VARIANTE Du

El factor Rh es una clase de protena que se encuentra en los

glbulos rojos de la sangre, cuando alguien tiene esa protena
se le considera Rh Positivo. Cuando no la tiene es Rh
Negativo. El factor Rh es hereditario y se transmite en dos
genes. El Factor Rh positivo es dominante, es decir si una
persona tiene un gen positivo y otro negativo, su factor Rh ser
positivo.
El termino DU se refiere a la expresin debil del antigeno D
normal , es decir la menor concentracin de antigeno D por GR.
Todo donante encontrado como DU positivo se identifica con Rh
D positivo.
En la evaluacion del DU se usa anti D en la prueba
antiglobilinica directa.

 PROCEDIMIENTO:
1. En tubo rotulado como DU coloque 1 gotas de GR del px y una gota de anti D.
2. En otro tubo rotulado como AC agregar 1 gota de GR y 1 gota de suero del px.
3. Los GR anteriormente usados deben estar lavados y diluidos al 2-5%
4. Mezcle e incube los tubos por 15-30 min a 37C
5. Centrifugar por 15-45 segundos
6. Observar si existe alguna reaccin de aglutinacin
7. Lavar 3 veces, en el ultimo lavado decantar completamente para eliminar el
exceso de solucion salina.
8.Agregar 1 gota de anti IgG a cada tubo y centrifugar durante 15 seg.
9. Examinar buscando alguna aglutinacin.
10. Si la prueba resulto negativa agregue a cada tubo 1 gota de clulas control
coombs.
11. Mezcle y centrifugue durante 15 seg.
12.Si se observa aglutinacin confirma que el reactivo de antiglobulina funciono
bien y el DU se hizo correctamente.

Ag D
- De mayor importancia en el Sistema
Rh, por su inmunogenicidad.

Acs IgG

Frecuencia 85 % D positivos

Frecuencia 15 % D negativos

70 % D negativos anti D

 Naturaleza proteica y su estruct ura

est mantenida por lpidos que la
rodean.
Peso molecular: 170 000 300 000
daltons.
Constituida por muchas
determinantes antignicas llamadas
eptopes.
Su estructura est compuesta por 4
partes y la mayora de las personas

Varainte Du
Variantes dbiles: Du
Rara en acucasianos pero comn en la raza
negra (22%)
Existen al menos 3 variantes Du de diferentes
categoras
Du adquirido o du de alto grad:
1.- Presencia del Gen C en posicin trans (en el
cromosoma homlogo opuesto) con el gen D
debilita la expresin fenotpica de este ltimo,
pero su descendencia hereda un gen d normal
que puede expresarse sin problemas.

 Las personas que poseen estea variante no

producen anti D.
Dce/dCe posicin trans de C y D
Dce/dCe puede producir un fenotipo Du
2.- Du variante
En esta variante de Du, el mosaico
antignico de la molcula D ha perdido
algunos de sus componentes o eptopes,
debilitndose su expresin fenotpica. Esta
alteracin es gentica

 Y por lo tanto puede ser heredada

por la descendencia. Las personas
con esta variante pueden producir
anticuerpos contra los componentes
que faltan.

Antgeno D normal

Du variante en que se h
perdido parte de la
molcula.

 3.- Du hereditario
Algunas personas a pesar de tener el
mosaico antignico completo, lo
tiene dbilmente expresado, cuya
causa no se cono

ANTGENO D NORMAL

Du HEREDITARIO

Du Hereditario

Antgeno D
Normal

Du Hereditario

MATERIALES
Muestra: sangre completa con o sin
anticoagulante.
Material:
CENTRFUGA
Pipetas Pasteur
Tubos de Kahn
Lminas de vidrio
Baguetas
Gradillas de metal o de madera.

MATERIALES

Fuente de luz y calor

Bao mara
Reactivos:
Suero anti Rh (anti D)
Suero antiglobulina humana
(Coombs)
Suero fisiolgico

PROCEDIMIENTO
Mtodo de lmina:Tipificaccin Rh (D)
1.- Preparar una suspensin al 50 % de
aproximadamente de eritrocitos de la muestra en
estudio en su propio plasma o ssuero.
2.- Colocar una lmina de vidrio sobre la fuente de
luz y esperar hasta que se caliente a 40 45 C.
3.- Depositar una gota de suero anti D para prueba
en lmina en el centro de la placa.
4.- Depositar una gota de la suspennsn al 50 % de
eritrocitos de la muestra cerca de la gota de suero
anti D,

 5.- Mezclar cuidadosamente con una bagueta e

inclinar la lmina a interaos de 10 segundos de modo
que el lquido se acumule en uno de los extremos y
volver lentamente a la posicin horizontal.
Repetir el procedimiento varia veces, cambiando
cada vez la direccin de la inclinacin de la lmina.
6.- Observar si existe o no aglutinacin
macroscpica, la cual debe aparecer antes de 30
segundos completarse a los 2 minutos. Lalectuta
debe realizarse dentro de este plazo, ya que despus
puede presentarse una falsa aglutinacin por
desecamiento.

 Mtodo en tubo:
1.- Deposita dos gotas de suero anti
D en un tubo de Kahn previamente
marcado.
2.-Agregar una gota de los eritrocitos
de la muestra, suspendidos al 4% en
su propio plasma o suero.
3.- Mezclar e incubar 15 minutos a
37C o 1 hora a temperatura
ambiente.

 4.- Centrifugar 1 minuto a 1000 RPM o

20 segundos a 3400 RPM.
5.- Leer sobre una fuente de luz,
removiendo suavemente los eritrocitos
sedimentados y observar si existe o no
aglutinacin macroscpica.
Interpretacin :
Aglutinacin: Rh (+)
No aglutinacn: Rh (-)

Investigacin de la Variante
Du
1.- Usar el mismo tubo que dio resultados
negativos y que contiene suero ati Rh y
glbulos rojos de la muestra y que ha sido
incubado por una hora.
2.- Lavar los glbulos rojos con abundante
suero fisiolgico por 4 veces.
3.- despus del ultimo lavado, eliminar tanto
suero fisiolgico como sea posibles, dejando los
glbulos rojos suspendidos en el suero
fisiolgico que queda adherido a las paredes
del tubo.

 4.- Agregar una gota de suero

antiglobulina humana.
5.- Mezclar y centrifugar a 1000 RPM
durante un minutos o a 3400 RPM
durante 20 segundos.