TEJIDOS

CULTIVOS
CELULARES

PRESENTADO POR:
ROXANA MARGARITA MIER CAAZ
MILAGRO BARANDICA MORALES
YULITH MARCELA MIER CAAZ
LIZETH MEJA MENDOZA

HISTORIA
Wilhelm Roux en 1885 cultivo clulas de embrin
de pollo en solucin salina durante algunos
das.
Harrison en (1907), realiz cultivos de medula espinal
embrionaria de anfibios.
Burrows en 1910 utilizo plasma para nutrir los
explantes de clulas embrionarias de pollo

Carrel en 1913 demostr la posibilidad de mantener

clulas de embrin de pollo, a un tiempo superior al de la
vida del animal, mantuvo las clulas durante 34 aos.

Frasco de Carrel

Rous-Jones en 1916 emplearon por primera vez extractos

enriquecidos con tripsina para disociar las clulas de
embrin de pollo, estableciendo el primer cultivo celular
propiamente dicho.

1940 con la produccin de antibiticos se

estabilizaron los cultivos celulares durante mas
tiempo.
Bacterias y hongos no permita la proliferacin de
clulas.

 En 1961, Hayflick y Moohead demostraron que a

partir de clulas de tumores humanos Se pueden
generar lneas celulares.
1952 Gey, Coffman y Kubicek, establecieron la
primera lnea celular continua. Clulas Hela
Henrietta Lacks

Hela

 1952 se desarrollaron las primeros

medios de cultivo qumicamente
definidos.
Eagle
MBE

RPMI
1640

Medio
199

DMEN
MEME

CULTIVOS DE
TEJIDOS
Conjunto
de
Tcnicas
que
permiten
el
mantenimiento de clulasin vitro, con una gran
aproximacin a sus propiedades y funciones in vivo
conservando
al
mximo
sus
propiedades
fisiolgicas, bioqumicas y genticas.
El cultivo de tejidos incluye:
Cultivos de rganos: Es el desarrollo de
pequeos fragmentos de tejidos o de rganos.
Cultivos de Clulas: Las clulas se dispersan
por medios mecnicos o enzimticos y son
propagadas en suspensin o sobre vidrio o
plstico.

El cultivo de tejidos
requiere de un
ambiente esterilizado y
un medio que contenga
agua, suero sanguneo
y todos los nutrientes
para mantener las
clulas vivas y
permitirles crecer fuera
del cuerpo.

CULTIVO DE CLULAS
Se define como el conjunto de
tcnicas de aislamiento de
clulas
y
obtencin
de
poblaciones celulares in vitro,
manteniendo al mximo sus
propiedades
fisiolgicas,
bioqumicas y genticas.

TIPOS DE CULTIVOS
CELULARES

CULTIVO DE RGANOS
Se coloca el rgano sobre una rejilla
situada en la interfase lquido-gas de
un medio.
Se conservan las interacciones
histolgicas por lo que representan
una buena rplica del tejido de
origen.
Sin embargo, no crecen mucho y no
se pueden propagar.
Se necesita un nuevo explante para
cada experimento.

EXPLANTES PRIMARIOS
Se coloca un fragmento
tejido o de rgano en
interfase slido-lquido
un soporte de vidrio o
plstico.

de
la
de
de

Las clulas se adhieren a

la superficie y las clulas
de la periferia del explante
pueden migrar y proliferar
por
la
superficie
del
soporte.

CULTIVO CELULAR PRIMARIO

Es el tipo de cultivo ms utilizado.
Es un cultivo derivado
directamente de un tejido u
rgano.
Las clulas son capaces de
proliferar y la poblacin celular
crece notablemente.

CULTIVO CELULAR
PRIMARIO

Pasos:
Aislamiento del
tejido de inters.
Disociacin mecnica
y enzimtica del
tejido.
Obtencin de la
suspensin celular.
Siembra en soporte
adecuado para la
proliferacin en
monocapa o en
suspensin.

SUBCULTIVOS
Una vez que el
cultivo alcanza la
confluencia (mxima
proliferacin posible
en el soporte en que
se encuentra), es
necesario tomar una
porcin clulas y
transferirlas a un
nuevo soporte
(repique o pasaje).

TIPOS DE CULTIVO
CELULAR PRIMARIO
Cultivos en monocapa
Las clulas crecen adheridas sobre un
soporte. Es el mtodo utilizado para la
mayora de las clulas. Para despegar
las clulas se utilizan enzimas como la
tripsina y colagenasa.

TIPOS DE CULTIVO
CELULAR PRIMARIO
Cultivos en suspensin:
Las clulas se encuentran dispersas en el
medio de cultivo. Alcanzan la confluencia
cuando el nmero de clulas es grande y los
nutrientes son insuficientes. El repique se
realiza mediante una dilucin de la
suspensin celular.

CELULAS EN MONOCAPA

Tomado de: Slidesplayer.es/slide/1608456/

LNEAS CELULARES
Las clulas del cultivo primario en monocapa se
dispersan por mtodos enzimticos y se pasan a
un nuevo frasco de cultivo.
En el caso de clulas en suspensin, sencillamente
se diluyen en medio fresco. Los sucesivos cultivos
as formados se denominan una lnea celular.
La formacin de una lnea celular a partir de un
cultivo primario implica que: Aumenta el nmero
de clulas obtenidas, la poblacin celular se hace
uniforme y homognea, sus caractersticas se
conservan durante las sucesivas generaciones.

EJEMPLO DE LINEAS
CELULARES

CULTIVOS HISTOTPICOS
Y ORGANOTPICOS
Los cultivos histotpicos son cultivos de un solo tipo celular
que consigue alcanzar una elevada densidad celular.
Los cultivos organotpicos constan de varios tipos celulares
que interaccionan entre s de una forma que intenta
parecerse lo ms posible a la clula original.
El objetivo final de este tipo de cultivos es la creacin in
vitro de tejidos u rganos completamente funcionales que
puedan ser utilizados en injertos o en trasplantes.

VENTAJAS Y
LIMITACIONES
Las principales ventajas de la utilizacin de las tcnicas de cultivo
de tejidos son:
Control del medio extracelular
Homogeneidad de la muestra.
Disminucin del gasto, por disminucin de tiempo y materiales.
Disminucin de la necesidad de realizar ensayos in vivo.
Pero tambin existen limitaciones como:
Excesiva sensibilidad.
Lmite de produccin
Inestabilidad
Validacin del modelo

APLICACIONES DEL CULTIVO

CELULAR
Para el estudio de clulas especficas, cmo crecen,
qu necesitan para su crecimiento, cmo y cuando
dejan de crecer.
Para investigaciones sobre el ciclo celular, el
control del crecimiento de clulas tumorales y la
modulacin de la expresin gentica.
Para la bsqueda de modelos experimentales.
Para la insercin de genes extraos en las clulas
receptoras (animales transgnicos).

Las Colecciones de Cultivos a

nivel internacional

La Federacin
Internacional de
Colecciones de
Cultivo (WFCC):
Constituye una nica
red global para la
preservacin ex situ de
la diversidad
microbiana que

La Federacin
Latinoamericana de
Colecciones de Cultivos
(FELACC):
Organismo dedicado a
promover acciones de
inters para colecciones de
cultivo de Amrica Latina y
El Caribe, en su funcin de
preservar ex situ la

MUCHAS GRACIAS

BIBLIOGRAFA
http://histolii.ugr.es/jmgarcia/cultivos/cultivos.pdf
http://www.ehu.eus/biofisica/juanma/mbb/pdf/cultivo_
celular.pdf
http://
www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioqui
mica/libros/celular/cultivos.htm
http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Cultivos%
20celulares%20I%20Euge.pdf
http://www.ehu.eus/biofisica/juanma/mbb/pdf/cultivo_c
elular.pdf