INSTITUTO TECNOLOGICO DE ACAPULCO

MICROBIOLOGA GENERAL
PROFESOR: M.C. MIGUEL ANGEL DAZ ALDAY

CICLO DE EXPORULACIN DE UNA BACTERIA

Tincin de esporas (tcnica de Shaeffer-Ffulton)
INTEGRANTES:
LOPEZ LOPEZ FIDEL BLADIOMAR
NO. DE CONTROL: 12320352
ISAAC PINEDA HEREDIA
NO. DE CONTROL: 12420378
ACAPULCO, GRO. A 2 DE MARZO DEL 2016

Endosporas bacterianas
Las endosporas son formas de reposo,
con el metabolismo prcticamente
detenido (criptobisis).
Debido a su diseo, resisten
condiciones fsicas y qumicas muy
agresivas (radiaciones UV, calor,
sequedad, disolventes, etc.).
Son producidas por ciertas bacterias
Gram positivas: Bacillus, Clostridium,
Sporosarcina.
http://pro.corbis.com/search/Enlargement.aspx?CID=isg&med
iauid=%7B1D5366E0-CE9E-4B38-982D-F452D1E583C0%7D

Endosporas bacterianas
Se producen cuando la bacteria detecta
bajos niveles de nutrientes (C, N, P).
La espora se forma dentro de la clula
vegetativa (endospora).
Al final de la esporulacin, la clula
madre se autolisa, y la espora queda libre.
La endospora resiste periodos largos en
ausencia de nutrientes y estrs ambientales.
Cuando las condiciones son apropiadas, la
espora germina y se surge una clula vegetativa.

Esporognesis
La esporognesis es un proceso de diferenciacin que apareci
evolutivamente en bacterias
para lograr supervivencia en
ausencia de nutrientes.

http://ilovebacteria.com/spore.htm

Criterios taxonmicos

Su dimetro relativo
~Deformantes
~No deformantes

Localizacin
~Subterminales
~Centrales
~Terminales

al de la clula madre

Partes de

la endospora

Pared
Corteza
Protoplasto o ncleo

Cubiertas

Protoplasto
(ncleo de la endospora)

DPA

DPC

Sus componentes estn

inmovilizados en una matriz de quelatos
Ca2+ (dipicolinato de
de cido dipicolnico (DPA) con iones
calcio, DPC), que llega a representar el 15% del peso.

Protoplasto
(ncleo de la endospora)
Citoplasma muy deshidratado (10 - 30%)
Contiene el cromosoma, pocos ribosomas,
ARNt, ARN polimerasa, mono y di nucletidos
pero no tri nucletidos (no ATP).
Carece de componentes inestables:
~No ARNm
~No enzimas biosintticas
~No aminocidos ni bases nitrogenadas cofactores
~No reducidos (NADH, CoA, etc.)
Espora de Bacillus cereus
http://www.shef.ac.uk/mbb/staff/moir-a

Pared de la endospora
A base de un Peptidoglucano similar al de la clula vegetativa.
Estructura muy delgada.
Constituye lo que ser la pared de la futura clula
Origen: se sintetiza a partir de la preespora

Pared

vegetativa.

Corteza

o crtex

Crtex

La lactama del murmico

presenta gran resistencia a la
lisozima.
Al microscopio electrnico: gruesa, transparente a
electrones,
lminas concntricas, formado de un Peptidoglucano especial:
~ 30% del NAM con tetrapptidos, pero con bajo grado de
entrecruzamiento
~ 15% del NAM tiene solo L-ala
~ 55% lactama del cido murmico

Exosporio
Estructura membranosa
transparente, a modo de saco
delgado y flojo a base de
protenas, polisacridos
complejos y lpidos

Muy resistente a enzimas

proteolticas

Esporulacin
Estmulo desencadenante de la
esporulacin: estado de inanicin
(carencia de nutrientes)
Dura 7-8 horas en Bacillus subtilis o en
B. megaterium.
Las fases se nombran con un nmero
romano (I, II,....VII). Se suele indicar los
lmites de tiempo en los que
transcurre la fase (ej: t2-t3 significa

que la fase transcurre entre la 2 y la

3 hora)

Fase I (t0-t1)
Los dos cromosomas se condensan
formando un filamento.
Se inician dos tabiques, cada uno cerca
de un polo (espculas de PC hacia el
interior).
Se degradan protenas viejas y los
aminocios se emplean en fabricar
protenas especficas de la esporulacin.
Se sintetizan y liberan al medio:
antibiticos y exoenzimas (proteasas,
amilasas, ribonucleasas, etc.).
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/09esporas.htm

Fase I (t -t )
1 2
I

Se termina el septo acntrico en uno de los

polos (el otro septo no se completa, aborta).
Cada nucleoide queda en un:
~Compartimiento pequeo, la prespora.
~Compartimiento grande la clula
madre.
Sigue sntesis de antibiticos y exoenzimas
(proteasas, amilasas, ribonucleasas, etc.).

Fase III (t2-t3)

Formacin del protoplasto de la espora
debido a:
~Degradacin selectiva del PG
del septo
~La membrana citoplsmica de la
clula madre va avanzando hacia
el polo, envolviendo a la prespora
Resultado: prespora posee dos
membranas, con polaridad opuesta.
La sntesis de protenas sigue en
clula madre, pero se detiene en
la prespora.

la

Fase IV (t -t )
3 4
Formacin de la corteza:
deposicin de PG de la clula madre
entre las dos membranas de la
prespora. Deposicin del
PG de la pared, procedente
de
la prespora.
La espora puede verse ya
refrctil en fresco.
Comienza sntesis de DPA y
acumulacin de Ca2+.
Comienza la sntesis del
exosporio.

Fase V (t4-t5.5)
Deposicin de materiales de las
cubiertas por fuera de la membrana
externa de la espora.
Contina la acumulacin de DPA,
Ca2+ para formar
que secuestra iones
el DPC en el protoplasto.

Fase VI (t5.5-t7)
Maduracin de prespora a endospora.
(PG especial,
Maduracin de la corteza
entrecruzamientos).
Maduracin de las
cubiertas.
Citoplasma se hace ms
homogneo y denso a los
electrones.
Resistencia al calor y
al cloroformo.
Resistencia a las
radiaciones UV.
Resistencia a la
lisozima.

ms laxo, con pocos

Fase VII (t7-t8)

Autolisis de la clula madre y liberacin de la espora.
El exosporio pierde agua y se pega a las cubiertas.

Tincin de esporas (tcnica de

Shaeffer-Ffulton)
FUNDAMENTO: Las endosporas poseen unas cubiertas exclusivas que
las hacen resistentes a los factores ambientales adversos. Adems, estas
cubiertas hacen que las esporas aparezcan en el
microscopio ptico como estructuras refringentes y de difcil tincin.
La tincin especfica de esporas requiere dos colorantes:

1.- Verde malaquita: capaz de teir las esporas en caliente.

2.- Safranina: colorante de contraste que tie las formas vegetativas.
Las endosporas, tras la primera tincin, no perdern el colorante en el
lavado con agua, y s lo harn las formas vegetativas, que quedarn teidas
con el segundo colorante.

Tincin de esporas.

Miercoles
Tincin

Frotis y fijacin

1.-Poner una gota

de agua en un
porta

2.-Calentar, con un
hisopo de algodn
empapado
en
alcohol y prendido
con la llama del
mechero, hasta la
emisin
de
vapores. Mantener
caliente durante 5
minutos.

2.-Tomar la muestra
de un cultivo de
Bacillus

3.-Lavar con agua

Espora
s

Bacteria
s

3.-Extender sobre
el agua y fijar a la
llama del mechero

4.-Teir con Safranina 1

1.-Cubrir la
preparacin con
Verde Malaquita

5.-Lavar con agua,

dejar
secar
y
observar
al
microscopio

Bibliografia
http://www.bio-nica.info/biblioteca/TincionBacterias.pdf
http://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-esporas.htm
https://es.wikipedia.org/wiki/Espora#Esporas_bacterianas
http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/117258/mod
_resource/content/1/Estructura%20y%20funcion%20parte
%201.pdf