INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL.

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA EN

INGENIERIA Y TECNOLOGAS AVANZADAS.
CRECIMIENTO BACTERIANO EN ELEMENTOS PROTESICOS.
CASTILLO RIVERA SALOMN.

Las infecciones osteoarticulares se producen en el seno

del biofilm o pelcula..
Un biofilm es un sistema organizado de capas de celulas
microbianas y de
polmeros extracelulares asociados a una superficie.
Los biofilm se |pueden formar en una multitud de
superficies biticas (tejidos , celulas vivas o en materiales
inertes en contacto con fluidos.

 Primera fase las bacterias se

adhieren a la superficie.
Segunda fase, las bacterias se
anclan mediante la produccin
de slime por la accin de la
adhesina intercelular.
Se forman microcanales
alrededor de las colonias que
permite el acceso a los
nutrientes, la eliminacin de
residuos y la comunicacin
interbacteriana.

 El inculo mnimo bacteriano

capaz de sobrevivir en este
ambiente, causar dao y
originar una infeccin es muy
bajo.(<100 ufc/mL.)
El biofilm facilita el papel
patgeno de bacterias .

Metabolismo bacteriano en el
biofilm.

Depender de su
localizacin:
Las bacterias ms externas
(poblacin plactnica)
muestran un estado
metablico activo y son ms
susceptibles a los antibiticos
Las bacterias que viven en el
interior del glicocalix (sesil)
sufren una modificacin
fenotpica y su estado de
inactividad energtica las
hace resistentes a los
antibiticos.

 Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de

cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son:
Temperatura (T),
Grado de humedad y
Presin de oxgeno (Pi O2) adecuadas,
As como un grado correcto de acidez o alcalinidad (pH).
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.

Un medio de cultivo adecuado ha de contener, como

mnimo, carbono (C), nitrgeno (N2), azufre (S), fsforo
(P), sales inorgnicas, ciertas vitaminas y otras sustancia
inductoras del crecimiento. Siempre han de estar
presentes las sustancias adecuadas para ejercer de
donantes o captadores de electrones para las reacciones
qumicas que tengan lugar.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas de ciertas
sustancias como suero, sangre, extractos de carne ,
lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios
ciertos carbohidratos y sales minerales como las de calcio,
magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias
promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza
vitamnica.

 Tambin los colorantes quimicos actan como indicadores para

detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del
crecimiento de unas bacterias y no de otras el Rojo Fenol se usa
como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido.
La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el
crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas.

Consistencia adecuada del medio

Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo
productos como albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en
estado semislido o slido.

Presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de
oxgeno normal. Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados
sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo se desarrollarn
adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto
intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones
atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida),
mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse
a cualquiera de las citadas condiciones.

Condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es
imprescindible para un buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas
en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mnimas
en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de
agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y
evitar as que se deseque el medio.

Luz ambiental
La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en
presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los
microorganismos fotosintticos.

 pH
La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el
crecimiento de los microorganismos. La mayora de ellos se
desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que
requieren medios ms o menos cidos. No se debe olvidar que la
presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar
sus procesos metablicos normales.
Temperatura
Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a
temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los psicrfilos crecen a
0C y los temfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores
(hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen
en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de 37C, y
los saproftos tienen rangos ms amplios.
Esterilidad del medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para
evitar la aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar
o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los
especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para
esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de
agua a presin como agente esterilizante)

 BIOFILM, BIOMATERIALES Y SISTEMA INMUNE

La ciruga e implantacin de biomateriales desorganizan la respuesta
del husped y los mecanismos inmunes. Las superficies de los
biomateriales y las partculas debridadas aumentan la susceptibilidad a
la infeccin, activan las defensas del husped y estimulan la liberacin
de mediadores inflamatorios, citoquinas, radicales oxgeno, y enzimas
lisosomales, resultando en dao proteico tisular e inflamacin crnica.
El dao tisular puede ser posteriormente agravado por actividades
bacterianas y toxinas. El exopolisacrido bacteriano tambin causa
perturbacin de la respuesta del husped. El exopolisacrido de S.
epidermidis parece inhibir la blastognesis de las clulas B y T, la
quimiotaxis de leucocitos, opsonizacin, y quimioluminiscencia .
Adems, en presencia de implantes polimricos colocados en
cavidades peritoneales, los neutrfilos exhiben un potencial bactericida
y fagoctico disminuido y una produccin de superxido reducida.

 Biofilms sobre implantes mdicos

Los biofilms sobre implantes mdicos pueden estar compuestos por
bacterias Gram positivas, Gram negativas . Estos microorganismos
proceden de la piel del propio paciente, del personal sanitario o del
ambiente. Pueden estar formados por una nica especie o por
mltiples especies, dependiendo del implante y de la duracin de su
uso en el paciente. Cuando un implante se contamina con bacterias
varios factores influyen en que se desarrolle un biofilm sobre el mismo.
Inicialmente los microorganismos deben adherirse a la superficie del
implante el tiempo suficiente para que la adherencia sea irreversible.
Esta adherencia depende del flujo de lquido al que est sometido el
implante, del nmero de bacterias que se adhieren y de las
caractersticas fsico-qumicas del implante.
En el caso de catteres venosos centrales, la superficie del catter
acaba recubierta de protenas del plasma, y otras protenas de los
tejidos como fibronectina, fibringeno, laminina, etc. Estas protenas
favorecen la unin de las bacterias que posean adhesinas para las
mismas. En el caso de sondas urinarias, la fuente de contaminacin
puede ascender desde la bolsa recolectora, entrar en el lumen del
catter a travs del exudado en el punto de entrada del catter. En este
caso las bacterias se unen directamente al material del catter sin que
intervengan protenas del paciente.

 Tratamiento de infeccin asociada a catteres intravasculares

La retirada del catter es el tratamiento ms efectivo; sin embargo, en
el caso de los catteres intravasculares tunelizados centrales la
retirada puede resultar problemtica y el riesgo quirrgico que supone
la retirada puede ser mayor que el riesgo asociado a un tratamiento
antibitico ineficaz. En estos casos se recomienda un tratamiento
denominado de sellado antibitico, que consiste en instilar en el
interior del catter una solucin de anticoagulante (heparina o EDTA) y
antibitico a una concentracin entre 100 y 1.000 veces mayor que la
concentracin mnima inhibitoria del microorganismo responsable de la
infeccin asociada a catter, durante al menos 8 horas diarias a lo
largo de 10-14 das.
El uso de catteres impregnados con antimicrobianos o antiinfecciosos
han sido otra estrategia aunque su eficiencia est en discusin.

ESTRATEGIAS DE INTERVENCIN FRENTE A INFECCIONES POR

BIOFILMS SOBRE IMPLANTES
Los microorganismos pueden colonizar la prtesis en el momento de
su colocacin, por inoculacin directa durante la manipulacin del
tejido o el implante o por contaminacin area de la herida; y
despus del implante, por diseminacin hematgena, por extensin
directa a partir de un foco adyacente de infeccin.
La contaminacin del implante en el momento de la intervencin
quirrgica se puede evitar mediante quimioprofilaxis quirrgica y/o la
utilizacin de quirfanos dotados de flujo laminar. La posible
contaminacin posterior se puede evitar mediante el diagnstico y
tratamiento precoz de las infecciones y procedimientos mdicos que
pueden llevar a bacteriemia como extracciones dentarias, sondaje,
etc. El tratamiento antibitico sistmico en general no consigue la
erradicacin del biofilm pero en general se debe implantar para
destruir las bacterias que pasan al torrente circulatorio.
Sin embargo, muy pocas infecciones asociadas a implante resuelven
satisfactoriamente, y la recurrencia es muy comn. Dado que el
tratamiento antibitico sistmico resulta ineficaz, se han utilizado
distintas estrategias para el control y tratamiento de las infecciones
asociadas a implantes.

Artritis sptica
1 Via hematgena
2 Extensin local
3 Inoculacin directa:

 Tratamiento de infecciones sobre prtesis articulares

El tratamiento de las infecciones de prtesis articulares incluye terapia
antimicrobiana agresiva junto con procedimientos quirrgicos que
incluye debridamiento completo para retirar todos los materiales
infectados incluyendo el segmento y los tejidos desvitalizados y el
hueso. En la mayor parte de los casos los intentos para salvar la prtesis
son infructuosos y es necesaria la retirada del implante junto con una
pauta antimicrobiana apropiada de larga duracin y posterior
reimplantacin de la prtesis articular.
Recientemente un consorcio de bioqumicos, microbilogos, cirujanos e
ingenieros de sistemas microelectromecnicos se han unido para
desarrollar un implante inteligente que sera capaz de detectar la
presencia en la superficie de patgenos bacterianos, bloquear sus
sistemas de transduccin de seal y tratar la infeccin incipiente con
altas dosis de antibiticos localizados y comunicar los resultados de las
acciones tomadas al personal responsable del cuidado del paciente a
travs de telemetra35. Este es un ejemplo ilustrativo de cmo diferentes
disciplinas pueden ofrecer soluciones imaginativas a las infecciones
asociadas a implantes en un futuro no muy lejano.

 Un ejemplo de biofilms beneficiosos lo constituye los biofilms

formados sobre la superficie de los dientes, que protegen frente a la
colonizacin por otros patgenos exgenos.
Las bacterias de la placa dental viven en equilibrio mientras las
condiciones externas se mantengan constantes. Una persona que
consuma muchos alimentos o bebidas ricas en azcares, favorecer
el desarrollo de especies bacterianas que fermentan los azcares,
desequilibrando la poblacin bacteriana y favoreciendo el desarrollo
de especies como Streptococcus mutans y Lactobacillus spp., que
producen cidos que disuelven el esmalte protector de los dientes.

La consecuencia final es el desarrollo de las dos infecciones ms

prevalentes en el hombre, la caries y la periodontitis.

Esterilizar instrumentos de laboratorio

Desinfectar superficies o piel
Asegurar la pureza del agua potable

METODOS FISICOS DE ESTERILIZACION

- Vapor a presin: (121C, 15 lb., 15 minutos)

Se puede esterilizar material de ciruga y curacin, ropa,

material de cristalera.

- Incineracin
Destruye todo tipo de microorganismo, se utiliza sobre
todo para rganos y cadveres contaminados.
- Aire caliente: Horno Pasteur (160-170C, 60-120 min.)
Esteriliza material de cristalera y material de ciruga.

Ebullicin:
- A nivel del mar se alcanza a 100C
Puede utilizarse para esterilizar material de cristalera,
instrumental de ciruga, jeringas, recipientes
Pasteurizacin
- Pasteurizacin lenta: 63C por 30 minutos
- Pasteurizacin rpida: 70-80C por 15 segundos
- Ultrapasteurizacin: 100C por 1 segundo

Radiaciones
- Ionizantes: Efecto daino irreversible sobre el DNA
Rayos alfa, beta, gamma, delta y equis
- No ionizantes: Lesiones en el DNA y algunas protenas
celulares
Rayos Infrarrojos, UV

*Se utiliza para esterilizar recintos cerrados, materiales

plsticos, hojas delgadas de metal, algodn

AGENTES QUIMICOS

- Agentes oxidantes:
Acido nitroso: Es inactivador y mutgeno
Adenina Hipoxantina
Citocina Uracilo
Guanina Xantina
- Agentes alquilantes: Inactivan y mutan.
La guanina se suprime y coloca
una base incorrecta
Formaldehdo: Inactiva viriones sin afectar su
poder antignico.
*Se puede usar para crear vacunas.
*Es muy irritante.

-ALCOHOLES
Alcohol etlico al 70%
Alcohol metlico
- DETERGENTES CATIONICOS
Cloruro de benzalconio
* Activos contra virus lipoflicos
* inactivos contra enterovirus
- DETERGENTES ANIONICOS
Jabn para las manos

- HALOGENOS
Yodo
*Excelente desinfectante
*Se puede aplicar en superficies corporales
Cloro
*Se inactiva facilmente en presencia de materia
orgnica
- COLORANTES
Rojo neutro
Naranja de acrinidina
Azul de metileno
*Se intercalan entre las bases de cido nucleico viral
*Son letales cuando se exponen a la luz