FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

Antimicrobianos
Agentes fsicos, asepsia y esterilidad

Dr. Guido Mora L.

Conceptos generales
Esterilizacin: es el proceso mediante el cual clulas vivas, esporas
viables y virus son destruidos o removidos de un objeto o hbitat. Un
objeto estril es aquel que est libre de microorganismos vivos, esporas o
cualquier agente infeccioso.
Desinfeccin: es el proceso de eliminar, inhibir o remover
microorganismos que puedan causar enfermedad.
Desinfectante: agente, generalmente qumico, utilizado para llevar a
cabo la desinfeccin, normalmente se utilizan sobre objetos
inanimados.
Antisptico: agente qumico utilizado sobre tejido vivo
Un desinfectante no necesariamente esteriliza un objeto, ya que pueden
permanecer algunos microorganismos o esporas.

Sanitizacin: es el proceso de reducir la poblacin de

microorganismos a niveles considerados seguros por los estndares de
salud pblica.

Agentes antimicrobianos
Agentes Fsicos (esterilizantes)
Calor: causa la denaturacin de las protenas y cidos nucleicos,
destruye las membranas. Calor hmedo (20 min a 121C) y Calor seco
(2 horas a 180C)
Radiaciones: producen dao al DNA.

Horno
Autoclave

Agentes antimicrobianos

Agentes Qumicos (desinfectantes)

Alcoholes, fenoles, sales de metales pesados: denaturan las protenas.
Agentes oxidantes: oxidan los grupos SH de las protenas.
Agentes alquilantes: sustituyen los tomos de H por radicales alquilo.
Detergentes: se insertan en la membrana celular e interfieren con sus
funciones.

Agentes Quimioteraputicos

Actividad de los antimicrobianos

La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
1. Tamao de la poblacin:
... un mayor nmero de microorganismos demoran ms en morir que
un nmero menor de ellos.
2. Composicin de la poblacin:
... la efectividad de un agente vara de acuerdo de acuerdo a la
naturaleza del organismo; los microorganismos varan mucho en sensibilidad.
(bacteria, levadura, espora, etc.)
3. Concentracin o intensidad del agente antimicrobiano:
... generalmente un agente ms concentrado o ms intenso elimina ms
rpido a los microorganismos. (no siempre...etanol 70% ms efectivo que
etanol 95%)

Actividad de los antimicrobianos

La actividad de los antimicrobianos se puede ver afectada por....
4. Duracin de la exposicin:
... mientras ms tiempo este el microorganismo expuesto al agente,
mayor ser el nmero de organismos eliminados.
5. Temperatura:
... un aumento de la temperatura en que se aplica el agente aumenta la
efectividad de ste.
6. Medioambiente local:
... el medioambiente que rodea al microorganismo lo puede proteger
de la accin del agente antimicrobiano. (la materia orgnica de la comida
protege a las bacterias de la esterilizacin por calor)
(todo el material quirrgico debe ser lavado antes de esterilizar)

Generalidades sobre antimicrobianos

Sustancia o Agente capaz de actuar sobre los
microorganismos, ya sea inhibiendo su crecimiento o
causando su muerte
ANTIMICROBIANOS
(a) Bacteriostticos
Inhiben el crecimiento del microorganismo
(b) Bactericidas
Matan a los microorganismos sin necesidad de
destruirlos o lisarlos
(c) Bacteriolticos
Matan a los microorganismos por lisis

Requerimientos para un Antimicrobiano (Quimioterpico)

1.- Especificidad:
Se refiere al espectro de la actividad antimicrobiana, definida
por su capacidad de unin a un sitio especfico de la bacteria.
2.- Eficacia in vivo:
Debe ser bacteriosttico o bactericida in vivo, es decir, su
accin no debe ser revertida en el interior del organismo.
3.- Toxicidad selectiva:
Debe ser txico para el microorganismo, pero ser inocuo para
el hospedero. Esto es indispensable para la utilizacin del
antimicrobiano en clnica.

Antecedentes histricos

Paul Ehrlich (1908):

Cre el primer compuesto qumico
sinttico (Salvarsan) que poda curar
una infeccin, la sfilis (Treponema
pallidum).

Estructura qumica del Salvarsan

(La bala mgica)

Antecedentes histricos. Descubrimiento de los antibiticos

Alexander Fleming (1928):

Observ que el hongo Penicillium notatum
impeda el crecimiento de Staphylococcus
aureus
Florey y Chain (1939): aislaron Penicilina G

Penicillium notatum

Antecedentes histricos. Descubrimiento de los antibiticos

Foto original tomada por Fleming

Foto actual

El hongo Penicillium notatum impide el

crecimiento de Staphylococcus aureus...

Antibiticos
Antimicrobiano:
Sustancia capaz de actuar sobre los microorganismos, inhibiendo su
crecimiento o destruyndolos.
Antibitico:
Sustancia producida por el metabolismo de organismos vivos,
principalmente hongos microscpicos y bacterias, que posee la
propiedad de inhibir el crecimiento o destruir microorganismos.
Segn su origen, los antibiticos pueden ser:
Biolgicos (naturales): sintetizados por organismos vivos, ej.
Penicilina, Cloranfenicol.
Semisintticos: obtenidos por modificacin qumica de
antibiticos naturales, ej. Ampicilina.
Sintticos: generados mediante sntesis qumica, ej. Sulfas.

Evaluacin de la susceptibilidad a un antibitico

En el laboratorio se puede estudiar la susceptibilidad a
antimicrobianos que presentan bacterias aisladas desde una
muestra biolgica...
La susceptibilidad a antimicrobianos, junto con la identidad
de la bacteria aislada y ciertos factores del hospedero
constituyen las bases para la eleccin de una terapia
antimicrobiana adecuada
Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana in vitro:
Test por dilucin
Test por difusin
Se realizan segn ciertas normas previamente estandarizadas (NCCLS)

Definiciones

Concentracin inhibitoria mnima (CIM)

Corresponde a la menor concentracin de
antimicrobiano que inhibe el crecimiento bacteriano
luego de 18 a 24 horas de incubacin.
Concentracin bactericida mnima (CBM )
Corresponde a la menor concentracin capaz de matar
un 99,9% la poblacin bacteriana.

Antibiograma por dilucin

Tcnica de referencia en la mayora de los estudios clnicos de
susceptibilidad a antimicrobianos.
Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite determinar la
concentracin inhibitoria mnima (CIM).
Se puede realizar en medio lquido (dilucin en caldo) o en medio
slido (dilucin en agar).
Mtodo complejo y de alto costo.
Lectura del CIM

Dilucin seriada en caldo

CIM

Antibiograma por difusin

(Tcnica de Kirby-Bauer)

Es el mtodo ms usado
Es prctico y sencillo de realizar e
implementar
Permite analizar un gran nmero
de antibiticos al mismo tiempo y
bajo las mismas condiciones
Entrega un resultado cualitativo
(bacteria sensible o resistente)

Antibiograma por difusin

(Tcnica de Kirby-Bauer)

Anlisis de
varios antibiticos en
un mismo ensayo

Resistente
(No hay halo de
inhibicin)

Sensible
(Presencia de halos de
inhibicin)

Factores que afectan la actividad antibacteriana in vitro

pH del medio de cultivo: algunos antibiticos son activos a pH
cido (nitrofurantona) y otros lo son a pH alcalino
(aminoglucsidos).
Componentes del medio de cultivo: pueden antagonizar al
antibitico (extracto de levadura antagoniza a sulfonamidas).
Estabilidad del medicamento: algunos antibiticos se inactivan a
la temperatura de cultivo (clortetraciclina, en menor grado
penicilina)
Tamao del inculo: si hay muchas bacterias, la susceptibilidad
es menor y pueden aparecer mutantes resistentes.
Tiempo de incubacin: si es muy breve los m.o. no mueren; si es
muy largo, pueden aparecer mutantes resistentes o inactivarse el
medicamento.

Actividad antimicrobiana in vivo

Es mucho ms compleja, ya que hay que considerar la relacin con
el hospedero
HOSPEDERO

ANTIBITICO

MICROORGANISMO

Prontosil

Metabolizacin en
el ratn

Gerhard Domagk (1939)

Sulfanilamida
(sulfa)

Factores que afectan la actividad antibacteriana in vivo

Estado de actividad metablica de los m.o.: puede ser muy

diferente, generalmente menor, que en el laboratorio.
Distribucin del medicamento en los diferentes tejidos y rganos:
es muy variable, ej. algunos medicamentos no penetran al SNC.
Localizacin de los microorganismos: pueden ser parsitos
intracelulares, lo que dificulta la accin antimicrobiana.
Sustancias que interfieren con el medicamento: el medicamento
puede ser inactivado por condiciones ambientales dentro del
organismo (ej. pH) o fijado por protenas sanguneas o tisulares.