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Pueden

AGAR-

Líquidos

ser:

Agente

solidifcante:

Sólidos

(polímero

de algas)

Semisólidos

AGAR

extraído

Pueden AGAR- • Líquidos ser: Agente solidifcante: (polímero de algas) AGAR extraído Medios de cultivo Son

Medios de cultivo

Son preparaciones a partir de compuestos naturales modificados, diseñadas para cultivar microorganismos en el laboratorio.

Pueden AGAR- • Líquidos ser: Agente solidifcante: (polímero de algas) AGAR extraído Medios de cultivo Son

Componentes básicos:

Agua

Fuente de C (H de C – glucosa, sacarosa, lactosa, almidón, etc.) Fuente de N (proteínas, peptonas, aminoácidos) Fuente de S, P, Ca, Na, Fe, (sales) Vitaminas y otros factores de crecimiento (extracto de

Pueden AGAR- • Líquidos ser: Agente solidifcante: (polímero de algas) AGAR extraído Medios de cultivo Son

levadura, extracto de carne, etc.)

Pueden AGAR- • Líquidos ser: Agente solidifcante: (polímero de algas) AGAR extraído Medios de cultivo Son
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SUS COMPONENTES •Naturales: aquellos que existen como tal en la
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN
SUS COMPONENTES
•Naturales: aquellos que existen como tal en la naturaleza ( leche,
suero, sangre, agua, etc.).
Son siempre complejos.
•Artificiales: se preparan a partir de diversos componentes; pueden
ser:
•Sintéticos o químicamente definidos: Se preparan con
sustancias puras y en cantidades conocidas.
•Complejos o químicamente indefinidos: Se preparan
con ingredientes cuya composición se conoce sólo de
forma aproximada, por ser sustancias complejas (suero,
sangre, extracto de levadura, extracto de carne,
peptonas, etc.)
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU FINALIDAD • Comunes o generales: aquellos que se utilizan
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SU FINALIDAD
Comunes o generales: aquellos que se utilizan para el cultivo de un
amplio rango de bacterias (u hongos) Pueden ser sólidos o líquidos, para
aislamiento no selectivo o mantenimiento, etc.
Especiales:
Enriquecidos: Son medios comunes adicionados de sangre, suero,
yema de huevo, etc. para el
nutricionalmente exigentes.
cultivo de m.o.
Selectivos
• Para enriquecimiento: medios líquidos que permiten el crecimiento
de varios m.o. de una muestra, pero favorecen a alguno que está
en muy baja proporción
• Para aislamiento: medios sólidos que contienen algún
componente que favorece el desarrollo de un grupo, inhibiendo a
otro.
Diferenciales: contienen algún componente que permite distinguir
entre 2 o más tipos de m.o. por carácter{isticas diferenciales de
crecimiento (ej. Color de la colonia)

Aumento del tamaño (y

Aumento del n° de células y/o aumento de biomasa

biomasa) celular

de una población celular

Es imposible medirlo en una sola célula Es limitado, no nos da ninguna

Las bacterias se dividen por fsión binaria, y el crecimiento de la población es exponencial

• Aumento del tamaño (y • Aumento del n° de células y/o aumento de biomasa biomasa)
• Aumento del tamaño (y • Aumento del n° de células y/o aumento de biomasa biomasa)
División por fsión binaria en bacterias

División por fsión binaria en bacterias

CURVA DE CRECIMIENTO

CURVA DE CRECIMIENTO
CURVA DE CRECIMIENTO

FASES DE CRECIMIENTO:

Latencia : La fase de latencia dura aproximadamente 4 hrs. No hay crecimiento

visible y de hecho puede haber una reducción en el número de bacterias. Es un período de adaptación, en que las bacterias tienen una gran actividad metabólica, pero no se dividen.

Logarítmica : Después de 6 hrs, aproximadamente, de haber sembrado las bacterias en un

medio óptimo, las bacterias comienzan a dividirse en forma constante y máxima. El número de bacterias aumenta en progresión geométrica y la resultante es una línea recta ascendente. Este período termina más o menos a las 12 hrs, debido a la disminución de los nutrientes disponibles.

Estacionaria : Debido a la acumulación de desechos metabólicos y disminución de los

nutrientes, la actividad metabólica decae. Las bacterias se dividen con menor frecuencia y el número total de bacterias vivas permanece constante, puesto que el número de muertes se equilibra con el de multiplicación. En la mayoría de las bacterias esta fase se produce entre las 18 a 24 hrs.

Regresión : En esta fase, conocida también como fase de muerte, las bacterias dejan de

multiplicarse y mueren con el tiempo, debido al término de nutrientes, acumulación de material de desecho y disminución del espacio físico. No todas las bacterias del cultivo se encuentran en esta fase al mismo tiempo, por lo tanto se representa como una pendiente, que no llega a 0.

Tiempo de Generación : g

Es el tiempo requerido para que una célula se divida o una población se duplique

g = t/n n = Numero de generaciones trascurridas t = Tiempo x 0 = Número de células iníciales x = Numero de células a tiempo t x = 2 n x 0

lg x = n log 2 + log x 0

3,3 log

x/x 0

n =

E. coli a 37 °C en condiciones óptimas se duplica cada 20 min. Al inicio -------------------- 10.000 células A los 20 min. ------------ 20.000 células

A los 40 min. ------------

40.000 células

A 18 hs. -------------------- ????

 

Temp.

Tiempo de

Organismo

(°C)

duplicación (hs)

BACTERIAS

Escherichia coli

37

0,28

Bacillus subtilis

40

0,43

Pseudomonas putida

30

0,75

Mycobacterium tuberculosis

37

6

Treponema pallidum

37

34

LEVADURAS

Saccahromyces cerevisiae

25

2

Tipos de Cultivos:

Estacionario (Batch)

Semicontinuo

Continuo

Determinación de Crecimiento Microbiano

Métodos Directos

  • - Recuento del número de célula en cámara de Nebauer

  • - Peso seco celular

  • - Determinación de Nitrógeno o Proteínas totales

  • - Determinación del DNA

Métodos Indirectos

- Recuento de Colonías en Placas

  • - Recuento sobre fltro de membranas

  • - Consumo de Oxigeno

  • - Liberación de CO2

  • - Medida de Turbidez

  • - Tubos Convinatorios