Universidad Nacional de Trujillo

Facultad de Farmacia y Bioqumica- Dpto. Bioqumica

Ctedra de Bioqumica y Anlisis Clnicos

Teora 2: Control Pre-Analtico: Extraccin y Toma de

Muestra. Control de manipulacin, estabilidad,
transporte, conservacin, almacenamiento, cadena de
custodia. Variabilidad ligada a la sistemtica postextraccin. Criterios para rechazo de muestras. Ventajas
y desventajas
entre plasma y suero.
Docente:

Msc Anabel Doris Gonzlez

Siccha

Trujillo, 06 de Abril de 2015

CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad es un elemento importante en
todo laboratorio, ya que permite asegurar la
confiabilidad de las pruebas, su reproducibilidad,
asegura la calidad de los materiales, reactivos y
equipos empleados, mejora la auto confianza del
personal, detecta fallas que pueden reflejarse en el
informe de resultados y en general provee un entorno
de excelencia en todos los aspectos del trabajo
Un programa de CC evala y documenta el
desempeo
de
todos
los
aspectos
de
un
procedimiento. Esto incluye la calidad de la muestra,
la eficiencia de los reactivos, medios, equipos y
verifica los resultados.
El sistema de calidad incluye un completo proceso de
aseguramiento en todas las etapas de trabajo en el

Control Pre- Analtico

Por qu y para qu se
solicita un anlisis.
1. Confirmar una impresin clnica
2.
3.
4.
5.
6.
7.

(descubrir enfermedades subclnicas)

Descartar, establecer y/o ratificar un
Dx.
Reconocer la respuesta teraputica.
Controlar un tratamiento
Realizar exploracin selectiva o
deteccin de una enfermedad.
Obtener informacin pronstico de
una enfermedad.
Precisar factores de riesgo.

Extraccin y Toma de la Muestra:

Muestras de sangre: suero o plasma
Muestra de orina: con un conservante (inhibe

el crecimiento bacteriano) o un cido para

estabilizar metabolitos. Orina de 24h.
Muestra de cavidades especiales: garganta,
nasofarngeos, esputo, contenido gstrico, del
ID, del IG, vaginales o cervicales, heces, etc.
Otro tipos de muestras: lquidos corporales o
tejidos especficos.
Muestras peligrosas: con infecciones deberan
ser etiquetadas con un adhesivo amarillo en el
que se lee muestra peligrosa

Materiales para la toma de muestra

sangunea
Algodn o gasa
Solucin antisptica: alcohol al 70% y

yodado al 1%
Ligadura o torniquete hecha con tubo de
goma 2-5 mm de calibre
Agujas estriles descartable N 18 o 20 X 1
pulgada
Jeringas estriles con capacidad para 2,5;
10 o 20 ml.
Viales o tubos de ensayo.
Soluciones anticoagulantes necesarias.
Rtulos para los frascos o tubos, segn el
examen corresp

Recogida de la muestra y
procesamiento
La sangre es el fluido corporal que se utiliza con ms frecuencia

para fines analticos.

Hay tres procedimientos generales para obtener sangre y son:
1) la venipuntura, 2) la puncin arterial y 3) la puncin cutnea.
La tcnica que se utilice para obtener muestras de sangre es
vital para mantener su integridad.
La sangre arterial es esencialmente uniforme en su composicin
en todo el cuerpo.
La composicin de la sangre venosa vara y depende de la
actividad metablica de los rganos y tejidos baados por ella.
El sitio de la extraccin puede afecta la composicin venosa.
La sangre de una puncin drmica contiene fluidos intersticiales
e intracelulares.

OBTENCIN DE LA MUESTRA
SANGUINEA

DESINFECTE Y
APLIQUE EL TORNIQUETE

REALICE LA VENIPUNCIN

MEZCLE SUAVEMENTE

DESECHE

SUELTE EL TORNIQUETE Y TOME

LOS
DEMS TUBOS EN EL ORDEN
INDICADO

Puncin arterial
La sangre arterial se utiliza para medir la tensin

de CO2 y del O2, y para medir el pH (gases en

sangre arterial (GSA)).
Estas mediciones de gas en sangre son vitales en
la valoracin de los problemas de oxigenacin
que se ven en pacientes con pneumona,
neumonitis y embolia pulmonar.
Tcnica de recogida de sangre arterial y

preparacin del paciente.

Las arterial radial y braquial son los vasos preferidos,
la arteria femoral es ms fcil para su puncin pero
tiende a sangrar mucho ms.

Puncin cutnea
Es utilizado en pacientes peditricos.
Es til en adultos con obesidad extrema,

quemaduras graves y tendencia a la

trombosis.
Se emplea: para hemogramas, recuentes
glbulos, grupos sanguneos (ABO),
micromtodos.
La
Tcnica
consiste en:
No
es aconsejable
para el Rcto de
Puncin
cutnea del pulpejo del dedo, del
plaquetas.

borde libre del lbulo de la oreja y en nios del

pulpejo del dedo gordo o del taln del pie.
Seleccionar el sitio adecuado para la puncin.
Calentar el sitio de la puncin con una toalla h
umeda y caliente que no sobrepase los 42
C, para aumentar el flujo sanguneo.
Desinfectar, esperar que seque y punzar rpida
con una lanceta descartable.
Eliminar la I gota y recolectar la sangre.

Puncin Yugular
Se realiza en nios
cuando las venas
antecubitales son muy
pequeas o estn muy
laceradas.
La Tcnica consiste
en:
Coloca al nio en el filo
de la camilla
permitiendo que su
cabeza caiga por debajo
de los hombros,
lateralizndolo un poco
para que se observe la
yugular.

Toma de muestra de orina

Materiales
Torundas de

algodn o gasa
Jabn o sol.
antisptica
Recolector de orina
o Frasco
esterilizado
Rtulos para los
frascos
Depsito para
eliminar el material
utilizado.

Importancia

Toma de muestra: secreciones

Manejo y almacenamiento
Intervalo de tiempo entre la obtencin y el anlisis.
La evaporacin de la muestra.
Manejo, conservacin y transporte de la muestra.
Exposicin a la luz (Bilirrubinas, porfirinas, vitamina

A).
Descomposicin de ciertos analitos con el tiempo y la
temperatura
Temperatura ambiente, refrigeracin, congelacin
Cuando se dispone de los resultados, se validan y se
emite un informe de laboratorio clnico, que permitir
el Dx, Px y/o Tto de una enfermedad.

Estabilidad y Conservacin de
Muestras
1. Recuentos Celulares y Grupos Sanguneos:

Preservante : solucin anticoagulante EDTA

dipotsica
Cantidad: 5 ml.
Duracin : 12 h, en refrigeracin 24 h.
2. Pruebas de Aglutinaciones
Sin anticoagulante, separar el suero (cc. 5 ml)
Duracin: 12 h, en refrigeracin hasta 7 das.
3. Tiempo de protrombina
Preservante: 0,5 ml de citrato trisdico ( cc. 4,5
ml)
Duracin: 2 h
4. Anlisis de Glucosa
Preservante: 5 mg de fluoruro sdico ( cc. 5 ml)
Duracin: 2 h ( si se separa suero o plasma hasta
24 h)

Estabilidad y Conservacin de
Muestras
5. Otros ensayos bioqumicos: colesterol, protenas,
creatinina, rea etc.
Sin Preservante separar el suero ( cc. 5 ml)
Duracin : 24 h, en refrigeracin hasta 3 das.
6. Determinacin de bilirrubina
Semejante al anterior, pero debe guardarse
protegido de la luz en frasco oscuro.
7. Determinacin de la actividad enzimtica
Sin Preservante separar el suero ( cc. 5 ml)
Duracin: 2 h en refrigeracin hasta 24 horas.
8. Cultivos de Sangre
Frasco estril con medio caldo de cultivo especial a
37
Cantidad : 5 ml
Duracin: 24 h

Transporte
Deben ser transportados en el menor tiempo posible.
Los tubos deben mantenerse en posicin vertical para promover

la formacin del coagulo y minimizar la agitacin del liquido, lo

cual reduce la posibilidad de hemlisis.
El tubo tapado elimina la posibilidad de contaminacin exgena
de la muestra, evaporacin, posibilidad de derrame y la
produccin de aerosoles al momento de la centrifugacin.
Muestras para determinar estado cido-base se transportar en
hielo a 4c.
El manejo suave evita la hemlisis y no se vern afectadas las
enzimas.
Debe evitarse la exposicin a la luz especialmente porque se
afectaran las vitaminas A y B6, beta-carotenos, porfirinas y
bilirrubina.
Debe usarse un recipiente estril y la muestra debe inocularse
tan pronto como sea posible (ex. Microbiolgicos)

La cadena de custodia
Es el procedimiento de control que se

emplea las mediciones clnicas de las

muestras obtenidas, su valoracin y
expresin de los resultados.
Tiene como finalidad garantizar que el
procedimiento empleado ha sido exitoso,
desde la recoleccin de la muestra,
conservacin, transporte, proceso,
valoracin e informe del laboratorio.

Variables que influyen en la estabilidad

de las muestras
Agitacin de la muestra
Exposicin a la luz
Orientacin del recipiente primario
Presin atmosfrica
Temperatura
Tiempo de transporte
La manipulacin de las muestras debe

realizarse exclusivamente por personal

sanitario cualificado y autorizado a ese efecto

Factores biolgicos que afectan la

interpretacin de los resultados

La discriminacin entre resultados

normales y anormales est afectado
por diversos factores fisiolgicos que
deben tenerse en cuenta cuando se
interpretan y se dan los resultados. Que
son:
Sexo y edad del paciente:
Estado nutricional: ayuno, dieta especial,
postprandial.
Hora de recogida de la muestra y tiempo
de muestreo, adicin de preservantes y
conservadores a la muestra, equipos etc.

Factores biolgicos que afectan la

interpretacin de los resultados

Estrs y ansiedad
Posicin del paciente: forma de
obtencin de la muestra.
Efectos del ejercicio
Historia clnica
Embarazo, Ciclo menstrual
Historia farmacolgica: metabolitos
pueden interferir en el anlisis.

Variacin de los resultados:

Depende de las Caractersticas metrolgicas en el
laboratorio:
Precisin: es la reproducibilidad de un mtodo analtico
Exactitud define que tan cerca est el valor
determinado del valor
Sensibilidad

: es la capacidad del test para

detectar la enfermedad, es el % resultados (+) en
pacientes enfermos.

Especificidad : capacidad para detectar a los sanos, %

resultados (-) en pacientes sanos

Prevalencia : Frecuencia al interior de la poblacin
Control de calidad: para confirmar que el
procedimiento de medida se est aplicando de forma
correcta con las muestras de los pacientes.

Caractersticas metrolgicas en el
laboratorio:
Control de calidad: para confirmar que el

procedimiento de medida se est aplicando de

forma correcta con las muestras de los
pacientes.
Sensibilidad : es la capacidad del test para
detectar la enfermedad, es el % resultados
(+) en pacientes enfermos.
Especificidad : capacidad para detectar a los
sanos, % resultados (-) en pacientes sanos
Prevalencia : Frecuencia al interior de la
poblacin

Variabilidad ligada a la sistemtica

post extraccin: Validez de una
prueba dx
Cuando se estudia una muestra de pacientes, los
datos obtenidos permiten clasificar a los sujetos en
cuatro grupos segn una tabla 2x2
Tabla 1. Relacin entre el resultado de una prueba
diagnstica y la presencia o ausencia de una
enfermedad.
Resultado de la
prueba

Verdadero diagnstico
Enfermo

Sano

Positivo

Verdaderos Positivos
(VP)

Falsos Positivos
(FP)

Negativo

Falsos Negativos
(FN)

Verdaderos
Negativos
(VN)

Criterio de Rechazo:
Errores en la obtencin de las
muestras
Identificacin inadecuada
Tcnica de recogida de la sangre
Estasis prolongada durante la
venipuntura
Muestra insuficiente
Errores en el tiempo
Recipiente incorrecto para la muestra
Lugar inadecuado de obtencin de la

Composicin de la sangre

Ventajas y Desventajas entre plasma y

el suero

Suero:

Sin factores de coagulacin

No es aconsejable desprender el coagulo del tubo con un aplicador,
porque es una fuente potencial de hemlisis.
Si el tiempo de coagulacin no es el adecuado, la formacin latente
de fibrina puede causar un problema en las determinaciones
Plasma: Con factores de coagulacin
Se utiliza tubo con anticoagulante, y puede ser centrifugado
inmediatamente.
Anticoagulantes; Citrato; EDTA; heparina sdica y heparina de litio.
Economa de tiempo, se elimina la espera de la coagulacin de la
sangre.
Rendimiento mas alto, puede obtenerse de un 15 a 20 % ms de
muestra
El resultado del plasma es mas representativo del estado biolgico
Riesgo bajo de hemlisis y trombocitolisis, las plaquetas
permanecen intactas, no hay seudohiperkalemia

Referencias bibliogrficas
BERNAD HENRY J. (2005). El Laboratorio En El

Diagnstico Clnico. Homenaje a Todd-Sanford &

Davidsohn, 20a..Ed. Editorial Marban. S.L. Espaa.
Pp 12-26.
GAW A, COWAN RA, OREILLY D, STEWART MJ Y
SHEPHERD J. (2006). Bioqumica Clnica. 2Ed.
Editorial Harcourt - Elsevier, Espaa.

MUCHAS GRACIAS
POR SU ATENCIN
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