ANTIBIOTIC RESISTANCE OF LACTOBACILLI

STRAINS ISOLATED FROM MILK AND MILK

PRODUCTS FROM MIDDLE SLOVAKIA*
Fabin Mina Saa-1610812
Jorge Alexis Mora Sanabria-1610847
Janeth Cristina Arias Umbarila-1610859
Karen Natalia Gmez Jojoa-1610880

*Hleba, L., Kacniov, M., Pavelkov, A., & Cubon, J. (2012). Antibiotic resistance of lactobacilli strains isolated
from milk and milk products from middle Slovakia.The Journal of Microbiology, Biotechnology and Food
Sciences,2(1), 253.

ABSTRACT
The aim of this study was to determine the antibiotic susceptibility of lactobacilli strains isolated from
milk and milk products from middle Slovakia. The 42 samples of milk and milk products from sheep
farming from middle Slovakia were collected. MRS agar for this cultivation of lactobacilli was used. It
was done at 37 C during 36-48 hours in CO2 box with 10 % CO2. Identification of lactobacilli strains by
Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry with Biotyper software
MALDI TOF MS Biotyper was done. Four anitibiotics M.I.C. evaluators strips for antibiotic susceptibility
testing were used. These antibiotics were used in this experiment: erythromycin (E 256 0.015 g/ml),
ampicillin (AMP 256 0.015 g/ml), gentamycin (CN 256 0.015 g/ml) and tetracycline (TE 256
0.015 g/ml). We isolated 42 lactobacilli strains and identified them as Lactobacillus plantarum and
Lactobacillus spp. We isolated 7 strains of Lactobacillus plantarum and 35 isolates were Lactobacillus
spp. From the seven isolates of Lactobacillus plantarum 3 isolates were resistant to ampicillin (MIC 16
g/ml in 2 isolates and MIC 12 g/ml in one isolate) and one resistant to tetracycline (MIC 16 g/ml).
From 35 isolates of Lactobacillus spp. 9 isolates were resistant to erytromycin (MIC 32 g/ml), 10
isolates resistant to ampicillin (MIC 16 g/ml in 4 isolates, MIC 12 g/ml in 5 isolates and MIC 4 g/ml in
one isolate), 5 isolates resistant to tetracycline (MIC 16 g/ml). Resistance to gentamycin was not
detected. Lactobacilli isolated from milk and milk products were resistant to erytromycin (resistance
was 21.42 %), ampicillin (resistance was 30.95 %) and tetracycline (resistance was 14.28 %) and were
sensitive in 100 % to gentamycin.

Lactobacillus

Aliment
os
Bioconserva
cin

Propiedade
s
Probioticas

MATERIALES Y MTODOS
Recoleccin de muestras

Cultivo de cepas de
Lactobacilos

Prueba de susceptibilidad

Identificacin de cepas de
Lactobacilos

Recoleccin de muestras
42 muestras de leche y productos lcteos (queso de
oveja, Bryndza y parenica)
De cada muestra se aisl una cepa de lactobacilos
Estas muestras fueron tomadas en junio de 2011

Cultivo de cepas de Lactobacilos

Incubacin A 37C/36-48
hrs con 10% de CO2

Agar MRS

Se utiliz el mtodo de la
resiembra
en
cada
muestra para lograr un
cultivo puro

Identificacin de cepas de
Lactobacilos
Se cubri cada
punto de la
muestra con
2L de
solucin
matriz

MALDI-TOF

Se sec al
aire durante
15 min

Los espectros primos

obtenidos fueron
importados al software
Biotyper versin 2.0

Prueba de susceptibilidad
Se usaron 4 tiras MIC evaluadoras de antibiticos:
ANTIBITICO

CONCENTRACIN

Eritromicina

(E 256-0.015g/mL)

Ampilicina

(AMP 256-0.015g/mL)

Gentamicina

(CN 256-0.015g/mL)

Tetraciclina

(TE 256-0.015g/mL)

Se utilizaron cultivos puros de cepas de Lactobacilos de

48 hrs
Se humedeci un
hisopo de algodn
estril en la
suspensin

Frotar en 3
direcciones en
el agar LMS

Colocar las
tiras MIC en el
agar

Secar

Incubar microaerbicamente
con 10% de
CO2

Los resultados
obtenidos
fueron
evaluados por
EFSA

Tiras de MIC

RESULTADOS
Perfil de resistencia a los antibiticos de Lactobacilos plantarum aislados de leche y
productos lcteos

Perfil de resistencia a los antibiticos de Lactobacilos spp. aislados de leche y productos

lcteos

Resistencia antibitica y las concentraciones mnimas inhibitorias de los

microorganismos por mililitro en cepas de Lactobacilos

CONCLUSIN
En conclusin, nosotros determinamos que las cepas aislados lactobacilos de leche y
productos lcteos fueron resistentes a eritromicina, ampilicina y tetraciclina, tambin
determinamos que las cepas de lactobacilos no son resistentes a la gentamicina. A
partir de los resultados se muestra que los antibiticos resistentes se propagan en el
ambEn conclusin, nosotros determinamos que las cepas aislados lactobacilos de leche
y productos lcteos fueron resistentes a eritromicina, ampilicina y tetraciclina, tambin
determinamos que las cepas de lactobacilos no son resistentes a la gentamicina. A
partir de los resultados se muestra que los antibiticos resistentes se propagan en el
ambiente y estas bacterias resistentes no patgenas pueden ser transferidas de
animales a alimentos y de alimentos a humanos. Adems como se muestra en las
conclusiones obtenidas por muchos investigadores, los resultados de resistencia a
antibiticos pueden variar de estudio a estudioiente y estas bacterias resistentes no
patgenas pueden ser transferidas de animales a alimentos y de alimentos a humanos.
Adems como se muestra en las conclusiones obtenidas por muchos investigadores,
los resultados de resistencia a antibiticos pueden variar de estudio a estudio.