Vous êtes sur la page 1sur 43

Facult de mdecine de Constantine

Laboratoire de Toxicologie CHUC


Cours de 2e anne
KOULOUGHLI Khaoula
23 Septembre 2014

Inductive Coupled Plasma


(ICP)

Plan
I.

Introduction

II.

Spectromtrie dmission atomique

1.
2.
3.

Dfinition
Principe
Appareillage

4.

Interfrences

5.
6.
7.
8.

Applications
Avantages
Inconvnients
Couplage ICP-MS

III. Conclusion

Introduction

La spectromtrie atomique tudie les missions


ou absorptions de lumire par l'atome libre,
c'est dire lorsque celui-ci voit son nergie
varie au cours d'un passage d'un de ses
lectrons d'une orbite lectronique une autre

Introduction

Dfinition
Lanalyse par mission atomique constitue une
mthode trs gnrale de dosage des lments qui
repose sur ltude optique des radiations mises par
les atomes passs dans un tat excit, gnralement
ionis.
Des sources thermiques comme les flammes, les fours
et les dcharges lectriques sont utiliss pour
dissocier les molcules de lchantillon en atomes
libres (sources datomisation).

Dfinition
Plus rcemment, dautres types de dcharges
lectriques dnomms plasma ont t utiliss comme
sources datomisation : le plasma coupl inductif(ICP).
Lnergie susceptible dtre fournis par ces plasmas est
considrablement plus importante que celle dune
flamme.
En effet la T atteinte correspond des valeurs de
5000 6000c

Notion de plasma

Plasma :un gaz ionis lectriquement neutre, produit dans


des tubes dcharge.
Les plasmas conservent certaines proprits des gaz
(compressibilit, pression proportionnelle la T
absolue, ...), par contre, les proprits lectromagntiques
sont diffrentes du fait de la prsence de- en mouvement.
Les plasmas ont t utiliss depuis les annes 1970 en
spectromtrie d'mission atomique, en remplacement des
flammes classiques.
Le rle du plasma, dans l'analyse par mission
optique, est:
-Casser les liaisons molculaires ;
-Produire des ions et atomes libres ;
-Exciter ces particules.

Notion de plasma
LAr est le gaz le plus appropri car il prsente les
proprits suivantes :
- Inerte : pas apte ragir chimiquement avec les
chantillons ;
- Optiquement transparent ;
- Facilit dionisation Ar Ar++e- .
- Disponible grande puret et a faible cot.
- Possde une conductivit thermique modrment
basse, ce qui
retient la chaleur au cur du plasma.
Largon a un potentiel dionisation trs lev de 15.76 eV.
De ce fait tous les lments possdant un potentiel
dionisation plus faible seront ioniss dans le plasma. Pour
gnrer un plasma et lentretenir, il faut apporter une
nergie importante.

Mthodes de spectromtrie bases sur les


Le plasma est gnr parplasmas
le couplage inductif d'lectrons
coupls
par
induction
(Inductively
libres
avec des
oscillations
rapides
du champ Coupled
lectromagntique Plasma
la frquence
de 27 Mhz dans
: ICP)
l'argon.
Les sources de plasma couples par induction (ICP)
peuvent tre associes :
Spectromtre d'mission atomique (spectromtrie
de rayonnements visibles)=ICP-AES (Inductively Coupled
Plasma-Atomic Emission Spectrometry) ou encore
OES(Optical Emission)car les raies
analyses sont souvent des raies ioniques et pas
seulement atomiques.
Spectromtre de masse=ICP-MS (Inductively
Coupled Plasma- Mass Spectrometry)

Mthodes de spectromtrie bases sur les


plasmas
coupls par induction (Inductively Coupled
Dans les 2 cas le processus d'excitation est le mme,
Plasma
ICP)
une flamme de plasma
d'argon :dont
les rgions internes
sont des T > 10 000 K
Ces instruments sont bass sur proprits ionisantes
d'un plasma dAr qui permet :
ICP-AES : mesure des missions ioniques/atomiques
des lments prsents /Ech
ICP-MS : sparation avec SM des ions correspondants
aux lments prsents dans chantillon, avec un grand
pouvoir de rsolution.

Principe
En mission, on excite thermiquement les atomes, dans la
flamme ou le plasma afin qu'ils rmettent leur spectre de
raies.

En tudiant les spectres dtects, on peut donc voir quels


lments constituent l'chantillon ( condition d'avoir une
T suffisamment leve pour exciter tous les atomes), et
valuer leur quantit grce l'intensit des raies.

ICP-AES :Les chantillons analyser sont introduits dans le


plasma et sont transforms en vapeur atomique ou
ventuellement ionique.

Principe
Les atomes/ions ainsi crs sont instables, ils reviennent
ensuite, en une ou plusieurs tapes, sa configuration
d'nergie fondamentale dans la queue de la flamme en
mettant les rayonnements lumineux dont la fr est
spcifique de l'lment et de la transition considrs
correspondant aux rarrangements du cortge lectronique.

C'est cette mission caractristique qui est mesure par


un spectromtre optique pour l'ICP-AES.
Quant l'ICP-MS les ions eux-mmes sont extraits du plasma
vers un SM qui les spare selon leur masse, permettant ainsi
leur identification.

Appareillage
*Source de nbulisation / atomisation / excitation de
l'ch
*Dispositif dispersif (monochromateur et/ ou
polychromateur) pour analyser le rayonnement
mis/l'ch
*Ensemble lectronique / informatique pour la
gestion des spectromtres et l'exploitation des
donnes

Appareillage

1-Nbuliseur
chantillon
nbulist fin et homogne (arosol
qui est introduit dans la zone de stimulation du
plasma).
Dessiccation (viter perte inutile dnergie).
Seuls quelques % de l'ch pomp arrivent au plasma, le
reste tant perdu dans la chambre de nbulisation.

Nbuliseur pneumatique
Nbuliseur Ultrason

Appareillage
Nbuliseur pneumatique:
Un jet de gaz anims dune grande vitesse arrache de
la surface liquide des vsicules qui sont rduites en
fines gouttelettes dans la phase gaz qui les
transporte.

Efficacit en f(x) de la viscosit du liquide.


Rendement faible ( 5 %).

Appareillage
Nbuliseur Ultrason:
La solution nbuliser est soumise des vibrations
ultrasoniques de fr comprise entre 800 et 3500 Hertz.
Il permet de donner des gouttelettes de diamtre homogne.
Rendement=> amlior= 100%.
Sensibilit de mesure par rapport au nbuliseur
pneumatique mais le prix lev limite son utilisation.

Appareillage
2-Torche
Un ensemble de tubes concentriques,
en quartz, o circulent flux dAr
(gaz plasmagne) + Nbulisat (arosol)
La vitesse de larosol doit tre suffisante
pour percer le plasma sans tre trop leve
car le temps de sjour des particules
exciter serait faible.

Appareillage
2-Torche
Le couplage est atteint par la gnration dun
champ magntique en faisant passer un
courant lectrique haute fr (5 et 100 MHz)
travers une bobine dinduction
Un flux dAr tangentiel (tube externe) va
permettre disoler, de refroidir la rgion proche
des bobines et de donner la forme au plasma.
Cet inducteur gnre un champ magntique
oscillant rapidement, orient dans le plan
vertical de la bobine induisant lionisation du flux
continu dAr.

Appareillage
2-Torche

Les ions rsultants+leurs e- associs


interagissent ensuite avec le champ magntique
fluctuant----- gnre suffisamment dE pour
ioniser+datomes dAr par stimulation de
collision.

Les e- gnrs dans le champ magntique sont


acclrs perpendiculairement la torche.
A grande vitesse, les cations et les e-, entreront
en collision avec les atomes dAr pour produire
une ionisation supplmentaire, ce qui engendre
une sensible de la T du plasma.

Appareillage
2-Torche
Le plasma est donc un milieu trs haute T qui sert ici:
- atomiser le nbulist
- ioniser partiellement et exciter les atomes par chocs avec
lAr (Ar ou Ar+) ou des e-:
Ar+M Ar + M+*+eAr++M Ar + M+*
e-+M M+*+2e-

Les hautes T permettent de dtruire compltement les

liaisons molculaires, et de s'affranchir des interfrences


chimiquesobserves dans les sources moins chaudes
(flammes)atomisation plus efficace: pas despces
rfractaires

Lexcitation a lieu certaine T seulement. Or le


plasma prsente un certain profil de T. Il y a donc
diffrentes zonescorrespondants aux diffrents
processus. Il y a une zone spcifique pour lanalyse
de lmission:
la zone dobservation analytique optimale

Appareillage
3-Systme dispersif
oLe passage de l'ch dans le coeur du plasma excite principalement
les lectrons des couches externes.
oLes rayonnements issus des rarrangements, des transitions entre
couches externes, sont typiquement compris entre lUV (170 nm) et
la limite du visible (780 nm). La partie mise dans le domaine UVVisible est analyse par le dispositif optique.
oDiffrents montages exprimentaux existent, faisant appel des
montages optiques+/- complexes de fentes, miroirs, rseaux . Les
monochromateurs, polychromateurs (mesurer l'intensit lumineuse
simultanment sur plusieurs longueurs d'onde caractristiques des
lments analyser) , ou mme mixtes, cherchent optimiser les
prcisions exprimentales.

Appareillage
3-Systme dispersif
La quantification des abondances en lments par
ICP-AES est base sur la capacit sparer un
spectre d'mission complexe selon les diffrentes
longueurs d'onde qui le composent.
Ceci doit se faire avec une sensibilit et une
rsolution suffisantes pour mesurer prcisment
l'intensit lumineuse de chaque longueur d'onde
caractristique de chaque lment
Tous les lments seraient excits

Appareillage
4-Photomultiplicateur
Transforme lnergie lumineuse provenant de la
radiation monochromatique en nergie lectrique.

5-Enregistreur
Donne des profils de spectre.

Couplage ICP-MS
Suite son introduction en 1983, lutilisation dun plasma
couplage inductif comme source dions pour un
spectromtre de masse (ICP-MS) a fini par connatre un
succs presque aussi important. En consquence, ces
performances conduisent un nombre limit
dinterfrences chimiques et spectrales, ce qui induit un
degr lev de spcificit lmentaire.
De plus, en ICP-MS, lefficacit de lionisation des
lments entrane des performances exceptionnelles en
termes de limites de dtection, susceptibles dtre
seulement concurrences par lactivation neutronique ou,
pour certains lments, par la SAA lectrothermique.
ICP-MS un caractre unique parmi lensemble des
techniques de spectromtrie atomique.

Couplage ICP-MS
ICP

Couplage ICP-MS
Avantages
Mesure de traces :
Concentration de lordre du p.p.m.
Mesure des ultratraces :
Concentration de lordre du p.p.b.
Mesure des rapports isotopiques.

Applications
Les applications sont surtout quantitative et restent
rserves au dosage des mtaux alcalins et
alcalino-terreux. C'est dire les mtaux les plus
faciles
exciter:
Li, Na, k, Rb
, Cs, Be, Mg, Ca, Sr, Ba; Fe, Co; Ni, Cu, Zn, ZnAl; cd , Pb, Ag.
Dosage des non mtaux et mtallodes:
B, Si, Ge; Sn, P, As, Sb, S , Se, Cl , Br, I

Matrices :

Liquides et tissus biologiques


Terre, boues, sdiments
Eau, gaz
Rejets industriels

Applications
En mono-lmentaire :
1- Pb: Dosage du plomb en milieu professionnel + Surveillance de la
population gnrale (sur sang total).
2- Hg : Suivi de lexposition au mercure par le dosage du mercure
urinaire est galement facilement ralisable par ICP SM sous certaines
conditions.
3- Cr : Surveillance de lexposition au Crome hexavalent, est propose
par le dosage du Crome urinaire total, ou le Cr dans le sang par ICP MS
quipe dune cellule de collision en mode Hlium.
4- As : le suivi de lexposition professionnelle a lAs, il est
indispensable de sparer larsenic dorigine alimentaire comme
larsenobetaine des autres formes toxiques de larsenic.
Une nouvelle mthode de spciation est dcrite en CLHP/ICP-MS sur
une colonne ionique.

En multi-lmentaire :
Profil mtallique chez les individus.
Dosage des mtaux dans les eaux, les sols, etc.

Applications
Prparation des chantillons :
Plasma : Dilution au dixime, dans une solution
aqueuse compose d'acide nitrique 0,144 M et de
triton 0,01 % (v/v).
Les chantillons de sang, pralablement congels
-20 C puis dcongels, sont dilus au dixime dans
une solution aqueuse compose d'acide nitrique
0,144 M et de triton 0,1 % (v/v).
Une fois l'hmolyse acheve, les mlanges sont
centrifugs 4000 tours/min.
Urine : prpares par dilution au 1 : 10 et au 1 : 5
dans l'acide nitrique 0,216 M et de triton 0,01 %v/v
en fonction de l'lment doser.
Prlvement sur tube en verre contenant lhparinate
de Na. Rcemment, une socit a dvelopp un

Applications
1-Dosage direct:
La dtermination de C se fait en extrapolant a partir
dune courbe dtalonnage.
2- Mthode de ltalon interne:
Ajouter chaque chantillon une quantit identique et
connue dun lment autre que celui doser (le lithium
dans le dosage de potassium et de sodium, le rhodium
pour le Pb dans le sang total).
Mesurer le rapport des intensits de la raie analyse et
de la raie talon.
Se reporter une courbe dtalonnage pour la
dtermination de la concentration de la solution
analyser.
Cette mthode permet dliminer les erreurs dues aux

es interfrences
Il faut cependant rester prudent en terme dinterprtation des
rsultats lors de lanalyse de matrices biologiques. De
nombreuses interfrences commencent aujourdhui a tre
bien connues des chercheurs et des toxicologues analystes
lors du dosage par ICP-MS dans ce type de prlvements.
1. Interfrences chimiques:
Contrairement aux autres techniques: SAA en mode
flamme/ four graphite , lICP ne prsente pas ou trs peu
dinterfrences chimiques (liaisons chimiques rompues audel de 6000 C augmentation de la limite de dtection de
composs rfractaires).
2. Interfrences dues lionisation:
Le plasma gnrant un important nombre de- les
interfrences dues lionisation sont la plupart du temps
inexistantes. Cependant dans le cas de solution concentres

Les interfrences
3. Interfrences spectrales:
Les atomes tant pour la plupart s/f dions, le spectre
dmission comprends de nombreux pics correspondants
aux diffrents niveaux dnergie des cations (il y a en
gnral plusieurs degrs doxydation possibles pour
chaque ions). Il est donc frquent dobserver des
interfrences spectrales.
* Les ions poly atomiques ICP SM:
Dont lexistence dpend directement de la prsence en
quantit importante dargon et des autres lment
prsents dans les matrices biologiques (O, H, N, P, S, Cl).
4. Interfrences physiques:
Elles sont dues en gnral une diffrence de
nbulisation due la matrice: nbulisation non
homogne (viscosit, tension superficielle)

Les interfrences
Autre interfrence (ICP SM) :
Les interfrences les plus tudies sont les
interfrences isobariques, lies a la prsence dun
isotope dun lment diffrent de lanalyte, mais de
rapport m/z quasi-identique.
La rsolution de ces interfrences isobariques peut
se faire, par le choix dun autre isotope non interfr
ou par lutilisation dquations de correction.

Avantages
Limite de dtection: trs faible situe en gnral entre celle
de SAA avec flamme et au four
Linarit: la courbe dtalonnage pour le plasma ICP est
linaire sur un grand domaine de concentration (plus dun facteur
de 1000) ce qui nest pas disponible en SAA et dmission de
flamme classique
Rapidit: plus rapide que la SAA surtout si lappareil est conu
pour faire des dosages simultans ex: dosage dune 20aine
dlments dans un mlange sans sparation pralable, ainsi des
spectres relatifs des douzaines dlments peuvent tre
enregistrs en mmes temps, ce qui est important lorsque lch
est de faible quantit

Avantages

1. Certains lments peuvent tre analyss avec une plus


grande sensibilit et moins d'interfrences.
2. L'mission atomique permet d'effectuer des analyses
qualitatives, ce qui n'est pas le cas en absorption.
En effet, c'est l'ch lui-mme qui est la source de lumire
dans une spectroscopie d'mission. Cela signifie que
plusieurs lments peuvent tre analyss simultanment,
ce qui reprsente un gain de temps apprciable, et donc
un gain d'argent, mme si un spectromtre d'analyse
multi-lments en mission cote beaucoup plus cher
qu'un spectromtre dAA.
3. 70 lments analysables.
4. Sensibilit au niveau du g/L (ppb).
5. Possibilit de faire lanalyse malgr une teneur leve
en sel dissout (40g/L).

Avantages
6. Les sources plasma permettent galement la dtermination de
non mtaux comme le chlore, le brome, liode et le souffre chose
qui nest pas fournit par la SAA.
7. En plus, elle prsente sur la SAA un avantage le fait quelle ne
ncessite pas lemploi dune source de radiation
monochromatique, diffrente pour chaque lment.
8. Cot modr du gaz plasmagne.
9. Absence de ractivit du milieu initial, du fait de lutilisation dun
gaz rare monoatomique, ce qui limite fortement la formation
despces molculaires, potentiellement interfrentes dans le
plasma et donc dans le spectre issu du gaz initial.
10. T leve du plasma (de lordre de 6 000 8 000 K) qui, lie
un temps de sjour des atomes de lordre de quelques ms , permet

Inconvnients
1. La ncessit dun systme plus compliqu au
niveau du nbuliseur (puisque, il faut scher le
nbulist form) entrane un certain dfaut de
reproductibilit et une prcision frquemment
infrieure celle de SAA avec four. Cest surtout dans
le cas du dosage des faibles traces dlments.
2. Interfrences
Dune faon gnrale les interfrences sont beaucoup
- importantes que celles observes avec la SAA et sont
plus marques en solutions concentres.
3. Son prix: que ce soit le prix l'achat ou le prix de
l'analyse en elle mme (grande quantit de gaz utilis
chaque analyse - environ 6 litres/min d'argon).

Comparaison : SAA/ICP
SAA flamme

SAA four

ICP

Facilit
demploi

Facile

Peu facile

Assez facile

Limite de
dtection

mg /l

g/l

10-100 g/l

Temps
danalyse

Rapide

Lent

Trs rapide

Marques
+++

Spectrales

Interfrences Bien connue

Avantages
essentiels

Automatisatio
n

dtection
de traces

analyse
simultane

Comparaison : SAA/ICP-MS/ICP-OES

Conclusion
Le succs de lICP repose sur sa capacit analyser un
grand nombre dchantillons en une courte priode de
temps avec de trs bonnes limites de dtection pour la
plupart des lments.
La spectromtrie dmission en plasma induit couple a
la spectromtrie de masse (ICP-MS) est une technique
danalyse multi lmentaire qui sadapte parfaitement
au dosage des mtaux dans le cadre de surveillances
dexpositions en milieu professionnel.
Cette technique est sensible, spcifique, rapide et ses
performances expliquent sa prsence aux cotes de
mthodes plus classiques utilisant la spectromtrie
dabsorption atomique.

Bibliographie :
1- Laurence LABAT*, Christine DHORNE, Florian KLINZIG,
Betty DEHON,
Michel LHERMITTE. ICP-MS et toxicologie professionnelle. Ann
Toxicol Anal, vol. XIX, n 1, 2007. p23-29.
2- Jean-Pierre GOULLE et al. Validation d'une technique de
dosage multi lmentaire des mtaux par ICP-MS
dans les milieux biologiques. Ann Toxicol Anal, vol. XV, n 4,
2003. p271-280.
3- Jean-Pierre Goull et al. Dosage multilmentaire dans le
plasma et le sang total par ICP-MS : influence du matriel de
prlvement. Ann Toxicol Anal. 2008; 20(2): 97-102.

Merci !