ANLISIS INSTRUMENTAL

Dra. Ing. Gabriela Garca

Rodrguez
Semestre Agosto-Diciembre
2015

Bibliografa recomendada
1)

Skoog, D.A., Holler, F.J., Nieman, T. A. Principios de Anlisis Instrumental, 5ta.

Edicin, Mc Graw Hill.

2)

Skoog D.A., West D.M., Holler F.J. Qumica Analtica. Sexta Edicin. Editorial
McGraw Hill,1997.

3)

R. D. Beaty. Conceptos, Instrumentacin y Tcnicas en Espectrofotometra de

Absorcin Atmica. Perkin Elmer.

4)

Pavia, D. L., Lampman, G. M., Kriz, G. S. Jr. Introduction to Spectroscopy.

Philadelphia: Saunders College.

5)

Willard, H. H., Merritt, L. L., Dean, J.A., Settle, F.A. Mtodos Instrumentales de
Anlisis, Editorial CECSA.

6)

Silverstein, R. M., Bassler, C. G., Morril, T. C. Spectrometric Identification of

Organic Compounds. John Wiley & Sons.

7)

Harris, Daniel. Anlisis Qumico Cuantitativo.2nda. Edicin, Editorial Revert S.

A. Espaa,1999.

8)

Muoz, Cuauhtmoc. Prcticas de instrumentacin Analtica: Mtodos pticos.

1ra. Edicin, Editorial Limusa, Mxico.

9)

Pgina Web: www.cideteq.mx; www.relaq.mx

UNIDAD I
Generalidades del
Anlisis Instrumental

Qumica Analtica

Determinacin de la
composicin qumica
de la materia

Mtodo cualitativo
Informacin referente a especies atmicas o
moleculares o a grupos funcionales de una
muestra

Mtodo cuantitativo
Informacin numrica referente a cantidad relativa
de uno o varios de los componentes de una
muestra

CLASIFICACIN DE LOS
MTODOS ANALTICOS
Los mtodos analticos se suelen clasificar
en:
Clsicos (mtodos de qumica hmeda)
Instrumentales
Clasificacin histrica: los mtodos clsicos
precedieron en un siglo o ms a los mtodos
instrumentales.

Mtodos clsicos
Separacin de los componentes de inters de una
muestra (analitos), mediante:
Precipitacin
Extraccin
Destilacin
Anlisis Cualitativo
Los componentes separados se tratan con reactivos
originando productos que se pueden identificar por su
color, punto de ebullicin o de fusin, su solubilidad,
su olor, o alguna otra propiedad.
Anlisis Cuantitativo
La

cantidad

de

analito

se

determina

mediante

Mtodos instrumentales

Mtodos en anlisis instrumental

Cualitativo: de la medicin de una
propiedad se puede indicar la
presencia de un analito en una matriz.
Cuantitativo: la magnitud de la
propiedad medida es proporcional a la
concentracin del analito en la matriz.
Frecuentemente, el mismo mtodo
instrumental es usado para el anlisis
cualitativo y cuantitativo.

Diferencia entre mtodos

clsicos e instrumentales

Mtodos
clsicos:
basados
interacciones materia-materia, esto es,
reacciones qumicas. El analito
determina por medidas gravimtricas
volumtricas.

en
en
se
o

Mtodos instrumentales: basados en

interacciones materia-energa, utilizan un
instrumento ms o menos complejo para
evaluar una propiedad fsica o fsico-qumica
del sistema objeto de anlisis.
Un mtodo analtico se considera fsico

Propiedades fsicas y
qumicas

CLASIFICACIN DE LAS TCNICAS

INSTRUMENTALES
Se pueden clasificar con base en la naturaleza de la seal
analtica estudiada:
Emisin de radiacin
Cambio en las propiedades de un haz de radiacin que pasa
por la muestra (absorcin, dispersin, difraccin, rotacin)
Medida de propiedades elctricas (potencial, carga, corriente,
resistencia)
Otras (relacin masa/carga, velocidad
propiedades trmicas o radiactivas)

de

reaccin,

Los dos primeros grupos forman los mtodos pticos, los

siguientes dan lugar a los mtodos elctricos.

TIPOS DE MTODOS INSTRUMENTALES

Seal

Mtodos instrumentales

Emisin de radiacin

Espectroscopia de emisin (rayos X, UV, visible, de electrones);

fluorescencia, fosforescencia y luminiscencia (rayos X, UV y visible)

Absorcin de radiacin

Espectrofotometra y fotometra (rayos X, UV, visible, IR); espectroscopia

fotoacstica; resonancia magntica nuclear y espectroscopia de resonancia
de espn electrnico

Dispersin de la radiacin

Turbidimetra; nefelometra; espectroscopia Raman

Refraccin de la radiacin

Refractometra; interferometra

Difraccin de la radiacin

Mtodos de difraccin de rayos X y de electrones

Rotacin de la radiacin

Polarimetra; dispersin rotatoria ptica; dicrosmo circular

Potencial elctrico

Potenciometra; cronopotenciometra

Carga elctrica

Coulombimetra

Corriente elctrica

Polarografa; amperometra

Resistencia elctrica

Conductimetra

Razn masa a carga

Espectrometra de masas

Velocidad de reaccin

Mtodos cinticos

Propiedades trmicas

Conductividad trmica y mtodos de entalpa

Radiactividad

Mtodos de activacin y de dilucin isotpica

Para que la mayor parte de las propiedades de los

analitos se manifiesten, se requiere de una fuente de
energa que estimule una respuesta medible que
procede de la sustancia estudiada.
No siempre es fcil elegir el mtodo ptimo.
Tampoco

es

necesariamente

cierto

que

los

procedimientos instrumentales utilicen aparatos ms

sofisticados y ms costosos.

Procedimientos
instrumentales
Adems de los numerosos mtodos
contemplados
en
los
mtodos
pticos y electroqumicos, existe un
grupo
de
procedimientos
instrumentales que se utilizan para
separar y resolver compuestos
afines. La mayora de ellos estn
relacionados con la cromatografa y
la electroforesis.

Propiedades fsicas y
qumicas

INSTRUMENTO PARA EL ANLISIS

QUMICO

Transforma informacin relacionada con

propiedades fsicas o qumicas del analito en
una seal analtica

Convierte la seal analtica que no suele ser

detectable ni comprensible directamente por un
ser humano en una forma que s lo es
Dispositivo de comunicacin entre el
sistema en estudio y el analista o cientfico

Diagrama simple del proceso de medicin

instrumental

Estmulo

Fuente de energa
(electromagntica,
elctrica, mecnica o
nuclear)

Respuesta

Sistema
objeto de
estudio

Informacin
Analtica

La informacin resultante surge de la interaccin del estmulo con el analito.

Ejemplo: paso de una banda estrecha de longitudes de onda de luz visible a
travs de una muestra para medir la capacidad de absorcin del analito

COMPONENTES TPICOS DE UN INSTRUMENTO DE

ANLISIS
Medidor
o escala

Generador de
seales

Seal
analtica

Transductor
de entrada o
detector

Seal de
entrada
mecnica
o elctrica Procesador
de seales

Registra
dor

12,301

Unidad
digital

Transductor
de salida o
lectura

Generadores de seales
Produce una seal, mediante una fuente de energa, que
indica la presencia y, con frecuencia tambin, la
concentracin del analito.
En algunos casos, el generador de seal es un compuesto o
un ion generado a partir del propio analito.

Detectores (transductores de entrada)

Dispositivo que convierte un tipo de energa (o seal) en otro.
Ejemplos: termopar, que convierte una seal de calor radiante
en un voltaje elctrico; fotoclula o fotocelda, que convierte la
luz en corriente elctrica.
Los transductores que actan sobre una seal qumica se
denominan detectores.
La mayora convierten las seales analticas en un voltaje o
corriente elctricos que se amplifican o modifican fcilmente
para accionar un dispositivo de lectura.

Procesadores de seales

Modifican la seal transducida procedente del detector de tal

forma que se adece al funcionamiento del dispositivo de
lectura.
La modificacin ms comn es la amplificacin (un proceso
en el que la seal se multiplica por una constante mayor que
la unidad).
A menudo, adems de la amplificacin, las seales se filtran
para reducir el ruido, se atenan, se integran, se derivan o se
aumentan exponencialmente.

Dispositivos de lectura

Es un transductor que convierte una seal procesada en una

seal que puede ser entendida por un observador humano.
Generalmente, la seal transducida toma la forma de la
posicin de una aguja en un medidor de escala, de un trazo
en un registrador de papel, o de una serie de nmeros en una
pantalla digital.
En otras ocasiones, el dispositivo de lectura da directamente
la concentracin de analito.

Circuitos, dispositivos elctricos y

microprocesadores en los instrumentos
En los instrumentos analticos ms modernos, el detector
convierte la seal analtica en una elctrica que se procesa
de diversos modos y que despus se muestra mediante un
dispositivo de lectura.
Tambin emplean uno o varios dispositivos electrnicos
sofisticados, como amplificadores operacionales, circuitos
integrados, convertidores analgico-digitales y digitalanalgicos, contadores, microprocesadores y ordenadores.

EJEMPLOS DE COMPONENTES DE INSTRUMENTOS

Instrumento

Generador de seal
(Fuente de energa o
estmulo)

Seal analtica

Transductor de
entrada

Seal
transducida

Procesador de
seal

Lectura

Fotmetro

Lmpara de wolframio,
filtro de vidrio

Haz de luz
atenuado

Fotoclula

Corriente
elctrica

Escala de
medida

Medidor de
corriente

Espectrmetro de
emisin atmica

Llama

Radiacin UV o
visible

Tubo
fotomultiplicador

Potencial
elctrico

Amplificador,
desmodulador,
monocromador,
cortador

Registrador
sobre papel

Coulombmetro

Fuente de corriente
continua

Corriente de la
celda

Electrodos

Corriente
elctrica

Amplificador

Registrador
sobre papel

Medidor de pH

Muestra, electrodo de
vidrio

Actividad del
in hidrgeno

Electrodos de vidrio
y de calomelanos

Potencial
elctrico

Amplificador,
digitalizador

Unidad digital

Difractmetro de
rayos X para polvo

Tubo de rayos X, muestra

Radiacin
difractada

Pelcula fotogrfica

Imagen
latente

Revelador
qumico

Imgen
ennegrecida
en una
pelcula

Comparador de
color

Luz solar

Color

Ojo humano

Seal del
nervio ptico

Cerebro
humano

Respuesta
visual al color

Seleccin de un mtodo analtico

Eleccin
del mtodo

ETAPAS DE UN ANLISIS CUANTITATIVO

TPICO

Obtencin de una
Muestra representativa
Preparacin de
la muestra
Definicin de
repetibilidad
Eliminacin de
interferencias

Evaluacin de la
confiabilidad de los resultados
Medicin de la
propiedad del analito

Clculo de los
resultados

Consideraciones importantes en
los mtodos analticos
Aunque muchas veces es el instrumento el
elemento ms visible e impresionante del
mtodo analtico, solo es uno de los
componentes del anlisis total.
Antes de enfocar el papel de la instrumentacin
en un mtodo analtico, el analista debe
considerar otras etapas importantes para la
determinacin.

Seleccin de un mtodo analtico

Se requiere definir con claridad la naturaleza del
problema analtico, respondiendo las siguientes
preguntas:
1. Qu exactitud se requiere?
2. De cunta muestra se dispone?
3. En qu intervalo de concentraciones est el analito?
4. Qu componentes de la muestra interfieren?
5. Cules son las propiedades fsicas y qumicas de la

matriz de la muestra?
6. Cuntas muestras hay que analizar?

Seleccin de un mtodo analtico

Exactitud requerida: determina el tiempo y el esmero
que requerir el anlisis
Cantidad de muestra existente e intervalo de
concentracin del analito: determinan lo sensible
que debe ser el mtodo y el intervalo de concentracin
al que debe adaptarse
Componentes presentes en la muestra que
interfieren: determina la selectividad del mtodo
Propiedades fsicas y qumicas de la muestra:
influyen en la eleccin del mtodo
Nmero de muestras por analizar: condiciona la
seleccin desde el punto de vista econmico

Criterios de funcionamiento de los instrumentos:

parmetros de calidad
Criterios que se utilizan para decidir si un determinado
mtodo instrumental es o no adecuado para resolver un
problema analtico

Parmetros de calidad

Permiten reducir la eleccin de los instrumentos a

tan solo unos pocos

a) Criterios cualitativos para seleccionar mtodos

analticos

b) Criterios cuantitativos para seleccionar mtodos

analticos

Criterios cuantitativos para seleccionar mtodos

analticos

Precisin

La precisin de los datos analticos se define

como el grado de concordancia mutua entre los
datos que se han obtenido de una misma forma.
Mide el error aleatorio, o indeterminado de un
anlisis.

Precisin
Parmetros de calidad

Exactitud
La exactitud mide el error sistemtico, o determinado, de un
mtodo analtico.
Se define por la ecuacin:

exactitud x t
Donde es la media de la poblacin para la concentracin de
un analito de una muestra cuya concentracin verdadera es xt.
Para determinar la exactitud hay que analizar uno o varios
materiales estndar de referencia cuyas concentraciones de
analito se conozcan.
Los resultados contendrn tanto errores aleatorios como
sistemticos, a menos que se realicen suficientes anlisis para
que el error aleatorio se reduzca.

CURVA DE CALIBRACIN
Los mtodos clsicos son mtodos absolutos (se
relacionan con patrones bsicos, como el Kg, el
Amperio o el segundo; ejemplo: gravimetra) o
estequiomtricos (la determinacin se basa en la
relacin estequiomtrica de una reaccin entre el
analito y un agente valorante; ejemplo: volumetra).
Los mtodos instrumentales son mtodos relativos,
en los cuales se compara la seal analtica obtenida
para una muestra, con la seal obtenida con uno o
ms patrones.

El calibrado consiste en obtener una relacin

matemtica entre la seal analtica y la
concentracin/composicin de la muestra, siguiendo
un proceso en el que intervienen uno o ms patrones.
La funcin analtica encontrada podr utilizarse para
calcular la concentracin de un analito en una muestra
a partir de la seal instrumental obtenida.
En la prctica, y siempre que es posible, se prefiere
trabajar en una situacin de linealidad, en la cual la
ecuacin que relaciona la seal analtica y
concentracin es una lnea recta.

Calibrado directo a travs de Curvas de calibracin

Para construir una curva de calibracin se sigue el
siguiente procedimiento:
Se prepara una solucin estndar de la sustancia que se
desea determinar
Generalmente se hace una dilucin de la solucin anterior,
a una concentracin conveniente para trabajar (solucin
patrn)
De la solucin patrn se toman diferentes cantidades, de
tal forma que se tenga una serie de soluciones de
concentraciones diferentes y conocidas
Se agregan reactivos y se mide en un espectrofotmetro a
la longitud de onda analtica

Se grafican los valores de concentracin en funcin de

la absorbancia
Si al graficar no se obtiene una lnea recta debe
realizarse un ajuste matemtico

Sensibilidad
Definicin cualitativa de Sensibilidad:
Es una medida de la capacidad de un mtodo o
instrumento de discriminar entre pequeas diferencias
en la concentracin del analito (de diferenciar pequeas
variaciones en la concentracin del analito).

Dos Factores limitan la sensibilidad:

Pendiente de la curva de calibracin
Reproducibilidad
medicin.

precisin

del

sistema

de

Sensibilidad de calibracin
Definicin cuantitativa de Sensibilidad de calibracin:
Es la pendiente de la curva de calibracin del analito de
inters.
Representando una curva de calibracin:

S mc S bl
Donde:
S = seal medida
c = concentracin del analito
Sbl= seal instrumental de un blanco
m = pendiente de la lnea recta

Entre dos mtodos que tengan igual

precisin, ser ms sensible aquel cuya
curva de calibracin tenga mayor pendiente.

Qu grfica tiene mayor sensibilidad?

Sensibilidad analtica
Inconveniente de la Sensibilidad de calibracin:
No considera la precisin.
Mandel y Stiehler proponen la Sensibilidad analtica
definiendo la siguiente ecuacin:

ss

= sensibilidad analtica
m = pendiente de la curva de calibracin
ss = desviacin estndar de las seales o medidas

Sensibilidad analtica

La sensibilidad analtica posee la ventaja de ser

relativamente insensible a los factores de amplificacin.
Si se aumenta la ganancia de un instrumento por un
factor de cinco, el valor de m se incrementar en cinco
veces.
Este aumento vendr acompaado del correspondiente
aumento en ss, y por tanto, la sensibilidad analtica se
mantendr prcticamente constante.

Lmite de deteccin
Concepto de Lmite de deteccin:
Concentracin o peso mnimo de analito que puede
detectarse para un nivel de confianza dado.
Depende de:
La relacin entre la magnitud de la seal analtica y el
valor de las fluctuaciones estadsticas de la seal del
blanco.
A menos que la seal analtica sea mayor que la del
blanco en un mltiplo k de las variaciones del blanco
debidas a errores aleatorios, no ser posible detectar con
certeza la seal analtica.

La mnima seal analtica distinguible Sm se toma como

la suma de la seal media del blanco Sbl
ms un
mltiplo k de la desviacin estndar del mismo:

S m Sbl k bl
Donde:
Sm= seal mnima distinguible
Sbl = seal del blanco
bl = desviacin estndar del blanco
k = multiplicador
Experimentalmente Sm puede determinarse realizando
20 o 30 medidas del blanco.

Lmite de deteccin

Despus, los datos se tratan estadsticamente para

Sbl
obtener
y sbl . Al final, el lmite de deteccin,
se calcula de la siguiente manera:

S m Sbl
cm
m
Kaiser argumenta que un valor razonable para la
constante es igual a k=3, siendo el nivel de confianza de
la deteccin como mnimo de 98%.

Intervalo de concentracin aplicable

El intervalo til de un mtodo analtico va desde la
concentracin ms pequea con la que pueden realizarse
medidas cuantitativas (lmite de cuantificacin, LOQ)
hasta la concentracin a la que la curva de calibracin se
desva de la linealidad (lmite de linealidad, LQL).
Como lmite inferior de las medidas cuantitativas se
toma, en general, aquel que es igual a diez veces la
desviacin estndar cuando la concentracin del analito
es cero (10 x Sbl).
Para que un mtodo analtico sea aplicable, debera
tener un intervalo de al menos dos rdenes de magnitud.

Intervalo lineal

Intervalo de concentracin aplicable

Respuesta del instrumento

LOL

Cm

LOQ

Intervalo til

Concentracin

Relacin Seal-Ruido
Una MEDIDA ANALTICA INSTRUMENTAL
consta de dos componentes:
Informacin del analito
que interesa al qumico

SEAL

Informacin ajena no
deseada que degrada
la exactitud y la
precisin del anlisis,
aumentando el lmite
inferior de la cantidad
de analito que se
puede detectar.

RUIDO

EFECTO DEL RUIDO SOBRE UNA

SEAL ANALTICA

Corriente, A x 10-15

Corriente, A x 10-15

EFECTO DEL RUIDO EN UNA MEDIDA DE

CORRIENTE

Tiempo, horas
Registro grfico experimental
de una corriente continua de
0.9 x 10-15 A

Tiempo, horas
Media de las fluctuaciones

Relacin Seal-Ruido

Datos sin ruido nunca pueden obtenerse en el

laboratorio.
En la mayora de las medidas, el valor promedio de la
seal de ruido R es constante e independiente de la
magnitud de la seal total S.
Por ello, para seales pequeas el valor del ruido da
lugar a errores ms importantes que en el caso de
seales grandes.
En general, se considera imposible detectar seales
cuando la relacin S/R es menor de 2 3.

Relacin Seal-Ruido
Por tanto, para describir la calidad de un mtodo
analtico o el funcionamiento de un instrumento, la
relacin seal/ruido (S/R) es un parmetro de calidad
mucho mejor que el ruido solo.
Para una seal, la magnitud del ruido se define como la
desviacin estndar s del valor de la seal medida,
mientras que la seal viene dada por la media X de la
medida. S/N estar dado por:
S
media
X

R desviacin estndar s

Fuentes de ruido en los anlisis

instrumentales

Ruido qumico

Ruido Instrumental

Proviene de una multitud de

variables incontroladas que
afectan la qumica del sistema
analizado
(variaciones
en
temperatura y presin que
afectan el equilibrio qumico).
Se asocia a cada componente
del instrumento (a la fuente, al
transductor de entrada, a todos
los elementos que tratan la
seal y al transductor de
salida).

Ruido Instrumental

El ruido de cada uno de los componentes del

instrumento puede ser de distinto tipo y provenir de
distintas fuentes. Por lo que el ruido que acaba
percibindose es una mezcla compleja que no se puede
caracterizar por completo.
Su origen puede relacionarse con fenmenos elctricos
del propio instrumento o en variaciones en la radiacin
electromagntica del ambiente que es recogida por los
componentes del instrumento (ruido ambiental).

Aumento de la relacin entre Seal y

Ruido
Es imposible eliminar completamente el ruido, pero es
posible minimizar su efecto aumentando la relacin S/N
tanto a nivel de hardware (empleando componentes
que eliminan o atenan el ruido sin afectar a la seal
analtica), como de software (empleando programas
informticos capaces de separar las seales analticas
de un entorno ruidoso).

VALIDACIN DE UN
PROCEDIMIENTO ANALITICO
Procedimiento para establecer por medio de estudios
laboratoriales una base de datos que demuestren
cientficamente que un mtodo analtico tiene las
caractersticas de desempeo que son adecuadas para
cumplir los requerimientos de las aplicaciones analticas
pretendidas.
Implica la demostracin de la determinacin de las
fuentes de variabilidad y del error sistemtico y al azar
de un procedimiento, no solo dentro de la calibracin
sino en el anlisis de muestras reales.

Calibracin en Anlisis Instrumental

Segn la ISO (International Standard Office), la

calibracin se define como el conjunto de operaciones
que permiten establecer, en determinadas condiciones
experimentales, la relacin existente entre los valores
indicados por el aparato o instrumento, con los valores
obtenidos en la medida de valor conocido del analito.

CALIBRACIN DE LOS MTODOS

INSTRUMENTALES
Los mtodos clsicos son mtodos absolutos (se
relacionan con patrones bsicos, como el Kg, el
Amperio o el segundo; ejemplo: gravimetra) o
estequiomtricos (la determinacin se basa en la
relacin estequiomtrica de una reaccin entre el
analito y un agente valorante; ejemplo: volumetra).
Los mtodos instrumentales son mtodos relativos,
en los cuales se compara la seal analtica obtenida
para una muestra, con la seal obtenida con uno o
ms patrones.

El calibrado consiste en obtener una relacin

matemtica entre la seal analtica y la
concentracin/composicin de la muestra, siguiendo
un proceso en el que intervienen uno o ms patrones.
La funcin analtica encontrada podr utilizarse para
calcular la concentracin de un analito en una muestra
a partir de la seal instrumental obtenida.
En la prctica, y siempre que es posible, se prefiere
trabajar en una situacin de linealidad, en la cual la
ecuacin que relaciona la seal analtica y
concentracin es una lnea recta.

Los tres mtodos de calibrado aplicables son:

Calibrado directo a travs de Curvas de
calibracin: obtencin de la funcin analtica
mediante la medida de patrones y clculo de la
concentracin de analito por interpolacin.
Mtodo de estndar externo: adicin a una muestra
de cantidades crecientes de patrn y clculo de la
concentracin de analito por extrapolacin.
Mtodo de estndar interno : similar al calibrado
directo, pero aadiendo un patrn interno a las
disoluciones patrn y a la muestra, con el fin de
compensar posibles fluctuaciones en la seal
analtica.

Calibrado directo a travs de Curvas de calibracin

Para construir una curva de calibracin se sigue el
siguiente procedimiento:
Se prepara una solucin estndar de la sustancia que se
desea determinar
Generalmente se hace una dilucin de la solucin anterior,
a una concentracin conveniente para trabajar (solucin
patrn)
De la solucin patrn se toman diferentes cantidades, de
tal forma que se tenga una serie de soluciones de
concentraciones diferentes y conocidas
Se agregan reactivos y se mide en un espectrofotmetro a
la longitud de onda analtica

Se grafican los valores de concentracin en funcin de

la absorbancia
Si al graficar no se obtiene una lnea recta debe
realizarse un ajuste matemtico

Mtodos de mnimos cuadrados

Es un mtodo matemtico utilizado para ajustar, a una
lnea recta, una serie de puntos o valores cuando se
presentan algunas desviaciones. Se basa en la ecuacin
de la lnea recta:

Y mX b
En donde:
Y = son los datos determinados o valores a ajustar
m = la pendiente
X = son valores o datos conocidos
b = es la ordenada de origen

Frmulas para el ajuste

XY

X Y

C X

Y m X

b
n

Coeficiente de determinacin

n XY X Y

2
2
2
2
n X X n Y Y
2

Para calcular el coeficiente de correlacin (r),

simplemente a la expresin anterior se le saca raz
cuadrada, y deber ser: r 0.99
RESOLVER PROBLEMAS

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

Es especialmente til para analizar muestras
complejas en las que es muy probable que se
produzcan efectos debidos a la matriz.
La forma ms comn de aplicacin consiste en la
adicin de diferentes volmenes de una disolucin
patrn a varias alcuotas de la muestra del mismo
tamao. Este proceso se conoce como adicin de
muestra (spiking).
Cada alcuota se diluye a un volumen fijo antes de
efectuar la medida.

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

El trmino matriz se refiere al conjunto de los
distintos componentes que constituyen una
muestra analtica.
La matriz incluye, adems del analito, todos los
dems componentes de la muestra a los que a
veces se les llama concomitantes.

Cuando la cantidad de muestra es limitada, las

adiciones estndar se pueden llevar a cabo por
adiciones sucesivas de volmenes del patrn a un
nico volumen del problema exactamente medido.
Las medidas se van haciendo en la muestra
original y despus de cada adicin del patrn en
la muestra.
En la mayora de las versiones de este mtodo, la
matriz de la muestra es casi idntica despus de
cada adicin y la nica diferencia es la
concentracin de analito, o la concentracin de
reactivo en caso de aadir un exceso de alguno.

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

En este mtodo varias alicuotas idnticas V x de la
disolucin problema con una concentracin c x se
transfieren a matraces aforados de volumen V r.
A cada uno de ellos, se le aade un volumen
variable (Vs, ml) de una disolucin patrn del
analito con una concentracin conocida c s.
Se aaden los reactivos adecuados y cada
disolucin se diluye hasta un volumen
determinado.

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

Se realizan las medidas instrumentales en cada
una de las disoluciones dando una seal S en el
instrumento.
Si la respuesta del instrumento es proporcional a
la concentracin, se puede escribir:

kVsc s kVxc x
S

Vt
Vt
donde k es una constante de proporcionalidad.

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

La representacin de S en funcin de Vs es una
lnea recta de la forma:

S mVs b
donde la pendiente m y la ordenada en el origen b
vienen dadas por:

kcs
m
Vt

kVxc x
b
Vt

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

Para determinar m y b puede utilizarse el mtodo
de mnimos cuadrados; cx se puede obtener a
partir de la relacin entre estas dos cantidades y
los valores conocidos de cs, Vx y Vs.
De esta manera:

b kVxc x / Vt

m
kV

b kVxc x / Vt Vx c x

m
kcs Vt
cs

bc s
cx
mVx

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

Se puede dibujar manualmente una grfica de los
datos, y la parte recta de la misma se extrapola
hasta el origen.
La diferencia entre el volumen aadido de patrn
en el origen (cero) y el valor del volumen en el
punto de interseccin de la lnea recta con el eje
de las x (Vx)0, es el volumen de patrn que
equivale a la cantidad de analito en la muestra.

MTODO DEL ESTANDAR EXTERNO

La interseccin con el eje de las x corresponde a
la seal cero del instrumento, as que se puede
considerar:
kVsc s kVxc x
S

0
Vt
Vt

Resolviendo:

( Vs )0 c s
cx
Vx

MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

En un anlisis, un patrn interno es una
sustancia que se aade a todas las muestras,
blancos y patrones de calibrado en una cantidad
fija.
Tambin puede ser un componente mayoritario
de las muestras y los patrones, pero que est en
una concentracin lo suficientemente elevada
para considerarla la misma en todos los casos.

MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

El calibrado es una representacin grfica del
cociente entre la seal del analito y la seal del
patrn interno, en funcin de la concentracin de
analito de los patrones.
Este cociente se utiliza para determinar la
concentracin de analito a partir de la curva de
calibrado.

Si se usa adecuadamente un patrn o

estndar interno (IS), se pueden compensar
algunos errores aleatorios y sistemticos.
Si las seales del analito y del patrn interno
tienen una respuesta proporcional al error
aleatorio instrumental y a las fluctuaciones del
mtodo, la relacin entre dichas seales es
independiente de dichas fluctuaciones.
La mayor dificultad es encontrar un patrn
interno adecuado, con seal reproducible y
que genere una seal similar a la del analito

El patrn interno deber dar una seal similar

a la del analito, pero lo suficientemente
diferente como para que ambas seales sean
claramente diferenciables por el instrumento.
Se debe asegurar la ausencia de patrn
interno en la matriz de la muestra, de tal forma
que la nica procedencia del patrn sea la
cantidad aadida.
Ejemplo: el litio es un patrn interno adecuado
para las determinaciones de sodio o potasio
en suero sanguneo.

MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

Analito
Patrn
Interno