Bacterias luminiscentes

Los mtodos de biomonitoreo con

mejillones,
Daphnia,
algas
o
bacterias naturales pueden ser
usados para detectar los efectos
totales en su mayora, sistmicos
txicos agudos de compuestos tales
como herbicidas y metales pesados.

 Para que un compuesto txico pueda

producir una respuesta medible en
las clulas bacterianas ,en un
biosensor, primero tiene que
atravesar la pared celular y la
membrana celular. Entonces, se tiene
que accionar un elemento de
deteccin, en la mayora de los
casos, un promotor unido a un gen
indicador, que conduce a la
produccin de protenas reportero
fcilmente medibles.

Protenas reporteras
En la actualidad, los ms utilizados protenas reportero para
deteccin ptica en sistemas microbianos son verde fluorescente
protena para la luciferasa de fluorescencia y luminiscencia
bacteriana . Para bioluminiscencia ofrece las ventajas de ms rpido
tiempos de respuesta y una mayor sensibilidad a corto plazo (de
segundos a minutos). Las protenas fluorescentes pueden seguir
acumulando para muchas horas y debido a su alta estabilidad,
permiten deteccin incluso despus de la muerte celular . Verde
fluorescente protena tambin no requiere un sustrato o ATP, con
ello la reduccin de la carga sobre las clulas . Por lo tanto, es la
luminiscencia mtodo de deteccin de eleccin para el seguimiento
en lnea, y esto visin general ser por lo tanto centrarse en
disponible luminiscente bacteriana reportero cepas Bacterias
bioluminiscentes expresan a travs de luminiscencia la produccin
de la luciferasa, ya sea bacteriana (lux) o lucirnaga (Luc).

Luciferasa bacteriana
Cataliza la oxidacin de un aldehdo aliftico
de cadena larga (RCHO) y una reduccin de
la flavina mononucletido (FMNH2).

Los ensayos con bacterias bioluminiscentes

se pueden dividir en dos grupos, los
sistemas con expresin constitutiva y
sistemas con expresin inducible.

Lux cepas Efecto-especficos

El efecto de las cepas especficas de lux
incluyen cepas que detectan ADN, protenas, y
la membrana daos, y el estrs oxidativo.
Estas cepas se construyen mediante el
acoplamiento del luxCDABE (Aliivibrio fischeri)
gen a un promotor que est implicado en una
tensin especfica respuesta. Como resultado,
la respuesta de estas cepas es directamente
correlacionado con la cantidad total y la
potencia de compuestos que inducen un tipo
especfico de estrs.

Dao en el ADN
El dao al ADN en las bacterias puede
desencadenar
al
menos
dos
reparacin sistemas, la respuesta
adaptativa ADA-controlada especfica
a daos por alquilacin, y la recAdependiente,
respuesta
SOS
lexAcontrolled. Ms de 40 genes que
se activan en la respuesta SOS,
incluyendo Reca, lexA uvrA y umuDC .