TOXICOLOGA AMBIENTAL

Cuantificacin de txicos en el organismo

La respuesta txica en un rgano determinado depende de la
exposicin de ese rgano al txico, o sea el dao depende de la
concentracin de la substancia en el tejido blanco.
Es evidente que si se desea estudiar cuantitativamente el efecto de
los txicos ambientales en la salud del hombre es necesario poder
estimar la cantidad de txico que realmente entr al organismo,
estudiar las transformaciones que le hace el metabolismo y las
concentraciones en las que se encuentran las especies txicas en
los distintos rganos del cuerpo. La estimacin de la concentracin
de las especies txicas en los medios corporales se puede hacer de
dos formas: por medio de muestreo biolgico y por el uso de
marcadores biolgicos.

TOXICOLOGA AMBIENTAL
Muestreo biolgico
El muestreo biolgico o dosimetra interna consiste en la
determinacin cuantitativa de la concentracin del txico o sus
metabolitos en uno o ms medios corporales del organismo
expuesto.
Esta informacin se usa para estimar la exposicin que experimentan cada
uno de los tejidos del cuerpo, con el fin de estimar la magnitud de la
exposicin ambiental y para demostrar que existi una exposicin efectiva.
El simple hecho de que el txico se encuentre dentro del organismo es la
prueba de que existi la exposicin.
El diseo del muestreo biolgico consiste en seleccionar el medio
biolgico que se va a muestrear, la especie qumica que se deber
analizar y el tiempo al que se deber tomar la muestra. Es necesario
asegurarse que las condiciones de muestreo sean las que proporcionen
observaciones de valores representativos del nivel del txico en el
organismo

FACTORES PRINCIPALES QUE SE CONSIDERAN AL

DISEAR EL MUESTREO.
Tipo de Exposicin. En el caso de las exposiciones
intermitentes el tiempo transcurrido desde la exposicin
es muy importante debido a que la concentracin del
agente puede variar rpidamente con el tiempo. La
concentracin interna se incrementa al inicio de la
exposicin y despus empieza a disminuir debido al
efecto de los procesos de desintoxicacin del organismo
(metabolismo y excrecin). El tiempo transcurrido no es
tan importante si la exposicin es continua, ya que la
concentracin del compuesto estar prcticamente
constante, cuando se establece el rgimen estacionario.

FACTORES PRINCIPALES QUE SE CONSIDERAN AL

DISEAR EL MUESTREO
Movilidad y metabolismo. Dependiendo de las
propiedades fsicoqumicas y bioqumicas del txico ste
se transportar a distintas velocidades hacia los rganos,
se acumular y se transformar a velocidades diferentes
en cada uno de los rganos en los que penetr. Si el
compuesto original se biotransforma rpidamente,
entonces su concentracin, en los medios biolgicos,
ser muy baja y en ese caso es ms significativo seguir
la concentracin de sus metabolitos. El compuesto se
puede encontrar en la sangre, acumulado en grasa, pelo,
uas, msculo o hueso, o encontrarse en las secreciones
del organismo (orina, heces, leche, sudor) etc.

FACTORES PRINCIPALES QUE SE CONSIDERAN AL

DISEAR EL MUESTREO
Facilidad de muestreo. Se prefiere analizar los medios de
los que se puedan obtener las muestras ms fcilmente,
invadiendo el organismo lo menos posible. Se prefiere el
medio en el que se encuentre la especie qumica relevante
en forma ms fcil de analizar.
El muestreo de cada medio tiene sus ventajas y desventajas
y la seleccin del medio ms adecuado, en cada caso,
depender del balance entre esas ventajas y desventajas.
Los medios ms comnmente analizados son la orina, la
sangre y el cabello. A continuacin se describen las
caractersticas principales de los muestreo de estos medios.

Orina
En este medio se encuentran los xenobiticos y/o sus
productos de excrecin que sean solubles en agua.
El muestreo es muy sencillo, no requiere de
procedimientos invasivos ni de personal especializado.
Como la orina es una solucin acuosa homognea es
muy fcil estimar la recuperacin del analizando.
Los cambios en flujo y composicin de la orina influyen
sobre la concentracin de las substancias en este
medio y por lo tanto los resultados se deben de corregir
por estos factores.

Sangre
La sangre se supone que est en equilibrio con todos los rganos del cuerpo y, por lo tanto, es el
medio que mejor refleja la exposicin de los diferentes rganos en un momento dado.
El factor que ms afecta la representatibidad de los resultados del muestreo de sangre es la
distribucin del txico entre el plasma y las clulas que puede variar con el periodo de exposicin
y el lapso transcurrido desde que sucedi. Como se ver ms adelante, la distribucin depende de
las propiedades fsicoqumicas del compuesto. Los liposolubles normalmente se encuentran en las
clulas y los compuestos ionizados en el plasma. En cada uno de estos compartimentos el
compuesto se puede encontrar libre o asociado a diferentes ligandos como protenas, cloruros,
glutatin.

El muestreo de sangre requiere de entrenamiento especializado y se deben de tener los

siguientes cuidados:
no contaminar la muestra con la aguja o con el recipiente
seleccionar procedimientos de muestreo y preparacin que no afecten los resultados. Por
ejemplo, si se usa EDTA como anticoagulante no se podr hacer la determinacin del nivel de
plomo plasmtico. La concentracin de plomo que se determine en una muestra preparada en
esta forma ser un valor ms alto que el real, debido a que el EDTA redistribuye el ion al
provocar su emigracin de las clulas al plasma
hacer la determinacin del hematocrito para estimar la recuperacin del analizando

Cabello
La mayora de los compuestos que se incorporan al cabello son los que tienen
afinidad por los grupos sulfhidrilo de la queratina.
El cabello crece lentamente, as que su muestreo no es adecuado para evaluar
exposiciones recientes. Se sabe que slo en una de las fases de crecimiento del
cabello (anagenia) se incorporan los xenobiticos, presentes en el cuerpo, al
eje del cabello y se sabe tambin que la velocidad de crecimiento en esa fase
es de 0.37 mm/da. Esta informacin se usa para reconstruir, con buena
exactitud, la historia de exposiciones pasadas por perodos prolongados.
Desafortunadamente solo se tiene datos para muy pocas substancias que nos
permitan estimar el coeficiente de particin sangre-pelo.
El principal problema que se tiene con el muestreo del cabello es la
contaminacin proveniente de fuentes externas como partculas suspendidas
en el aire, contaminantes presentes en el agua, productos de limpieza y
cosmticos.
El muestreo de cabello no es un procedimiento invasivo.

Otros Medios
Se
pueden
seleccionar
otros
medios
biolgicos para tomar muestras, tales como,
aire exhalado (v.g. en la determinacin de
alcohol etlico), clulas exfoliadas de la piel,
uas, sudor, saliva, hueso y leche materna. El
anlisis de leche materna se utiliza
principalmente para estimar exposiciones de
infantes,
ms
que
para
estimar
concentraciones corporales en la madre

Toxicodinmica
En el medio ambiente la biota est rodeada permanentemente de una
gran cantidad de substancias con las cuales interacciona en todas sus
actividades vitales. Aunque todos los compuestos con los que est en
contacto, incluyendo el agua, pueden ser txicos en determinadas dosis,
es evidente que un gran nmero de especies han tolerado esta situacin.
Para que un txico ambiental cause un dao, en primer lugar se debe
estar expuesto a l y en segundo lugar el txico tiene que vencer las
defensas del organismo que tratan de impedirle que llegue al tejido
blanco en forma activa. Las defensas consisten fundamentalmente en
mecanismos que restringen la movilidad y disminuyen el perodo de
exposicin del tejido blanco. Esto lo puede hacer el organismo poniendo
barreras a su desplazamiento hacia determinados tejidos, disminuyendo
su difusibilidad a travs de las membranas celulares y/o facilitando su
excrecin.

Figura 2.3. ADME Las rutas que sigue un txico en el

organismo

Absorcin
La absorcin de un txico se define como el proceso por medio del cual ste
atraviesa membranas y capas de clulas hasta llegar al torrente sanguneo.
El mecanismo de ingreso del txico al organismo usa los mismos mecanismos de
transporte diseados para movilizar compuestos de estructura similar.
Los principalesmecanismos de transporteson los siguientes:
difusin simple. Depende de la existencia de un gradiente positivo de
concentracin (entre el medio contaminado y la sangre). La difusibilidad de una
substancia a travs de las membranas biolgicas depende de sus propiedades
fsicoqumicas, las substancias polares de bajo peso molecular (hasta 600 daltons)
pasan a travs de los poros acuosos de las membranas, mientras que, las
molculas hidrfobas se difunden a travs de las zonas lipdicas. En general, los
lpidos penetran ms fcilmente las membranas que las molculas ionizadas
Eltransporte
activo, la endocitosis o la difusin mediada por un
transportadorson los mecanismos por los cuales se difunden los compuestos de
peso molecular grande (sean polares o liposolubles) y los que se transportan en
contra del gradiente de concentracin

Ingestin
Cuando el txico se ingiere, entra alTractoGastroIntestinal (TGI), la mayor cantidad se absorbe
en el estmago y en los intestinos aunque tambin puede haber absorcin en cualquier lugar
delTGI, incluyendo las absorciones sublingual y rectal.
El sitio de absorcin depende en parte del estado de ionizacin del compuesto. Los cidos dbiles
es ms probable que se absorban en el estmago, donde hay un pH bajo, mientras que las bases
dbiles, que estn menos ionizadas a pH alto, se absorben mejor en el intestino donde existen
estas condiciones.
La gran rea de absorcin del intestino y los largos tiempos de residencia, dependiendo de la
movilidad intestinal, permiten que se tengan absorciones considerables aunque el flux, cantidad
transportada por unidad de rea y de tiempo, sea pequeo.
La absorcin de los xenobiticos usa los mismos mecanismos que tiene el TGI para absorber los
nutrimentos. Por ejemplo, el plomo se absorbe en el intestino usando el sistema de transporte del
calcio.
Para que un compuesto ingerido pueda alcanzar la circulacin general, accesar el resto del
organismo y tener la posibilidad de causar un dao, debe primero ser capaz de resistir:
la accin de las enzimas digestivas,
el pH del estmago,
la biodegradacin por la flora intestinal.
la biotransformacin por las enzimas hepticas.

Inhalacin
La inhalacin es la va de exposicin a gases, vapores de lquidos voltiles, aerosoles y
partculas suspendidas en el aire.
Los sitios de absorcin son la nariz y los pulmones.
La nariz acta como un limpiador o trampa para los gases solubles en agua y los muy reactivos
as como, para retener las partculas grandes.
La absorcin de gases y vapores que llegan al pulmn usa el mismo mecanismo que existe para
el intercambio de oxgeno y bixido de carbono.
La velocidad de difusin de los gases en el pulmn es muy grande, debido a que la distancia de
difusin es muy pequea, el flujo sanguneo es muy alto y el rea de transferencia es muy
grande. Lo anterior produce que la velocidad de absorcin en el pulmn sea alta,
independientemente de la naturaleza qumica del agente.
Las substancias ionizadas, que son las de ms lenta absorcin, normalmente no son voltiles,
por lo que es poco probable que se encuentren en el aire como vapores o gases, aunque desde
luego pueden llegar hasta los alvolos si estn absorbidas en las partculas pequeas de polvo.
La concentracin de txico que se puede alcanzar en la sangre depende de los coeficientes de
particin de la substancia, primero el coeficiente aire/sangre cuando se absorbe y despus, el
coeficiente sangre/tejido cuando se distribuye. El coeficiente de particin es la relacin de
concentraciones de equilibrio de un soluto a ambos lados de una interface.

TOXICOCINTICA
Toxicocintica
Ya hemos visto que el comportamiento del txico en el organismo est
determinado por los procesos de absorcin, distribucin, biotransformacin y
excrecin.
La interaccin dinmica de todos los procesos que constituyen el ADME,
determina el tiempo que permanecer un agente dentro del organismo despus
de que ste ha sido expuesto a una dosis determinada. Al estudio de la
velocidad de cambio de la concentracin de las especies txicas dentro
del organismo se le conoce como toxicocintica.
Las tasas de cambio que se presentan en cada fase del ADME se pueden modelar
matemticamente e integrarlas en un modelo que represente la dinmica global
del txico dentro del organismo.
Cada proceso, sea este de cambio de lugar y/o de identidad qumica, se puede
representar por una ecuacin diferencial en la que la derivada de la concentracin
con respecto al tiempo en un sitio determinado, se expresa como una funcin de
la concentracin en ese lugar. La constante de proporcionalidad se denomina
velocidad especfica y normalmente se representa por la letra "k".

TOXICOCINTICA

El conjunto de ecuaciones diferenciales simultneas integran el

modelo que representa el cambio global de la concentracin del
txico. El modelo se puede usar para predecir la magnitud de la
respuesta txica en funcin de la exposicin, utilizando la
informacin generada por el muestreo biolgico y los
biomarcadores.

TOXICOCINETICA
Dosis equivalentes para humanos. Cuando se utilizan
datos obtenidos con animales experimentales como base
para la extrapolacin, hay que calcular la dosis para
humanos que es equivalente a las dosis utilizadas en los
estudios. Para calcular las dosis equivalentes se supone que
los organismos son igualmente susceptibles al agente, si
absorben la misma cantidad de txico por unidad de
superficie
corporal.
La
superficie
corporal
es
aproximadamente proporcional al peso corporal elevado a la
potencia 2/3.
La dosis equivalente para humanos, en mg/da, se calcula
multiplicando la dosis experimental por el factor (peso
hombre/peso animal)2/3.

EVALUACIN DE RIESGOS AMBIENTALES

Conceptos Bsicos
riesgo es la posibilidad de sufrir un dao por la exposicin a un
peligro y peligro es la fuente del riesgo y se refiere a una
substancia o a una accin que puede causar dao.
Evaluacin de riesgosse refiere a la tcnica para determinar la
naturaleza y magnitud del riesgo.
El trminoanlisis de riesgose ha usado frecuentemente como un
sinnimo de evaluacin de riesgos. Debe de interpretarse que
adems de la evaluacin, el anlisis incluye los mtodos para hacer
un mejor uso de los resultado de la evaluacin.
En elmanejo de los riesgosse disea la respuesta de control,
reduccin o eliminacin de riesgos utilizando la informacin
producida por la evaluacin y el anlisis, en el contexto de los
recursos tcnicos, valores sociales, econmicos y polticos.

Fuente.
Las caractersticas fundamentales de la fuente son su localizacin y
los mecanismos de emisin. Se localiza y describe utilizando los
datos de muestreo y la informacin preliminar que se tenga acerca
del sitio.
Se localizan los lugares dnde se estn liberando, se liberaron o se
espera que se liberen los txicos, identificando todos los
mecanismos posibles de liberacin y de medios receptores. Por
ejemplo; la presencia de suelo contaminado cerca de un tanque
puede indicar que el tanque con rupturas (fuente) present fugas
(mecanismo de liberacin) hacia el suelo (medio receptor). La
fuente puede ser tambin punto de contacto si los organismos
receptores entran en contacto directo con la fuente. Por ejemplo;
con recipientes abiertos, suelo contaminado, residuos apilados, etc.

Figura 3.2.2 - Descripcin de la Ruta de Exposicin.

Cuantificacin de la exposicin
El estudio de la ruta de exposicin tiene por objeto llegar a determinar la cantidad
de substancia txica que contacta un organismo durante el perodo de exposicin
y poder estimar las exposiciones futuras.
La cuantificacin de la exposicin consiste en determinar la magnitud, frecuencia
y duracin de las exposiciones de los individuos miembros de la poblacin por
cada una de las rutas significativas.
Si la exposicin ocurre durante un determinado perodo, la exposicin total se
divide entre el tiempo de ocurrencia para calcular la tasa de exposicin promedio
por unidad de tiempo y frecuentemente esta tasa promedio de exposicin se
expresa por unidad de masa corporal.
A esta exposicin normalizada se le denominaDosis Suministrada.
Hay tres categoras de variables que se usan para calcular este valor y son: una
variable relacionada con la substancia (concentracin de exposicin); las
variables que describen la poblacin expuesta (tasa de contacto, frecuencia y
duracin de la exposicin, peso corporal) y una variable determinada por el
proceso de evaluacin (eltiempo de promediacin).

CLCULO DE LA DOSIS
SUMINISTRADA
La Dosis Suministrada (Ds) se calcula para todas
las substancias en el punto de contacto de todas
las rutas seleccionadas como significativas. Se
expresa en trminos de la cantidad de la
substancia (mg) en contacto con el cuerpo por
unidad de masa corporal (Kg) por unidad de
tiempo (da).
La DSse calcula utilizando la siguiente ecuacin:
DS= (CTFD)/(MP)
Donde:

C = concentracin promedio durante el perodo de exposicin

T= tasa de contacto, la cantidad de medio contactado por
unidad de tiempo
F = frecuencia de exposicin
D = duracin
M = masa corporal
P = tiempo de promediacin

Informacin contenida

Los resultados del estudio de la exposicin que se necesitan son los siguientes:

Concentraciones qumicas de todas las substancias txicas en el punto de exposicin

Frecuencia y duracin de las exposiciones

Clasificacin de las exposiciones observadas de acuerdo al perodo de exposicin

(crnicas, subcrnicas y agudas) y la va de exposicin (oral, inhalacin y cutnea)

Caractersticas de la poblacin expuesta identificando subpoblaciones especiales

Caractersticas del sitio

Descripcin de las rutas de exposicin significativas

Dosis Suministradas y/o Absorbidas de cada substancia por cada ruta significativa, por
cada va y por cada perodo de exposicin

Relacin de las rutas completas que se clasificaron como no significativas y porqu.

Posible efecto de las exposiciones que no se estn evaluando

Lista de las rutas de exposicin que pueden contribuir a la exposicin de los mismos
individuos en forma simultnea

Modelos de transporte y destino utilizados en el anlisis de las rutas de exposicin

Suposiciones hechas en el proceso de modelaje de las exposiciones

Valores utilizados para los parmetros de exposicin y fuentes de informacin

Identificacin y caracterizacin de las incertidumbres.