50 m3 las burbujas se expanden lo suficiente como para subir a travs
del reactor debido a la disminucin de la presin hidrosttica. Esto influye en la
transferencia de masa.

Reactor air lift: la distribucin de burbujas resulta en un flujo del lquido hacia

arriba, en la seccin de arriba las burbujas escapan del lquido, y una seccin de
abajo donde el lquido es recirculado downward. Aunque se parece a una columna
de burbujas, el hold up del gas es es < que lo que predice la ec (1) debido a la
interaccin con el flujo del lquido. Por consiguiente kla ser menor respecto a la
columna de burbujas.

Reactor tanque agitado: el flujo est determinado por el balance: entre fuerzas

de aireacin y agitacin. El gas distribuido se recoge rpidamente en las cavidades

del gas, prximas a las paletas que giran del agitador. El flujo en stas cavidades
es de una turbulencia muy alta, y el gas es dispersado como pequeas burbujas.
Esto sigue en el flujo del lquido, pero tambin sube a la superficie. Ellas coalescen
en reas que son relativamente calmas y se redispersan en lugares donde la fuerza
de corte es alta. Una parte de las burbujas es recirculada dentro de las cavidades y
el resto escapa a la superficie.
Hay una correlacin disponible para el hold up gas en lquidos coalescentes:
= 0.13 (Pg / Vl)

0.33

(vg po / p)

0.67

:hold up
Pg: potencia cuando pasa aire
Vl: volumen de lquido (m3)
Para lquidos no coalescentes el valor del hold up es considerablemente >.
Las correlaciones de kla son todas empricas, Ps / Vl entre 0.5 y 10 kW m3.

Lquidos coalescentes:
kla = 0.026 (Pg / Vl)

0.4

(vg po / p)

0.5

Lquidos no coalescentes:
kla = 0.002 (Pg / Vl)0.7 (vg po / p)

0.2

En lquidos coalescentes la influencia de la aireacin es ms grande que la

agitacin, mientras que para lquidos no coalescentes ocurre lo opuesto. (Las
correlaciones son independientes del tipo del agitador).
La cantidad de potencia entregada por el agitador de dimetro D con una velocidad
de rotacin N (1 / seg)se expresa como:
P=PO l N3 D5
P: potencia de entrada (W)
P0: N de potencia del agitador

l : densidad de la fase lquida (kg / m3)

El N de potencia es una funcin de la velocidad de aireacin. El N de Reynolds
(l N D2 / ) y el tipo de agitador segn la figura:

Cuando un caldo es aireado, P0 generalmente

cae debido al tamao en crecimiento de las
cavidades dentro de las paletas del agitador.
Algunos N de potencia de agitadores no
aireados son una funcin del N de Re. En
flujo turbulento (Re > 4000) en ausencia de
aireacin el valor de N de potencia para un
agitador tipo turbina de 6 hojas es constante
e igual a 5. En rgimen laminar (Re < 1000)
hay una proporcionalidad inversa con el Re,
Ej para el agitador Rushton (P0 64 / Re)
Cuando se usan concentraciones altas de organismos filamentosos, los filamentos
ramificados del micelio interactan entre ellos y forman agregados que
disminuyen el flujo libre del lquido. Esto resulta en una viscosidad alta y un
comportamiento pseudoplstico elstico.
Observaciones similares se han hecho cuando un microorganismo excreta
sustancias polimricas, como el xantano.
La disminucin de la transferencia de masa se debe en parte a la estimulacin de
la coalescencia de las burbujas, para formar burbujas grandes en el caldo. El Hold
up es menor, por lo tanto el rea interfacial ser pequea.
En reactores grandes bajo condiciones extremas, se pueden observar burbujas de
1 m de dimetro. Algunas veces este efecto se compensa parcialmente por la
presencia simultnea de un gran N de pequeas burbujas (dimetro < 1 mm)

que tienen un tiempo de residencia largo en el caldo (15 min ms).

Hay tambin un efecto de viscosidad sobre kl. Esto se debe a la disminucin de la
velocidad del lquido, y no a una consecuencia directa de la viscosidad por si
misma.
En caldos aireados la potencia de entrada puede disminuir por el tamao de las
cavidades a medida que las paletas del agitador sean ms grandes. Esto
disminuir las velocidades de corte y la ruptura de las burbujas.
Para tanques agitados y medios no coalescentes:
kla = 0.002 (Ps / Vl)

0.7

(vg p0 / p)

0.2

( / 0)

0.7

Puesto que = 0 donde 0 = 0.05 Pa s.

Ps: potencia de entrada del agitador (W)

: viscosidad dinmica (kg / m seg)

0 : viscosidad dinmica de referencia (kg / m seg)
Si el caldo tiene un comportamiento pseudoplstico (la viscosidad disminuye con
la velocidad de corte alta) fludo dilatante ( la viscosidad aumenta con
velocidades de corte altas), se puede tomar una viscosidad promedio en el
reactor:

=K

n-1

: velocidad de corte promedio (1 / seg)

Que se puede estimar como: = 10 N

K: ndice de consistencia
n: ndice de ley de potencia
Los parmetros K y en el modelo reolgico dependen de la concentracin de la
biomasa. Tpicamente K es proporcional a Cx con el valor de entre 1.5 y 4.
Para caldos pseudoplsticos n < 1, para lquidos dilatantes n > 1, y para medios
Newtonianos n = 1.

Transferencia de masa lquido - slido

La descripcin de la transferencia de masa a travs de una pelcula lquida
desde la superficie de un slido es mucho ms simple que para la transferencia
gas lquido. kl es dependiente de las propiedades slido lquido, y el valor del
rea interfacial puede ser determinado experimentalmente.
Usualmente la transferencia slido lquido se aplica a situaciones donde la
transferencia de masa y la reaccin estn interactuando: un sustrato es
transportado a travs de la pelcula lquida a la superficie de una partcula donde
los microorganismos estn presentes para consumir el sustrato.
Los productos formados son transportados a travs de la pelcula al volumen
total del lquido. Estas situaciones se tratan a menudo en trminos de cintica
aparente, Ej: la velocidad de reaccin observada se describe con expresiones
cinticas standard, se introduce un factor de efectividad (entre 0 y 1) para
describir el comportamiento de la reaccin comparado a la misma reaccin sin
limitaciones de transporte.

Transferencia de masa dentro de una partcula

slida
Cuando hay microorganismos activos dentro de una partcula agregado celular, el
transporte (por difusin) dentro de las partculas puede presentar otra resistencia.
Esta situacin se encuentra en procesos biocatalticos con clulas inmovilizadas en
alginato partculas slidas porosas.
Una descripcin apropiada del fenmeno es difcil debido a que la cintica de las
reacciones microbianas dentro de la partcula pueden diferir grandemente de
aquellas con clulas suspendidas libremente, y por lo tanto desconocido.
Esto es debido a condiciones fisiolgicas alteradas para las clulas. Adems de un
factor de efectividad para la transferencia de masa externa, aparece un factor de
efectividad total que incluye tambin la resistencia intrapartcula.

Determinacin del coeficiente volumtrico de transferencia de

masa
Para estimar el valor de kla en los bioreactores se disean una serie de
experimentos. Se usan modelos fludos, tales como agua soluciones salinas, si es
necesario con pulpa de papel polmeros agregados para imitar un caldo viscoso,
y ver que se puede esperar en sistemas reales.
Hay diversos mtodos:

Mtodo de la reaccin qumica: Trata de imitar una reaccin microbiana, el

componente transferido puede ser consumido producido en una reaccin qumica.

Para estudios de transferencia de oxgeno, se puede usar el sulfito, que se oxida
rpidamente a sulfato en la presencia de oxgeno y un catalizador.
Kla se determina segn midiendo la velocidad de consumo del sulfito.
J a = kla (C* - C)

(2)

J: flujo de masa molar (mol / m2 seg)

a: rea interfacial por unidad de volumen de lquido (1/m)
El producto J a = dCsulfito / dt , y C* = p / H para el oxgeno. Para obtener resultados
seguros , se debe imponer la condicin de que C es 0.
Como alternativa para el sulfito se puede usar glucosa en combinacin con la
glucosa oxidasa (el oxgeno es consumido), una mezcla de agua oxigenada y
catalasa ( el oxgeno es producido). Tambin se pueden usar soluciones de Na(OH)
para estudiar la transferencia de dixido de carbono (el dixido de carbono
reacciona rpidamente con OH -.

Mtodo del reemplazo fsico: Consideramos un gas que es distribuido en estado

estacionario, tal que C* es igual a C. El experimento comienza cuando la fraccin
molar de oxgeno en la fase gaseosa se cambia rpidamente del estado
estacionario a otro valor. Por Ej. El nitrgeno gaseoso dispersado en un lquido es
reemplazado por aire.

El trmino J a es igual a dC /dt y por medidas continuas de la [O2] en el lquido, se

puede evaluar kla de la ecuacin (2).
Otra posibilidad es un cambio sbito en la presin del componente a ser
transferido. Este mtodo es muy rpido, por lo tanto se requiere de un electrodo
de oxgeno para medir la respuesta.
Si se requiere un valor real de kla, se deben aplicar teoras, modelos de sistemas y
correlaciones pre establecidas.
Para determinar kla en cultivos en crecimiento, se usan los siguientes mtodos:

Mtodo de la bioreaccin en estado estacionario: cuando usamos un sistema

microbiano que consume oxgeno, el kla se calcula tambin a partir de la ecuacin
(2): J a = kla (C* - C)
J a, C* y C deben ser conocidos, y la diferencia (C* - C) lo suficientemente
grande.
Ej: para el oxgeno, J a (OTR) ser igual a la diferencia de las fracciones molares
de oxgeno a la entrada y a la salida, multiplicadas por las velocidades de gas a la
entrada y la salida.

Velocidad de transferencia de oxgeno (OTR) = velocidad de consumo de oxgeno

(OUR) . C*, teniendo en cuenta la presin parcial de oxgeno (C* = p / H), y C
puede leerse usando un electrodo de oxgeno disuelto.

Mtodo dinmico:
Cuando el flujo de aire es
temporariamente reducido (se corta),
bien es reemplazado por nitrgeno
en un cultivo que respira.
kla para el oxgeno se vuelve cero, y
la concentracin de oxgeno disuelto
cae rpidamente. La velocidad de
disminucin, dC / dt representa a la
velocidad de consumo de oxgeno (q).
Cuando se restablece la velocidad de flujo de oxgeno, la concentracin retornar
a su valor inicial.
Con la ecuacin (2) J a = kla (C* - C) se determina kla, ahora el trmino J a es
igual a dC / dt + q.
Este mtodo es aplicable slo para fermentadores pequeos (< 100 l), porque
para fermentadores grandes la composicin de la fase gaseosa no ser uniforme
despus de dispersar con nitrgeno (el hold up del gas debe built up an cuando
se corta el flujo de gas). En cualquier caso se necesita un electrodo de oxgeno.

El oxgeno como sustrato

El crecimiento en un cultivo microbiano con un sustrato limitante se expresa como:
S
= mx -----------KS + S
Con el oxgeno como sustrato S = C, que es la concentracin de oxgeno. Cuando
la velocidad de crecimiento en la fase de equilibrio se relaciona con la velocidad
especfica de absorcin de oxgeno, se establece la ecuacin siguiente:

QO2 = Qm

CL
------------KO2 + CL

K02 : cte de Michaelis Menten para el oxgeno

QO2 : velocidad especfica de toma de oxgeno / peso seco celular (mM oxgeno / gr
hr)
Qm : velocidad especfica mxima de toma de oxgeno
Cuando el valor Qm se relaciona con la biomasa / l, se obtiene la velocidad de
absorcin de gas y de toma de oxgeno que se debe conseguir durante la
fermentacin.
x Qm = kLa (c* - cL)
(mM oxgeno / l hr)
x: concentracin de clulas (peso seco gr / l)

La velocidad de absorcin de gas no es constante durante la fermentacin ya

que si un sustrato diferente del oxgeno se hace limitante, como sucede al
final de la fase logartmica, el valor puede ser reducido.
Durante la fermentacin de los organismos unicelulares y los productores de
micelio existe una diferencia caracterstica en la velocidad de absorcin de
oxgeno.
Durante el crecimiento logartmico, la velocidad de absorcin de oxgeno
aumenta y el
contenido en oxgeno en el caldo desciende hasta que se hace limitante.
Despus con
bacterias unicelulares la velocidad de absorcin de oxgeno es constante hasta
que otro
sustrato se haga limitante.
Sin embargo en fermentaciones miceliales (estreptomicetos y hongos), la
velocidad de
absorcin desciende cuando el oxgeno se hace limitante, debido al aumento en
el
volumen del micelio y al aumento en la viscosidad relativa.

Concentracin crtica de oxgeno

La concentracin crtica de oxgeno es el trmino utilizado para indicar el valor
de la velocidad especfica de absorcin de oxgeno que permite la respiracin
sin impedimentos.

A velocidades de absorcin de oxgeno que son ms bajas que las concentraciones

crticas, la velocidad de respiracin se correlaciona con la concentracin de oxgeno
en la solucin.
Por encima de este valor no se observa dependencia entre la velocidad de
respiracin y el oxgeno disuelto. En fludos Newtonianos, como los que existen en
las fermentaciones de organismos filamentosos (Ej: durante la produccin de
novobiocina con Streptomyces niveus), la concentracin crtica de oxgeno depende
de las condiciones de la fermentacin.
Concentraciones crticas de oxgeno de algunos organismos
Organismo

Ccrt (mg/l)

E. Coli

0.26

Penicillium chrysogenum

0.40

Sacharomyces cerevisiae

0.60

Pseudomonas ovalis

1.10

Torulopsis utilis

2.00

Velocidad de consumo de oxgeno y concentracin de oxgeno disuelto, en

condiciones de limitacin de oxgeno

Cultivo bacteriano

Fermentacin fngica

velocidad de absorcin de oxgeno

------- CLconcentracin de oxgeno disuelto

El efecto de la escala sobre la transferencia de

masa
Scale up: para bioreactores en gran escala, la

transferencia de oxgeno es mejor que en una escala

laboratorio un reactor de planta piloto. Esto se debe a
una contribucin > de la fase gaseosa (velocidad
superficial del gas superior), y una fuerza impulsora ms
grande (presin en el espacio de cabeza alta y una presin
hidrosttica de cabeza.
La mayora del oxgeno es transferido en la regin cerca
del agitador.
El caldo pasa a travs del agitador hacia fuera y adentro
del cuerpo del reactor y regresa de nuevo al agitador, se
consume ms oxgeno de lo que se transfiere y por lo tanto
la concentracin de oxgeno disminuir. En un reactor
tanque agitado grande ese camino de circulacin del
lquido puede llegar a ser de 10 m. Con una velocidad de
lquido de 1 m/seg, el tiempo de circulacin ser de 10
seg. En el peor de los casos (no existe transferencia fuera
de la regin del agitador), pasarn 10 seg antes de que el
oxgeno vuelva a depleted en el loop. Por lo tanto la
concentracin de oxgeno en el compartimento del fondo
debe ser alta para que la depletion de oxgeno que
perjudicara al estado microbiano y la velocidad de

formacin de producto, sea evitada.

Segn la ecuacin J a = kla (C* - C), la velocidad de transferencia de masa ser <
porque la fuerza impulsora (C* - C) en el fondo del reactor es baja porque C* y C
son altos.
En un bioreactor grande la OTR tiene limitaciones mximas debido a las siguientes
restricciones:
Pueden haber dificultades de construccin mecnicas en fermentadores muy
grandes (> 300 m3). Adems el transporte de lquido y el mezclado se vuelven
muy lentos con respecto a la transferencia de masa y a la reaccin, por lo tanto se
ve afectada la velocidad de la reaccin total. Tambin hay limitaciones en el
enfriamiento que se vuelven muy significativas.
La potencia promedio de entrada no debe exceder los 5 kW m3. Los
microorganismos superiores pueden ser daados en reas donde el valor de
potencia es localmente muy alto. Adems los costos de energa y mantenimiento
del motor tambin sern excesivamente altos.
La presin correspondiente a la velocidad superficial de aire debe estar por
debajo de 0.1 m/seg. Los costos del compresor tambin son restrictivos y un hold
up alto de aire aumentar con el costo del espacio que ocupe el caldo de
fermentacin en el reactor.
La presin en el espacio de cabeza tiene un mximo por razones mecnicas.
Adems la presin parcial de CO2 aumentar inhibiendo al crecimiento y a la
produccin.
La fase gaseosa no se puede considerar idealmente mezclada. La presin parcial

de oxgeno cae a medida que las burbujas viajan a travs del reactor, y esto
reduce la fuerza impulsora para la transferencia de masa. En reactores ms
grandes que 10 m3, el proceso de transporte de lquido y masa se vuelve lento.
La transferencia de masa y circulacin del lquido interfieren entre s , por lo tanto
deben ser tratadas juntas. En un reactor tanque agitado con un nico agitador, la
mayora de la transferencia de oxgeno tiene lugar en la zona del agitador.

Scale down: los microorganismos pueden experimentar cambios continuamente

cuando viajan a lo largo de un bioreactor grande, esto puede producir efectos
indeseables. Para evitar estos problemas la escala grande se toma como un
punto de referencia, y los efectos posibles se estudian por simulacin de las
variaciones sufridas en la escala grande en una escala experimental pequea.

Factores limitantes de la escala grande como transferencia de masa, se llevan a

una escala menor, se estudian y se los minimiza de una forma prctica y
econmica.
Hay algunas herramientas adecuadas para encontrar soluciones adecuadas al
down scaling:

Se usan dos reactores imitando las dos zonas ms importantes de un reactor, y

la recirculacin del caldo entre esas dos zonas. El tamao de los compartimentos
y la velocidad de recirculacin son crticas, igual que el tipo de flujo en cada
reactor. Por Ej. Se va desde un flujo bien mezclado a un flujo pistn.

 El desarrollo y verificacin en gran escala de

modelos de flujo matemticos para tanques
grandes se llevan a cabo y luego se usan para
disear el experimento en la escala menor.
Se usan sistemas de ensayo microbianos bien
caracterizados, en los cuales la sensibilidad a
variaciones seleccionadas son conocidas.
Esto se ha estudiado extensivamente para mejorar
la transferencia de oxgeno y el mezclado del
sustrato que se usa como alimentacin en
reactores grandes.

Transferencia de oxgeno gas - lquido

Debido a la importancia de los procesos de fermentacin aerbicos, la
transferencia de masa gas lquido es casi un sinnimo de la transferencia de
oxgeno desde las burbujas de gas a un medio lquido. Como la velocidad
volumtrica de transferencia de masa es proporcional a la diferencia entre la
concentracin de equilibrio (saturacin) c*0 y el valor real de la concentracin de
oxgeno disuelto en el medio c0, es necesario conocer la concentracin de
saturacin. La solubilidad del oxgeno disminuye a medida que aumenta la
temperatura, y disminuye con la concentracin de varios solutos presentes en el
medio.
Solubilidad del oxgeno en agua pura a una presin de oxgeno de 1 atm

Solubilidad del oxgeno a 25 C a 1 atm de presin en varias soluciones acuosas

Mtodos para la determinacin del coeficiente volumtrico de

transferencia de masa para el oxgeno
Mtodo directo: La mayora de los procesos de fermentacin aerbicos estn

equipados con analizadores de oxgeno y electrodos para medir la concentracin

de oxgeno disuelto. Se mide el contenido de oxgeno a la entrada y a la salida
junto con la velocidad de flujo del gas, si es posible se trabaja en condiciones de
flujo estacionario y se determina la velocidad de transferencia de oxgeno
volumtrico, qt0, el cual en ee es igual a la velocidad de consumo volumtrico q0.
As tenemos la ecuacin siguiente:

R: cte de los gases 8.314 J / mol K 0.08206 l atm / mol K, T (K), p0 es la

presin parcial de oxgeno, y vg es la velocidad de flujo de gas.
La mayora de los analizadores dan el resultado como una fraccin de moles de
oxgeno en el gas. Cuando se usa aire normal, es suficiente analizar solamente la
composicin del gas a la salida.
Sin embargo para bioreactores grandes es importante tener en cuenta la diferencia
de presin a lo largo del reactor. Si se mide tambin la concentracin de oxgeno
disuelto, c0 en el medio, se puede calcular kla de:

Suposiciones
La concentracin de saturacin c*0 es la misma a travs
del reactor.

La diferencia de presin es pequea y que la disminucin en la presin parcial

de oxgeno en la fase gaseosa es pequea, si no es este el caso se debe usar la
ecuacin para la fuerza impulsora de la concentracin:

Este es un mtodo simple y el que tiene una ventaja mayor para aplicarse en
fermentaciones reales. Sin embargo se deben conocer medidas seguras del
contenido de oxgeno, de las velocidades de flujo de gas y de la solubilidad del
oxgeno en el medio. Adems la tensin de oxgeno no debe cambiar durante la
medida, ya que suponemos estado estacionario pseudo estacionario como un
requerimiento estricto.

Mtodo dinmico: se basa en la medida de la concentracin de oxgeno disuelto

en el medio. No requiere de medidas de la composicin del gas, por lo tanto es un

mtodo barato.
El balance de masa dinmico para la concentracin de oxgeno disuelto es:
Si se corta el suministro de gas, qt0 es cero y el
primer trmino del lado derecho de la ecuacin
cae a cero. La concentracin de oxgeno disuelto
disminuye a una velocidad igual a la velocidad de consumo de oxgeno, - q0 que
puede por lo tanto determinarse midiendo la concentracin de oxgeno disuelto
c0 (t). Si q0 es independiente de c0 la concentracin de oxgeno disuelto disminuye
como una funcin lineal con el tiempo. Cuando se restablece el suministro de gas,
la concentracin de oxgeno disuelto aumenta de nuevo al nivel inicial, y usando el
valor promedio estimado para q0, se puede determinar el valor de kla midiendo el
perfil de oxgeno disuelto.
El mtodo es simple y puede aplicarse durante una fermentacin real. Exige que q0
se determine correctamente cuando se corta el suministro de gas. La mayora de
los electrodos para medir la concentracin de oxgeno disuelto,
desafortunadamente tienen un tiempo de respuesta prximo al tiempo
caracterstico para el proceso de transferencia de masa, y por lo tanto las
concentraciones medidas estn influenciadas por la dinmica del aparato de
medida, Ej un electrodo de oxgeno.

El mtodo dinmico puede aplicarse para condiciones donde no hay reaccin (q0 es
cero). Esto es interesante cuando se estudia la influencia de parmetros
operativos, Ej: velocidad de agitacin y velocidad de flujo de gas, sobre el
coeficiente volumtrico de transferencia de masa en un medio modelo.
Despus de una etapa de cambio en la concentracin a la entrada del gas, hay
cambios dinmicos en la concentracin de oxgeno disuelto y en la concentracin
de oxgeno a la salida. Debido a la dinmica baja de los electrodos de oxgeno, es
preferible aplicar medidas del gas agotado para la determinacin del coeficiente de
transferencia de masa. (Se debe usar un balance de masa para el oxgeno en la
fase gaseosa). Sin embargo antes de aplicar esto es importante chequear con
cuidado la dinmica del analizador de gas.

Mtodo del sulfito: Es posible determinar la transferencia de oxgeno usando un

modelo de oxgeno que se consume en una reaccin qumica.

El mtodo tradicional del sulfito se basa en la oxidacin de sulfito a sulfato por el

oxgeno:
La reaccin es catalizada por un n de iones
metlicos, que pueden ser impurezas. Sin embargo
se agrega una cantidad conocida de Cu (10-3 M)
sales de Co para hacer la reaccin casi instantnea. As la velocidad de consumo
del sulfito se determina solamente por la velocidad a la cual el oxgeno es
transferido desde la fase gaseosa.

De la ecuacin anterior se tiene que:

Consideramos:
La concentracin de oxgeno disuelto, c0
es cero debido a que la reaccin con el
sulfito es muy rpida.

La velocidad de reaccin se determina midiendo la concentracin de sulfito en

muestras que se toman a intervalos de tiempo una vez iniciada la reaccin. La
concentracin de sulfito en las muestras se determina agregando yodo en exceso,
por lo tanto se hace una titulacin por retroceso con tiosulfato de sodio, usando
almidn como indicador. Las reacciones son las siguientes:

Para aplicar el mtodo, es necesario conocer la concentracin de saturacin de

oxgeno en una solucin de sulfito concentrada, como esto no se conoce se usa
la solubilidad del oxgeno en soluciones de sulfato, que es 1.02 mM a 25 C para
una solucin 0.25 M de sulfato.
Este mtodo es simple de usar pero tiene una serie de desventajas:
La oxidacin del sulfito puede aumentar la absorcin de oxgeno, ya que la

reaccin rpida puede ocurrir no solamente en el volumen de lquido sino tambin

en la pelcula lquida. La suposicin de un perfil lineal de concentracin es por lo
tanto cuestionable
Otra complicacin es el efecto de coalescencia reducida del sulfito en el volumen
de lquido, que resulta en un rea interfacial especfica ms grande.
Ambos, el aumento de transferencia de masa debido a la reaccin en la pelcula,
y a los efectos de coalescencia reducida del sulfito, pueden conducir a una
sobreestimacin del valor de kla comparado al que se encuentra en un medio de
fermentacin normal. Esto es una desventaja significativa del mtodo.
Este mtodo no se puede aplicar a una fermentacin real, ya que los
microorganismos moriran.

Mtodo del perxido de hidrgeno: es un mtodo qumico como el sulfito pero

tiene algunas ventajas sobre este.

En este mtodo se mide la transferencia de oxgeno desde el lquido a la fase

gaseosa. El oxgeno es generado por la descomposicin de H2O2 catalizada por una
enzima segn:

La reaccin es de primer orden con respecto al agua oxigenada y a la enzima

catalasa. Pasa un flujo volumtrico constante de aire, y despus de la adicin de
una cantidad conocida de enzima, se alimenta en forma continua agua
oxigenada al reactor.

Inicialmente el perxido de hidrgeno se acumular en el medio del reactor hasta

que se establece el estado estacionario, entonces la velocidad de descomposicin
del perxido de hidrgeno qag oxes igual a la mitad de la velocidad de transferencia
de oxgeno de la fase lquida a la fase gaseosa:
Notar que ambos trminos de esta ecuacin son negativos, porque el oxgeno se
genera en el lquido.

La velocidad volumtrica de descomposicin del perxido de hidrgeno se calcula

de la velocidad volumtrica de adicin y de la concentracin de perxido de
hidrgeno en el lquido agregado , de acuerdo a:

La concentracin interfacial de oxgeno se calcula a partir de la presin parcial de

oxgeno de la fase gaseosa. (DOT = c0 / c*0 > 1)
Es necesario suponer mezclado de la fase gaseosa para determinar la
concentracin interfacial de oxgeno.
Hickman suposo mezclado completo de ambas fases gaseosa y lquida, que da:

Este mtodo es fcil de implementar. Para estimar el valor de kla se debe medir la
velocidad de adicin del perxido de hidrgeno y la concentracin de oxgeno
(DOT) en la fase lquida.
Una medida independiente (pero mucho menos segura) de qt0 es obtener de la
diferencia en contenido de oxgeno entre ving y voutg como en el mtodo directo.
Comparando con el mtodo del sulfito, una ventaja significativa es que el valor de
kla no aumenta por la concentracin de la catalasa en un rango bastante amplio.
El riesgo de aumentar la transferencia de masa debido a la reaccin en la pelcula
lquida es muy pequeo, y el efecto de propiedades por coalescencia por la
catalasa tambin es muy pequeo.
Este mtodo se puede aplicar con buenos resultados para medir kla en reactores
de escala industrial y tambin con fludos viscosos y medios no Newtonianos.

Mtodos por trazadores: 85Kr es un istopo voltil que emite radiacin beta y

gamma. Se inyecta el istopo en el medio y luego se mide la radioactividad en el

gas agotado, es posible determinar el coeficiente volumtrico de transferencia de
masa para Kr. Se supone que existe una relacin constante entre los valores de kla
para diferentes gases en las mismas condiciones, el valor estimado de kla para Kr
se usa para calcular el valor correspondiente de kla para el oxgeno.
Pedersen et al:

Aproximadamente se encuentra el mismo valor si uno usa la relacin entre los

coeficientes de difusin molecular para las dos especies:

Este mtodo es fcil de implementar, y es bien apropiado para medir ambos,

medios modelos y bajo condiciones de fermentacin real.
La principal desventaja es la radioactividad, que obviamente limita su aplicacin
en la industria a pesar de que el istopo es muy voltil y la radiacin baja a los
pocos minutos de su inyeccin. Kr es completamente inerte en conecciones con
fermentaciones.

Transferencia de Masa Convectiva Forzada

Grupos Adimensionales Conceptos Generales
A menudo se requiere un mezclado mecnico vigoroso para obtener velocidades
de biomasa crecientes, de consumo de sustrato de formacin de producto.
Las funciones que rigen la agitacin mecnica (y en algunos casos son
dominantes) que influyen sobre el flujo convectivo de las burbujas que suben
libremente que caen dispersadas son:
La presin dinmica alta cerca de la punta del agitador en otros aparatos que
producen burbujas pequeas, aumenta con el rea, a.
El fludo de fermentacin puede contener una suspensin de slidos u otra fase
lquida, que tiende a subir caer en el tanque. Los agitadores mecnicos proveen
una dispersin volumtrica uniforme de estas dos fases.
Para burbujas de gas de un dado tamao vigorosamente agitadas, kl no vara
significativamente con la potencia de entrada, ya que la velocidad relativa del
gas del fludo es dominada por las diferencias de densidad.
En agitacin turbulenta, D disminuye y aumenta apara un hold up dado.
Cambian el tamao de las burbujas y kl, segn D.
El tamao de micelios, slimes microbianos, pellet de hongos, etc disminuyen
con la agitacin. Se puede obtener un < rendimiento de producto a velocidades
de agitacin altas por daos celulares a enzimas extracelulares.

 La suspensin lquido clulas puede ser viscosa tal que nicamente una
agitacin mecnica provea un mezclado en todo el volumen del medio.
En conveccin forzada, la accin de un trabajo mecnico aplicado produce una
velocidad caracterstica con otros movimientos que pueden ser escalados.
Para agitacin mecnica existen dos factores: la fluctuacin de la velocidad del
fludo u, y la velocidad de punto del agitador ui que es proporcional a Ni Di ,
donde Ni es la velocidad de rotacin del agitador en revoluciones por unidad de
tiempo, y Di es el dimetro del agitador.
Considerando los balances de conveccin forzada para la masa total, especies, y
momentos producen los grupos adimensionales siguientes, consideramos u
como la velocidad caracterstica:

Alternativamente en sistemas agitados, la dimensin caracterstica es el dimetro

del agitador Di , y la velocidad de referencia es Ni Di. El subdice i hace referencia
al cambio de escala.

El n de Froude tiene tambin otras definiciones. Para transferencia de masa en

una suspensin de partculas buoyant neutrlmente,es:

L es la longitud del reactor. Como el n de Froude representa la contribucin de

la dinmica de la superficie libre vs el mezclado mecnico, la distancia de la
superficie del fondo del tanque el n de Froude debe considerarse.
Cuando tengo dos fases, el n de Froude es:

Cambio de Escala
Los procesos de produccin por microorganismos son seleccionados primero en
el laboratorio, bajo condiciones diferentes de aquellas de la produccin en gran
escala. El microorganismo se prueba en un n de bioreactores de volumen
mayor, y la verificacin del proceso final se lleva a cabo en una planta piloto (50 l
a 3000 l).
La operacin de cambio de escala cambia significativamente cuando el cultivo
proviene de una caja de Petri de un cultivo en erlenmeyer a un reactor de
escala pequea.
El cambio de escala no involucra solamente consideraciones de ingeniera pura,
sino tambin consideraciones econmicas.
Los fenmenos necesarios a tener en cuenta en un cambio de escala se dividen
en procesos fsicos (fenmenos de transporte) y proceoso metablicos (cintica
microbiana).
Se modela el reactor para el cambio de escala de acuerdo al esquema siguiente:

Representacin esquemtica de los pasos que se deben analizar en un cambio de

escala

Los procesos fsicos se describen mediante modelos matemticos de complejidad

variable, se hace por ingeniera qumica mecnica clsica. Los fenmenos
metablicos son dependientes de la escala. Como consecuencia de los fenmenos
de transporte, el entorno de la clula vara mucho en un bioreactor en escala
grande a uno en escala pequea (reactor bien mezclado).

Estos cambios de entorno pueden causar cambios metablicos, las concecuencias

son impredecibles, debido a la insuficiencia de datos experimentales.

Bioreactore
s
Requerimientos bsicos y tipos de reactores
Se desea obtener un rendimiento de producto alto, productividad alta, y tambin
reproducibilidad alta.
La mayora de los bioreactores estn dentro de las categoras siguientes:
tanques no agitados, tanques agitados, reactores air lift, reactores de
membrana, lechos fluidizados lechos empaquetados. Los tipos de reactores
difieren principalmente con respecto al modo de agitacin y aireacin.
En reactores agitados mecnicamente, el mezclado se hace con agitadores
internos, en cambio en reactores agitados neumticamente el flujo se alcanza
por aireacin solamente.
En reactores loop, parte del medio es continuamente withdrawn por medio de
una bomba. La aireacin, la adicin de sustrato y la transferencia de calor se
ubican en el loop externo.

a) Reactor tanque agitado

b) Columna de burbujas
c) Reactor air lift
d) Reactor de lecho empaquetado
e) Reactor loop con circulacin externa, e intercambiador de calor

Hay varios tipos de agitadores, sus caractersticas varan de acuerdo al tipo de

flujo, a la capacidad que tengan para agitar una suspensin para dispersar.
Se distinguen dos tipos principales de agitadores: los agitadores de flujo axial
(propeller) y los de flujo radial (agitadores turbina de hojas planas).
El dimetro del agitador es 1/3 del dimetro del reactor (turbina Rushton),
mientras que para fludos foil, el dimetro del agitador puede exceder a la mitad

del dimetro del tanque.

Carctersticas de los agitadores

Caractersticas

Propeller

Turbina de Disco

Direccin de flujo

Axial

Radial

Gassing

menos apropiado

muy apropiado

Dispersar

menos apropiado

muy apropiado

Suspender

muy apropiado

menos apropiado

Mezclar

muy apropiado

apropiado

La aireacin tiene lugar introduciendo aire (oxgeno) por medio de un

distribuidor colocado debajo de los agitadores. Consiste de un tubo abierto, un
anillo con orificios muy finos (de dimetro algo menor al del agitador).
La relacin entre la velocidad de flujo de aire, vg, y el rea de seccin
transversal del reactor se llama velocidad superficial del gas, us. La velocidad
superficial del gas no debe ser muy grande, para asegurar una dispersin
eficiente y utilizacin del gas.
A velocidades superficiales del gas demasiado altas, el agitador est
completamente rodeado del gas, y la capacidad de dispersin cae
dramticamente. Este fenmeno se llama flooding.

Procesos Fsicos de Importancia en un Cambio de

Escala
Hay un n de factores fsicos que cambian en un cambio de escala del reactor.

Estos problemas se resuelven con ecuaciones de movimiento para el fludo en el

reactor.
Enfocaremos modelos simplificados para ilustrar los cambios esenciales que
ocurren con respecto al: mezclado, consumo de potencia, transferencia de
calor, transferencia de masa y patrones de flujo en reactores tanque
agitados como cambios de escala.

Mezclado
Se entiende como mezclado el proceso para alcanzar uniformidad. Se divide en
el n de fases involucradas en el proceso de mezclado:
Mezclado de una nica fase lquida, mezclado lquido lquido, mezclado gas
lquido, mezclado slido lquido, y mezclado de tres fases.
Un bioreactor generalmente contiene tres fases por lo que no se puede alcanzar
uniformidad en una escala micro. Sin embargo con velocidades de agitacin muy
altas, la concentracin en las fases lquida y gaseosa puede ser
aproximadamente constantes en el volumen del reactor.
La suposicin de mezclado perfecto es vlida para escala pequea (1 2 l) en
reactores que son agitados intensamente, con tiempos de mezclado del orden de
1 seg, ya que la mayora de los procesos biolgicos son procesos relativamente
lentos a temperaturas de 30 a 40 C.

En sistemas de escala grande, el tiempo para alcanzar homogeneidad en el

reactor puede ser del orden de minutos, por lo que no se puede despreciar.
El mezclado se alcanza por un flujo de conveccin sea la distribucin causada
por el patrn de flujo principal en el reactor (macromezclado). Y en el
micromezclado el tamao se alcanza por difusin molecular.
Una forma de cuantificar el mezclado es por ej. agregar un colorante al reactor y
monitorear el regreso gradual a la homogeneidad. El grado de mezclado grado
de homogeneidad, m , se usa cuantitativamente para describir este experimento y
se define como:

Donde s(t) es la concentracin del trazador a tiempo t, s0 es la concentracin

inicial, sinfinito es la concentracin para t tendiendo a infinito, donde m se aproxima
a 1.
El tiempo de mezclado se define como el tiempo necesario para obtener un
valor de m ms grande que un valor especfico threshold. Este es un valor
arbitrario (0.95 a 0.99).
Algunos investigadores consideran que el mezclado se asemeja a un proceso de
primer orden. Por lo tanto el tiempo de mezclado ser la inversa de una constante
de velocidad de primer orden, es conveniente comparar la velocidad de mezclado
con la velocidad de transferencia de masa, la velocidad de la reaccin.

Para un sistema de una fase desarrollado en un tanque agitado con bafles, el

tiempo de mezclado es inversamente proporcional a la velocidad del agitador, N
(seg-1).

La velocidad del agitador se expresa en rpm, rotaciones por minuto. La constante

de proporcionalidad depende del tipo del agitador.
Otra caracterstica que depende del tipo del agitador es la capacidad de
bombeo , vpump, que se define como el volumen de lquido que es expulsado
desde el agitador por unidad de tiempo (m3 / seg).

ds es el dimetro del agitador (m). La constante de proporcionalidad se llama

Nmero de flujo , Nf , y depende del tipo del agitador y la viscosidad del medio.
El tiempo de circulacin , tc (seg) , se define como:

tm es proprcional a tc en un reactor de flujo turbulento completo.

Potencia Consumida
El proceso de mezclado requiere energa. La potencia de entrada, P (W) , en un
tanque agitado consiste de dos partes, la potencia para agitar y la potencia de
compresin para la aireacin.
Para reactor tanque agitado el 1 trmino es lo importante, y para una columna
de burbujas como un reactor air lift lo es el segundo.Adems se requiere de una
energa adicional para la circulacin del lquido, por ej: con bombas externas.
La potencia de entrada es de costo mayor en procesos aerbicos, y esto depende
de varios factores: velocidad de agitacin, N, dimetro del agitador, ds, densidad
del fludo, l (kg / m3), y la viscosidad del fludo, (kg / m seg) es la viscosidad
dinmica.
Por anlisis dimensional es posible combinar estos factores en n adimensionales,
el consumo de la potencia para agitar se expresa como una funcin de un n
adimensional , Np (n de Newton), Np tambin se expresa como una funcin del n
de Reynolds, que se definen como:

La variacin de Np con el Res , se observa en la figura siguiente. El flujo en un

reactor tanque agitado es completamente turbulento, para un Res > 104.
En un reactor con bafles, slo las fuerzas inerciales son importantes para un flujo
turbulento, Np tiene un valor constante de Res.
En rgimen de flujo laminar, Res < 10, las fuerzas viscosas dominan y la disipacin
de la potencia depender del Res.

Para flujo laminar el Np es:

Entre flujo laminar y turbulento hay una zona de transicin, en la cual hay que
considerar las fuerzas inerciales y viscosas. Para Np conocido, la potencia
consumida se calcula como: (para un nico sistema de agitadores)
Para mltiples agitadores se puede calcular la potencia de entrada multiplicando la
potencia consumida por el n de agitadores, pero esto es una sobre estimacin, ya
que la potencia consumida aumenta suavemente menos y proporcional a n de
agitadores.

Influencia de la aireacin
La potencia consumida para la agitacin est afectada por la aireacin. Cuando se
dispersa el gas en el tanque , las burbujas se van hacia regiones de baja presin,
entonces se forman reas llenas de gas, que se llaman cavidades cerca de las
hojas del agitador.
La formacin de estas cavidades depende de la relacin entre la velocidad
volumtrica del flujo de gas y la capacidad de la bomba. Esta relacin se expresa
como un grupo adimensional, llamado nmero de aireacin NA:

Nf es el n de flujo
vg: flujo de gas (m3 / hr)
vpump:flujo inducido por el agitador (m3 / seg)
Las cavidades crecern con el aumento de NA hasta que el agitador est
completamente inmerso en el gas, una condicin que se llama flooding.
El Np,g cae gradualmente con el aumento de NA, tal como se muestra en la
figura siguiente.

Una correlacin emprica que describe la relacin entre Pg , y P no aireada, es el

consumo de potencia:

El valor de k depende del tipo de agitador.

Potencia de entrada en una columna de burbujas: es normalmente pequea en
reactores tanque agitado, adems la energa para el mezclado es suministrada
por la aireacin.
La potencia de entrada de compresin que opera auna velocidad superficial
moderada es:

g: es la aceleracin de la gravedad (9.82 m / seg2)

us: velocidad superficial del gas (m / seg)
V: volumen (m3)

Cambio de Escala y Transferencia de Masa

El problema es describir la velocidad de transferencia de masa desde la fase
gaseosa a la fase lquida.
El valor de kla depende de la potencia especfica de entrada, P/V, y la velocidad
superficial del gas, us , y se expresa con la ecuacin siguiente:
(1)

k: constante de velocidad (ej: kg / kg hr)

y : coeficientes empricos
Vl:volumen de lquido (m3)
Esta correlacin se debe usar con cuidado para estimar la transferencia de masa
en diferentes escalas. Es vlida nicamente cuando el agitador no est totalmente
sumergido en el gas.
Como consecuencia de un cambio de escala la relacin entre velocidad de aireacin
y volumen de lquido puede cambiar. La velocidad de aireacin se expresa vvm
(volumen de gas por volumen de lquido por minuto).

La velocidad superficial del gas aumenta con V1/3 para un mismo valor de vvm.
Si excede a la velocidad ascensional de la burbuja, ub (depende fuertemente de
la viscosidad), ocurrir flooding. Para un caldo viscoso ub se estima alrededor
de 0.2 m/seg.
Casi para una velocidad superficial del gas que se aproxime en un 25 50 %

de la velocidad ascensional de la burbuja , el flooding es probable que ocurra. Por

lo que la velocidad superficial del gas debe mantenerse por debajo de 0.05 m/seg
para asegurarnos de evitar el flooding en los caldos similares al agua.
Superficie de aireacin
La transferencia de oxgeno al lquido no se debe nicamente a las burbujas
dispersadas, sino tambin va superficie. En reactores de escala pequea (< 50 l),
la contribucin de la transferencia de oxgeno en la superficie es muy significativa,
mientras que para reactores grandes se puede despreciar.
En la ecuacin (1) los exponentes y disminuyen aumenta el tamao del reactor.
Disipacin de la potencia no constante
Es espacialmente no homognea, es mucho > cerca del agitador (por un factor de
100). Se debe a diferencias en la distribucin del tamao de burbujas, hay
burbujas pequeas cerca del agitador y ms grandes cerca de la pared, sobre todo
en medios coalescentes. Estas correlacin nos da un valor de kla < que en escala
pequea.
Gradientes de otros compuestos distintos al oxgeno
La transferencia de masa en todo el volumen de lquido no es instantnea, ej, la
suposicin del tanque ideal no es vlida.
Cuando aumenta el tc se producen gradientes para cualquier componente que se
agrega durante la operacin. Por ej ocurre cuando se agrega una base para el
control de pH.

En procesos continuos fed batch los gradientes ocurren tambin para otros
componentes del medio, ej: cuando se agrega una fuente de carbono.

Reologa de los Caldos de Fermentacin

El patrn de flujo en un reactor tanque agitado se determina por el reactor y la
geometra del agitador, la potencia de entrada al sistema y las propiedades del
fludo.
Reologa es el estudio del flujo y la deformacin de la materia. Un fludo se
define como una fase material que no puede sustain fuerzas de corte, ej: fuerzas
que acten en una direccin tangencial a la superficie, (las fuerzas que actan en
direccin normal a la superficie son las fuerzas de presin). Un fludo responder a
fuerzas de corte deformndose continuamente, ej por flowing.
La velocidad de corte, (seg-1) en un flujo de dos dimensiones se define como:

= duy / dz
donde Z es la direccin perpendicular a la direccin del flujo. Newton estableci
que la resistencia (esfuerzo de corte) que se origina en un fludo, es
proporcional a la velocidad por parte del fludo, que est siendo separado
uno de otro (velocidad de corte).
La viscosidad dinmica , (kg m / seg), de un fludo es una propiedad
fundamental que relaciona la fuerza de corte, (N / m2), con la velocidad de
corte segn:

= -

No se debe confundir la viscosidad dinmica con la viscosidad cinemtica que es la

relacin entre la viscosidad dinmica y la densidad del fludo (m2 / seg).

Para fludos Newtonianos, la viscosidad es independiente de la velocidad de corte.

Para fludos no Newtonianos es una funcin de la velocidad de corte. El agua y
muchos caldos de fermentacin se pueden considerar como fludos Newtonianos.
En cambio las fermentaciones de hongos filamentosos donde se excretan
polmeros, tienen un comportamiento no Newtoniano.

Comportamiento no Newtoniano
El ms importante es cuando la velocidad de corte depende de la viscosidad. Un
fludo cuya viscosidad disminuye cuando aumenta la velocidad de corte se llama
pseudoplstico. Lo opuesto, es decir aumenta la viscosidad cuando disminuye la
velocidad de corte se llama dilatante.
Las soluciones de polmeros y soluciones que contienen hongos filamentosos son a
menudo pseudoplsticos.
Ciertos materiales no fluyen hasta que se excede tres veces el esfuerzo de corte,
estos materiales se llaman plsticos de Bingham.
Una relacin tpica entre la velocidad de corte y viscosidad es el Modelo de OSTWALD
power law model.
=K

n-1

K es el ndice de consistencia
n es el ndice de la ley de potencia.
Si n > 1, el fludo es dilatante, si n < 1 es pseudoplstico, y si es n = 1 es un fludo
Newtoniano.
Un medio que contiene microorganismos es normalmente Newtoniano, y la viscosidad
es cercana a la del agua pura (excepto cuando tengo [biomasa] muy altas.
Si el microorganismo produce polisacridos extracelulares, hay un efecto significativo
sobre la reologa, pero el efecto sobre las clulas es despreciable.

En fermentaciones de hongos, el medio se vuelve muy viscoso. Las propiedades

reolgicas van a depender si tengo micelio libre aglomerado de hifas, de la forma
de los pellets. Generalmente el esfuerzo de corte y la viscosidad en un medio con
micelio es > que en un medio con pellets a la misma [biomasa].

Cambio de Escala en la Prctica

Es imposible mantener las mismas condiciones de una escala laboratorio planta
piloto a una escala >.

En la Tabla 1 se mantuvieron constantes 4 parmetros, potencia de entrada

especfica, velocidad de agitacin (que es equivalente a mantener el tiempo de
mezclado), la velocidad de punta (que da aproximadamente la misma velocidad
de corte, y el n de Re, el resto de los parmetros se modifican con el cambio

de escala.
Hay cuatro aproximaciones diferentes para un cambio de escala:
Mtodo Fundamental
Mtodos semi fundamentales
Anlisis dimensional
Reglas de Thumb
El mtodo fundamental se basa en la solucin de ecuaciones que gobiernan el
flujo combinadas con la cintica de la reaccin. En un sentido estricto, esto no es
posible ya que la cintica microbiana no es del todo conocida, se deben hacer
suposiciones.
En el mtodo semi fundamental se aplican modelos de flujo ms simples.
Cuando un modelo se combina con un modelo cintico apropiado, se puede
describir con precisin el proceso. Por ej: un modelo estructurado.
Anlisis dimensional se basa en la comparacin de los tiempos caractersticos
de mecanismos diferentes involucrados en un proceso de fermentacin.
Para un proceso que se modela como de primer orden, el tiempo se define como
la recproca de la velocidad constante.
Para procesos que no son de primer orden, el tiempo se calcula como la relacin
entre la capacidad y el flujo (contenido volumtrico de la especie considerada vs
velocidad volumtrica de la especie consumida).

Analizando los tiempos caractersticos se pueden identificar problemas como

limitacin de oxgeno en un proceso en gran escala.
: hold up del gas (m3 de gas / m3 de la dispersin del gas en el lquido)
vg : flujo de gas (m3 / hr)
qs: velocidad volumtrica de sustrato (kg / m3 hr)
vf: lquido de alimentacin del reactor (m3 / hr)
sf: [S] en la alimentacin (kg / m3)

Pasos principales en un cambio de escala

Reglas de thumb
En la Tabla 1 se puede mantener constante un parmetro durante el cambio de
escala, lo ms usado es potencia de entrada del agitados y el valor de kla. En la
prctica no es as porque los valores pueden cambiar, inclusive puedo disear un
reactor completamente diferente.
Si se sigue los pasos esquematizados para un cambio de escala puedo evitar fallas
asociadas con el mismo.

Fermentacin en estado slido (FES)

Antecedentes
Los procesos de FES existen de manera natural desde el comienzo de la vida en el
planeta y fueron empleados de forma artesanal en los pases del Sudeste Asitico,
frica y Amrica Central desde hace siglos para la elaboracin de alimentos a partir
de cereales, yuca, entre otros.
El objetivo fundamental con estas fermentaciones ha sido no solo aumentar el
contenido proteico de estos alimentos, sino mejorar las posibilidades de
conservacin, cambiar las caractersticas fsicas, el color, el olor o el sabor de los
mismos.
Ejemplos de estos productos lo constituyen el Koji, que se obtiene por el cultivo del
hongo Aspergillus oryzae sobre cereales cocidos, el Shoyu, el Miso y el Ontjom
(Hesseltine, 1972).
La produccin del queso Roquefort a partir de leche de oveja, data de alrededor de
1000 aos; sin embargo, no es hasta aproximadamente 1930 que se conoce el
papel de los hongos en la elaboracin de ese alimento, cuando se demostr que
todos los hongos desarrollados en este tipo de queso eran del mismo organismo
Penicillium roqueforti.
No es hasta finales de la dcada de los 70 que se promueve con fuerza el estudio
cientfico, con vistas a aprovechar las ventajas econmicas de este tipo de

fermentacin (Doelle y col., 1992).

Definicin
Hesseltine (1972) emple el trmino de fermentacin en estado slido a todas las
fermentaciones donde el sustrato no es lquido.
Posteriormente, Raimbault (1980) propuso un trmino ms preciso: "Las
fermentaciones en las cuales el sustrato no est ni disuelto ni en suspensin en un
gran volumen de agua".
No obstante, Moo-Young y col. (1983), propusieron un trmino a todos los procesos
que utilizan materiales insolubles en agua para el crecimiento de microorganismos
en ausencia de agua libre.
Aautores como Mudgett (1986) y Durand. y col. (1988), han planteado una
definicin ms general: "Es un mtodo de cultivo de microorganismos sobre y/o
dentro de partculas slidas". El lquido ligado a las partculas slidas debe estar en
una cantidad que asegure la actividad del agua adecuada para el crecimiento y el
metabolismo de los microorganismos, pero sin exceder el mximo poder de
retencin de este lquido en la matriz slida.
La definicin ms general y reciente fue formulada por Viniegra-Gonzlez (1997),
donde se plantea que "es un proceso microbiolgico que ocurre comnmente en la
superficie de materiales slidos que tienen la propiedad de absorber y contener
agua, con o sin nutrientes solubles".

Esta definicin abarca a procesos donde el soporte slido es inerte y los sustratos
que utiliza el microorganismo pueden ser sustancias solubles en agua, como el
proceso de bioconversin de etanol y el crecimiento de Candida utilis sobre
amberlita (Christen y col., 1993).
Ventajas y desventajas de la fermentacin en estado slido comparada
con el cultivo sumergido en lquido
Doelle y col. (1992) consideran como ventajas los siguientes aspectos:
Los medios de cultivo son simples, generalmente subproductos agrcolas que
presentan un alto contenido de los nutrientes necesarios.
La baja actividad del agua es de gran ayuda para evitar las contaminaciones,
especialmente de bacterias y levaduras.
La concentracin natural del sustrato permite utilizar reactores ms pequeos en
comparacin con los utilizados en otro tipo de fermentacin. Tienen mayor
productividad volumtrica.
La aireacin forzada es facilitada por la porosidad del soporte, lo que permite
una alta transferencia de oxgeno al microorganismo.
Pueden emplearse, frecuentemente conidios como inculo en los procesos de
crecimiento de hongos, lo cual disminuye los costos y las manipulaciones en la
preparacin del inculo.

 Los conidios de los hongos que se producen son mucho ms resistentes y

tienen mejor adaptabilidad a las condiciones en las que se aplican como agente
de biocontrol.
El proceso de recobrado es simplificado. Algunos productos son utilizados
integralmente, como alimento animal, productos para el control biolgico, etc.
Los procesos se consideran generalmente como tecnologas limpias.
Entre las principales desventajas se encuentran:
Su aplicacin se limita a microorganismos que crecen en bajos contenidos de
humedad.
La extraccin del calor metablico puede ser un problema, sobre todo cuando
se trabaja a gran escala y no se controla el proceso.
La naturaleza slida del sustrato trae problemas al medir los parmetros de la
fermentacin tales como el pH, la temperatura, el contenido de humedad y la
concentracin de sustrato y productos.
Los procesos de transferencia de masa son limitados por la difusin.
Muchos aspectos ingenieriles como el diseo de reactores y el escalado estn
muy poco caracterizados.

 El tiempo de fermentacin es mayor debido a que generalmente se utilizan

microorganismos que presentan bajas velocidades especficas de crecimiento.
Es bueno recalcar que algunas de estas desventajas son relativas, por ejemplo, el
tiempo de fermentacin ya que actualmente se estn empleando bacterias en los
procesos de FES.
Autores (Ballio y col. 1964 y Richard-Molard y col. 1985) , demostraron que
durante el desarrollo del cultivo de un hongo, la variacin de la actividad del agua
(aH2O) en el medio, puede influir sobre el crecimiento micelial en la germinacin
de las esporas y esto es til para optimizar la produccin de conidios en
fermentadores con sustrato slido, donde la suplementacin de oxgeno y la
cosecha de conidios, resulta ms fcil que en fermentaciones lquidas.
Influencia de factores ambientales en la fermentacin en estado slido
Las condiciones ambientales tales como la humedad, la actividad del agua, el pH,
la temperatura, la concentracin y disponibilidad del sustrato, la aireacin, el
tamao de partculas y la forma de inoculacin afectan significativamente tanto el
crecimiento como la formacin de productos.
En el cultivo lquido agitado el control de las condiciones ambientales es
relativamente simple, ya que estos sistemas son homogneos desde el punto de
vista de la concentracin celular, nutrientes y productos.

Sin embargo se presentan problemas serios en los sistemas slidos con el

mezclado, la transferencia de oxgeno, el intercambio de calor y el control de la
humedad y el pH, debido, principalmente, a la heterogeneidad y la consistencia
del sistema (Doelle y col., 1992).
La Humedad y la actividad del agua (aH2O)
El porcentaje de humedad en la fermentacin slida puede variar entre 30 y 80%
(Oriol y col., 1988), dependiendo del slido utilizado, el microorganismo y el
objetivo del proceso (formacin de producto, crecimiento de la biomasa).
Aunque el porcentaje de humedad es una de las variables que comnmente se
optimiza en los sistemas de fermentacin slida, (Kim y col., 1985, Rodrguez y
col., 1986), hoy se reconoce que no es solo la cantidad de agua presente en el
sistema la que ejerce su influencia sobre la eficiencia del proceso, sino el carcter
de las interacciones entre el agua y el medio slido.
La actividad del agua (aH2O) es el parmetro que se ha utilizado para caracterizar
cuantitativamente esas interacciones fsicas y/o qumicas del agua en el sistema.
La actividad del agua se define como la humedad relativa de la atmsfera gaseosa
en equilibrio con el sustrato (Oriol E. y col., 1988).
La humedad relativa de un sistema gas - vapor de agua se determina por %H. R.
= (p H2O / pH2O) 100, de manera que la actividad del agua es igual a la relacin

entre la presin parcial del vapor de agua en la solucin gaseosa (p H2O ) en el

estado de equilibrio con el agua adsorbida en el slido y la presin de vapor del
agua pura (pH2O ) a esa misma temperatura .
Se demostr que la actividad del agua no slo ejerce influencia sobre el
crecimiento, sino tambin sobre la formacin de productos y, en muchos casos, el
valor mnimo requerido de aH2O para la formacin del producto difiere del necesario
para el crecimiento (Troller, 1980, Gervais y col., 1988).
El pH
El pH es otra variable que afecta el desarrollo de los procesos de fermentacin en
estado slido, al igual que lo hace en los cultivos sumergidos. Sin embargo, en el
caso de la fermentacin slida, su control es prcticamente imposible, debido a la
ausencia de instrumentos capaces de medir el pH en la capa de lquido que rodea el
slido (Mitchell y col., 2002).
Por otra parte, el mezclado de slidos es un proceso complejo por lo cual se
dificulta tambin el control de esta variable durante el desarrollo de la
fermentacin.
El pH cambia por diferentes razones; normalmente disminuye por la secrecin de
cidos orgnicos como actico y lctico durante el proceso. No obstante, la fuente
de nitrgeno utilizada influye mucho en la tendencia que sigue el pH (Domenech,
2000).

La temperatura
El crecimiento y la formacin de productos son resultados de complejas reacciones
qumicas, y al igual que cualquier otra reaccin, estn afectados por la
temperatura, la que ejerce una accin determinante en el conjunto de actividades
celulares.
La temperatura es la variable cuyo control, en una fermentacin slida, se
considera lo ms crtico debido a la alta concentracin de sustrato por unidad de
volumen y a la baja conductividad trmica del sistema heterogneo slido lquido - gas, lo que favorece la acumulacin del calor metablico en el sistema y
un aumento de la temperatura del cultivo.
El aumento de la temperatura favorece tres aspectos negativos:
La actividad microbiana se desacelera o se detiene.
Se deshidrata el medio slido.
El metabolismo se desva como un mecanismo de defensa ante el calor o ante la
deshidratacin (Gutirrez y col., 1995).
El control de la temperatura se ha tratado a travs de mtodos convencionales de
extraccin de calor y de mtodos no convencionales.
Los mtodos convencionales incluyen el intercambio de calor por los mecanismos

de conduccin y conveccin forzada. Se demostr que los primeros no son tan

efectivos como los segundos (Saucedo - Castaeda y col., 1990).
Los mtodos de extraccin de calor por conveccin, para ser efectivos, requieren
de elevadas tasas de aireacin que con frecuencia deshidratan al medio.
Los mtodos no convencionales se refieren a la utilizacin del calor latente de
vaporizacin del agua para eliminar el calor metablico de manera rpida y
efectiva (Sargantanis y col., 1993).
Existe un compromiso entre las soluciones drsticas y efectivas (mtodos no
convencionales) versus las menos efectivas (mtodos convencionales) pero que
respeten la integridad del sistema biolgico en su conjunto.
Resulta tambin claro que los sistemas de control de las FES debern tomar en
cuenta, simultneamente, la humedad del medio, la humedad relativa del aire y la
temperatura.
Tambin el tipo de reactor utilizado (con o sin agitacin) juega un papel
fundamental en la eficiencia del control de la temperatura.
La concentracin y disponibilidad del sustrato
El medio de cultivo debe tener todos los nutrientes necesarios de forma
balanceada para favorecer el crecimiento del microorganismo.

Las relaciones entre algunos de sus elementos son de particular importancia, por
ejemplo, carbono-nitrgeno y fsforo-oxgeno, esta ltima de manera relevante en
lo referido a la eficiencia de conversin energtica y a la respiracin (Cannel y Moo
Young, 1980).
La formulacin tiene que ver con los aspectos cuantitativos de los medios, es decir,
debe establecer las concentraciones a ser utilizada de cada componente.
Una primera aproximacin con respecto a las cantidades a utilizar de las diversas
lo da el conocimiento de la composicin de la biomasa del microorganismo
empleado (Ertola y col., 1994).
Mediante el conocimiento de los coeficientes de rendimiento para la formacin de
biomasa y producto, y los valores de la energa de mantenimiento ser posible
establecer tambin los requerimientos de las fuentes de carbono necesarios para
formular un medio (Ertola y col., 1994).
Al igual que en los cultivos sumergidos, la concentracin de sustrato ejerce una
influencia sobre el desarrollo del microorganismo. Hasta el momento, tal influencia
no est caracterizada en trminos de limitacin o inhibicin como en los cultivos
sumergidos; pero se piensa que los efectos de limitacin sean mayores en las
fermentaciones slidas, debido a la baja velocidad de difusin de los nutrientes en
la fase lquida (Moo-Young y col., 1983).
Si se ha encontrado que la relacin carbono a nitrgeno tiene una gran

importancia y su valor ptimo puede variar en el intervalo de 10 a 100 en

dependencia del proceso de fermentacin.
La aireacin
En la mayora de los procesos de fermentacin en estado slido participan
microorganismos aerobios, y resulta la aireacin un factor fundamental para el
desarrollo del proceso.
La aireacin se utiliza para suministrar el oxgeno necesario, para extraer el CO2
formado, as como para extraer el calor metablico evolucionado, de manera que
el flujo ptimo de aire debe tomar en consideracin la naturaleza del
microorganismo utilizado, los requerimientos de oxgeno para el crecimiento y/o la
formacin del producto deseado, la velocidad de generacin de calor metablico, la
concentracin crtica del dixido de carbono y otros metabolitos voltiles, el
espesor de la masa de slido, entre otros.
La aireacin en las FES es ms fcil que las fermentaciones sumergidas, porque la
superficie de contacto es mayor entre el aire y el lquido que est absorbido en las
partculas (Viniegra y col., 2003).
El tamao de partcula
El tamao de partcula est muy ligado a la transferencia de masa en el sistema de
fermentacin en estado slido, y para considerar este fenmeno se ha propuesto
dividir el anlisis en la transferencia de masa intrapartcula y la

interpartcula (Moo-Young y col., 1983).

En el primer caso, influye ms el tamao y la forma del poro de la partcula, as
como la porosidad, aunque tambin influye el tamao de la partcula (Huerta, S.,
1984).
En el segundo caso, el espacio interpartcula es lo ms importante y es afectado por
el tamao de la partcula, su forma y la humedad (Bernard y col., 1992).
Otro aspecto que influye en la transferencia de masa durante el proceso, es el
cambio de estructura de las partculas de sustrato resultado de la accin de los
microorganismos (Moo-Young y col., 1983).
El inculo
Otro factor que influye en los procesos de FES lo representa el tipo de inculo y la
forma de inoculacin. En la literatura se reconoce el uso de dos tipos fundamentales
de inculo en la produccin de hongos, tanto a nivel de laboratorio como industrial:
micelio o esporas (Domenech, 2000).
El uso de micelio est reportado por Moore y Prior (1993) y Jenkins y col. (1998),
entre otros. Las principales ventajas del uso de micelio como inculo son: una
mejor competitividad del hongo, una reduccin de la posible colonizacin del
sustrato por microorganismos contaminantes y la colonizacin ms rpida debido a
que se reducen los tiempos de incubacin (la fase de latencia o de adaptacin
principalmente).

Sin embargo, en diferentes trabajos se reporta el uso de suspensiones de esporas

(Bosch y col., 1995, Dorta y col., 1996 y Booth y Shanks, 1998), destacndose su
principal ventaja en la reduccin de los costos en la etapa de propagacin del
microorganismo.
Cintica y actividad metablica del cultivo batch
La cintica de un proceso; representa la variacin de una o ms variables de dicho
proceso en el tiempo. En los procesos fermentativos las variables de mayor
importancia y que ms se han estudiado son: contenido de biomasa en el sistema,
la naturaleza del sustrato, la sntesis de uno o varios metabolitos, el consumo de
oxgeno y la produccin de dixido de carbono.
Dentro de estas variables, la sntesis de biomasa en el proceso y el consumo de
sustrato han permitido establecer una serie de criterios y parmetros que
caracterizan cualquier proceso fermentativo (Domenech, 2000).
Los estudios cinticos permiten determinar aspectos tan importantes como:
La velocidad especfica de crecimiento
El rendimiento del proceso.
La productividad del sistema.
El calor generado en el sistema.

La estrategia a seguir en cuanto a la produccin de un metabolito especfico.

Una de las principales dificultades encontradas en el estudio y desarrollo de los
procesos de fermentacin en estado slido viene dada por las caractersticas
intrnsecas de estos sistemas heterogneos, la imposibilidad del muestreo durante
la fermentacin para determinar las concentraciones correspondientes de
biomasa, sustrato y productos.
Este hecho se refleja de manera particularmente aguda cuando se tiene la
necesidad de realizar estudios cinticos del proceso. No obstante, existen
diferentes alternativas que permiten desarrollar estos estudios de manera objetiva
y satisfactoria.
La determinacin de la biomasa por mtodos indirectos se ha empleado por
diferentes investigadores. Entre ellos, Sato y col. (1983), Rodrguez y col. (1988),
Desgranges y col. (1991) han basado su metodologa en el metabolismo
respiratorio.
El O2 consumido y el CO2 producido son el resultado de los procesos metablicos a
travs de los cuales los microorganismos aerbicos obtienen la energa necesaria
para su crecimiento.
Por tanto, estas actividades metablicas estn asociadas al crecimiento del
microorganismo y pueden usarse para estimar la biomasa sintetizada.
Entonces es posible relacionar en trminos diferenciales el O2 consumido (dO2/dt)

y el CO2 producido (dCO2/dt) tanto al crecimiento celular como al mantenimiento.

Se usan modelos de correlacin que son resueltos con el uso de tcnicas
numricas para la solucin de ecuaciones diferenciales. Con el empleo de
computadoras y software adecuados y cromatgrafos o analizadores de gases
(CO2 y O2) acoplados a la salida de los gases del fermentador, es posible estimar
de forma continua la biomasa sintetizada y, de esta manera, estimar el calor
metablico generado.
Esta metodologa tambin podra aplicarse en el control de parmetros de la
fermentacin como, por ejemplo, para la temperatura.
Consideraciones acerca de optimizacin de medios de cultivo
Pueden ocurrir situaciones en las cuales sea imperativa la optimizacin de los
medios de cultivo (Ertola y col., 1994). Entre ellas podemos mencionar las
siguientes:
La no existencia de informacin respecto a coeficientes de rendimiento de macro
y micro elementos para el cultivo del microorganismo determinado.
La existencia de limitaciones nutricionales ocultas, especialmente de
microelementos y factores de crecimiento.
El uso de medios de cultivo conteniendo elementos en exceso respecto de los

requerimientos nutricionales del microorganismo en cuestin, que pueden causar

inhibicin del crecimiento.
El ensayo de sustancias estimulantes, activadoras e inhibidoras del crecimiento y
formacin del producto.
El empleo de fuentes nutricionales no convencionales.
Acerca de esto existen en la literatura diferentes ejemplos sobre tcnicas que
hacen posible la optimizacin de los medios de cultivo. La mayora de estas, basan
la formulacin de los mismos en la composicin elemental del microorganismo a
estudiar o de otros similares que puedan servir de referencia para realizar un
balance de materia apropiado. (Dreyer y col., 2000).
La optimizacin de los medios de cultivo con fines industriales, en la mayora de
los casos ha sido efectuada mediante procedimientos empricos de ensayo y error,
no solo en la formulacin del medio de cultivo, sino tambin en las condiciones de
operacin.
De cualquier manera es probable que el medio de cultivo original pueda ser
optimizado, modificando el porcentaje de los componentes del mismo y las
materias primas utilizadas, siendo factible en muchos casos optimizar un medio de
tal manera que no sea solamente ms productivo, sino de menor o igual costo que
el original, para lo cual se requiere del uso de varios mtodos de optimizacin
(Dreyer y col., 2000).

Un aspecto relevante en la optimizacin de un medio de cultivo de inters industrial

no es slo el logro de una formulacin racional del mismo, sino tambin la posible
inclusin de materias primas de bajo costo que hagan rentable el proceso. Ello ha
llevado a la bsqueda de subproductos de bajo valor comercial que puedan sustituir
componentes costosos y que puedan ser utilizados como fuentes de carbono o
nitrgeno (Dreyer y col., 2000).

Bibliografa
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