DOCENTES:

Ms.C. Carlos Eduardo Abanto Daz

Ms.C. Juan Francisco Giles Saavedra
Ms.C. Max Roger Siaden Ortega
Ms.C. Johnny Alexander Gordillo
Carbonel

ASPECTOS GENERALES QUE DEBEN SER TENIDOS

EN CUENTA AL COLECCIONAR LAS MUESTRAS
CLNICAS
1. La muestra debe ser representativa del proceso
infeccioso.
2. Evitar la contaminacin con microorganismos saprofitos
del rea.
3. Seleccionar el lugar anatmico correcto de donde se
obtendr el espcimen y utilizar la tcnica apropiada y
los instrumentos o elementos adecuados para su
obtencin. Especialmente en el caso de investigar
microorganismos anaerobios.
4. Nunca refrigerar una muestra por anaerobios.
5. Coleccionar un apropiado volumen de la muestra.
Insuficiente material puede ser causa de resultados
falsos negativos.

6. Junto con la muestra enviar solicitud de anlisis:

a. Nombre del paciente,
b. Nmero de identificacin personal,
c. Procedencia,
d. Tipo de muestra,
e. Fecha y hora de coleccin,
f. Especificar regin anatmica,
g. Diagnstico clnico,
h. Duracin de la enfermedad,
i. Terapia antibitica,
j. Prueba requerida e iniciales del funcionario que
tom la muestra.
7. El paciente debe ser informado en forma clara y
sencilla de acuerdo a su grado de instruccin sobre
los procedimientos a realizar.

8. Obtener en lo posible muestras antes de administrar

antibiticos o agentes antimicrobianos. Si se han
administrado, informar de ello al laboratorio. A menudo
un lquido cefalorraqudeo no revela patgenos
bacterianos en frotis ni cultivo, cuando se ha tomado
un antibitico en las 24 horas anteriores.
9. Colocar la muestra en un recipiente estril y adecuado
para su transporte como cajas, gradillas, bandejas,
llevando en la base papel absorbente embebido en
desinfectante, con el fin de asegurar la sobrevivencia
del posible agente infeccioso, evitar derrame del
espcimen y mantener medidas de bioseguridad
apropiadas.
10.Ordenar siempre un frotis para tincin o coloracin de
Gram, para los especmenes que procedan de
cavidades aspticas y anote su inters en
determinado microorganismo.

ORINA
En las muestras de orina se pueden realizar diferentes
anlisis como: examen microscpico de orina, urocultivo,
determinacin de algunos residuos de medicamento
(doping) e investigacin de microorganismos especiales
como Leptospira. El xito de estos exmenes depender
de la tcnica con que se tome la muestra y sobretodo del
tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y el
anlisis, ya que el proceso de descomposicin que se
sucede en la orina por accin de las bacterias all
presentes, modifica el parmetro de los componentes y
muy especialmente altera la carga microbiana.

Procedimiento
1. Lavarse las manos.
2. Las pacientes mujeres deben realizar previamente el
lavado de los genitales externos con agua y jabn y de
adelante hacia atrs, mientras que los hombres solo lo
realizarn en el caso de solicitarse cultivos.
3. Secarse con un apsito estril.
4. Las muestras deben colocarse en un frasco de boca
ancha y tapa de rosca estriles, depositar
aproximadamente entre 30 y 40 ml de preferencia la
primera muestra de la maana a travs del chorro
medio (miccionar una buena cantidad en el inodoro y
luego en el envase).
5. En mujeres la miccin debe ser separando los labios
mayores de la vulva.

6. En hombres se hace la retraccin del prepucio de

manera que el chorro de orina salga directamente.
7. Tapar el frasco con precaucin, evitando contaminar la
muestra y/o derramarla.
8. En casos de nios pequeos utilizar bolsas colectoras
adheridas a los genitales.
9. La muestra debe ser enviada inmediatamente al
laboratorio. En caso de no ser posible refrigerarla no
ms de 4 horas.

HECES
Las muestras de heces se solicitan para examen
bacteriolgico, virolgico, bioqumico y para la bsqueda
de parsitos. Las muestras de heces de un paciente
sospechoso de enfermedades diarreicas deben colectarse
antes de la administracin de cualquier antibitico.

Procedimiento
1. Muestra evacuada: La persona debe defecar en un
recipiente limpio y seco, teniendo cuidado de no
miccionar para que sta no se mezcle con orina.
2. Hisopado rectal: La muestra se obtiene con un hisopo
de algodn estril, el cual se desenvuelve y se lubrica
antes de su uso, introducindolo en el medio de
transporte, de preferencia Cary Blair, y luego se
introduce en el recto, unos 3 cm, mediante movimientos
de rotacin.
3. El hisopo con la muestra se introduce hasta el fondo del
tubo que contiene el medio de transporte (Cary Blair,
Amies o Stuart).
4. El frasco con la muestra o tubo con el medio de
transporte se pueden conservar a temperatura ambiente
hasta su procesamiento o envo al laboratorio, no ms
de 12 horas.
5. No se debe refrigerar la muestra.

HEMOCULTIVO
La sangre de los individuos sanos es estril. Una afluencia
repentina de bacterias habitualmente es eliminada del
torrente circulatorio en un perodo de tiempo corto (de
minutos a horas), excepto cuando existe una infeccin
masiva o est presente un foco intravascular infectado.
Bsicamente, cuando las bacterias se multiplican a tasas
que exceden el sistema retculoendotelial para eliminarlas,
se habla de BACTERIEMIA. El trmino FUNGEMIA se
utilizar para designar la presencia de hogos en sangre.
Siempre que exista una razn para sospechar de una
bacteriemia se debe practicar el cultivo de la sangre o
hemocultivo.

Procedimiento
Los hemocultivos se obtendrn antes de iniciar la terapia
antibitica, el incumplimiento de este punto puede dar
lugar a resultados falsamente negativos, pudiendo
comprometer la vida del paciente.
Los microorganismos de la piel pueden contaminar la
sangre, durante la extraccin, dificultando la interpretacin
de los resultados. Adems, algunos contaminantes actan
como patgenos oportunistas, por lo que se debe ser muy
cuidadoso durante la extraccin.

La toma debe realizarse por venopuncin y para ello debe

hacerse:
1. Lavado de manos y utilizacin de guantes estriles.
2. Limpiar con jabn lquido o alcohol el lugar de la
puncin.
3. Aplicar durante un minuto povidona yodada, dejar secar.
4. Desinfectar los tapones de los frascos.
5. Efectuar la extraccin.
6. No airear los frascos
7. Nunca debe hacerse la extraccin a travs de catteres,
salvo en aquellas circunstancias en que se indica
especficamente.
8. Cuando la extraccin se realice con adaptador, se debe
esterilizar o ser de un slo uso.

MUESTRAS FARNGEAS Y
AMIGDALARES
Ms del 70 % de procesos estn ocasionados por virus,
rinovirus, coronavirus, adenovirus(3,4,7,14,21),
parainfluenza, virus de la gripe, virus coxsakie A y otros
enterovirus, virus Epstein-Barr y virus herpes simple tipo I.
Entre el 10 y 20 % de la faringitis agudas en nios de 5 a
10 aos, estn ocasionados por Streptoccoccus pyogenes.
Otras bacterias patgenas son: Streptococcus grupos C o
G, Corynebacterium diphteriae, Neisseria gonorrhoeae,
Haemophilus influenzae.

Procedimiento
1. Las muestras de exudado faringo-amigdalar se obtienen
con la ayuda de un depresor lingual, tocando con la
torunda todas las partes con exudados, membranas o
zonas de inflamacin. Se deben frotar las criptas
tonsilares y la faringe posterior.
2. No se requieren medidas especiales para su transporte
y conservacin.
3. La toma de muestra de la epiglotitis, debido al riesgo de
complicaciones, se hace por un especialista en las
condiciones adecuadas.
4. Es recomendable realizar hemocultivos.

HISOPADO FARNGEO
1. El paciente se sentar cmodamente de frente al profesor, el rea debe
tener buena iluminacin para que permita visualizar adecuadamente el sitio
anatmico a examinar.
2. Indicar abrir la boca y con ayuda del bajalengua deprimir la lengua para
favorecer que la faringe quede expuesta, con un hisopo estril frotar
firmemente la pared posterior de la faringe y las amgdalas, particularmente
en donde existan puntos blancos o reas que presenten signos de
inflamacin o sangrado.
3. Cuando el paciente no tenga amgdalas, la muestra se obtendr del fondo
de las fosas amigdalinas. Al retirar el hisopo tener la precaucin de no
hacer contacto con ninguna otra rea de la boca.
4. A partir de la muestra tomada, se realizar el aislamiento por el mtodo de
aislamiento en estra en placa, se utilizarn placas de agar sangre, agar
chocolate y agar manitol salado.
5. Antes de eliminar el hisopo , realizar una extensin para preparar un frotis,
fijar la muestra y teir con una tincin simple (Azul de metileno) para
observar :
Morfologa de la bacteria
Agregacin o tipo de distribucin bacteriana.

MUESTRAS NASALES
Procedimiento
1. La muestra se obtiene introduciendo una torunda para
cultivo, previamente embebido en suero fisiolgico estril,
unos 2 cm en la nariz y girando suavemente contra la
mucosa de la superficie nasal.

CATTERES
El estudio bacteriolgico de los catteres , nos va a
permitir en ocasiones conocer el agente causal de una
bacteriemia relacionada con el catter y prevenir que
aparezca dicha bacteriemia. Para valorar su importancia
podemos decir que de una u otra forma el 82 % de las
bacteriemias nosocomiales se relacionan con la
presencia de catteres.
Vas de infeccin:
a. Piel y catter : en los catteres perifricos y de corta
duracin
b. Endoluminal : en las vas centrales tunelizadas.

Procedimiento
1. Desinfectar con alcohol al 70 % una zona de la piel de
unos 10 cm correspondientes a la zona de entrada del
catter
2. Retirar el catter con la mxima asepsia, con la ayuda
de pinzas y tijeras estriles, cortar los 5 cm distales del
catter que corresponde a la porcin intravascular.
3. Introducir el segmento del catter en un recipiente estril
correctamente identificado
4. La muestra debe ser enviada al laboratorio en un perodo
de tiempo menor de 30 minutos. Cuando no sea posible
deber ser guardada en refrigeracin a 4 C

LQUIDOS ESTRILES
En este grupo incluimos lquidos producidos, ya sea de
forma espontnea o bien provocada a nivel de las serosas,
en las que habitualmente no existen microorganismos y son
presumiblemente estriles. Su buen manejo presenta un
triple inters por:
La trascendencia de esta patologa por su elevada
morbilidad o mortalidad
Dificultad de diferenciar patgenos y oportunistas como
consecuencia de cuidados teraputicos instaurados o
prtesis aplicadas previamente.
Posibilidad de contaminacin exgena, sea en la
obtencin o en su manipulacin, siendo por ello muy
importante extremar las medidas de asepsia, de recogida y
procesamiento.

Muestras
Lquido asctico o peritoneal
Lquido articular o sinovial
Lquido pericrdico
Lquido pleural

Procedimiento
1. La obtencin de estos lquidos es un procedimiento
mdico
2. La toma se realiza por puncin percutnea
(toracocentesis, paracentesis, puncin pericrdica o
puncin articular)
3. Para el estudio bacteriano se requerir de 1 a 10 ml; para
lquido de dilisis peritoneal se requerir de un volumen
superior a 100 ml.
4. Para evitar la coagulacin de algunos lquidos se utilizar
heparina sin conservantes, ya que otros anticoagulantes
podran tener accin antibacteriana.
5. Los recipientes idneos son los viales de transporte para
anaerobios
6. Los frascos de hemocultivo tambin son tiles para
cultivar lquidos biolgicos estriles. Si se sospecha de
anaerobios colocar la muestra luego de ser extrada en
un frasco para anaerobios.

LQUIDO CFALORRAQUIDEO
(LCR)
La meningitis es un proceso inflamatorio del Sistema
Nervioso Central, que afecta a las leptomeninges y al
lquido cefalorraqudeo. Se trata de una urgencia mdica y
requiere un diagnstico y tratamiento precoz. Su
morbimortalidad, en meningitis agudas bacterianas, se
relaciona directamente con el retraso en el inicio de la
teraputica.
Los casos espordicos de meningitis agudas bacterianas ,
se relacionan directamente con el retraso en el inicio de la
teraputica, aparecen en edades extremas de la vida,
ocurriendo el 75 % de los casos en menores de 1 ao.

Muestra
1. La toma de la muestra lo realiza el mdico tratante o el
patlogo clnico del laboratorio.
2. Se obtendr antes de instaurar cualquier terapia
antimicrobiana, siempre que las condiciones lo permitan.
3. LCR se obtiene por puncin lumbar
4. Generalmente se obtendrn dos tubos, el primero se
enviar para el estudio bioqumico, el segundo para el
estudio microbiolgico con el mayor volumen posible.
5. El tubo ms turbio se enviar a Microbiologa.
6. Se debe solicitar simultneamente hemocultivos, por
proceso bacterimico
7. El volumen mnimo para el estudio bacteriolgico
rutinario es 1 ml, aunque es preferible disponer de
volmenes superiores. Para hongos o micobacterias se
necesitarn al menos 2 ml adicionales por cada uno de
los estudios, siendo deseable llegar a los 10ml

8. La muestra debe enviarse inmediatamente al

laboratorio, pues algunos agentes etiolgicos como S.
pneumoniae pueden lisarse rpidamente a partir de la
primera hora de su recogida
9. Si no fuera posible se mantendr en estufa a 35 a 37C
y una parte se incubar en frasco de hemocultivo, que
se mantendr en idnticas condiciones.
10.Si no se dispone de estufa se mantendr a temperatura
ambiente. Nunca se refrigerar pues se afectar la
viabilidad de Neisseria meningitidis y H. influenzae.

Procesamiento del lquido cefalorraqudeo

1. Centrifugar a 1 500 hasta 3 000 revoluciones durante 15
a 20 minutos.
2. En caso de lquidos muy purulentos no ser necesario
centrifugar.
3. Recoger el sobrenadante con pipeta de Pasteur estril y
conservarlo a 4C en frigorfico.
4. Sembrar el sedimento con pipeta de Pasteur en: agar
Sangre a 35 - 37C. atmsfera de CO2 ,agar Chocolate
a 35 - 37C atmsfera de CO2 ,caldo Tioglicolato o
caldo Infusin Cerebro Corazn BHI a 35 - 37C por 72
horas.
5. Se realizarn tres extensiones para tincin: tincin de
Gram, Azul de metileno, Wright.

EXTRACCIN DE SANGRE
PERIFRICA
1. Colocar sobre la mesa de trabajo todo el material que se
necesitar para ejecutar la obtencin de la muestra.
2. Lavarse las manos previamente a la extraccin de la
sangre y si es preciso colocarse guantes.
3. El paciente deber sentarse cmodamente de manera
que el brazo quede colocado paralelamente a la mesa de
trabajo, donde se realizar la extraccin se sangre.
4. Apoyar el brazo del paciente sobre un pequeo cojn bajo
el codo. Con la palma de la mano hacia arriba.

5. Colocar la ligadura aproximadamente dos dedos por

encima de la flexin del codo. sta se deber ajustar solo
lo suficiente para aminorar la corriente sangunea y
dilatar la vena.
6. Pedir al paciente que abra y cierre la mano varias
veces, para favorecer la dilatacin de las venas.
7. Con el dedo ndice palpar la vena.
8. Desinfectar la zona donde se realizar la puncin.
9. Tomar la jeringa con la mano derecha, colocar la yema
del dedo ndice sobre la base de la aguja.
10.Colocar la aguja sobre la vena con el bisel hacia arriba,
introducir la aguja de 1 a 1,5 cm aproximadamente.
11.Luego de extraer la sangre por puncin venosa, retirar la
aguja de la jeringa y colocarla en un depsito de metal
(para autoclavar o incinerar); verter lentamente la sangre
en un tubo o en el caldo de cultivo.