Macromolc

ulas de la
levadura

Introduccin:
La clula esta constituida por una variedad de
macromolculas indispensables para la
realizacin de procesos metablicos por lo tanto
es de vital importancia su estudio para lo cual
se ha diseado la siguiente practica con el fin
de identificar variedad de macromolculas
orgnicas presentes en la levadura as como
tambin presencia de protenas, cidos
nucleicos y glucgeno lo cual se logra mediante
la experimentacin conjunta.

Centrifugacin

La centrifugacin constituye el procedimiento mas

rpido, cmodo y limpio para separar un slido en

suspensin con un lquido. El fundamento es
aplicar una cierta velocidad angular(hacer girar)a
la suspensin, de forma que las partculas ms
pesadas se depositen en el fondo del
recipiente(precipitado),
mientras
que
las
sustancias
ms
ligeras
quedan
por
encima(sobrenadante).

La velocidad de una centrifuga se expresa en

revoluciones por minuto(r. p. m) y la fuerza

centrifuga que genere se expresa como fuerza
centrifuga relativa. Las unidades de la fcr se
expresan como mltiplos de la gravedad(g).
La relacin entre rpm y fcr(g) viene dada por
la siguiente formula:
Fcr = 1,12 10 n r
n= Velocidad de rotacin del rotor. Expresado
en r. p. m
r= Radio de la centrifuga en centmetros
correspondiente a la distancia existente entre el
centro del cabezal de la centrifuga y el fondo
del porta tubos.

Glucgeno
Elglucgeno(o glicgeno) es

unpolisacridode reserva energtica formado

por cadenas ramificadas deglucosa;
esinsolubleenagua, en la que
formadispersiones coloidales. Abunda en
elhgadoy en menor cantidad en los
msculos, as como tambin en varios tejidos.

Obtencin e identificacin de
Glucgeno.

1.

Agrega
levadur
a

Arena lavada

Triturar
5
minutos

2.

cido tricloroactico
10 ml

Macerar
3 minutos

3.
Dejar que la arena se sedimente

Suspensin sobrenadante

Centrifuga 5
Minutos 1000g
(3000 rpm aprox)

Sobrenadante

Glucgeno
Sedimento

cidos nucleicos

4.
5.

Sediment
o

Bao sobre hielo para uso

posterior
2 volmenes
Alcohol etlico
Al 96% frio

Sobrenadante

Agitar

Bao de hielo
5 minutos
Observar

6.

7.

Centrifuga 3
Minutos 1500g
(5000 rpm
aprox)
Agua
destilada
1ml

Elimina
r
Sediment
o

Agua destilada Sln de almidn

Glucgeno
1ml
Al 0.5% 1ml (control positivo)
(control
negativo)
Lugol 2-3 gotas

Sobrenadant
e

Agitar

Muestra

Comparar y registrar

Protenas
La qumica de los organismos vivos abarca

principalmente a las protenas de sus

clulas. La mitad de materia solida de las
clulas consiste en protenas. Estas
protenas intervienen en el anabolismo y
catabolismo de la clula, la sntesis de los
tejidos del cuerpo, enzimas, ciertas
hormonas y los componentes proteicos de
la sangre. Tambin actan en los sistemas
de transporte de los tejidos, movimiento del
cuerpo y proteccin contra la invasin

Protenas
Tome sedimento de cidos
nucleicos y protenas

Agregue 10mL de cloruro de

sodio al 10%

Agite cuidadosamente

Caliente suspensin en bao mara por

10min

Deje enfriar y transfiera a un tubo de

centrifuga
Centrifugue por 10min a 1.500g

Sedimento

Protenas

Sobrenadante

cidos nucleicos

Re suspender en
2 mL de solucin
de cloruro de
sodio 0,15M

En un tubo
solucin
salina
(NaCl 0.15M)
y 1ml de
solucin de
casena

Control positivo

Transferir a otro tubo de

ensayo y conservar en hielo

En otro tubo
coloque
solucin
salina sola

Control
negativo

Aada a cada tubo 1mL de sulfato cprico 0.1M y 2mL de

hidrxido de sodio 10M mezclar y observar

Reactivo de Biuret
La producen los pptidos y las

protenas, ya que se debe a la

presencia del enlace peptdico
(- CO- NH -) que se destruye al
liberarse los aminocidos.
Cuando una protena se pone
en contacto con un lcali
concentrado, se forma una
sustancia compleja denominada
Biuret. Debido a dicha reaccin
fue que observamos que al
agregar el reactivo de sulfato
de cobre mas solucin de
protena precipito una
coloracin violeta.

La reaccin debe su
nombre al biuret, una
molcula formada a partir
de dos de urea (H2N-CONH-CO-NH2), que es la ms
sencilla que da positiva
esta reaccin

cidos nucleicos

Son compuestos orgnicos de elevado peso

molecular, formados por carbono, hidrgeno,

oxgeno, nitrgeno y fsforo. Cumplen la
importante funcin de sintetizar las protenas
especficas de las clulas y de almacenar, duplicar
y transmitir los caracteres hereditarios. Los cidos
nucleicos, representados por el ADN (cido
desoxirribonucleico) y por el ARN (cido
ribonucleico), son macromolculas formadas por
la unin de molculas ms pequeas llamadas
nucletidos.

Identificacin de cidos
nucleicos:
Se toma la muestra de cidos nucleicos

conservada en hielo y se aade 2

volmenes de alcohol al 96% frio, se agita y
se mantiene sobre hielo por 5 minutos.
Se procede a centrifugar por 3 minutos a
1500g lo que equivale aproximadamente a
5000 r.p.m., se elimina el sobrenadante
(parte superior clara de la mezcla despus
de ser centrifugada).

Se disuelve el sedimento en 2mL de NaCl 0.15M

(muestra)
En otro tubo de ensayo se ponen 2mL de NaCl
0.15M (control negativo)
Tubo adicional 2mL de solucin de ribosa al 0.5%
(control positivo)
Agregar a cada tubo 3mL de reactivo de orcinol
calentar en bao mara por 20min o hasta que
aparezca un color verde intenso en el tubo de
control y en la muestra
Observar y registrar

GRACI
AS