La exposicin al arsnico a travs del

consumo de agua potable lleva a

la senescencia y alteracin de la
longitud del telmero en
los seres humanos: Un estudio de
casos y controles en Bengala
Occidental, India
.

Debmita Chatterjee, Pritha Bhattacharjee, Tanmoy

Sau,Jayanta
K.
Das,
Nilendu
Sarma,Apurba
Bandyopadhyay, Sib Sankar Roy, and Ashok K. Giri.

J.
K.

Jose Sanitago Delgado Rodrguez

Mara de los Milagros Hernndez Mndez
Fatima Hernndez Arias

INTRODUCCIN
Dnde?
En Bengala
Occidental, India

Senescencia

Fuente: Agua
contaminada

Exposicin crnica al
arsnico cncer
de piel, rganos
internos

SASP cambia las clulas

senescentes a clulas proinflamatorias
que llevan a la promocin de tumores

Factores SASP

Vas de
sealizaci
n que
conducen
a la
senescenc
ia: la va
dependien
te de p53
a travs
de p21 y
la p53
independi
ente de
p16

Cue
rpo
s
APB
s

Anteced
entes:
experim
entos in
vitro
alargam
iento y
acortam
iento de
telmer
os.

clulas
senesc
entes
es la
activida
d
senesc
encia
asociad
o bgalacto
sidasa
(SA-bgal).

T
R
F
1
T
R

Caracterstica de la
senescencia:
alteracin de longitud
telmero

Telom
erasa
Meca
nism
o ALT

 El objetivo del estudio

fue evaluar la interaccin
entre la senescencia
celular,
marcadores
SASP
y
regulacin
telomrica en individuos
susceptibles
hacia
formas pre-malignas o
malignas de las lesiones
dermatolgicas
inducidas por arsnico.

Eleccin de la poblacin en estudio

La seleccin de los participantes se hizo en base a
reportes encontrados sobre los distritos donde se
tiene mayor intoxicacin por arsnico y estos son
pertenecientes al oeste de bengala y el grupo
control se tomo de un distrito del este , donde se
tiene un control con este toxico.

Los limites permisibles de arsnico en el agua potable ,

reportados por la OMS son hasta 10mg/L , la
concentracin reportada en los lugares del oeste de
bengala va de 30-620 mg/L.
Se seleccionaron 180 individuos para el estudio,
emparejados por edad(40-50 aos) , sexo , uso de tabaco
y estado socioeconmico.

Sujetos en estudio
Se formaron tres grupos de 60 individuos para el anlisis.

WSL
WOSL
Individuos Individuos
expuestos expuestos Individuos
control.
y con
y sin
lesiones
lesiones
cutneas. cutaneas.

EXPUESTOS: Murshidabad , Parganas y

Nadia.
CONTROL: Este de Midnapore.

Fundamento de la Tcnica
Muestreo previo de orina y agua potable , analizado por
Absorcin atmica mediante generacin de hidruros.
(Cantidades de referencia para la comparacin en niveles
sricos).
El anlisis se realizo en suero mediante diferentes ensayos:
Senescencia celular
Medicin de SASP(marcadores de fenotipo secretor asociado a
senescencia).
Evaluacin de la longitud del telmero.
Evaluacin de la actividad de la telomerasa.

Este anlisis esta dirigido a las clulas mononucleares

de sangre perifrica , DNA y protenas.

Senescencia celular
Mediante un kit de ensayo especifico se
procesan las clulas en un frotis de sangre
perifrica.
El nmero de clulas positivas SA- b gal ,
se determin mediante el recuento de 300
clulas a partir de campos elegidos.
Se mide la actividad de la beta
galactosidasa en las clulas , la cual indica
que hay envejecimiento celular que
propicia a la senescencia.

Medicin de sasp
Mediante un kit de ensayo inmunolgico ,
usando IL -6 y IL- 8 kits de ELISA (ThermoKit
Scientific , Rockford , IL) , y MMP- 1 y MMP3( RayBiotech , Inc. , Norcross, GA ) segn el
fabricante delinstrucciones.
Se
cuantifica
la
presencia
de
las
metaloproteinas de matriz en los promotores
especficos , para evaluar los posibles
polimorfismos( insercin de guanina m1
o
adenosina m2) presentes que estn induciendo
al dao y proliferacin de clulas malignas.

Evaluacin de la longitud del

telmero
Longitud de los telmero (TL) se midi usando
qPCR en sangre total.
La determinacin se bas en la relacin del nmero
de copias repetidas de los telomeros (T) y el
nmero de copias del gen individual (S) expresada
como T / S proporcin. Todos los experimentos se
realizaron por triplicado en Mx3000P (Stratagen,
Agilent Technologies,Santa Clara, CA).
A fin de validar esta proporcin se realizo un
posterior southernblot.

Actividad de la telomerasa.
Se trabajaron las clulas de sangre perifrica ,
obtenidas de las muestras anteriores(long.tel.) , se
someten a lisis para extraer las protenas usando el
Kit Telo TAGGG telomerasa PCR ELISA ( RocheApplied
Science ), siguiendo el protocolo del fabricante .
Una muestra se considera positiva a la telomerasa si
la diferencia en la absorbancia de las muestras y la
control es mayor a 0.2(kit) .
Se evala la presencia de la telomerasa que dar la
capacidad de la DNA polimerasa para replicar
material gentico de los extremos de los cromosomas
para el buen funcionamiento del ciclo celular.

Resultados:
Caractersticas demogrficas y la
exposicin de los participantes al
arsnico:
El As-contenido en el agua potable y
la orina fueron significativamente
mayor en comparacin con
individuos no expuestos .

Exposicin a arsnico induce senescencia va p53-p21

En la medicin de la senescencia inducida por As- se
encontr que el porcentaje de clulas senescentes fue
significativamente mayor en la poblacin expuesta como
que el no expuesto. El anlisis cuantitativo de las
protenas inductor de senescencia revelaron que p16 fue
aproximadamente dos veces mayor en los controles no
expuestos que el grupo expuesto mientras que p21 y
p53 fue aproximadamente 2,5 y 1,46 veces,
respectivamente, ms alta en el grupo expuesto que los
controles no expuestos
Expresin diferencial de Marcadores SASP Con la
Presencia de las lesiones cutneas inducidas por arsnico.

Longitud del telomero alterada esta

asociada con la induccin del
arsnico a lesiones de piel

Discusin:

Discusin de resultados:
La poblacin expuesta a As, independientemente del estado de lesin
de piel, tena aumento significativo de clulas senescentes comparado
con la poblacin no expuesta.
Los niveles de senescencia inducido por protenas como p16,p21 y
p53 en individuos expuestos que presentan lesin en la piel y en el
grupo que no presenta lesiones muestra sobre regulacin de la p53
va que implica p53 y su efector rio abajo p21 en el grupo expuesto,
pero no p16.
Si bien el arsnico est induciendo la SASP, no est asociada con la
induccin a lesiones cutneas y no es el factor fundamental que
contribuye a la desarrollo de la carcinognesis inducida por As.
Aumento en la longitud telomerica podra ser una indicacin de que el
arsnico tiene una efecto constante en la longitud de los telmeros,
independiente de la edad.
Tienen RTL mayor que 0.5 mostr un aumento significativo del riesgo
de el desarrollo de lesiones de la piel

Conclusin
La exposicin al As induce senescencia in
vivo, lo que lleva a que los marcadores SASP
estn elevados, independientemente de la
lesin en la piel. El alargamiento del Telmero
se encontr que est asociado estrictamente
con la ocurrencia de lesin de la piel inducida
por el Arsnico. La longitud del Telmero
puede utilizarse para predecir el riesgo de
susceptibilidad de un individuo hacia el
desarrollo
de
lesiones
dermatolgicas
inducidas por Arsnico.

REFERENCIAS
BIBLIOGRFICAS

Debmita
Chatterjee,Pritha
Bhattacharjee, Tanmoy J. Sau,Jayanta
K. Das, Nilendu Sarma,Apurba K.
Bandyopadhyay, Sib Sankar Roy, and
Ashok K. Giri. Arsenic Exposure
through Drinking Water Leads to
Senescence
and
Alteration
of
Telomere Length In humans: A CaseControl Study in West Bengal, India.