Prctica de

Cromatografa Slida:

Cromatografa en
Papel
Equipo Kriptonita:
Karen Palacios
Israel Prez
Katheryne
Snchez
Katia Matus
Ana Ballado

Que es?
Es la tcnica de separacin e
identificacin de sustancias qumicas
mediante un disolvente que se mueve
sobre hojas o tiras de papel filtro.

Tipos de cromatografa en
papel:
Cromatografa ascendente:
El disolvente se encuentra en el fondo
del recipiente que sostiene al papel y
va subiendo atreves de el por
capilaridad.

Cromatografa descendente:
El disolvente esta en un recipiente
del que cuelga el papel, fluye por
el hacia abajo con una combinacin
de capilaridad y gravedad.

 En ambos casos el disolvente avanza a lo largo

del papel pasando por encima de la mancha, al
avanzar disuelve y arrastra las sustancias de la
mancha, cada una de ellas se mueve, por lo
general a distinta velocidad que las otras. Se
deja actuar el disolvente, se seca el papel y se
observa las sustancias separadas.
A esta tcnica se le conoce
como cromatografa monodimencional y el papel resultante como cromatograma monodimensional.

Conceptos:
Fuerzas resultantes:
Al pasar el disolvente sobre la mancha,
actan dos tipos de fuerzas opuestas: una
que arrastra y otra que retarda.
La fuerza propulsora acta apartando las
sustancias de su punto de origen y
desplazndolas en direccin del flujo de
origen.

 Las fuerzas retardantes tratan de impedir el

movimiento de las sustancias, llevndolas
fuera del disolvente que fluye y hacia atrs
en el papel.

La distancia recorrida por

cada sustancia a partir del
origen, en un tiempo, es la
resultante de estas dos clases de fuerzas.

Tipos de fuerzas retardantes:

Adsorcin:
Es otra fuerza diferenciales, esto significa
que unas sustancias son adsorbidas mas
que otras y por consiguiente la liberacin
de las sustancias de la mancha varan de
una sustancia a otra.
Constante RF:
Es un punto de referencia que sirve para
expresar la distancia recorrida de la
sustancia en una cromatografa.

Prctica:
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
TECNICA

OBJETIVO
Que al realizar esta practica podamos
identificar los componentes de los
reactivos o materiales a utilizar que se
desean analizar y aprender a emplear
la cromatografa de papel.

MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales

Reactivos

Papel filtro
5 vasos de
precipitado de 100
ml

ALCOHOL
ETILICO

1 pipeta de 10 ml
tijeras
regla
Papel filtro de
cafetera
Plumones
permanentes
Plumoness de agua

ACETONA
PURA

COMO PREPARAR NUESTRA CROMATOGRAFIA

PASO POR PASO:

PASO 1
SELECCIONAMOS NUESTRO
COLORES A ULTILIZAR PARA
HACER LA CROMATOGRIA

PASO 2
EN EL CASO DEL PAPEL
FILTRO
DE
CAFETERA
LAS
CORTAMOS EN FORMA DE UN
CUADRADO Y DE AH SE PARTEN
EN 2

PASO 3
LUEGO DE YA TENERLAS
CORTADAS LAS ENROLLAMOS
EN FORMA DE TUBITOS

PASO 4
UNAVEZ
ENROLLADAS
NUESTROS TUBOS DE PAPEL
FILTRO
DE
CAFETERA
LOS
JUNTAMOS PARA VER CUANTAS
CROMATOGRAFIAS
IBAMOS
HACER

PASO 5
PROCEDIMOS A MARCAR EL
CENTRO DE NUESTRO PAPEL
FILTRO NORMAL PARA PODER
MARCAR CON EL PLUMON

TECNICA
LAVAMOS NUESTRO MATERIAL
CORRECTAMENTE
UNA
VEZ
MARCADAS
NUESTROS
CIRCULOS
DE
PAPEL
FILTRO
LOS
MARCAMOS
CON
LA
TINTA
DEL
PLUMONES QUE DESEABAMOS CONOCER
SUS COMPONENTES
CON LA AYUDA DE LA PUNTA DE
HIERRO DEL COMPAZ ATRAVEZAMOS EL
CENTRO DEL PAPEL

LUEGO DE HABER HECHO EL HUECO A

CADA UNO LOS ATRAVEZAMOS CON LOS
TUBOS DE PAPEL FILTRO

DESPUES DE HABER TERMINADO

PROCEDIMOS A LLENAR NUESTROS
VASOS DE PRECIPITADO CON EL
REACTIVO A UNTILIZAR LLENAMOS 3
CON ACETONA PURA Y LOS OTROS 3
CON ALCOHOL ETILICO ( 2OML)

MEDIMOS 2.5 CM DEL TUBO QUE ES A

LA ALTURA EN LA CUAL PAPEL FILTRO NO
TOCABA AL REACTIVO YA SEA DE
ACETONA O ALCOHOL

DESPUES DE HABER MARCADO Y

MEDIDO NUESTROS TUBOS TAMBIEN
MARCAMOS NUESTRO VASOS DE
PRECIPITADO CON EL REACTIVO QUE
UTILIZAMOS

DESPUES DE HABER TRANSCURRIDO

VARIOS MINUTOS:

Como preparar las tiras

Cromatografa en tiras de papel

Materiales:
Una tira depapel poroso. Se puede utilizar el papel de
filtro de una cafetera o incluso recortar el extremo (sin
tinta) de una hoja de peridico.
Rotuladoresobolgrafosde distintos colores.
Unvaso
Un poco dealcohol

Tcnica:
Recortauna tira del
papel porosoque tenga
unos4 cmde ancho y que
sea un poco mas larga que
la altura del vaso.

Enrolla un extremo en
un bolgrafo(puedes
ayudarte de cinta
adhesiva) de tal manera
que el otro extremo llegue
al fondo del vaso. (ver
dibujo).

Dibuja unamanchacon un
rotuladornegro, o de
cloresen el extremo libre
de la tira, a unos2 cmdel
borde. Procura que sea
intensa y que no ocupe
mucho.

Echa en el fondo del vaso

alcohol, hasta una altura
de1 cmaproximadamente.

 Sita la tira dentro del

vaso de tal manera que
el extremo quede
sumergido en el alcohol
pero la mancha que has
hecho sobre ella quede
fuera de l.

Puedes tapar el vaso

para evitar que el
alcohol se evapore.

 Observa lo que ocurre: a medida que el alcohol va ascendiendo

a lo largo de la tira, arrastra consigo los diversos pigmentos que
contiene la mancha de tinta. Como no todos son arrastrados con
la misma velocidad, al cabo de un rato se venfranjas de
colores.
Repite la experiencia utilizando diferentes tintas.

Prctica 3:
Tiras de papel filtro
en botes

OBJETIVO:
El objetivo de esta prctica es
poder
separar
los
componentes
de
nuestra
muestra, en este caso se
utilizaron tintas de diferentes
marcas
y
colores,
con
diferentes eluyentes, y poder
identificar cada uno de ellos.

Materiales & Reactivos:

Materiales

Reactivos

Papel Filtro

Agua Destilada

Tarros largos de
conserva

Alcohol

Plumones de
Colores

PROCEDIMIENTO:
Cortar una tira de papel de filtro.

A unos 4 o 5 centmetros del final

de la tira dibujar con lpiz una
lnea horizontal

 Tambin con lpiz, dibujar

pequeos
crculos
suficientemente separados
entre s (3 a 4 cm) y
escribir a un lado con qu
tinta los vamos a pintar.

 Escribir en la parte
superior del papel el
disolvente en el que
vamos a meter el papel
de filtro

Pintar los crculos con las

tintas correspondientes

 Repetir con el resto del

papel de filtro, para usar las
mismas tintas en distintos
disolventes
Llenar tarros largos de conservas -muy
limpios- (o vasos de tubo, pueden ser
de plstico desechables) con los
disolventes
(agua
destilada
-de
planchar-, alcohol, o una disolucin de
alcohol
50%
en
volumen).
Es
importante que slo hayan 2 o 3 cm de
altura de disolvente.

 Poner los papeles de filtro en los

tarros: el papel no debe tocar las
paredes ni el fondo del tarro. La
parte inferior del papel debe estar
sumergida en el disolvente. Sin
embargo, los crculos que hemos
pintado deben estarpor encimadel
disolvente: es muy importante que
no queden sumergidos.

 Observar cmo la fase mvil (el disolvente)

sube por capilaridad, arrastrando los distintos
componentes de las tintas.

 Parar la cromatografa antes de que el

disolvente alcance el otro extremo del papel
(a 2 cm aprox. del final del tarro), sacando los
papeles de los tarros, y ponindolos a secar.

 En ciencia es muy importante analizar los

resultados de las investigaciones, y sacar
alguna conclusin de ellas. As que lo ms
importante viene ahora: se deben analizar los
resultados

Prctica 4:
Extraccin y
Separacin de
Pigmentos
Fotosintticos

Karen
Palacios

Objetivo

En esta prctica queremos

extraer los pigmentos que se
encuentran en los hojas de
espinaca y conseguir separarlos
utilizando una tcnica sencilla,
que es la cromatografa en
papel

Clorofila
Qu es?:
La clorofila es un pigmento de las
plantas, que les proporciona su
color verde y que absorbe la luz
necesaria para la fotosntesis.

Qu
causa?:

La abundancia de clorofila en hojas y

su ocasional presencia en otros
tejidos vegetales es la causa de que
esas partes de las plantas aparezcan
verdes, pero en algunas hojas la
clorofila es enmascarada por otros
pigmentos.

Clorofila
Por cromatografa se pueden separar cuatro clorofilas distintas:

Clorofila
A

Clorofila
B

Constituye de manera aproximada el 75% de

toda la clorofila de las plantas verdes,
estando presente tambin en las algas
verdeazuladas y en clulas fotosintticas
ms complejas.

Es un pigmento accesorio presente en

vegetales y otras clulas fotosintticas
complejas; absorbe luz de una longitud de
onda diferente y transfiere la energa a la
clorofila A, que se encarga de transformarla
en energa qumica.

Pigmentos Vegetales
Qu son?:
Son molculas qumicas que reflejan o
transmiten la luz visible, o hacen
ambas cosas a la vez. El color de un
pigmento depende de la absorcin
selectiva de ciertas longitudes de onda
de la luz y de la reflexin de otras.

Dnde se
encuentran?:
Estos pigmentos se encuentran en el
interior
de
la
clulas
vegetales
especficamente
en
una
organelo
llamada cloroplasto .

Pigmentos Vegetales
Por cromatografa se pueden separar 2 pigmentos diferentes:

Xantofila

Son
compuestos
qumicos
pertenecientes al grupo de los
carotenoides que poseen uno o ms
tomos de oxgeno en su estructura..

Caroteno
s

Son pigmentos de color no verde y

que poseen un alto contenido en
vitamina A, poseen una cadena
hidrocarbonada menor que la clorofila
y tienen una coloracin roja o
anaranjada

Por qu ocuparemos esta planta?

Todas los pigmentos presentes
en esta planta presentan un
grado diferente de solubilidad,
lo cual permite su separacin
cuando una solucin asciende
por capilaridad por una tira de
papel poroso (papel filtro), ya
que las ms solubles se
desplazarn a mayor velocidad,
pues acompaarn fcilmente
al disolvente a medida que ste
va ascendiendo.

Forma de las Bandas

Coloreadas
Mas desplazadas o con mayor longitud
cuando:

Cuanto mas solubles sean los pigmentos a

los que pertenecen

Mas anchas o con mayor grosor

cuando:

Cuanto mayor sea la abundancia de esos

en la muestra

Lo que se espera encontrar

Esperamos que al realizar

nuestra prctica nos quede
mas o menos como la
siguiente fotografa

Materiales
Materiales

Sustancias

Mortero con Pistilo

Papel Filtro

Alcohol Etilico

Matraz Aforado
Caja Petri
Embudo de Vidrio
Agitador

Hojas de Espinaca

Procedimiento
Paso No.1
Se trocean hojas de vegetales sobre
un mortero

Paso No.2
Se cubren con alcohol y con una cucharada
de arena y se trituran hasta lograr una
buen homogenizacin. De esta forma se
rompen las clulas y los pigmentos que se
hallaban encerrados en los cloroplastos
dentro de ellas pasan al alcohol.

Paso No.3
Se filtra el contenido del mortero
sobre un matraz.

Procedimiento
Paso No.4
Se vierte el filtrado en una placa Petri
y se coloca sobre ella un rectngulo
de papel de filtro doblada por la mitad
formando un ngulo.

Paso No.5
Esperamos hasta que el alcohol y los pigmentos vayan
ascendiendo por el papel producindose la separacin
cromatogrfica.

Paso No.6
En la disolucin extrada del vegetal tendremos tantos
pigmentos como bandas coloreadas aparezcan en la
cromatografa.

Finalmente:

Obtuvimos:
Xantfilas

Clorofila B

Clorofila A