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Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento

de la Educacin

Facultad: Medicina Humanas y Ciencias De La Salud


Escuela: Estomatologa
Curso: Microbiologa
Catedrtico: Adni Jeh Inocente Bonilla
Integrantes: Arrese Caldas, Aldair Geoby
Musac Reyna, Paulo Franco
Icumina Zamudio Rayza
Mass Soplin, Dick Manuel
Viena Vasquez, Margoth
Valera Vargas, Carlos Alberto Junior

CRECIMIENTO BACTERIANO y
MEDIO DE CULTIVO

QUE ES CRECIMIENTO
BACTERIANO ?
Entendemos por crecimiento bacteriano el aumento
del nmero de microorganismos a lo largo del
tiempo.
Por tanto, no nos referimos al crecimiento de un nico
microorganismo (ciclo celular), sino al demogrfico.

El crecimiento de una poblacin es el aumento del


nmero de clulas como consecuencia de un
crecimiento individual y posterior divisin.

FASES DEL CRECIMIENTO


BACTERIANO

Cuando introducimos una poblacin de


microorganismos dentro de un medio de cultivo
liquido, cada organismo presenta cuatro fases de
crecimiento tpicas:
FASE LAG(latencia)
FASE LOGARITMICA (LOG)
FASE ESTACIONARIA
FASE DE MUERTE .

Estas cuatro fases forman la curva estndar del


crecimiento bacteriano

FASE LAG(latencia)
Es el tiempo necesario para la
adaptacin de las bacterias al
nuevo medio donde se siembran
y se caracteriza por:
1.
2.
3.

Las bacterias aumentan su


actividad metablica
Se incrementa la tasa de ARN
Hay aumento del volumen
bacteriano, no hay divisin.

FASE LOGARITMICA (LOG)

a)
b)

c)

d)

Es la fase de crecimiento
acelerado, se caracteriza
principalmente por:
El tamao de las bacterias es
grande.
Se alcanza el valor mas alto en el
numero de generaciones por
hora.
El numero de clulas viables es
prcticamente idntico al de las
clulas totales.
La actividad metablica es
mxima.

FASE ESTACIONARIA

Se produce una estabilizacin de modo que el numero


de clulas que se reproducen equivale a las que
mueren, se puede explicar por dos razones:
Falta o disminucin de nutrientes
Acumulacin de productos derivados del metabolismo
bacteriano como cidos orgnicos entre otros.

NUTRICION Y METABOLISMO

1.
2.
3.

Para que la bacteria pueda vivir y reproducirse debe


disponer de los nutrientes necesarios:
Elementos energticos constitutivos.
Elementos especficos (variables de acuerdo a cada
bacteria).
Condiciones fisicoqumicas adecuadas.

GENETICA BACTERIANA
Entre otras las variaciones pueden ser:
a)
Morfolgicas: cambios de forma y tamao, tincin,
aparicin de flagelos, esporos etc.
b)

Cromgenas: como la no produccin de pigmento rojo por


Serratia marcescens a 37c, pero si a temperatura mas
baja.

c)

Enzimticas: como E.coli que solo


galactosidasa en presencia de lactosa.

secreta

beta

GENETICA BACTERIANA
La informacin gentica de la bacteria se encuentra
contenida en la secuencia de nucletidos del ADN
cromosmico.

Genotipo: es el conjunto de caracteres genticos que la


bacteria posee capaz de transmitirse a la descendencia.
Fenotipo: es el conjunto de caracteres manifestados por
interaccin del genotipo y del medio ambiente.

MEDIOS DE
CULTIVO

OBJETIVOS
Conocer los medios
de cultivo

Aplicar fisiologa al
cultivo de
microorganismos
en el laboratorio

Recordar tcnicas
de tincin en
microbiologa

Identificar medio
de cultivo mtodo
de siembra

Principios de cultivo
microbiolgico

Facilitar el crecimiento y el aislamiento de las


bacterias presentes en una muestra clnica.

Determinar qu bacterias entre las que se


desarrollan tienen ms probabilidades de ser las
causantes de la infeccin y cuales son sus posibles
contaminantes o colonizadores.

Obtener un desarrollo suficiente de las bacterias


de importancia clnica para permitir su
identificacin y su caracterizacin.

CULTIVO PURO

CULTIVO MIXTO
CULTIVO CONTAMINADO

Es importante destacar que la transicin exitosa de un microorganismo in


vivo a un ambiente in vitro va a depender de:
Disponibilidad de nutrientes esenciales
Condiciones ambientales adecuadas
pH
Temperatura
Oxgeno y CO2
Presin
Luz

SLIDOS
LQUIDOS

SEMISLIDOS

Clasificacin de los medios de


cultivo segn consistencia

MEDIOS SLIDOS

semislido

Caldo nutritivo
Caldos de enriquecimiento
Caldos revitalizadores

Enriquecimiento
Nutritivo

Selectivo y
diferencial

Clasificacin de los medios


de cultivo segn utilizacin

MEDIOS NUTRITIVOS

Contienen nutrientes que favorecen el


desarrollo de la mayora de los
microorganismos sin requerimientos
especiales de cultivo.

No promueven el crecimiento de ningn


agente en particular

MEDIOS DE
ENRIQUECIMIENTO
Contienen nutrientes especficos
requeridos para el crecimiento de
patgenos que pueden estar presentes
solo o con otras especies de bacterias en
la muestra de un paciente
Se utilizan para favorecer el desarrollo
de un patgeno determinado a partir de
una mezcla de microorganismos
mediante el uso de especificidad de
nutrientes

En general, son medios lquidos

MEDIOS SELECTIVOS

Contienen uno o ms agentes que inhiben el


crecimiento de los microorganismos que no se
quieren estudiar

Agentes inhibidores: colorantes, sales


biliares, alcoholes, cidos y antibiticos

MEDIOS DIFERENCIALES

Contienen un factor o factores que permite que las


colonias de una especie o un tipo bacteriano exhiban
ciertas caractersticas metablicas o de cultivo que
puedan utilizarse para diferenciarlas de otras
bacterias que crecen en el mismo agar

MEDIOS ESPECIALES

MEDIOS CROMGENOS
MEDIOS DE TRANSPORTE
MEDIOS DE CONSERVACIN

Sustancias cromognicas:
- Son productos qumicos de sntesis que son incoloros
cuando se unen a sustratos naturales por enlaces que son
hidrolizados por enzimas microbianas especficas.
- Cuando la enzima microbiana hidroliza el enlace, se
libera el compuesto cromognico, que adquiere un color
intenso.
- Ejemplo: Cromo agar (agentes uropatgenos), se pone
en evidencia la actividad enzimtica de la B- glucoronidasa
o B- galactosidasa de las bacterias formndose colonias de
diferentes colonias segn la especie.
- Identificacin presuntiva, haciendo innecesaria la
realizacin de pruebas bioqumicas.

Medios para bacterias no exigentes


- agar
- extracto de carne
- peptona
- NACL
- leche descremada (congelar cepas)

NORMATIVA ISP, entregar

CONTROL DE CALIDAD
El Control de Calidad en la preparacin y evaluacin
de los medios de cultivo es considerado como una
esencial y buena prctica de laboratorio, necesaria para
mantener el nivel y la ejecucin de cualquier tcnica
microbiolgica.

Proceso continuo que se extiende desde las materias


primas ; a travs del productor hasta el producto final
utilizado en los diferentes departamentos de anlisis y
diagnstico microbiolgico.

Recuperacin o supervivencia de los microorganismos de inters


(Productividad)
Inhibicin o suspensin de los microorganismos no
deseados.
(Selectividad)
Propiedades bioqumicas (diferenciales y
diagnsticas)
Propiedades fsicas (por ejemplo, pH, Volumen)
Sea estril .... etc.
El Jefe inmediato responsable del rea
* Deber analizar mensualmente los resultados de las pruebas
realizadas por el responsable del departamento de control de calidad
* Evaluar el cumplimiento de objetivos a travs de los resultados

CRITERIOS DE EVALUACIN DE LA CALIDAD


DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS PREPARADOS.
Se evala utilizando criterios objetivos del medio respecto a:
La recuperacin o supervivencia de los microorganismos de inters
La inhibicin o supresin de los microorganismos no deseados tiene que ser
cuantitativa
Los atributos ( por ejemplo: Propiedades fsicas y bioqumicas)
Rajadura del plato o envase
Variaciones en el volumen del medio
Hemlisis
Cristales en el medio
Presencia de burbujas
Presencia de cogulos
Cambio de color normal
Contaminacin
Falla en la inhibicin de microorganismos saprofitos
Esterilidad

PRUEBAS FUNCIONAMIENTO
Para evaluar cada lote de medio de cultivo que sea
recibido en el laboratorio, se emplean cepas patrones
(ATCC) de varios gneros y especies de acuerdo al
medio de cultivo a analizar.
El control del funcionamiento consistir en
comprobar:
capacidad del medio de recuperar un bajo
nmero de los microorganismos ms sensibles
para los que ha sido preparado.
capacidad de inhibir un alto nmero de los
microorganismos que deben ser inhibidos en
caso de los medios selectivos y
diferenciar los microorganismos para los que ha
sido diseado en caso de los medios diferenciales.

RECONSTRUCCIN DEL MEDIO DE


CULTIVO
DESHIDRATADO
Cumplir con las instrucciones de preparacin del medio de cultivo

indicado en la etiqueta del envase

Cumplir con los procedimientos tcnicos de frmulas enviadas por


el cliente
Utilizar agua destilada de calidad
Determinar el pH del M de C
Esterilizacin del medio de cultivo
Procedimiento escrito
Control de esterilidad del Medio de Cultivo

ERRORES EN LA PREPARACIN
Apelmazamiento del producto deshidratado
El envase no fue cerrado correctamente despus de su
uso.
El envase permaneci abierto por largo rato.
El producto sobrepas la fecha de vencimiento.

El valor de pH no coincide con el indicado

No fue empleada agua destilada


El medio fue sobrecalentado durante su preparacin
El Ph no fue determinado correctamente
El medio estaba vencido.

Aparicin de turbiedad o precipitados:


El medio preparado perdi agua por evaporacin
El medio se calent en exceso
El medio no se calent lo suficiente.
No fue empleada la cantidad del medio o suplemento recomendada.

El color del medio no coincide con el indicado:


El medio fue sobrecalentado durante su preparacin.
El pH no fue ajustado correctamente.
El recipiente empleado estaba sucio.
Los azcares contenidos en el medio se caramelizaron

El gel se obtiene ms blando que lo caracterstico


para el medio:
No fue garantizada la disolucin total del agar durante la
preparacin del medio.
No fue empleada la cantidad del medio recomendada o se aadi
agua en exceso.

El crecimiento de los microorganismos es pobre:


El medio fue sobrecalentado
El valor del pH no fue ajustado correctamente.
La adicin de suplementos al medio se efectu a excesiva
temperatura.
El medio no fue mezclado correctamente.

El crecimiento de los microorganismos es atpico:


Quedaron

residuos de sustancias inhibidoras del


crecimiento no deseables, en los recipientes donde se
prepar o distribuy el medio.
El medio de cultivo fue preparado de manera incorrecta.
El producto sobrepasa la fecha de vencimiento.

ES, POR LO TANTO, MUY IMPORTANTE QUE


EL TECNLOGO MDICO SEA QUIEN
SUPERVISE Y CONTROLE TODOS LOS
FACTORES
NECESARIOS
EN
LA
PREPARACIN Y CONSERVACIN DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO, PARA AS LOGRAR
AISLAR E IDENTIFICAR CON EXCELENCIA
LOS DISTINTOS AGENTES MICROBIANOS.

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