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Filogentica de las Asteridas basados en 3

marcadores codificantes y 3 no codificantes


del ADN cloroplastidial y la utilidad del ADN no
codificante en niveles taxonomicos superiores.
E.A.P Gentica y Biotecnologa

Helianthus
annuus

Bellis perennis

Campanula
latifolia

Convolvulus
tricolor

Marcadores Usados
Codificantes
rbcL

ndhF

No codificantes
matK

Ribulose
NADH
Megakaryocytebisphosphate dehydrogenase
Associated
carboxylase
F
Tyrosine Kinase
large chain

trnV
Incluye
exones e
intrones
trnV, trnM
espacios
intergnicos
entre trnV
(UAC) and
atpE

Rps16

trnL

Ribosomal
Protein S16
gene

Incluye
exones e
intrones trnL y
espacios
intergnicos
entre trnT
(UGU) a trnF
(GAA)

METODOLOGA

La estrategia de muestreo fue incluir un miembro de cada uno de las 106 familias de Asteridos del
Sistema APG(APG, 1998). Se escogi una especie de cada tipo de gnero de la familia. As se obtuvo
ADN representando 104 familias aunque no se pudo obtener material de dos familias
Carlemanniaceae y Sphenostemonaceae.

Se seleccion solo 2 grupos que no pertenecen al grupo taxonmico de los Asteridos: Paeonia de
Paeoniaceae y Vitis de Vitaceae. Ambos de estos gneros asumen una posicin basal en nucleo de
las eudicotiledoneas.

Adems se aadi 7 grupos con posiciones inciertas en APG: Cardiopteris, Dipentodon, Kaliphora,
Lissocarpa, Paracryphia, Pentaphylax y Sladenia.

Y 7 grupos de posicin incierta dentro de los Lmidos: Androya, Antirrhinum, Globularia,


Peltanthera, Proboscidea, Sanango, and Selago.

Desfontainia de Columelliaceae, Quintinia de Escalloniaceae y Schima de Theaceae, Maesa de la


familia Maesaceae, Pterostyrax de Styracaceae y tres gneros del grupo Icacinaceae

Se secuenci por primera vez el gnero Grevea de la familia Montiniaceae

Se incluy un total de 132 especies.

SECUENCIACIN

La mayora de los secuenciamientos fueron realizados en Evolutionary Biology


Centre

labs en Uppsala de acuerdo al siguiente procedimiento:

En reaccin de la PCR se us la Taq polimerasa.

Los productos amplificados fueron limpiados con Qiaquick PCR purification kit
(Qiagen).

La reaccin de secuenciacin fue realizada usando dos diferentes protocolos con


BigDyeTM terminator cycle sequencing kit (Applied Biosystems) y analizado en
un ABI 377 (Applied Biosystems) o con DYEnamicTM ET termination cycle
sequencing premix kit (Amersham Pharmacia

Biotech), en un MegaBACE 1000 capillary machine (Amersham Pharmacia


Biotech). Los protocolos se siguieron de acuerdo al manufactor

ANALISIS

Sis matrices separadas fueron producidas por los seis marcadores.

Los genes codificantes fueron alineados manualmente por medio del uso de los
marcos de lectura de las secuencias de aminocidos correspondientes.

Los genes no codificantes fueron alineados por Clustal

Para investigar la utilidad del AND codificante y no codificante para los niveles
taxonmicos de este estudio se fusionaron los datos de los genes codificantes
(rbcL, ndhF, and matK) en una matriz y se hizo lo mismo para los marcadores
no codificantes (trnL, trnV, and rps16). Para obtener la ms comprensiva
informacin establecida y el mayor soporte filogentico para los Asteridos sef
usionaron todos los datos en una combinada matriz y se analiz
posteriormente.

Cada matriz fue analizada usando PAUP* 4.0

CONCLUSIONES

This study has provided increased support for resolution within the asterids,
demonstrated the utility of non-coding DNA also at higher levels, and
contributed to ordinal classification of several families of asterids.

We have been able to resolve with strong support the basal interrelationships
among Cornales, Ericales, lamiids, and campanulids.

Resolution among orders within lamiids and campanulids, respectively,


remains partly unclear.

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