Dogma Central de la

Biologa Molecular:
Replicacin de DNA
Reparacin de DNA
Recombinacin

Transcripcin Reversa
(Virus)

Replicacin del
DNA:
generacin de una
copia exacta del
genoma de una clula

Sntesis de RNA (Transcripcin)

Sntesis de Protenas (Traduccin)

El DNA Acta como Molde para su propia Sntesis

El nucletido A slo se aparear con xito con T y G con C, por lo que cada
cadena de DNA puede especificar la secuencia de nucletidos de su cadena
complementaria. As, la doble hlice de DNA se puede copiar fielmente.
Figure 5-2 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

La Replicacin del DNA es Semiconservativa

Doble
hlice
parent
al

En cada ronda de replicacin, cada una de las dos hebras es usada

como templado (molde) para la formacin de una hebra de DNA
complementaria. Por lo tanto las hebras originales de DNA
permanecen intactas durantes muchas duplicaciones celulares.

Dobles hlices de DNA

Replicacin del DNA

La sntesis del DNA
transcurre en direccin
5 3

Molcula de DNA
de Doble Hebra
5

Separacin
de las hebras
3

3
3
5

Sntesis de
hebras nuevas

Dos nuevas molculas

de DNA de doble hebra
3

Reaccin Catalizada por

la DNA Polimerasa
La DNA Polimerasa cataliza la
adicin de un
desoxirribonucletido al extremo
3-OH de una cadena de
polinucletidos, por lo tanto la
nueva cadena de DNA se sintetiza
en el sentido 5 3. El
apareamiento de bases entre el
desoxirribonucletido entrante y la
cadena molde gua la formacin
de la nueva cadena de DNA, la
cual, por lo tanto, tendr una
secuencia de nucletidos
complementaria a la de la cadena
molde. Los nucletidos entran en
la reaccin como
desoxirribonuclesidos trifosfato.
La rotura del enlace
fosfoanhdrido (indicada por el
asterisco) del nuclesido trifosfato
entrante entrega la energa
necesaria para la reaccin de
polimerizacin.

Burbuja u Ojo
de Replicacin

La Horquilla de Replicacin es Asimtrica

Reaccin Catalizada por la DNA Polimerasa

Crecimiento de
la cadena en
sentido 5 3

desoxirribonuclesido
trifosfato entrante

hebra de
partidor
(RNA)
hebra
templado

La DNA polimerasa requiere de una extensin corta de RNA (partidor de RNA) sobre la
cual comienza a adicionar los nucletidos. La enzima adiciona desoxirribonucletidos
al extremo 3-OH de la cadena polinucleotdica (hebra del partidor), la que est
apareada a la hebra molde o templado. Por lo tanto, la nueva hebra crece en la
direccin 5 3. Como cada desoxirribonuclesido trifosfato entrante debe aparearse
con la hebra templado para poder ser reconocido por la polimerasa, esta hebra
determina cul de los cuatro posibles desoxirribonucletidos (A, C, G, o T) sern
adicionados.

Estructura de la Horquilla de Replicacin

hebras de DNA
sintetizadas ms
recientemente

templado de la
hebra retrasada

templado de la
hebra lder

Como ambas hebras hijas son sintetizadas en la direccin 5 a 3, la sntesis del DNA en la
hebra retrasada debe realizarse inicialmente como una serie de molculas cortas de DNA,
llamadas Fragmentos de Okazaki.

Iniciacin de los Fragmentos de Okazaki

con Partidores de RNA
DNA templado

iniciacin de
sntesis de RNA

extensin del
partidor de RNA
por DNA polimerasa

sntesis del
partidor de RNA

DNA Primasa

DNA Polimerasa

Sntesis de Partidores de RNA por DNA Primasa

A diferencia de la DNA
polimerasa, esta
enzima puede iniciar la
sntesis de una cadena
polinucleotdica por la
unin de dos
nucletidos. La
primasa se detiene
luego de la sntesis de
un polinucletido corto,
dejando un extremo 3OH disponible para la
elongacin por la DNA
polimerasa.

partidor
de RNA

templado de
hebra retrasada

sntesis de un nuevo partidor

de RNA por DNA primasa

DNA polimerasa elonga desde

el nuevo partidor para iniciar
nuevo fragmento de Okazaki

DNA polimerasa termina el

nuevo fragmento de DNA

partidor de RNA removido y

reemplazado por DNA

Espacio (nick) sellado por DNA ligasa

El nuevo fragmento de Okazaki
se incorpora a la cadena creciente

Sntesis de uno de los

Fragmentos de DNA en
la Hebra Retrasada

En eucariontes, los
partidores de RNA son
sintetizados a intervalos
separados en alrededor
de 200 nucletidos en la
hebra retrasada y cada
partidor es de 10
nucletidos de largo.
Este partidor es borrado
y reemplazado por
DNA. Los fragmentos
de Okazaki son unidos
por DNA ligasa.

Reaccin Catalizada por la DNA Ligasa

Figure 5-13 Molecular Biology of the Cell ( Garland Science 2008)

DNA Polimerasas de Procariontes y

Eucariontes

E. coli

Levaduras Mamferos

I
durante
fragmentos

III
DNA en
replicacin

Relleno de espacios
replicacin (en
de Okazaki) y reparacin de

DNA
II

Funcin

II

III

Relleno de espacios
Replicacin desde templados
daados
Elongacin de cadena de
la horquilla de

Direccin de
movimiento de
la Horquilla de
Replicacin

Helicasa
Protenas de
Unin a DNA
De Hebra Simple

Hebra
Lder

Hebra
Retrasada

Accin de
Helicasas
y
Protenas de
Unin a DNA
de Hebra
Simple

Protenas que Actan en la Horquilla de Replicacin

DNA polimerasa III
sobre hebra lder

hebra lder

Topoisomerasa
templado de la hebra lder
templado de la
hebra retrasada

helicasa
primasa

partidor RNA
protenas de unin a
DNA de hebra simple

DNA parental

fragmento de Okazaki
DNA polimerasa III
sobre hebra retrasada

Se muestran dos molculas de DNA polimerasa, una sobre la hebra lder y otra sobre
la retrasada. La DNA helicasa va desenrollando y separando la doble hlice del DNA
paterno delante de la DNA polimerasa. Las protenas de unin a DNA de hebra simple
mantienen las hebras separadas, permitiendo el acceso a la primasa y la polimerasa.

Orgenes de Replicacin en Procariontes y Eucariontes

eucariontes

procariontes

Actividad Correctora de
Pruebas de la DNA
Polimerasa Durante la
Replicacin del DNA
(Proofreading)

Reparacin del DNA

Para corregir errores en la secuencia o MUTACIONES

MUTACIN = cambio heredable en el material gentico de una clula.

2 Tipos Generales:
- Mutaciones Cromosmicas (delecin o repeticin de un trozo de
cromosoma)
- Mutaciones Puntuales

- Sustituciones
- Inserciones o Deleciones (cambio de marco de
lectura)
- Formacin de Dmeros de Pirimidina

Las modificaciones de nucletidos producen mutaciones

La desaminacin de la citosina provoca una sustitucin:

Las modificaciones de nucletidos producen mutaciones

La despurinacin provoca una delecin:

La irradiacin del DNA con luz UV provoca la formacin de

dmeros de pirimidinas (generalmente timina)

C desaminada

pares de
bases

REPARACIN POR ESCISIN

DE BASES (Base Excision
Repair; BER)
Generalmente para reparar
bases modificadas
qumicamente, que podran
producir mutaciones de
sustitucin

URACILO DNA
GLICOSILASA

Hlice de
DNA con una
base menos
AP ENDONUCLEASA Y
FOSFODIESTERASA REMUEVEN
EL AZCAR-FOSFATO

Hlice de DNA
con un
nucletido
menos ADICIONA
DNA POLIMERASA
NUEVOS NUCLETIDOS, DNA
LIGASA SELLA EL ESPACIO

Dmero de pirimidinas

pares de
bases

REPARACIN POR ESCISIN DE

NUCLETIDOS (Nucleotide
Excision Repair; NER)
Reparacin de lesiones que
producen deformaciones en la
doble hlice, como:

NUCLEASA DE
ESCISIN

DNA
HELICASA

Dmeros de timidinas
Uniones a grupos qumicos
voluminosos

Hlice de DNA
con un espacio
de 12
nucletidos
DNA POLIMERASA +
DNA LIGASA

REPARACIN DE
DESAPAREAMIENTOS EN
EL DNA (Mismatch Repair;
MMR)
Para reparar errores
introducidos durante la
replicacin y que escapan a
la correccin de pruebas
La hebra nueva es
reconocida por la presencia
de cortes (generados por la
sntesis de los fragmentos
de Okazaki)