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MTODOS

INSTRUMENTALES
DE ANLISIS

UAGRM

ANLISIS INSTRUMENTAL

TERMINOLOGIA
Anlisis : proceso que proporciona informacin fsica o qumica acerca de
los componentes de una muestra o de la propia muestra
Analitos : Componentes que interesan de una muestra.
Matriz: Todos los componentes de una muestra que no son analitos
Determinacin : Anlisis de una muestra para identificar la identidad,
concentracin o propiedades del analito.
Medida : Determinacin experimental de las propiedades qumicas o
fsicas de una analito
2

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Tcnica : Principio fsico o qumico que puede emplearse para analizar una
muestra.
Mtodo : Medio para analizar una muestra a fin de hallar un analito dado en
una matriz especfica
Procedimiento : Instrucciones escritas que sealan la forma de analizar una
muestra.
Protocolo: conjunto de instrucciones escritas especificadas por un organismo
para analizar una muestra

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Clasificacin de los mtodos


analticos

Los mtodos analticos producen informa


INFORMACION ANALITICA: Declaracin relacionada con cualquier
propiedad qumica, fsica, o biolgica denominada propiedad analtica,
analtica
producida en conexin con la informacin qumica del material
analizado

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Clasificacin de los mtodos


analticos
Punto de vista histrico
mtodos clsicos e instrumentales

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Clasificacin de los mtodos


analticos
Mtodos clsicos
Gravimetra
Volumetra
Mtodos instrumentales

Espectroscpicos
Trmicos
Electromtricos
Separacin
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ANLISIS INSTRUMENTAL

Eleccin de un mtodo analtico


1. Qu exactitud se requiere?
2. Cuntas muestras se tiene?
3. Cul es el intervalo de concentracin
del analito?
4. Qu componentes de la muestra
podran causar interferencia?
5. Cules son las propiedades fsicas y
qumicas de la matriz de la muestra?
6. Cuntas muestras se analizarn?

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Calibracin de mtodos
instrumentales

Comparacin con estndares


Calibracin de un estndar
externo

Mtodos de adicin estndar


Mtodo del patrn interno

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PROPIEDADES DE LA
RADIACION
ELECTROMAGNETICA

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Onda Electromagntica
Radiacin electromagntica
Espectro electromagntico
Espectroscopia

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Onda electromagntica

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Qu es una onda?
Es una perturbacin de alguna propiedad de un
medio, que se propaga a travs del espacio
transportando energa

El medio perturbado puede ser de naturaleza


diversa como aire, agua, un trozo de metal o el
vaco

Qu parmetros definen una onda?

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Qu parmetros definen una onda?


LONGITUD DE ONDA ()

Distancia entre dos puntos cuyo estado de


movimiento es idntico, como por ejemplo crestas
o valles adyacentes.
AMPLITUD (A)

Es el valor mximo que adquiere una variable en un fenmeno


oscilatorio
FRECUENCIA ()
Nmero de repeticiones de cualquier fenmeno o
suceso peridico en una unidad de tiempo
PERIODO (T)
Es el tiempo empleado por cada partcula en una oscilacin
completa.
Entonces:
1/T

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RADIACION
ELECTROMAGNETICA COMO
ONDAS
Una
onda,
es
un
fenmeno
ondulatorio,
corresponde
a
la
propagacin en el espacio y en el
tiempo
de
una
perturbacin
oscilatoria, es decir, un fenmeno
regularmente repetido.

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Una perturbacin ondulatoria (una onda) se


propaga a una cierta velocidad (v) y se modela
satisfaciendo la llamada ecuacin de ondas,
escalar o vectorial, dependiendo de la
naturaleza de la perturbacin.
Una amplitud (A), que mide el valor extremo
(mximo o mnimo) respecto de una situacin
de equilibrio de la perturbacin, y una fase

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Las
ondas
normalmente
se
representan grficamente por una
funcin de tipo sinusoide en la que
podemos definir algunos parmetros
generales que la definen.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

CARACTERSTICAS DE LAS ONDAS

nodo

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ANLISIS INSTRUMENTAL

La R.E se representa como un campo


elctrico y otro magntico oscilantes,
que estn en fase con oscilaciones
sinusoidales en ngulo recto de uno
respecto al otro a la direccin de
propagacin.

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Radiacin electromagntica polarizada.

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La R.E puede interaccionar consigo y


con la materia, dando lugar a
fenmenos
como
la
reflexin,
refraccin, dispersin y polarizacin de
la luz.

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Cmo se clasifican las ondas?

Segn el medio en
que se propagan

Segn la direccin
de la perturbacin

Ondas mecnicas: Necesitan medio de


propagacin
Ondas electromagnticas: No necesitan
medio de propagacin
Ondas longitudinales: Movimiento de las
partculas producido por la perturbacin es
paralelo a la direccin de propagacin de la onda
Ondas transversales: Las partculas se
mueven perpendicularmente a la direccin de
propagacin de la onda.

Fotn = Paquete de energa


Una radiacin electromagntica de frecuencia
determinada () no puede adquirir ni ceder la energa
que transporta ms que en cantidades discontinuas,
que son mltiplos de una cantidad elemental E (cuanto
o fotn).
Se cumple que:
E=h.

(h = 4,1356.10-15 eV.s)

Un fotn es un paquete de energa equivalente a una


partcula de energa cintica h..

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Radiaciones electromagnticas
Son una forma de propagacin de energa a travs
del espacio sin necesidad de un medio material.
Abarcan un espectro muy amplio de tipo de onda,
desde las microondas hasta los rayos X y , pasando
por la luz visible.
Los rayos X son radiaciones electromagnticas de
alta frecuencia (energas mayores a 1 keV).

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I.1 MODELOS PARA EXPLICAR LA


R.E
a)Modelo Clsico de onda sinusoidal
b)Modelo Ondulatorio: Modelo corpuscular

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a)Modelo Clsico de onda sinusoidal


Una onda electromagntica consiste en
la oscilacin de un campo elctrico y otro
magntico
en
direcciones
perpendiculares, en si y estos a su vez
son perpendiculares a la direccin de
propagacin.
Se propaga fcilmente en el vacio.
Utiliza parmetros como longitud de
onda, frecuencia, velocidad, amplitud.

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El campo elctrico es perpendicular al campo magntico

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b) Modelo corpuscular:
La R.E se contempla como un flujo de
partculas
discretas
o
paquetes
ondulatorios de energa denominado
FOTONES, en los que la energa de un
foton es proporcional a la frecuencia
de radiacin.

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As cuando el tomo absorbe (o emite)


una radiacin el electrn pasa a una
orbita de mayor o menor energa y la
diferencia entre ambas orbitas se
compondr con una lnea del espectro
atmico de absorcin ( o de emisin).

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Espectro electromagntico

MIL MILLONES

UN BILLON

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103 km

cm

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ESPECTRO ELECTROMAGNETICO
Es la distribucin energtica del conjunto
de ondas electromagnticas.
Es
el
intervalo
de
radiaciones
electromagnticas que se extiende desde los
rayos gamma (radiacin mas energtica)
hasta las ondas de radio (radiacin menos
elctrica).

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El espectro electromagntico se divide


en varias regiones con funcin principal
de los mtodos que se precisan para
generar y detectar las diversas clases
de radiacin.

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Espectro electromagntico
Longitud de Onda

Vacio
ultravioleta

Ultravioleta

10-2000

200-380nm

Visible

385-750nm

Infrarrojo

0.75-200m

Energa

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Espectro electromagntico

Infrarrojo

Longitud de Onda

0.75-200m
IRC : 0.75 2.5 m (13333-4000 cm-1)
IRM : 2.5 50 m (4000-200 cm-1)
IRL : 50 1000 m (200-10 cm-1)
Energa

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I.2 TIPOS DE R.E


1.Ondas de radio
2.Microondas
3.Infrarrojo
4.Luz Visible
5.Ultravioleta
6.Rayos X
7.Rayos Gamma
8.Ondas y sonido

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Propiedades de las radiaciones


electromagnticas

No tienen masa

No tienen carga elctrica


Viajan a la velocidad de la luz
Tienen energas diferentes y mensurables
(frecuencias y longitud de onda)

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ANLISIS
INSTRUMENTAL
TEMA 2.- INTRODUCCIN A LOS MTODOS
PTICOS

PROPIEDADES DE LA RADIACION ELECTROMAGNETICA


Muchas de las propiedades de la radiacin electromagntica se explican
adecuadamente con un MODELO CLSICO DE ONDA SINUSOIDAL, que
utiliza parmetros como la longitud de onda, la frecuencia, la velocidad o la
amplitud.
A diferencia de otros fenmenos ondulatorios, como el sonido, la radiacin
electromagntica no necesita de un medio de apoyo para transmitirse y, por tanto,
se propaga fcilmente a travs del vaco.
Pero el modelo de onda falla al intentar explicar fenmenos asociados con la
absorcin o la emisin de energa radiante.
PARA ENTENDER Y EXPLICAR LOS MTODOS ESPECTROSCPICOS SE
SIGUE EL MODELO CORPUSCULAR

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I. 4 ESPECTROSCOPIA

ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

La espectroscopia es la rama de la fsica


y la qumica que estudia la interaccin
entre la materia y la luz o cualquier
radiacin electromagntica, como las
ondas de radio.

Luis Adolfo Mercado R., Ph.D

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Interaccin
de la radiacin
con la materia
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DIFRACCION DE LA RADIACION
ELECTROMAGNETICA

ANLISIS INSTRUMENTAL

La difraccin es una propiedad


ondulatoria que puede observarse no
solo para la radiacin electromagntica
si no tambin para ondas mecnicas o
acsticas.

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Se basa en el curvado y
esparcido de las ondas
cuando
encuentran
un
obstculo o al atravesar una
rendija.

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Transmisin de radiacin
ndice de Refraccin

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La velocidad con que se propaga la radiacin a


travs de cualquier sustancia va a ser menor que
la velocidad con la que se propaga en el vaco.
Cuando atraviesa un medio, las frecuencias
emergentes e incidentes son iguales, y como la
frecuencia y la energa se relacionan a travs de
la formula, podemos afirmar que la energa de
una onda cuando atraviesa un medio no vara.
Es decir no se produce trasferencia permanente
de energa.

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La refraccin es la desviacin que


experimentan los rayos luminosos al
pasar de un medio transparente de
DENSIDAD determinada a otro cuya
densidad es distinta de la del anterior.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Se define el ndice de refraccin como


la relacin existente entre la velocidad
de la luz en el vaco y la velocidad de la
onda en el medio.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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PROPIEDADES MECANICO
CUANTICAS DE LA RADIACION

1.El efecto fotoelctrico


2.Absorcin de radiacin (AM y AA)
3.Emisin de radiacin
4.Principio de Incertidumbre

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1. Efecto fotoelctrico:

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Se conoce como efecto fotoelctrico a a la


emisin de electrones por un metal al ser
irradiado con radiacin electromagntica (luz UV
en general).

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2. Absorcin de Radiacin:
Al pasar R.E. por una capa transparente de
un slido, lquido o gas, pueden eliminarse
selectivamente ciertas frecuencias como
consecuencia del proceso llamado absorcin.
La E.R. se transfiere a los tomos o
molculas que constituyen la muestra, como
resultado de ello estas partculas pasan del
estado de menor energa a estados de mayor
energa o estados excitados.

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Absorcin Atmica
El tomo consiste de un ncleo y de un nmero
determinado de electrones que llenan ciertos niveles
cunticos. La configuracin electrnica ms estable de
un tomo corresponde a la de menor contenido
energtico conocido como estado fundamental.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Si un tomo que se encuentra en un


estado fundamental absorbe una
determinada
energa,
ste
experimenta una transicin hacia un
estado particular de mayor energa.
Como este estado es inestable, el
tomo regresa a su configuracin
inicial, emitiendo una radiacin de una
determinada frecuencia.

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La frecuencia de la energa radiante emitida


corresponde a la diferencia de energa entre el
estado excitado (E1) y el estado fundamental
(Eo) como se encuentra descrito en la ecuacin
de Planck.

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Segn la teora atmica, el tomo puede


alcanzar diferentes estados (E1, E2, E3, ) y
de cada uno de ellos emitir una radiacin ( 1,
2, 3, ) caracterstica, obtenindose as un
espectro atmico, caracterizado por presentar
un gran nmero de lneas discretas.
En absorcin atmica es relevante solamente
aquella longitud de onda correspondiente a
una transicin entre el estado fundamental de
un tomo y el primer estado excitado y se
conoce como longitud de onda de resonancia.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

De la ecuacin de Planck, se tiene que un


tomo podr absorber solamente radiacin
de una longitud de onda (frecuencia)
especfica. En absorcin atmica interesa
medir la absorcin de esta radiacin de
resonancia al hacerla pasar a travs de
una poblacin de tomos libres en estado
fundamental. Estos absorbern parte de la
radiacin en forma proporcional a su
concentracin atmica.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

La
relacin
entre
absorcin
y
concentracin se encuentra definida en la
Ley de Lambert-Beer.
Como la trayectoria de la radiacin
permanece constante y el coeficiente de
absorcin es caracterstico para cada
elemento, la absorbancia es directamente
proporcional a la concentracin de las
especies absorbentes.

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UAGRM

ANLISIS INSTRUMENTAL

Absorcin Molecular:
La espectroscopia de absorcin molecular
se fundamenta en las interacciones entre la
metera y la energa.
La absorcin de dicha energa como
herramienta para detectar y cuantificar la
presencia de ciertos analitos en una
muestra
en
estudio.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Esta tcnica est basada en la


medicin de absorcin de radiacin
U.V. o visible por determinadas
molculas.
La
radiacin
correspondiente a estas regiones del
espectro electromagntico provocan
transiciones electrnicas a longitudes
de ondas caractersticas de la
estructura
molecular
de
un
compuesto.

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3. Emisin de radiacin

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Radiacin Trmica

La radiacin se refiere a la emisin


continua de energa de la superficie de
todos los cuerpos. Los portadores de
esta
energa
son
las
ondas
electromagnticas producidas por las
vibraciones de las partculas cargadas
que forman parte de los tomos y
molculas de la materia.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

La radiacin electromagntica que se


produce a causa del movimiento
trmico de los tomos y molculas de la
sustancia se denomina radiacin
trmica o de temperatura. La radiacin
trmica se origina a costa de la energa
interna del cuerpo. Si el cuerpo no
recibe energa del exterior se produce
su enfriamiento.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

El espectro de la radiacin trmica es


continuo y contiene longitudes de onda que
pueden variar desde la longitud de onda de
los rayos X hasta la longitud de onda que se
capta por los radios comunes. La distribucin
de energa en el espectro de radiacin
trmica depende de la temperatura del
cuerpo que la emite. A temperaturas bajas
(alrededor de 300C) predomina la radiacin
infrarroja de longitudes de onda entre 800 y
4000nm aproximadamente que es invisible
para el ojo humano

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A temperaturas altas (ms de 800C) en el


espectro aparecen longitudes de onda
ms cortas (400 800nm) que
corresponden a la parte visible y
ultravioleta del espectro. A la temperatura
de 800C el cuerpo emite suficiente
energa y parece rojo. Y la de 3000C la
energa radiante contiene bastante ondas
de longitud de onda ms corta y el
cuerpo parece prcticamente blanco.

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Emisin de radiacin de
rayos X:

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Fluorescencia y fosforecencia
La Fosforescencia es el fenmeno en el cual
ciertas sustancias tienen la propiedad de
absorber
energa y almacenarla, para
emitirla posteriormente en forma de
radiacin.
Fluorescencia es la propiedad que tienen
algunas sustancias de absorber energa y
luego emitir parte de esa energa en forma
de luz.

IA DE
ABSORCION
MOLECULAR
ULTRAVIOLETA
VISIBLE

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Trminos empleados en la
espectroscopia de absorcin.

1. TRANSMITANCIA:La cantidad de
luz transmitida a travs de una solucin
se conoce como la transmitancia (T).

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Esta se define como la relacin entre la energa de la luz


transmitida a travs de una solucin problema (I) y la energa
transmitida a travs de una solucin de referencia (I0),
tambin llamada Blanco de referencia, que generalmente es
el solvente utilizado en la solucin problema.

Luis Adolfo Mercado R., Ph.D

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ANLISIS INSTRUMENTAL

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Luis Adolfo Mercado R., Ph.D

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PARA
MEDICIONES
DE ABSORCION
DE LAS REGIONES
ULTRAVIOLETA
VIS Y DEL
INFRARROJO
CERCANO

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5

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Los instrumentos que miden la


absorcin selectiva de la radiacin
en las soluciones son:
Colormetros
Fotmetros y
Espectrofotmetros.

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1. COLORIMETRO
Herramienta que identifica el color y el
matiz para una medida ms objetiva del
color.

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El colormetro tambin es un
instrumento
que
permite
la ABSORBANCIA de una solucin
en una especfica FRECUENCIA
de LUZ a ser determinada. Es por
eso, que hacen posible descubrir
la concentracin de un SOLUTO
conocido que sea proporcional a la
absorbancia.

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Los colormetros se basan en el


principio de que la absorbancia de
una sustancia es proporcional a su
concentracin, y es por eso que las
sustancias
ms
concentradas
muestran una lectura ms elevada
de absorbancia.

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2. FOTOMETROS

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3.
ESPECTROFOTOMETRO
Un espectrofotmetro es un
instrumento
para
analizar
pticamente
un
material. La
espectrofotometra es el mtodo de
anlisis ptico ms usado en los
laboratorios
de
qumica
y
bioqumica.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Es importante diferenciar los


instrumentos segn su sistema de
deteccin:
Detectores simples (convencional) o
Detectores multicanal (arreglo de
diodo).

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COMPONENTES DE LOS
INSTRUMENTOS:
1.FUENTES
2.SELECTORES DE LONGITUD DE
ONDA
3.RECIPIENTES DE MUESTRAS
4.DETECTORES DE RADIACION
5.SISTEMA DE PROCESAMIENTO
Y DISPOSITIVO DE LECTURA DE
LAS SEALES.

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ANLISIS INSTRUMENTAL

Algunos de los diseos bsicos de los instrumentos usados en la medicin


de la absorcin de Energa Radiante se ilustra en el siguiente esquema:

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1. FUENTES:

Lmpara de
Deuterio e
hidrogeno

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a) Fuente de energa radiante


Debe producir un haz de radiacin cuya potencia sea suficiente para facilitar
la deteccin y medida; debe ser estable. Ej.:
Lmpara de hidrgeno
Lmpara de deuterio.
Ambas lmparas producen un espectro continuo entre 160375 nm y deben
emplearse ventanas de cuarzo en los tubos: ya que el vidrio absorbe
fuertemente en esta regin del espectro electromagntico.
Lmpara de filamento de tungsteno
Es la fuente ms comn para la zona del visible e infrarrojo. Esta lmpara
es til para la regin entre 320 2,500 nm.

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Lmpara de filamento de
tungsteno

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di
a
ci

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d

UAGRM

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b) Sistema selector de la longitud


de onda de trabajo
(i) Fotmetro (colormetro): este tipo
de instrumentos utiliza filtros que
permiten obtener bandas de radiacin
que abarcan un intervalo limitado de
longitudes de onda (con un fotmetro
no es posible obtener una banda de
absorcin
variable
en
forma
continua).

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Regin (nm
380435
480490
500560
580595
595650

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Color filtro
Azul
Verde azuloso
Verde amarillento
Anaranjado
Rojo

Color solucin
Amarillo
Rojo
Violeta
Azul verdoso
Verde azuloso

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(ii) Espectrofotmetro: utilizan un complejo


sistema ptico de seleccin de longitud de
onda (sistema monocromador). el cual
consta de variados componentes tales
como:
prisma o rejilla; lentes; espejos; ranuras de
entrada y salida.

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Estos
instrumentos
pueden
seleccionar longitud de onda en
forma continua y en algunos casos
con precisin de dcimas de nm. Por
lo tanto, es posible obtener en forma
continua el espectro de absorcin de
una molcula.

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RECIPIENTES PARA MUESTRA:

ar
a
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0
0
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c) Recipientes para la muestra


La
mayor
parte
de
las
aplicaciones
espectrofotomtricas utiliza las muestras en solucin
lquida, por esta razn se requieren recipientes para
colocar la muestra (celdas). La celda debe transmitir
el 100% de la energa radiante en la zona espectral
de trabajo.
Regin U.V. =

Celdas de cuarzo

(2002,000 nm)

Regin VIS =

Celdas de vidrio

(3502,000 nm)

Algn tipo de
plstico.
La longitud ms comn para el trabajo en las regiones UV-VIS es 1 cm (otras
son: 2, 5 y 10 cm).

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UAGRM

ANLISIS INSTRUMENTAL

a
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s
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n
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s
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al

UAGRM

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d) Deteccin de la radiacin
Dispositivo electrnico
llamado transductor que convierten la
energa radiante en una seal elctrica.
Requisitos:
Responder a la E.R. en un amplio
intervalo de .

Poseer elevada sensibilidad.

Respuesta lineal.

Tiempo de respuesta rpido, etc

Detectores de fotones:
Celdas fotovoltaicas.
Fototubos.

Tubos fotomultiplicadores.

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e) Procesadores de seales e
instrumento de lectura
Dispositivo electrnico que amplifica la
seal elctrica generada en un detector.
En este sentido existe una amplia gama
de alternativas, desde galvanmetros
hasta avanzadas computadoras.

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TIPOS GENERALES DE
INSTRUMENTOS PARA
MEDICIONES DE ABSORCION
MOLECULAR
Los sistemas pticos de dos tipos de
instrumentos para medidas de
absorcin ultravioleta/visible.
1.Instrumento de un solo haz
2.Instrumento de doble haz

UAGRM

ANLISIS INSTRUMENTAL

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ANLISIS INSTRUMENTAL

ALGUNOS INSTRUMENTOS
CARACTERISTICOS:
1.FOTOMETROS
2.ESPECTROFOTOMETROS

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