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LA GALERIE API 20E (travail de Roland FERRY

CANNES)
1- Prsentation de la galerie
Galerie de 20 microtubes prts lemploi permettant de raliser 23 tests biochimiques afin
didentifier des bacilles Gram appartenant la famille des ENTEROBACTERIACEAE.
cupule

microtube contenant le milieu dshydrat


La suspension bactrienne introduite dans le tube dissout les substrats dshydrats.

LA GALERIE API 20E


2- Prparation de linoculum

1 seule colonie
sur GO

isolement

Prlvement
dune souche pure
sur GNI

Souche pure sur GNI

5 mL deau distille strile

LA GALERIE API 20E


3- Ensemencement de la galerie API 20 E
Introduire la suspension bactrienne dans chaque tube laide dune pipette
Pasteur strile ouverte, pointe appuye lintrieur et sur le ct pour viter la
formation de bulles

Pour certains caractres:

Remplir de suspension le tube et la


cupule
Pour les tests :

Remplir le tube de suspension puis


recouvrir dhuile de paraffine
Pour les tests : ADH, LDC, ODC, H2S,
URE

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E

Aprs 24h dincubation 37C, dans quelles cupules doit-on rajouter des r

Chlorure
de fer III
Napht-1-ol

Naphtyl-1amine

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 premiers tests

Tests ngatifs

+ Ractif + Ractif + Ractifs


TDA
Kovacs VP 1 et 2

Tests positifs

+ Ractif + Ractif + Ractifs


TDA
Kovacs VP 1 et 2

LA GALERIE API 20E


4- Lecture de la galerie API 20 E Les 10 derniers tests

Tests ngatifs

Tests positifs

Aprs ajout des ractifs Nit 1 et Nit 2 : lecture de la NR

TABLEAU DE LECTURE DE LA GALERIE MINIATURISE API 20E


Microtube

Substrat :

ONPG

ONPG = OrthoNitro-PhnylGalactoside

ADH
LDC
ODC

Arginine
Lysine
Ornithine

Caractre recherch :

Beta
galactosidase

Citrate

Utilisation du
citrate

H2S

Thiosulfate de
sodium

Production dH2S

UR

Ure

Urase

TDA

Tryptophane

Tryptophane
dsaminase

IND

Tryptophane

Tryptophanase ou
production dindole

VP

Pyruvate de
sodium

production dactone
(3-hydroxybutanone

Glatine

GLU
ARA

Substrat
carbon
(glucide)

=
zymogramme

NO2- / N2

Nitrates (NO3-)

BBT

Nitrate rductase

Lecture directe

Lecture directe
Lecture directe

Rouge de
Phnol

Lecture directe
Lecture indirecte
Ajouter une goutte de ractif
chlorure de fer III
Lecture indirecte
Ajouter une goutte de ractif
Kovacs
Lecture indirecte
Ajouter 1 goutte de VP1 et
VP2 Attendre 10 minutes

glatinase

Utilisation de substrats
carbons (glucides)

Lecture directe ou indirecte


Test (si ncessaire)

Lecture directe

Arginine Dihydrolase
Rouge
Lysine Dcarboxylase
de
Ornithine Dcarboxylase Phnol

CIT

GEL

Rvlateur

Lecture directe

BBT

Lecture directe
Lecture indirecte
Ajouter 1 goutte de NIT1 et
NIT2 et zinc ventuellement

Rsultat
-

Rsultat +

LA GALERIE API 20E


5- Identification de la souche
Rsultats de la galerie :

Rsultats reports sur la fiche didentification


Code n: 5 215 773 (55)

Se rfrer au catalogue pour identifier la souche laide du