UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE MEDICINA

Blga. Mara Leticia Amsquita

DEPARTAMENTO DE MORFOLOGA HUMANA
BIOLOGA MOLECULAR
Y CELULAR
Crdenas

LOS DISTINTOS TIPOS CELULARES

Regulacin de expresin gnica es caracterstica esencial en mantenimiento de funcin y integridad de
una clula.

en que se diferencian uno del otro ?

Sintetizan s conjuntos de
protenas

Control gnico:
Que genes se expresan
En que momento
Con que pauta temporal

Tipos de genes:
Constitutivos: expresan constantemente
Inducibles:
cc
Represibles: cc

EXPRESIN GENICA EN RESPUESTA

A SEALES
PDGF
EGF
TGF-

FACTORES DE CRECIMIENTO
SEALES NUTRICIONALES
Hepatocitos
regula
cc metabolitos
responde
cambios x cc
activa o reprime
genes

CONTACTOS INTRACELULARES
Desarrollo
Embrionario
Esteroideas
Tiroideas
Insulina
Glucagn

SEALES HORMONALES

CARACTERISTICAS DEL
CONTROL GNICO EN
EUCARIOTAS
La estructura de la cromatina afecta a
la expresin gnica
No hay operones
Existe protenas de unin a DNA que
modifican actividad transcripcional
Existencia de intrones ( procesamiento
alternativo)
Son ms comunes los activadores que
los represores
Separacin espacial entre transcripcin
y traduccin
Las modificaciones post-traduccionales
son frecuentes

NIVELES DE CONTROL DE EXPRESIN

GNICA
1. PRETRANSCRIPCIONAL
Cambios en estructura de cromatina
Modificacin de histonas: acetilacin y metilacin
Remodelacin de cromatina
Metilacin de ADN
2. TRASCRIPCIONAL
Inicio de transcripcin: Interaccin elementos cis y trans
Elementos cis: promotores, intensificadores y silenciadores
Elementos trans:
- Factores de transcripcin: basales y especficos
Dominios unin al DNA :
Motivo dedo de zinc
Motivo hlice-giro-hlice
Motivo cremallera de leucina
Motivo hlice bucle hlice
-Activadores, represores, coactivadores, correpresores,
Hormonas
-ARN pol II

3. PROCESAMIENTO DEL TRANSCRITO PRIMARIO

4. CONTROL EN LA ESTABILIDAD DE ARNm
5. PROCESO QUE AFECTAN TRADUCCIN
6. MODIFICACIN DE PROTENAS

1. PRETRASCRIPCIONAL:

cambios en estructura de cromatina

a. Modificacin de histonas
Cromatina activa.

Fosforilaciones

Cromatina inactiva:

Activadores y represores de transcripcin se asocian con

acetiltransferasa

desacetilasasa

Aspectos importantes de la remodelacin de la

cromatina incluyen:

b. Remodelacin de cromatina
1. FT se unen ADN y reclutan a coactivadores = histonas
acetilasas
2. Histonas acetilasas

acetilan a lisina de H3 y H4

disminuyen carga positiva y debilitan interaccin ADN y

exponen regin promotora.
3. Residuos en colas H4 altera compactacin y crea sitios
unin a protenas con dominios de reconocimiento =
bromodominios, mayor afinidad

maquinaria de

trascripcin.
4. Complejos remodeladores cromatina SW1/SNF actividad
ATPasa , provocan cambios de posicin o estructura de
nucleosoma. SW= mutantes de levadura swi

donde estaba alterado

el cambio (switch) de tipo de apareamiento, y

SNF=

mutantes snf

incapaces de utilizar la sacarosa.

Otras protenas:

La capacidad de ARN pol II de trascribir moldes de

cromatina esta facilitada por asociacin de acetltransfersas, protenas HMG que desplazan a H1 y
apertura cromatina, factores de elongacin que estn
unidos a dominio C-terminal de ARNpol

c. Metilacin de ADN
Islas CpG asociadas genes especficos de tejido y mantenimiento = desmetiladas
Metilacin ADN = supresin o sileciamiento por metil-transferasa
Metilacin de ADN asociada a interferencia en la unin de F.T: RB y E2F

Mecanismo de metilacin del ADN

S-adenosil-metionina

ADN metil-transferasa

Ejemplo: genes globina estn ms metilados en clulas no

productoras de Hb.

intensificadores y
2. TRANSCRIPCIONAL a. Regulacin elementos cis: Promotor,
silenciadores

Enhancers: caractersticas:
Pueden estar hasta 1, 000 pb distancia del gen.
Situados aguas arriba, aguas abajo, o dentro de un intrn del gen que controlan.
Accin especfica de tejido: estn presentes slo en ciertos tejidos.

Silenciadores : secuencias ADN donde unen protenas represoras

Aisladores( o elementos limite) son secuencias que bloquean o aislan el efecto de los
intensificadores de forma dependiente de su posicin

b.
Regulacin
elementos
trans:
RNA polimerasas
(I, II, III), TF,
activadores y represores
FT al menos 2 dominios reconocible que son:
1.Dominio de unin ADN:
Existen varios tipos de motivos con dominio de unin al ADN,
que incluyen a:
dedos de zinc (receptores de hormonas esteroides)
Cremalleras de leucina (factor de transcripcin dependiente
de cAMP)
Hlice-loop-hlice
Helix-tum-hlice (protenas homeodominio codificadas por
homeotic / genes homeobox)
2. El dominio de activacin, permite FT:
Enlazarse con otros factores de transcripcin
Interactuar con la RNA polimerasa II para estabilizar la
formacin de la iniciacin del complejo
Reclutar protenas modificadoras de cromatina como
histonas acetilasas o deacetylases
Pueden

distinguir:

Factores

especficos de transcripcin.

generales

Factores

PROTEINAS REGULADORAS Y SECUENCIAS DE ADN

Protenas con motivos : hlice lmina ,QUE
se unen DNA
por: contacto: H, inico, hidrofbico.
RECONOCEN
Protenas

Tipo de dominio

SP1( specificity protein 1) FT asociados a

Secuencia
ADN

Dedo de zinc

GGGCGGG
CCCGCCC

Hlice vuelta hlice

ATGCAAT
TACGTTA

ARN pol II. Une a caja GC presente en

promotores mamiferos carentes de caja
TATA.

TFII-A, receptor hormonas

esteroideas y tiroideas
Oct-1
Oct-2, myo D

ATTTGCAT

Gata
AP-1

TGATAG
(heterodmero jun y fos),

CREB

c-myc

Cremallera

TGA(C/G)TCA

de leucina

TGACGTCA

R.Glucocorticoide
Dedos de zinc

GGTACANNNTG
TTCT

CONTROL DE TRANSCRIPCIN EN CLULAS HUMANAS

Coactivadores: protenas que actan

como adaptadores moleculares que
integran seales de activadores y quizs
de represores

Por unin de al DNA entre un activador y represor

Interaccin entre activador represor

Interaccin de represor y mediador con factores de transcripcin

inhibe inicio de transcripcn

represin por reclutamiento por modificadores de histnicos que alteran los

nucleosoma de modo que alteran la transcripcin (caso de desacetilaciones,
metilaciones en promotores

REGULACIN DE LA EXPRESIN GNICA

EN EUCARIOTAS
HRE= 12-14 pb

Hormonas esteroideas

GF= Factores de crecimiento

AD: Dominios de activacin

LBD: Dominio de union al ligando
DBD: Dominio de union al DNA

3. PROCESAMIENTO DEL TRANSCRITO PRIMARIO

a. PROCESAMIENTO ALTERNATIVO DEL ARNm
Un transcrito primario puede ser procesado por la maquinaria de splicing crendose diferentes grupos de ARN maduros, con
una diferente combinacin de exones.
Utilidad: gen puede dar a mltiples protenas

Del 35-56 % de genes

humanos
sufren
proceso alternativo
Genes
protenas
trasductoras de seales
mayor frecuencia de
este proceso

Mecanismo responsables desconocido, pero interacciones de U1 en sitio 5 de

empalme y factor U2 determina longitud preferidas de exones

EXON SKIPPING
significa "saltar a travs de los exones".

La omisin de exn significa "saltar a travs de los exones". uno o varios exones faltan, o estn duplica dos o
tienen errores en la secuencia de sus letras. Esto interrumpe el proceso de lectura de la informacin gentica
para la biosntesis de la protena. Estos errores se pueden corregir, es decir, la sntesis de la protena puede
ser restaurada de nuevo, si uno bloquea uno o ms de los exones vecinos presentes en tal manera que el
mecanismo que une los exones los omita

CORTES Y EMPALMES EN TALASEMIA

Exones extendidos e intrones

retenidos

Ejemplo tpicos de corte y empalme de tejido especifico. Existe mutaciones que inactivan lugares de corte y
empalme

Crptico sitios no comunes de corte y empalme

en exn o intrn

Intercambio de un nucletido genera nuevo lugar de corte y empalme en un intrn lleva alargamiento
exn siguiente en 5
La prdida de lugar dador corte y empalme activa lugar de corte y empalme crptico que no se usa y
produce acortamiento o alargamiento de exn.
CONSECUENCIAS:
eritrocito maduros

sntesis de Hb eritrocito y reticulocitos, restriccin en transporte O2 por

b. POLIADENILACIN ALTERNATIVA:
La unin de colas de poli a no coincide con unin de corte

Ejemplo: Sntesis de Ig de membrana y secrecin

Estimulacin
temprana de sitio
de poliadenilacin

No estimulo para crear sitio de

poliadenilacin

Tambin depende del estado de

desarrollo en que se encuentra la
clula.

Figura 7-99 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)

Ejemplo de poliadenilacin alternativo

DE UN MISMO GEN SE PRODUCE DOS
PROTEINAS CON FUNCIN DIFERENTE

juga papel en la homeostasis

cardiovascular y trasmisin del
dolor
Regula niveles de fsforo y calcio en sangre

CORRECCIN o EDICIN DE ARNm

Splicing alternativo y sitio poliadenilacin= forma mejor estudiada y ms habitual regulacin de expresin gnica
procesamiento ARN, no son nicas.

La edicin= modificacin de secuencia de ARNnh o ARNm, altera producto. No constituye

error sino una herramienta utilizada clula para lograr determinada protena.
En humano el caso de las apoprotenas B100 y B48. Ambas son codificadas por el mismo gen y contienen ARNnh los mismos exones
e intrones.

Edicin de pre-ARNm de apo-B

ARNm no sufre modificacin

Transporte de colesterol y steres de

colesterol va partculas LDL

Mutacin puntual CxU

Transporte de quilomicrones de
trigliceridos

Correccin en gen que codifica a enzima ADAR por deaminacin de adenosina por inosina
Papel importante: sistema nervioso, correccin resulta cambios sencillos de as en receptores para algunas molculas sealizadoras en
superficie de neuronas.

4. Control en el transporte del ARNm

El transporte de ARN se realiza de forma activa y muy controlada a travs de los poros nucleares.
Evita que intrones y otros ARN inapropiados viajen al citoplasma.
Algunas protenas que se unen al ARNm durante el proceso de transcripcin, elogancin, terminacin y splicing
son retenidas formando complejos de ribonucleoproteinas

5. CONTROL DE LA ESTABILIDAD DEL ARNm

La degradacin citoplasmtica de mayora de ARNm esta iniciada por acortamiento de colas de poli-A y
eliminacin de caperuzas en 5.
Tambin esta regulada por seales extracelulares ejemplo: ARNm que codifica a receptor de transferrina
protena que capta hierro en clulas animales

ARNm DEL RECEPTOR DE LA TRANSFERRINA

La expresin de receptores de transferrina tambin se maneja
por estabilidad del mensajero
O IRE

a CC citoslicas Fe, mensajero liga en extremo 3 a enzima

aconitasa= IRE (elemento de respuesta al Hierro).
Proteger al ARNm de la accin de nucleasas.

a CC citoslica Fe, este compite con mensajero por IRE se

une Fe y libera el extremo 3 del receptor de transferrina.
Este extremo 3 posee 5 bucles secuencias desestabilizadoras
que son rpidamente reconocidas por ribozimas.
De este modo se reduce la traduccin de protena y con ello
ingreso de ms Fe innecesario- a la clula

Figura 7-111 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)

6. PROCESOS QUE AFECTA TRADUCCIN

a. Control de la traduccin

Regulacin de la traduccin por fosforilacin del eIF-2.

El eIF-2 es requisito absoluto para inicio de
sntesis de protenas en cada ciclo traduccin
El factor eIF-2 est compuesto de
tres
subunidades
diferentes,
denominadas , y t
Su actividad est definida por la
formacin de complejos ternarios
eIF-2~GTP-Met-tRNA1
y
su
posterior unin a la subunidad
ribosomal 405.

En el caso particular del IFe2B es la

subunidad la susceptible de ser
fosforilada
por
una
proteinquinasa
independiente de AMPc que responde a
seales de estrs y se inactiva evitando la
formacin del complejo 40S.

Se cree que el GTP interacciona

con las subunidades y t , de este
modo el eIF-2 es capaz de
asociarse con el Met-tRNA1

Figura 7-107 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)

Fase de Inicio
La secuencia Kozak se encuentra en la mayora de los ARNm eucariotas:
5 gccRccAUGG3, donde R puede ser purina (A o G) tres bases antes del
AUG.
Secuencias reconocidas por el ribosoma como sitio de inicio de traduccin.

Fue descripta por Marilyn Kozak como (5')ACCAUGG(3'). La A que precede a la

secuencia AUG y la G ubicada en la ltima posicin determinan la eficiencia de la
iniciacin de la traduccin.

ARNm de lat
b. Regulacin de traduccin ARNm de ferritina mediados por hierro
Control negativo

CC Fe la IRE queda libre y se liga al ARNm de la ferritina

formando un bucle en el extremo 5 bloquea el ligado de IFe4F y
con ello el ensamblaje del aparato de traduccin.
Bloquea la produccin innecesaria de protena.

CC Fe citoslicas, la sntesis de ferritina se produce a altas

velocidades y el hierro se liga a la aconitasa o IRE.

Figura 7-111 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)

7. MODIFICACIN DE PROTENAS
Mecanismos de control despus de la traduccin
Tutores moleculares (chaperonas)
Modificacin: fosforilacin, metilacin
Metales pesados: dedos Zn
Preprotenas. Ej: insulina

FORMACIN DE ENLACES DISULFURO

DISULFURO
ISOMERASA

PROTEOLISIS

GLUCOSILACIN

A. Factores de transcripcin en general

B. RNA polimerasa para activar la enzima a
transcribir a travs de regiones de terminacin en
un gen
C. Factores de transcripcin que se unan al
promotor pero no a la ARN polimerasa
D. ARN polimerasa en un solo sitio promotor
E. Spliceosomas

Un farmaclogo empleado de una compaa farmacutica est investigando

el mecanismo de accin de un nuevo frmaco que inhibe significativamente
la divisin tumoral de clulas de un pacientes con leucemia mieloide aguda.
l ha determinado que el medicamento sirve como un potente inactivador
de la modificacin de la actividad de la cromatina que regula la expresin
de un grupo de oncogenes involucrados en la presencia de estas clulas
tumorales. Qu tipo de actividad en la modificacin de la cromatina es ms
probablemente que ocurra para la accin de este medicamento?
A. La acetilacin de las histonas centrales
B. La unin de la histona H1 a nucleosomas
C. La desacetilacin de la histona H4 ncleo
D. Desaminacin de bases de citosina en el ADN
E. Bases metilacin de citosina en el ADN
Respuesta: A. La acetilacin de las histonas ncleo nucleosoma est fuertemente asociado con la
cromatina transcripcionalmente activa.
Otras modificaciones (opciones B, C y E) estn asociados con la baja regulacin de la expresin gnica.
La desaminacin de la citosina en el ADN (opcin D) no est relacionado con remodelacin de cromatina.

Referencias
Alberts . 2008. Biologa Molecular de la clula
Gerald Karp. 2008. Biologa Celular y Molecular

COOPER. La clula
Fundamentos de Bioqumica. Donald Voet, Judith G.