Diseo de un Mtodo de Anlisis

Espectrofluomtrico para la
Determinacin de Etanol en Aire
Rosa Alafro Sols
Juan Valds Gonzlez
Juan Pablo Sibaja Brenes
Germain Esquivel Hernndez

Uniciencia Vol. 27, N1, p. 215-231, junio 2013

www.revistas.una.ac.cr/uniciencia
ISSN 1101-0275

Contenido

Motivacin
Riesgos a la salud por exposiciones de etanol
Problema
Equipos utilizados
Muestreo
Metodologa
Resultados
Conclusiones

Motivacin

El crecimiento industrial y el uso masivo de combustibles fsiles, han expulsado han

expulsado diversidad de materiales contaminantes para el aire, como lo es
el etanol (compuesto organico voltil, COV)

Motivacin
El Etanol puede ser usado para oxigenar la gasolina y
provocar una combustin ms completa, reduciendo las
emisiones al aire de monxido de carbono, COV , pero
aumenta las emisiones de aldehdos, cetonas, cidos
carboxilos y etanol sin quemar.
Estas emisiones directas a la
atmosfera forman
parte de ciertas reacciones y
procesos de fotooxidacin que
generan ozono
y nitrato de peroxiacetilo
(cancerigeno).

Riesgos a la salud por exposiciones

de etanol
Mutaciones
Daos al desarrollo del feto,
en altas concentraciones
Dolor de cabeza, nauseas ,
mareo
Irritacin de la piel, ojos,
nariz boca y garganta
Daos en el hgado, sistema
nervioso por concentraciones
altas y repetidas.

Concentraciones 10003300 ppm pueden

provocar los sntomas
mencionados.
Concentraciones
mayores que 3300ppm
son altemente
peligrosas para la vida.

Problema
La capacidad de oxidacin de
los compuestos orgnicos
voltiles oxigenados (CVOO) en
la troposfera es poco conocida y
por consiguiente se requieren
de mtodos analticos de
detencin tanto en fase liquida
como gaseosa, de manera de
determinar su concentracin en
el aire, y poder establecer
controles y medidas para
proteger la salud humana.

Equipos Utilizados
Espiral de vidrio refrigerada de 25cm de longitud, 20 cm de
alto y 2,5cmm de dimetro interno, para realizar el muestreo.

Fig 1: Espiral de vidrio para el muestreo del etanol

Equipos Utilizados
Sistema de Inyeccin por flujo, acoplado a una columna
que contiene alcohol oxidasa, inmovilizada sobre perlas
de vidrio y un sistema de detencin por fluorescencia
para el anlisis.

Fig 2: Sistema de inyeccin por flujo

4. Bomba peristltica

Disolucin de arrastre conformada por:

6.Vlvula de inyeccin

1. Amortiguador de fosfato 0,1 mol L^(-1), pH=7,5

8. Y 9. Cmaras de mezclas

2. Disolucin reactivo: acido hidroxifenilactico 0,1

mol L^(-1) + 250U de peroxidasa +
amortiguador de fosfato 0,1 mol L^(-1), pH=6,0

7. Reactor enzimtico
13. Detector de fluorescencia

14. Sistema de obtencin de datos 3. Hidrxido de sodio 0,15 mol L^(-1)

Muestreo
Las muestras se tomaron en las
instalaciones del Ingenio Taboga, en la
provincia de Guanacaste a una altura de
13 metros sobre el nivel del mar.
Se recolectaron en viales de polietileno de
alta densidad de 25 mL, a los cuales se
les midi la masa antes y despus de la
muestra.
Se almacenaron en un refrigerador a 4C.

Metodologa
El sistema de inyeccin por flujo utilizado es el descrito por
Taniai,Sukuragawa y Okutani (2001) y Valds (1999).
Con un detector de fluorescencia , utilizando una disolucin 1,00 mol/L, que
contiene el dimero del acido p-hidroxifenilcetico se evaluaron y fijaron las
longitudes de onda de excitacin (310nm) y de emisin (410 nm).
Se fijo el flujo de la fase mvil en1,05 mL/min. Esto se obtuvo realizando 10
inyecciones repetidas del patrn (etanol 1,00mol/L), variando el flujo entre
0,75 mL/min y 1,60/mL/min.
Se fijo la longitud del reactor (1m). Este valor se obtuvo inyectando 10 veces
un patrn (etanol 1,00mol/L), y variando la longitud entre 0,00m y 4,00 m.
Se fijo la longitud y el dimetro interno de la columna de alcohol oxidasa
inmovilizada sobre perlas de vidrio en 7,00 cm y 3,00 mm respectivamente.
Inyectando 10 veces un patrn (etanol 1,00mol L^(-1)), y variando su
longitud entre 4,00 cm y 10,000 cm y su diametro entre 2,00mm y 3,00mm.
La concentracin ptima de la disolucin de hidroxido de sodio (0,15 M) se
determin variando la concentracin de 0,1 mol/L a 2,0 mol/L hasta obtener
un pH de 11,00.

Resultados

Fig 3: Espectros de excitacin y emisin del dimero del cido p-hidroxifenilactico1,00 mol/min

Se observan 2 longitudes de onda mxima de excitacin (295 nm y 415 nm).

Se observan 2 longitudes de onda mxima de emisin (310 nm y 415 nm).
Por lo tanto, se fijo la longitud de onda de excitacin en 310 nm y la de amisin en
410 nm.

Resultados

Fig 4: Determinacin del flujo de anlisis en el sistema de inyeccin por flujo

Se fijo un flujo de anlisis de 1,05 mL/min, ya que para las 10 inyecciones del patrn
(etanol 1,00 mol/L), variando el flujo, el rea del pico disminuye para flujos menores y
mayores que 1,05 mL/min, ya que a velocidades mayores que 1,05 mL/min, el analito no
tiene suficiente tiempo de reaccionar tanto en la columna de alcohol oxidasa como en
los reactores.

Resultados

Fig 5: Determinacin de la longitud del reactor

Se fij la longitud ptima del reactor en 1,00 m, debido a que para esa longitud se
obtiene la mayor rea de pico (6,39x 10^(4)).
La longitud ptima interna de la columna de alcohol oxidasa es de 7,00 cm, ya que
para dicha longitud los picos son bien definidos, lo que indica que para convertir en
perxido de hidrogeno las concentraciones de alcohol etlico (etanol) presentes en el
aire, la cantidad de enzima en la columna es ptima.

Resultados

Se observa que la columna con 3mm de dimetro genera una mayor cantidad de
perxido de hidrgeno, ya que el volumen de la columna es un poco ms del doble
y contiene mayor cantidad de enzima.

Resultados
El hidrxido de sodio se usa para asegurar que
el pH de la disolucin que contiene el dimero de
p-hidroxifenilactico sea mayor que 11,00 y as
lograr su mxima emisin. Este ocurre para 0,15
mol/L.
Esto se debe a que para pH < 11,00 se produce
disminucin de la intensidad de la fluorescencia,
enfuncin del grado de disociacin del dimero.
Mientras que para pH > 11,00 ocurre
disminucin de la intensidad de emisin, debido
a la prdida de la actividad enzimtica
(peroxidasa), que limita la formacin del dimero.

Resultados

El mtodo diseado es lineal de 1,00 mol/L a 5,00 mol/L, con una

correlacin de R^2= 0,995.
Para concentraciones de etanol mayores de 8,00 mol/L, disminuye la
linealidad, la curva comienza a presentar un comportamiento hiperbolico.

Resultados

Concentracin mxima en los fermentadores = 1200 2 mg/m^3.

Concentraciones mximas en condensadores , entrada de destilera,
laboratorio de destilera son menores de 44,6 0,1 mg/m^3.

Conclusiones
Segn la norma mexicana NOM-076-SSA1-[12], el mximo
permisible de exposicin a los vapores de etanol en una
jornada de 8H es de 1884 mg/m^3 . La concentracin mxima
de etanol en los fermentadores estuvo cercana al limite
permitido. Por lo que por periodos prolongados de exposicin
se podran sentir sntomas de envenenamiento.
Sin embargo, las mximas concentraciones de etanol en los
otros lugares fue mucho menor que la permitida.
La determinacin anlitica de etanol en aire, con la utilizacin
de una columna que contiene alcohol oxidadsa inmovilizada
sobre perlas de vidrio, acoplada a un detector de fluorescencia,
es rpida, confiable y genera resultados de buena precisin.
La tcnica empleada puede ser utilizada para determinar
concentraciones de etanol en aire , en ambientes laborales y
externos.