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Les biofilms bactriens

on
Un biofilm est une communaut de microorganismes
(bactries, champignons etc.) adhrant entre eux, fixe
une surface ( bactries dites sessiles) , et caractrise par la
scrtion d'une matrice adhsive et protectrice.
Ils sont naturellement rsistants aux antibiotiques
Ils sont lorigine de nombreuses infections chroniques

LES BIOFILMS
Le mode de vie en biofilm est l'une des deux modalits de
vie des organismes unicellulaires
1/ mode de vie naturel de la plupart des microorganismes,
(notamment en milieu hostile)
2/ mode de vie de la flottaison libre de type dit
planctoniques dans un milieu liquide.
La structure et la physiologie du biofilm donne aux bactries
ce que lorganisation tissulaire apporte aux cellules des
tres suprieurs.

LES BIOFILMS
Ils peuvent se dvelopper sur n'importe quel type de
surface naturelle (dbris cellulaires, squestres) ou
artificielle (prothse, sonde, cathter) mais aussi
sur des tissus vivants (endocardites)
La matrice du biofilm, est constitue de
polysaccharides (peptidoglycanes, cellulose)
imbibe d'eau.

LES BIOFILMS:
adaptation phnotypiques et gnotypiques
Un aspects majeurs des biofilms est le changements dans les
phnotypes correspondant au changement du mode de vie de
planctonique et individuel , celui de fix et communautaire .
Des groupes de gnes (>103 ) changent leurs mcanismes d'activation
pour assurer cette permutation de style de vie (en quelques minutes).

L'environnement particulier du biofilm permet ( ou oblige ) les bactries


cooprer ensemble ce qui nest pas le cas dans un environnement
libre.

Les bactries vivant dans un biofilm ont des proprits trs diffrentes
de celles des bactries isoles de la mme espce.

Protection des bactries dans un biofilm


1. Protection passive
La matrice protge physiquement les bactries contre l'entre des
agents antimicrobiens, les dtergents et les antibiotiques.

2. Protection mtabolique.

les bactries entoures de biofilm sont moins actives


mtaboliquement, donc moins rceptives aux agents antimicrobiens

3. Protection active
--La rsistance de P. aeruginosa aux antibiotiques a t attribue
des pompes defflux du biofilm expulsant activement les
composants antimicrobiens.

4. Protection gntique

-- lors de leur implantation dans un biofilm l'expression gntique


des bactries peut tre est modifie. Lenvironnement du biofilm est
propice aux changes de matriel gntique et permet le transfert

Le cycle de vie dun biofilm

Center for Biofilm engineering, Montana State University


www.erc.montana.edu/default.htm

Les biofims sont la cause


dinfections chroniques

Biofilm: une cause dinfection chronique

Les bactries planctoniques


peuvent tre limines par les
mcanismes de dfense naturels
(anticorps, phagocytes) et elles
sont sensibles aux antibiotiques
Antibiotic
Antibody Planktonic cell
Biofilm cell
Phagocyte enzymes

Biofilm:une cause dinfection chronique

Les bactries peuvent adhrer entre


elles pour former un biofilm
notamment sur une surface inerte;
cette communaut, sessile, est
rsistante aux anticorps, aux
phagocytes et aux antibiotiques

Antibiotic
Antibody Planktonic cell
Biofilm cell
Phagocyte enzymes

Biofilm: une cause dinfection chronique

Les phagocytes sont attirs par les


biofilms.
La phagocytose est inoprante
mais les enzymes phagocytaires
sont libres localement
Antibiotic
Antibody Planktonic cell
Biofilm cell
Phagocyte enzymes
13

JW Costerton (1999) Science, 284:1318-1322

Biofilm: a cause of persistent infection


Les enzymes phagocytaires vont endommager
les tissus autour du biofilm et des bactries
planctoniques vont essaimer du biofilm
Cette libration peut tre la cause dune
dissmination de linfection et dune infection
aigu dans un tissu voisin

Antibiotic
Antibody Planktonic cell
Biofilm cell Phagocyte enzymes

In vivo, les biofilms se prsentent sous la forme dagrgats


de dimension limites (5-200m) et non de films

Ce nest quen cas de corps trangers (cathter) que le biofilm


pourra se dvelopper comme dans les situations16in vitro

Biofilm: action dun antibiotique

A gauche, developpement dun biofilm (plaque verte); droite action de la


tobramycine (100g/mL pendant 24h) qui tue les bactries priphriques
(zone jaune) mais natteint pas les bactries centrales (points verts)

Les Biofilms et leur biologie

Biofilm bactrien & risque infectieux


Les infections classiques sont dues des
bactries planctoniques contre lesquelles les
antibiotiques sont actifs

Biofilm bactrien & risque infectieux


De plus en plus dinfections, notamment chez
les sujets dbilits, sont dues des bactries
commensales du corps ou de lenvironnement
ces bactries forment des biofilms

Infections associes des biofilms


1. Infections ou maladies
caries dentaires
Otite moyenne
Ostomylites
Prostatites
2. infections nosocomiales
Sutures

lentilles de contact

cystite associe une sonde urinaire


Sonde endotrachale
Cathter central veineux
Prothse orthopdiques

Ostomylite & biofilm

A broche a t mise 3 mois avant cette radio et on notera le dvelop-pement dune ostomylite avec la prsence dun gros squestre;
B, 2 ans plus tard aprs un traitement chirurgical de la fracture, mise
dune plaque et et une strilisation de la zone

infections associes des biofilms


Mammite Staphylococcus aureus
Phnotype planctonique

Expression des
facteurs de virulence

Phnotype en biofilm

Expression des gnes


25
de sessilit

La plaque dentaire est un biofilm

Infection du pturon donnant un biofilm

Biofilm: aspects
thrapeutiques

PL Toutain Ecole Vtrinaire Toulouse

28

Biofilm: aspects thrapeutiques


Les antibiotiques ont une actions symptomatiques sur
les infections lies aux biofilms car ils dtruisent
uniquement les bactries planctoniques qui essaiment
de faon programme mais ils ne peuvent pas
radiquer les bactries du biofilm
Le biofilm toujours prsent est lorigine de la
rcurrence des symptmes larrt du traitement
Recours la solution chirurgicale quand elle est possibles
(squestres, ostomylite etc.)
PL Toutain Ecole Vtrinaire Toulouse

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Biofilm: test de sensibilit


Les pathognes semblent normalement sensibles aux
antibiotiques car les techniques conventionnelles ne testent
que les bactries planctoniques
Ncessit dune valuation approprie de la sensibilit des
bactries
CMIB: CMI du biofilm
( BMIC= Biofilm Minimal Inhibitory Concentration) ,

sensibilit des bactries libres par le biofilm.

CMEB : Concentration Minimale dEradication du Biofilm


(MBEC= Minimal Biofilm Eradication Concentration,)
Sensibilit des bactries dans le biofilm

valuation de la sensibilit bactrienne pour les


biofilms
Systme 96 puits pour tester
des biofilms

MBEC High-throughput
Screening - (HTP) Assay

MBEC

35

Diffrences entre les CMI & CMI-Biofilme


pour la pnicilline

g/ml

Melchior et al 2006

Le cas des staph aureus internaliss ;


il faut attendre le turnover naturel des PNN pour
voir ressortir le germe et latteindre avec un
antibiotique conventionnel