Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

INGENIERA QUMICA
LCB III
(QUMICA ORGNICA)
CROMATOGRAFA: Extraccin y Separacin de
Pigmentos Vegetales
Andrade Quiroz Kimberly
Prez Montes Jairo
3304
20 Octubre 2015
profesora: Mara Eugenia Ibarra H.

Introduccin

La cromatografa es uno de los principales mtodos para la

separacin de especies qumicas estrechamente relacionadas en
mezclas complejas. La cromatografa es un mtodo fsico de
separacin basado en la distribucin de los componentes de una
mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra
mvil.

En todas las separaciones cromatografas la muestra se disuelve

en una fase mvil, que puede ser un gas un lquido o un fluido
supercrtico. Esta fase mvil se hace pasar a travs de una fase
estacionaria inmiscible, la cual se mantienen fija en una columna
o sobre una superficie slida. Las fases se eligen de tal forma que
los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto
entre la fase mvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes
que son retenidos con ms fuerza por la fase estacionaria se
mueven lentamente con el flujo; por el contrario los componentes
que unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con
rapidez

 Clasificacin:
Las

distintas tcnicas cromatrogrficas se pueden

dividir segn como est dispuesta la fase
estacionaria:
Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita
sobre una placa plana o sobre un papel.
Cromatografa en papel
Cromatografa en capa fina
Cromatografa en columna. La fase estacionaria se
sita dentro de una columna. Segn el fluido
empleado como fase mvil se distinguen:
Cromatografa de lquidos
Cromatografa de gases
Cromatografa de fluidos sper-crticos

Objetivos
Extraer

el pigmento de un producto natural

(espinacas), haciendo usa de la tcnica mas
adecuada
Elegir mediante cromatografa en capa fina el
eluyente o mezcla de eluyentes ideales para
separar los diferentes pigmentos de un producto
natural por cromatografa en columna
Separar
por medio de cromatografa por
columna los pigmentos vegetales
Verificar por cromatografa en capa fina si se
logro la separacin de los pigmentos por
cromatografa en columna

HIPTESIS:

Una vez extrado el pigmento a utilizar y gracias a la previa

realizacin discontinua y la eliminacin del disolvente utilizado
mediante el uso del rotavapor, se realizar la cromatografa en
capa fina, con el fin de encontrar el eluyente o mezcla de estos
que mejor separen los pigmentos, en la cual se espera encontrar
4 pigmentos diferentes, los cuales son las xantofilas (amarillo),
clorofilas (verde-azulado), clorofila (verde amarillento) y el
caroteno (naranja), ya que los pigmentos antes mencionados
dan el color caracterstico a la espinaca.
Si se Encuentra el eluyente o la mezcla que mejor separe los
pigmentos presentes en la espinaca, entonces se continuar con
la cromatografa en columna donde se obtendrn los cuatro
pigmentos ya mencionados; siendo la clorofila la mas
predominante ya que constituye aproximadamente el 75% de la
composicin de la espinaca.

MATERIAL:
Mortero con pistilo*Columna para
Equipo:
Bascula granataracromatografa
Parrilla de
Pinzas de doble
Vidrio de reloj
calentamiento
presin
Vaso de
Recirculador del
Mangueras
precipitado
agua
Tubos de ensayo
Pinzas de tres
Rotavapor
Gradilla
dedos
Bomba de vaco
Soporte universal
Lmpara de luz UV
Refrigerante recto
Reactivos:
Disolventes:
Agitador
Extracto de espinacas
Hexano
Embudo tallo corto
Etanol al 95%
ter de petrleo
Matraz Erlenmeyer
Gel de slice
Benceno
Matraz bola fondo
NaCl
Cloruro de
plano
metileno
Pipetas graduadas
Cloroformo
Frascos mbar
Acetato de etilo
Embudo de
Acetona
extraccin
Propanol
Anillo metlico
Etanol
*Cmara
Metanol
cromatografa
Agua
Portaobjetos
cido actico

Extraccin de los Pigmentos

INTRODUJO

5g de
concentrado de
espinaca

AADI

10mL de etanol al
95%, calentar
durante 5 minutos

FILTR

Mezcla caliente

VACI

filtrado

DEVOLVI

residuo slido

AADI

10mL de cloruro
de metileno

CALENT A REFLUJO durante 3 o 4 minutos

FILTR

Aadir el filtrado
al obtenido
previamente

REPITI

VACIARON

AADI

PAS

2 o 3 veces la
extraccin con
ms cloruro de
metileno

extractos

Mililitros de
disolucin salina
saturada
La capa
inferior
coloreada al
cloruro de
metileno

EVAPOR

GUARD

el disolvente en el rotavapor

la disolucin orgnica
en un frasco mbar
pequeo
Cromatografa en Capa Fina

PREPAR

papilla de gel de slice

REALIZ

placas cromatogrficas

ACTIVARON

APLICARON

SUMERGIERON

INTRODUJO

en la mufla 100C durante 20 minutos

2 gotas (0.2mm) de
extracto en forma de
mancha

cmara cerrada
que contiene el
disolvente

un trozo de papel filtro

FASE MVIL

RETIR LA PLACA

CALCUL DE

Ascendi por capilaridad

una vez avanzada una

distancia conveniente

CROMATOGRAFA EN
COLUMNA

ARM

el sistema (la columna cromatogrfica)

COMPRIMI

CUBRI

VACI

un trozo de algodn en el
fondo de la columna

con

una capa de (1cm)

gel de slice 20cm (en polvo)

CUBRI

ADICION

HOMOGENIZ

AGREG

con 1cm

disolvente (hexano)

evitar que la columna se

quede sin disolvente,
evitar que se cuartee

1mL de pigmento

ADICION

disolvente, en el orden indicado

SEPARACIN

de diferentes pigmentos al
agregar los disolventes

OBTENCIN

diferentes coloraciones

VERIFIC

por C.C.F. si la separacin se

llev a cabo exitosamente

PLACA INCOLORA revelar mediante luz UV

RESULTADOS C.C.F:
Disolven
te

Hexano

Benceno

ter de Benceno
petrleo -Acetato
de etilo

Placa

Disolvent
e

Acetato
de etilo

Metanol

Placa

Cloruro
de
metileno

Clorofor
mo

Disolvent
e
(combina
ciones)

BencenoAcetato
de etilo
(2:1)

BencenoCloruro
de
metileno
(2:1)

Placa

Cloruro
de
metileno
-Acetato
de etilo
(2:1)

Benceno(
2.6)Acetato
de
etilo(2.4)

RESULTADOS C.C.:
Cloruro de metileno -Acetato de etilo (2:1)

Anlisis de resultados
Existieron

inconvenientes que
alteraron
nuestros
resultados
como por ejemplo la distribucin
de nuestra muestra en el papel
( afectando su corrimiento)
Factores ambientales como calor
o
una
buena
cmara
de
cromatografa que afectan a la
fase mvil disminuyendo su
cantidad
al
vaporizarse
o
deteriore de la fase estacionaria.

Conclusiones
la

cromatografa se usa para separar los pigmentos y

colores a partir de un diluyente dependiendo de el
pigmento o el color
Se observo en este experimento que por medio de la
cromatografa es posible identificar de que
sustancias esta compuesta una mezcla
Los componentes que se desearon separar depende
de3 la afinidad que tenga con la fase mvil y la
polaridad
Como futuros ingenieros qumicos es importante
conocer y desarrollar los mtodos cromatograficos y
realizarlos de manera adecuada para aplicaciones en
el rea profesional como la industria o investigacin.

BIBLIOGRAFA
Pavia

D. L., Lampman G. M., Kriz G. S.,

Introduction to Organic Laboratory Techniques,
Saunders College, Fort Worth, 1988.

Experimental

Organic Chemistry 3th Edition.

Gilbert & Martin. Harcourt, pp. 171

Domnguez

X. A., Domnguez S. X. A., Qumica

Orgnica Experimental, Limusa-Noriega,
Mxico, 1990.