UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

SEMINARIO
CINTICA ENZIMTICA

MODULACION
ENZIMATICA

Una determinada molcula de enzima no tiene por qu actuar

siempre a la misma velocidad; esta es otra propiedad que distingue a
las enzimas de los catalizadores inorgnicos.
a. En primer lugar la actividad enzimtica puede ser regulada por
los cambios de Ph y temperatura.
b. La velocidad enzimtica depende de las concentraciones de los
sustratos y en su caso, de cofactores.
c. Por otra parte, la presencia de productos finales de una reaccin
enzimtica puede hacer que esta sea ms lenta o incluso invertir su
sentido.
d. Tambin existen molculas que actan sobre las enzimas
inhibiendo su accin cataltica, bien por ocupar temporalmente el
centro activo (inhibidor competitivo), o bien por alterar la composicin
espacial de la enzima ( inhibidores no competitivos).

 Enzimas

alostricas: Pueden adoptar dos conformaciones interconvertibles,

llamadas R (relajada) y T (tensa).
Favorecen R: Moduladores positivos. El propio sustrato es a menudo un modulador
positivo. Otras molculas que favorecen la forma R son los moduladores alostricos.
Favorecen T: Moduladores negativos, a este grupo pertenecen los inhibidores
alostricos .

Algunas

enzimas pueden pasar de una forma menos activa a una ms activa,

unindose convalentemente a un grupo qumico de pequeo tamao. Tambin existe
el caso inverso
Fosforilacion / desfosforilacin y adenilacin / desadenilacin.
As el Glucgeno sintetasa, una enzima relacionada con la sntesis de glucgeno,
puede adoptar dos formas principales por modificacin covalente: La sintasa D,
menos activa, y conteniendo grupos fosforilo se transforma en sintasa I, ms activa.
Al liberar los grupos fosforilos por el contrario pasa de sintasa I a sintasa D.

REACCION ENZIMATICA
DEFINICION:
Es una reaccin qumica mediada por una
enzima.La reaccin catalizada por una
enzima utiliza la misma cantidad de
sustrato y genera la misma cantidad de
producto que una reaccin no catalizada,
las enzimas no alteran en absoluto el
equilibrio de la reaccin entre sustrato y
producto.

TIPOS DE REACCION
I .Enzima Soluble-Sustrato Insoluble:
Las proteasas o amilasas en los detergentes
para ropa. Sin embargo esta reaccin enzimtica
ha causado cierta controversia en relacin con la
contaminacin del agua. Una vez en solucin, la
enzima soluble podra digerir (es decir,
descomponer) un sustrato insoluble como una
mancha de sangre.

II .Enzima Insoluble-Sustrato
soluble:
Actualmente se est intensificando la
investigacin de las reacciones de este
tipo. Al unir grupos enzimticos activos a
superficies slidas se pueden crear
unidades de procesamiento continuo.

III .Enzima Soluble-Sustrato

soluble:
Es evidente que la ms intensa actividad en el
estudio de las enzimas ha estado relacionada
con las reacciones biolgicas, Muchas de
estas reacciones son homogneas en fase
lquida. Al desarrollar algunos de los principios
elementales de la cintica de las reacciones
enzimticas

Factoresque
queinfluyen
influyenen
enlala
Factores
actividadenzimtica
enzimtica
actividad
1._ Concentracin de
Enzima
2._Concentracin de Sustrato

3._

Temperatura

4._ PH

1._ Concentracin de Enzima

Si tomamos en cuenta la
velocidad inicial (equivalente a
la actividad enzimtica) de las
diferentes concentraciones de
enzimas, siempre y cuando no
se modifiquen las dems
factores (pH, temperatura, etc.),
podremos afirmar que a mayor
concentracin de enzimas,
mayor ser la actividad
enzimtica
2._Concentracin de Sustrato
Si vara la concentracin de sustrato
en forma ascendente, sin alterar los
otros factores, en un principio hay
un incremento muy rpido de la
velocidad
de
la
actividad
enzimtica, luego conforme va
aumentando la concentracin de
sustrato
esta
velocidad
va
aumentando pero de forma muy
lenta hasta llegar a un tope.

3._ Temperatura
En conceptos generales a medida
que la temperatura aumente, la
actividad enzimtica tambin
aumenta, pero esta actividad
enzimtica va a llegar a un tope, a
una determinada temperatura. Por
ejemplo, en las personas la
mayora de enzimas llega a su
mxima actividad enzimtica a los
37C (temperatura corporal) si se
incrementa la temperatura puede
llegar a ser inactivadas.

4._pH
La mayora de enzimas encuentran
su mayor actividad enzimtica con
un pH entre 6 y 8, pero existen
otras, como la pepsina, que
necesitan un pH de aprox. 1,5.

INHIBICIN
IRREVERSIB
LE

- Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo

qumico de la enzima, modificndola covalentemente
- Su accin no se describe por una constante de equilibrio Ki,
sino por una constante de velocidad

E+I

ki:

- A diferencia de la inhibicin reversible, el efecto de los

inhibidores irreversibles depende del tiempo de actuacin
del inhibidor.
- Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente
txicos.

Algunos tipos de inhibidores irreversibles

1. Reactivos de grupos -SH

2. Organofosfricos
3. Ligandos de metales
4. Metales pesados

Reactivos de grupos -SH

(a) Agentes alquilantes
Yodoacetato
(b) Compuestos insaturados
N-Etil maleimida (NEM)
(c) Formadores de mercptidos
p-Hidroximercuribenzoato
(d) Oxidantes
Promueven la oxidacin de dos tioles a un disulfuro

Organofosfricos
DFP:
diisopropil
fluorofosfato

- Actan sobre enzimas sernicas

- nicamente sobre la Ser activa
- Insecticidas: Parathion, Malathion
- Inhibidores de la Acetilcolinesterasa
- Neurogases

Ligandos de coordinacin de metales

Es el caso del ion cianuro, CNSe fija con gran afinidad a la sexta posicin de coordinacin
del Fe hemnico, impidiendo toda modificacin posterior.
Por ello acta sobre sistemas de Fe hemnico con la sexta
posicin de coordinacin libre, como la citocromo oxidasa,
de lo que deriva su elevadsima toxicidad

Substratos suicidas
(Inhibidores activados enzimticamente)

- Se trata de molculas que se unen al centro activo de manera

especfica, igual que el substrato o los inhibidores competitivos
- Una vez unidos al centro activo, la enzima transforma la
molcula en una especie qumica muy reactiva que modifica
covalentemente a la enzima, inactivndola
- Tienen por tanto (a) la especificidad del inhibidor competitivo
y (b) la potencia de los inhibidores irreversibles

Modo de accin de los inhibidores suicidas

E+I

EI

EI*

E + I*

1. El inhibidor se fija a la enzima igual que el substrato o un

inhibidor competitivo convencional
2. La accin cataltica de la enzima convierte al inhibidor I
en una especie altamente reactiva I*
3. I* modifica covalentemente a la enzima, inactivndola
de forma definitiva al igual que un inhibidor irreversible.

Existen unos inhibidores denominados pseudoirreversibles que no cumplen

todas las condiciones de Michaelis, puesto que la concentracin inicial de inhibidor
[Io] es efectiva al mismo orden de magnitud que la concentracin inicial de enzima.
En este tipo de inhibicin la Ki presenta valores que van desde 10-8 -10-12.

Se comportan como inhibidores pseudoirreversibles la gran mayoria de inhidores

de naturaleza proteica, as como los anticuerpos obtenidos frente a las protenas
enzimticas. El comportamiento cintico es diferente de los inhibidores reversibles.

Los inhibidores suicidas son compuestos que son inactivos como inhibidores en
ausencia de enzimas, se activan especficamente por la enzima a la que van a
inhibir , unindose covalentemente a la protena enzimtica.

Anlisis de la velocidad de la inhibicin irreversible. Muestra un comportamiento

dependiente de la presencia de substrato y de la posibilidad que el parmetro
tiempo influya en el proceso de unin covalente. As se distinguen desde el punto
de vista cintico:
Inhibicin irreversible simple
Inhibicin irreversible simple en presencia de Sustrato.
Inhibicin irreversible simple tiempo dependiente
Inhibicin irreversible simple tiempo dependiente en presencia de
Sustrato

ISOENZIMAS

Deshidrogenasa Lctica LDH1 (MMMM)

DEFINICION
Las

isoenzimas son distintas formas

moleculares de una misma enzima que
presentan o muestran especificidad por el
mismo sustrato.
La
principal caracterstica de las
isoenzimas es que deben tener la misma
especificidad de sustrato.

Ejemplo de Isoenzima

La

Glucoquinasa, una variante de hexoquinasa

que no es inhibida por la glucosa-6-fosfato.

Sus

diferentes funciones de regulacin y su

menor afinidad por la glucosa (en comparacin
con otros hexoquinasas), le permiten tener
diferentes funciones en las clulas de
determinados rganos, como el control de la
liberacin de insulina por las clulas beta del
pncreas, o la iniciacin de la sntesis de
glucgeno por las clulas del hgado.

Variabilidad

Variabilidad Tisular

Distintos tejidos u
rganos de un mismo
individuo muestran
diferentes formas
moleculares o distintas
cantidades relativas
de las mismas
isoenzimas.

Variabilidad
Ontognica

Un mismo tejido u
rgano en distintos
momentos del
desarrollo muestra
diferentes formar
moleculares o distintas
cantidades relativas de
las mismas isoenzimas.

Variabilidad
Poblacional

Distintos individuos en
el mismo tejido u
rgano y en el mismo
estado de desarrollo
presentan diferentes
isoenzimas.

APLICACIN
MEDICA

En quimioterapia:
Muchos

de los frmacos que se

utilizan, son inhibidores enzimticos,
otros aumentan o disminuyen la
sntesis de enzimas.
Ejemplos: Sildenafil (Viagra), la
penicilina, la vancomicina, son
inhibidores enzimaticos.

Control Metablico:
Muchas

de las rutas metablicas que

tienen lugar en la clula, son inhibidas por
metabolitos que controlan la actividad
enzimtica mediante procesos de
regulacin alostrica o inhibicin por
sustrato.
Ejemplo: la regulacin alostrica de la
gluclisis

IMPORTANCIA BIOMEDICA
El anlisis
cintico revela
detalles del
mecanismo
cataltico.

Permite identificar posibles agentes

teraputicos que incrementan o
inhiben las velocidades de procesos
catalizados por las enzimas.

El anlisis cintico
permite reconstruir
los pasos mediante
los cuales las
enzimas trasforman
los sustratos en
productos.

Para saber como las

condiciones fisiolgicas
adversas como: anoxia,
acidosis y alcalosis
metablicas, toxinas y
agentes farmacolgicos
afectan el equilibrio.

ENZIMAS UTILIZADAS EN EL DIAGNOSTICO Y

TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES
ENZIMAS

ENFERMEDAD

Fosfatasa acida

Carcinoma prosttico

Fosfatasa alcalina

Hgado , enfermedad sea

Amilasa

Enfermedad pancretica

Glutamato aminotransferasa

Hgado ,enfermedad cardiaca

Aspartato aminotransferasa

Hgado ,enfermedad cardiaca

Alanina aminotransferasa

Hgado ,enfermedad cardiaca

Lactato deshidrogenasa

Hgado, corazn y hemates

Creatinina cinasa

Corazn, msculo ,cerebro

Seroplasmina

Enfermedad de Wilson ( hgado)

Aldolasa

Msculo, corazn

Tripsina

Pncreas ,intestino

Glucosa 6-fosfato deshidrogenasa

Hemates (defecto gentico )

- glutamiltranspectidasa

Enfermedad heptica

Ornitina transcarbamilasa

Enfermedad heptica

Seudocolinesterasa

Hgado

Pepsina

Estmago

Hexosa 1 fosfato uridiltransferasa Galactosemia ( defecto gentico)

Glutatin reductasa

Anemia, cianosis

Elastasa

Enfermedades del colgeno

Plasmina

Trastornos de la coagulacin
sangunea

ENFERMEDADES DE
DOSAJE SRICO

FOSFATASA ACIDA
PROSTTICA.
La fosfatasa cida
prosttica es una isoenzima
localizada principalmente
en la prstata, si bien
puede detectarse tambin
en menor cantidad en
leucocitos, pncreas, bazo
y vescula biliar. Se
consideran normales las
concentraciones inferiores a
4 ng/ml.

 Los

niveles elevados de FAP tambin han

sido relacionados con el cncer testicular,
leucemia, y el linfoma no-Hodgkin, as
como con trastornos no cancerosos tales
como la enfermedad de Gaucher, la
enfermedad de Paget, la osteoporosis,
cirrosis del hgado, embolia pulmonar y el
hiperparatiroidismo

ALDOLASA.
Significado clnico
La aldolasa es una enzima de la va glucoltica que se usa
ocasionalmente como marcador para la enfermedad muscular.
Presente en hgado y cerebro.
Los niveles disminuyen frente a enfermedades
miodegenerativas crnicas con baja masa muscular.
Los niveles estn aumentados en distrofias musculares,
dermatomiositis, polimiositis y triquinosis.

 Valores

normales

Un tpico rango de referencia es 1.0 a 7.5 unidades por

litro y hay ligeras diferencias entre hombres y mujeres.

Utilidad clnica
Diagnstico de distintos tipos de miopatas.

Variable por enfermedad

Aumentado: Hepatitis aguda, infarto de
miocardio; procesos con desintegracin
hstica como pancreatitis hemorrgica,
gangrenas extensas, neumona, infarto
pulmonar, anemia hemoltica y psicosis
alcohlica.
Disminuido: Cnceres epiteliales de

Tripsina

La tripsina es una enzima peptidasa, que

rompe los enlaces de las protenas mediante
hidrlisis para formar pptidos de menor
tamao y aminocidos.
La tripsina es producida por el pncreas en
forma de tripsinogeno (enzima inactiva), y
luego es activado en el duodeno por la
enteroquinasa intestinal a tripsina (enzima
activa) mediante corte proteoltico.
El pH ptimo es 8 y la temperatura ptima es
37 C.

LDH: Lactato deshidrogenasa

Es una enzima oxidorreductasa, dado que

cataliza una reaccin redox, en la que el
piruvato es reducido a lactato gracias a la
oxidacin de NADH a NAD+.
Participa en el metabolismo energtico
anaerobio,
reduciendo
el
piruvato
(procedente de la gluclisis) para regenerar
el NAD+, que en presencia de glucosa es el
sustrato limitante de la va glucoltica.

Reaccin

La lactato deshidrogenasa (140 kDa) est

formada por 4 subunidades, cada una de unos
35 kDa. Se conocen dos tipos de
subunidades: H y M, que presentan pequeas
diferencias en su secuencia de aminocidos.
Se asocian y forman 5 isoenzimas.

1.
2.
3.
4.
5.

LDH-1 (H4): en el corazn, msculos y

eritrocitos.
LDH-2
(H3M):
en
el
sistema
retculoendotelial y leucocitos.
LDH-3 (H2M2): en los pulmones.
LDH-4 (HM3): en los riones, placenta
y pncreas.
LDH-5 (M4): en el hgado y msculo
esqueltico.
La asociacin de las subunidades para
formar tetrmeros es aleatoria.

Fisiopatologa

Los niveles aumentados de LDH pueden

indicar:
Cardiopatas
Enfermedades hematolgicas.
Hepatopatas
Metstasis tumorales

ENFERMEDAD DE WILSON
Es un trastorno hereditario en el cual hay demasiado
cobre en los tejidos corporales. El exceso de cobre
causa dao al hgado y al sistema nervioso.
enfermedad hereditar
ia
autosmica recesiva
, poco comn. En
caso de que ambos
padres porten un gen
anormal para la
enfermedad de
Wilson, hay un 25%
de posibilidades en
cada embarazo de
que el nio tenga el
trastorno

ENFERMEDAD DE WILSON
Sntomas:

Postura anormal de brazos y piernas

Confusin , delirio y demencia
Dificultad y rigidez para mover los brazos y
las piernas
Dificultad para caminar (ataxia)
Cambios emocionales o conductuales
Agrandamiento del abdomen (
distensin abdominal)
Cambios de personalidad
Fobias, angustia (neurosis)
Movimientos lentos
Lentitud o disminucin de los movimientos
y expresiones faciales
Deterioro del lenguaje
Esplenomegalia
Temblores en los brazos o en las manos
Movimientos incontrolables
Vmito con sangre
Debilidad
Movimientos impredecibles o espasmdicos

PANCREATITIS
AGUDA es un proceso inflamatorio agudo del pncreas,
desencadenado por la activacin inapropiada de los
enzimas pancreticos, con lesin tisular y respuesta
inflamatoria local, y respuesta inflamatoria y
compromiso variable de otros tejidos o sistemas
orgnicos distantes.

Se han establecido una serie de teoras tendientes a explicar el mecanismo

desencadenante de la pancreatitis aguda:
Teora del reflujo duodenal. Puede jugar un papel en algunos casos de
pancreatitis, pero en la mayora de ellos no hay evidencia que lo apoye.
Teora del reflujo Biliar. Esta hiptesis esta limitada principalmente a la PA
asociada con colelitiasis. Sugiere que la impactacin de un clculo en la porcin
distal del canal comn facilita el reflujo de bilis hacia el interior del conducto
pancretico.
Teora de la obstruccin del flujo pancretico. En el caso de la litiasis biliar,
esta teora sostiene que un clculo biliar o la inflamacin secundaria al paso del
mismo, podran obstruir transitoriamente el conducto biliar comn y el pancretico
en la ampolla de Vter.

PROSTATITIS (FOSFATASA
ACIDA)
La fosfatasa cida prosttica (PAP, por sus
siglas en ingls) se presenta en cantidades
pequeas en la sangre, pero puede encontrarse
en niveles ms altos en algunos pacientes con
cncer de la prstata

Sntomas:

Aumento de la frecuencia urinaria

Dolor en el bajo abdomen
Dolor en el ano
Dolor al orinar
Disminucin en la fuerza del chorro de orina
Infecciones recurrentes del tracto urinario
Dolor perineal o en el piso plvico
Dolor testicular
Dolor o ardor durante la miccin
Dolor con el movimiento intestinal
Orina con sangre
Incontinencia
Color de orina anormal