NEISSERIA Y MOXARELLA

CATARRHALIS
Bacteriologa
EQUIPO: 3

4.- B

Q . F. B .

A L F O N S O J I M E N E Z A LO N D RA
F LO R E S C A M P O S M A RT H A YA N E T
G A RC I A S O R I A N O Y E S E N I A
P E R E S A L C A L A A M A I RA N I
TA M AY H E R N A N D E Z M A R I E L A

Introduccin a la familia
Neisseriaceae
La Neisseria gonorreae, el agente
etiolgico de la gonorrea fue
observada por primera vez en 1879,
en exudados purulentos uretrales y
conjuntivales.
El microorganismo se aisl e inocul
en voluntarios, posteriormente se
reaisl por parte de Bumm en 1885,
con lo cual se prob la relacin del
microrganismo y la enfermedad.

Introduccin a la familia
Neisseriaceae
El agente etiolgico de la
meningitidis cerebroespinal fue
descrito en 1887, posteriormente
Marchiofava y Celli lo observaron en
exudados menngeos.
En 1887 Weichselbaum aisl el
microorganismo Neisseria
meningitidis.
Kiefer en 1896 y Albrecht en 1901
establecieron el estado de portador
de meningococos en individuos
sanos.

Introduccin a la familia
Neisseriaceae
El gonococo es una bacteria capaz de producir enfermedades localizadas en
urogenitales, rectales, orofarngeas y sistmicas.

Las especies de Neisseria no patgenas o sapoftas que formanparte de

la flora normal pueden producir en ocasiones enfermedades potencialmente
fatales como la endocarditid y la bacteremia.

Taxonoma de la familia
Neisseriaceae
Hay cuatro gneros en la familia: Neisseria, Moraxella, Kingella y Acinetobacter.
Genero Neisseria: tiene 11 especies de Neisserias verdaderas y 3 especies
animales falsas neisserias.

Acinobacte
r

Grupos
fenotipicos

Psychrobac
ter

M (M) lacunata

Taxonoma de la familia Neisseriaceae

Moraxella uretrlis:
microorganismo de difcil
ubicacin (actualmente Oligella)
K. kingae

Moraxella

M (M) ovis
M (M)
nonliquefaciens
M (M)
atlantae
M (M)
phenylpyruvica

Genero Moraxella

M (B) catarrhalis

Genero
Kingella

K. denitrificans
K. Indologenes

M (B) caviae
Branhamell
a
M (B) ovis
M (B)
cuniculi

Caracteristicas generales de los generos

Neisseria y Moraxella catarrhalis.
Gramnegativos.
Cocoides o bacilares.
En pares o cadenas cortas (los cocoides tienen caras aplanadas (granos de caf).
Viven en la superficie de las mucosas de huspedes de sangre caliente.
Inmviles.
No forman esporas.
Capnofilos.
Crecen a temperaturas de 35-37C.
Producen cido en forma oxidativa.
Las Neisserias verdaderas son los nicos verdaderamente cocoides.
Catalasa positiva.

Factores de virulencia de las especies

de Neisseria y Moraxella catarrhalis.
Poseen una membrana citoplasmtica interna.
Capa delgada de peptidoglucano.
Membrana externa que contiene lipooligosacaridos (LOS), protenas y
fosfolpidos.
Los LOS del meningococo y del gonococo carecen de las cadenas laterales
repetitivos del antgeno somtico O.
Los gonococos y meningococos recin aislados poseen pilis.
Las protenas de la membrana externa confieren actividades biolgicas tales
como la estimulacin de la formacin de anticuerpos y respuestas medidas
por celulas.

Factores de virulencia de las

especies de Neisseria y
Moraxella catarrhalis.
Tipos de protenas;
Protenas porinas (Por o protenas I): protena termoestable.
Protenas de capacidad (Opa): funciona junto con los pilis en la adherencia a las
mucosas.
Protena III o Rmp (protena reductora modificable): con la OmpA disminuye el
efecto bactericida del suero humano normal sobre los gonococos.

Capsulas de polisacridos.
Gonococos y meningococos de especies patgenas de Neisseria producen
una proteasa de IgA, capaz de degradar la IgA 1 humoral y secretora.

Factores de virulencia de las

especies de Neisseria y
Moraxella catarrhalis.
La M. catarrhalis:
Produce -lactamasas, que hace que sean resistentes a la penicilina y a la
amoxacilina.
Poseen la protena UpsA

Aislamiento Neisseria
gonorrhoeae
Recoleccin de la muestra.
Este microorganismo puede producir infecciones en diversos sitios del cuerpo, la
recoleccin de la muestra adecuada para el cultivo y diagnostico depender del sexo y
de las practicas sexuales del paciente.
Deben recolectarse muestras de localizaciones genitales.
Hombre

uretra

Mujer

endocrvix

Si el paciente tiene antecedentes de contacto sexuales anogenitales y orogenitales es

adecuado tomar muestras orofarngeas y del canal anal

Sitios del cuerpo que deben

cultivarse
Paciente

Sitio primario

Sitio secundario

Mujer

Endocrvix

Recto, uretra, faringe

Varn, heterosexual

Uretra

Faringe

Varn, homosexual/bisexual

Uretra, recto, faringe

Mujer, infeccin diseminada

Sangre, endocrvix, recto

Faringe, lesiones cutneas

*lquido sinovial

Varn, infeccin diseminada

Sangre, uretra

Faringe, recto, lesiones

cutneas. *lquido sinovial+

*si estn presentes.

+ cultivo si hay artritis.

Las muestras deben ser tomadas con hisopos de Dacron o de rayn.

Los instrumentos utilizados deber ser lubricados con agua o solucin fisiolgica
tibia, deben prepararse frotis directos para teir con Gram a partir de sitios
uretrales y endocervicales y estos frotis deben tomarse con un hisopo aparte.
Para la preparacin de los frotis el hisopo debe hacerse rotar suavemente y en
una sola direccin sobre el portaobjetos.

Procedimientos de recoleccin de muestra para el

diagnstico.

Endocrvix

Recto

Despus de colocar un especulo se

elimina todo el moco cervical con un
algodn o gasa. Se inserta el hisopo y se
recoge la muestra con un suave
movimiento lateral. Se deja trascurrir el
tiempo necesario

Se introduce el hispo 4-5 cm dentro del

canal anal y se lo desplaza suavemente
de lado a lado para tomar muestras de
las criptas anales. Se dejan transcurrir
unos segundos y se hace rotar
suavemente a medida que se retira

Orofaringe

Sangre

Con ayuda de una bajalengua se efecta

un hisopo enrgico de las zonas
amigdalinas y de la faringe posterior.

Despus de punzar la vena se siembra

un medio adecuado para hemocultivos
que contenga polianethol sulfonato de
sodio.

Uretra masculina

Lesiones cutneas

El
exudado
purulento
puede
ser
exprimido
estirando el pene hacia
adelante y recolectando en material
sobre un hisopo.
Las muestras provenientes de hombres
asintomticos se obtienen insertando un
hisopo nasofarngeo de alginato de
calcio de 2-3 cm dentro de la uretra, el
hisopo se hace rotar suavemente a
medida que se retira.

Las muestras de biopsia en sacabocados

(punch) se recolectan y se colocan en un
envase estril con una pequea cantidad
de caldo o solucin fisiolgica estril y
se
transporta
personalmente
al
laboratorio

Conjuntivas

Liquido articular

El exudado conjuntivial de la cara

internal del parpado inferior se recoge
con un hisopo nasofarngeo pequeo y
se prepara un frotis para coloracin de
Gram.

El material debe ser aspirando con

jeringa
y
aguja
y
transportado
personalmente al laboratorio.

Transporte de la muestra

Sistemas no nutritivos de transporte de hisopos

Los medios semislidos tamponados de transporte de Stuart o de Amie pueden ser
utilizados para el transporte de hisopos con muestras.
Las muestras deben ser procesadas dentro de las 6 hrs. de su obtencin debido a que
durante el lapso se produce una disminucin de la cantidad de microorganismos viables.

Sistemas de transporte con medios de cultivo

En estos sistemas incluyen las placas JEM-BEC que contienen diversas formulaciones de
medios selectivos y el Gono-Pak. En estos sistemas los medios se siembran con la
muestra y se colocan en una bolsa de plstico impermeable que contiene un granulo de
bicarbonato- cido ctrico. La incubacin durante por lo menos 18 a 24 hrs a 35C.

Medios de cultivos selectivos

Thayer-Martin Modificado (MTM)

Martin-Lewis (ML)
New York City (NYC)
GC-Lect (BD Microbiology Systems

Todos estos preparados contienen agentes antimicrobianos que inhiben a otros

microorganismos y permiten la recuperacin selectiva de N. gonorrhoeae y N.
meningitidis

Siembra e incubacin de los medios de

cultivo
Los medios de cultivo deben estar a temperatura ambiente antes de sembrarlos y no deben estar
excesivamente secos ni hmedos.
Si existe demasiada humedad en la tapa de las placas se debe colocar invertidas y ligeramente
abiertas en una estufa comn a 35C / 20 a 30 min.
Las muestras tomadas con hisopo se hacen rodar firmemente en forma de Z sobre el medio
selectivo y se estran en forma cruzada con un asa
Las placas se incuban en una estufa de CO2 o en una jarra anaerbica entre 35 y 37C.

Aislamiento Neisseria
meningitidis
Recoleccion y transporte de las muestras.
Las muestras tiles para el diagnostico de enfermedad meningoccica
incluyen lquido cefalorraqudeo, sangre, aspirados y muestras de
biopsia e hisopados nasofarngeos y orofarngeos.
Ocasionalmente pueden buscarse meningococos en esputo y aspirado
transtraqueales.
Se desarrollan bien en todos los medios selectivos para las neisserias
patgenas, en medios comerciales de agar sangre de carnero,
aunque no tan bien como en agar chocolate.

Identificacin de
especies de Neisseria
patgenas
IDENTIFICACIN PRESUNTIVA DE NEISSERIA
GONORRHOEAE

Morfologa de las colonias

Los gonococos producen varios tipos de colonias en cultivo. En el esquema de
Kellogg estos tipos se denominan T1 a T5 y se describen en trminos del tamao y
otras caractersticas de las colonias.
A nivel celular los microorganismos comprendidos en las colonias tipo P+ y P++ (T1
y T2) poseen pili, en tanto que las clulas tipo P- (T3,T4,T5) carecen de pili
Otro sistema descriptivo es la opacidad de las colonias, determinadas por la
observacin de su desarrollo en un medio transparente. Las colonias opacas, se
denominan O+ y O++ y las tranparentes O-. Los tipos T de colonias descritos por
Kellogg pueden ser reconocidos en los cultivos MTM o agar- chocolate
Los aislamientos obtenidos en cultivo primario son en la mayora de tipo P+ y P++.
Estas colonias pueden ser pequeas, brillantes y elevadas

Coloracin de Gram y prueba de

oxidasa
Las placas primarias para aislamiento de N. gonorrhoeae deben ser examinadas
despus de 24, 48 y 72 horas de incubacin utilizando una lupa o microscopio de
tincin
La tincin gram de la colonia debe mostrar los diplococos gram negativos
uniformes. Algunos de los microorganismos pueden aparecer como ttradas,
especialmente con frotis de colonias jvenes. Los microorganismos en frotis de
cultivos mas viejos aparecen hinchados
Los mejores resultados de la prueba de oxidasa se obtienen con el derivado
tetrametilado del reactivo de oxidasa. Esta solucin se coloca en un trozo de
papel filtro y una porcin de la colonia se frota sobre el reactivo. Con los cultivos
recientes se obtiene un color purpura oscuro en el termino de 10 segundos

Prueba de superoxol
Es til para la identificacin rpida de N. gonorrhoeae. Estas cepas producen
un burbujeo inmediato y brusco cuando se emulsiona parte de la colonia con
el reactivo sobre un portaobjetos de vidrio. Tanto N. meningitidis como N.
lactamica producen un burbujeo dbil y retrasado

Diferenciacin de otros
microorganismos en medios
selectivos
Tanto la identificacin presuntiva como la confirmatoria de la especies de
Neisseria dependen de la posibilidad de diferenciar a estos microorganismos de
otros que tambin pueden crecer en medios selectivos.
Una prueba til y rpida para identificar gonococos y diferenciarlos de K.
denitrificans es la prueba de la catalasa. K. denitrificans produce una reaccin
catalasa negativa. M. catarrhalis y otras especies de Moraxella, como los
gonococos, son oxidasa + y catalasa +. Estos microorganismos pueden
diferenciarse de Neisseria por la prueba del disco de penicilina. Las especies de
Neisseria y M. catarrhalis conservan su morfologa de diplococos, aunque pueden
parecer un poco hinchados. Las especies de Moraxella forman largos filamentos

Criterios presuntivos para la

identificacin de Neisseria
gonorrhoeae
Todos los aislamientos de diplococos gram oxidasa + que se recuperan de
reas genitales y que se desarrollan en medios selectivos pueden ser
identificados como N. gonorrhoeae. Los gonococos sospechosos aislados en
nios deben confirmarse por al menos dos mtodos diferentes. Estos pueden
incluir las pruebas de:
Hidratos de carbono
Mtodos inmunolgicos
Procedimientos enzimticos
Confirmacin del cultivo con sondas e DNA

Pruebas de utilizacin de
hidratos de carbono
Medio CTA convencional con hidratos de carbono. Usa un medio
semislido de agar base cistina-tripticasa que contiene 1% de hidratos de
carbono y como indicador tiene al rojo fenol
Prueba rpida de utilizacin de hidratos de carbono. Es un mtodo
dependiente de la falta de crecimiento para detectar la produccin de acido a
partir de los hidratos de carbono
Prueba RIM- Neisseria. Mtodo rpido de la identificacin de Neisseria

Pruebas cromognicas de
enzima sustrato
Los sistemas de identificacin enzimticos usan sustratos bioqumicos
especficos que, despus de la hidrolisis por enzimas bacterianas, producen
un producto final coloreado que se detecta directamente o despus de la
adicion de un diazorreactivo acoplador de color. Los sistemas comerciales
que usan este enfoque son:
Gonocheck II
Bacticard Neisseria

Mtodos inmunolgicos para la

confirmacin del cultivo N.
gonorrhoeae
Inmunofluorescencia directa con anticuerpos monoclonares. Usan
estos anticuerpos que reconocen eptopos en la protena de la membrana
externa PorA, principal protena de la membrana externa N. gonorrhoeae
Pruebas de coagulacin. Hacen uso de la capacidad de la protena A en las
clulas de Staphylococcus aureus para unirse a molculas de IgG por su
regin Fe
Prueba Gonogen II. Usa anticuerpos monoclonales anti. Por conjugados con
oro coloidal como reactivo de deteccin

Pruebas de sondas de DNA para la confirmacin del

cultivo de N. gonorrhoeae
Identifica N. gonorroheae por la deteccin de secuencias rRNA especificas de
especie. Esta prueba puede ser muy til para determinar cepas que no se
identifican con facilidad por otros procedimientos confirmatorios

Caracteristicas de cultivo de
las especies de Neisseria y
Moraxella catarrhalis

Neisseria gonorrhoeae
La auxotipificacion y la serotipificacion determinan la potencial de virulencia, la
invasividad, la susceptibilidad a los antimicrobianos y la constitucin gentica de
diversas cepas de gonococos.
Las cepas de gonococos poseen requerimientos especficos de ciertos factores
nutritivos para su crecimiento se conocen como auxotipos.
Las cepas de arginina, hipoxantina y uracilo (AHU) se les recupera de pacientes con
infeccin gonoccica diseminada (IGD) y son altamente sensibles a la penicilina.
Las cepas AHU y los auxotipos que se han recuperado de infecciones sistmicas
suelen ser resistentes a la accin bactericida del suero humano normal, lo que puede
explicar parcialmente su capacidad de ingresar al torrente circulatorio.
Las cepas AHU tambin se asocian con infecciones uretrales asintomticas en los
hombres. Crecen como colonias atpicas en medios solidos; algunas pueden necesitar
72 horas o mas de incubacin antes de que se observe un crecimiento visible.

Los CDC consiste en 12 reactivos de coaglutinacion. A partir del patrn de coaglutinacion de un

aislamiento determinado con estos 12 reactivos se han descrito 46 patrones definidos o serovares.
Estos reactivos para tipificacin tambin han sido adaptados a un enzimoinmunoensayo en el cual
los puntos finales son menos subjetivos y mas reproducibles.
Las aplicaciones de estos esquemas de tipificacin han incluido
1. El estudio de diferencias regionales y de variaciones en el tiempo de los gonococos a nivel
nacional y dentro de comunidades.
2. El examen de las relaciones serovares-auxotipos
3. El estudio de serovares el estudio de serovares de gonococos como indicadores o predicciones de
virulencia
4. El uso de determinaciones de serovares para evaluar recaidas versus reinfeccin en pacientes
individuales.
5. El uso de determinaciones de serovares como herramienta en anatoma patolgica forense en lo
que respecta a violencia y abuso sexuales.

Neisseria meningitidis
En los frotis con Gram preparados a partir de muestras clnicas, particularmente LCR,
los meningococos aparecen como diplococos gramnegativos tanto dentro como fuera
de leucocitos polimorfonucleares.
Los microorganismos pueden mostrar una considerable variacin en el tamao y
tienden a resistir la decoloracin.
Las cepas con capsulas gruesas pueden tener un definido halo rosado alrededor de las
clulas
Ademas de la tincin de gram y del cultivo de LCR se pueden realizar pruebas de
deteccin directa de antgeno para polisacridos capsulares de meningococos.
Actualmente las pruebas directas para antgeno detectan antgenos capsulares de los
grupos A, B, C y W135.
Estas pruebas deben ralizarse junto con una coloracin de gram y un cultivo de medios
solidos enriquecidos adecuado.

Los procedimientos de identificacin para meningococos (asi como para

gonococos) producen los mejores resultados cuando se siembran a partir de
subcultivos recientes de 18 a 24 horas en agar-sangre o agar-chocolate.
En el caso de pruebas confirmatorias de utilizacin de hidratos de carbono la
reaccion del tubo de maltosa con frecuencia es mucho mas intensa que la del
tubo de glucosa debido a que la maltosa es degradada por el microorganismo
en dos molculas de glucosa, las que a su vez son metabolizadas
posteriormente.

OTRAS ESPECIES DE NEISSERIA

Neisseria lactamica

Se encuentra con mayor frecuencia en nios que en adultos, crece en medios

selectivos y produce acido a partir de la glucosa, maltosa y la lactosa.
Tambien hidroliza el ONPG, que puede ser utilizado como sustituto de la
lactosa en la batera de pruebas.
Algunas cepas de estos m.o. producen reacciones falso-positivas con algunos
equipos de coaglutinacin.

Neisseria cinerea
Forma parte de la flora normal del tracto respiratorio superior.
Se desarrolla en agar-sangre y en agar-chocolate. En el caso del agaarchocolate, despus de 24 horas de incubacin, las colonias tienen
aproximadamente 1mm de dimetro y son lisas con bordes regulares.
El m.o. no produce acido a partir de hidratos de carbono ni en medios con
base CTA ni en las pruebas rapidas de degradacin de hidratos de carbono.
Se han comunicado reacciones positivas dbiles con la glucosa despus de
la incubacin durante la noche con el sistema de Minitek y su reaccion
positiva conhidroxipropil aminopeptidasa.
Puede ser diferenciada de la especie de asacarolitica N. flavescens por su
incapacidad de producir polisacridos a partir de la sacarosa y por la falta de
pigmento amarillo evidente.

La prueba til para diferenciar N. cinrea es la prueba de susceptibilidad a la

colistina.
Se prepara una
suspensin del m.o. en
caldo (que corresponda
al estndar 0.5 de la
escala de McFarland)

Se siembra con hisopo

en la susperficie de una
placa de agar-chocolate
o de agar-sangre como
para una prueba de
susceptibilidad por
difucion con discos de
Bauer-Kirby

Se coloca un disco de 10
g de colistina y la placa se incuba
en CO2 durante 18 a 24 horas

Generalmente N.
gonorrhoeae se
desarrolla hasta el borde
del disco.

La N. cinrea es
susceptible ala colistina
y presenta un halo
mayor o igual a 10mm
alrededor del disco.

Neisseria flavescens
Se encuentra en el tracto respiratorio y en raras ocasiones se asocia con
procesos infecciosos.
Se desarrolla en forma de colonias lisas amarillentas en agar-sangre y en
agar-chocolate. Ademas crecen en agar nutritivo a 35C y tambin se
desarrollan en temperatura ambiente..
Es capaz de sintetizar polisacridos yoduro-positivos a partir de la sacarosa y
no reduce nitratos, es DNsa.-negativo y no hidroliza la tributirina.

Neisseria polysaccharea
Se encuentra en la orofaringe humana, es un diplococo gram negativo
oxidasa - positivo que forma colonias lisas de color amarillo.
Las cepas capaces de crecer en medios selectivos tienen CIM para la colistina
de 64g/ml o mayores, en tanto que las cepas que tienen CIM para colistina
de 1 g/ml o menos.
Son resisitentes a la vancomicina. A las 24 horas el m.o. forma colonias de
aprox. 2mm de dimetro en agar-chocolate o en agar-sangre y produce acido
a partir de la glucosa y la maltosa, pero no a partir de la fructosa o la lactosa.

Moxarella catarrhalis
Crece en agar-chocolate y en agar-sangre y ciertas cepas tambin se desarrollan
bien en agar TMT y otros medios selectivos.
Las colonias sin generalmente de color gris a blanco, opacas y lisas. Tambien se ha
descrito un medio selectivoque contiene acetazolamida como inhibidor del resto de
la flora normal del tracto respiratorio superior.
Es nosacarolitico en las pruebas de decgradacion de los hidratos de carbono y en
realidad puede tornar alcalinos los medios de identificacin con base de peptona.
La mayor parte de la cepas reducen los nitratos y los nitritos y reducen Dnas. La
actividad Dnasa se detecta sembrando en forma de manchas, con inoculos densos,
una placa con medio de prueba para Dnasa que contenga azul de toluidina 0, en
una zona de tamao de una moneda de 5 centavos.
Despues de la incubacin que dure toda la noche la hidrolisis de DNA se detecta por
un cambio en el color del medio, alrededor y por debajo del inoculo, del azul al rosa

Hidroliza los grupos butirato con unin ester. Esta actividad enzimtica se
detecta mediante un sustrato denomidado tributirina.
La mayora de las cepas clnicamente importantes de M. catarrhalis tambin
producen una -lactamasa inducible asociada a la celula. Debido a su naturaleza
inducible, las pruebas -lactamasas acidometricas rapidas pueden dar resultados
falsos-negativos.
Los mejores resultados se obtienen con el metodo yodometrico o con la
prueba cromgena con cefalosporina.

Sensibilidad de las especies

de Neisseria y Moraxella
catarrhalis de los
antimicrobianos

 Neisseria gonorrhoeae
A partir del reconocimiento y la caracterizacin de las cepas de PPNG, CMRNG Y
TRNG los investigadores de los CDC han descrito cinco fenotipos en cepas de N.
gonorrhoeae:
1. Cepas sensibles a la penicilina (CIM menores de 2,0 g/mL).
2. Cepas de n. gonorrhoeae productoras de penicilinasa (PPNG, positivas
para -lactamasa).
3. Cepas con resistencia de alto nivel a la tetraciclina, mediada por
plsmidos (TRNG; CIM de 2,0 g/mL o mayores) que poseen el
determinante tetM.
4. Cepas con resistencia a la penicilina mediada por cromosomas (CMRNG,
CIM de 2,0 g/mL o mayores).
5. Cepas con resistencia de alto nivel mediada por plsmidos a la penicilina
y a la tetraciclina (PPNG, -lactamasa-positivas y con determinantes tetM.

Los CDC han formulado recomendaciones a cerca de las indicaciones y los

mtodos para evaluar la susceptibilidad de N. gonorrhoeae a los
antimicrobianos.
Se publico un estudio multicntrico en el cual se determinaron criterios de
interpretacin para:
pruebas de dilucin en agar y
de difusin con discos
para estas drogas y las directivas para las pruebas y su interpretacin.
Tambin se ha usado la prueba E para determinar la sensibilidad d N.
gonorrhoeae a los antibiticos.
Las tiras de la prueba E consisten en una tira transportadora de plstico
con un gradiente continuo predeterminado de antibitico inmovilizado
sobre uno de sus lados.

 Neisseria meningitidis
Se comunico cepas de N. meningitidis que no son -lactamasa-positivas
pero tienen una sensibilidad disminuida a la penicilina (CIM para la
penicilina de 0,10 a 1,0 g/mL. Esta disminucin de la fijacin de la
penicilina por una protena fijadora de penicilina (PBP 2) especifica de la
pared del meningococo. La alteracin de la afinidad de la PBP 2 por la
penicilina es resultado de una alteracin de la secuencia de nucletidos del
gen de la PBP 2, penA.
Las cepas de N. meningitidis sensibles a la penicilina tienen CIM de 0,05
g/mL o menores para la penicilina, en tanto que las cepas relativamente
resistentes tienen CIM para la penicilina que varan entre 0,10 y 1,0 g/mL
.
Dado que la mayora de los laboratorios de microbiologa clnica no cuentan
con equipos para realizar pruebas de sensibilidad por dilucin en agar todo
meningococo presuntamente resistente a la penicilina debe ser enviado a un
laboratorio de referencia para que se realicen pruebas de sensibilidad por
dilucin en agar. Como alternativa la prueba E puede ser til para determinar la
sensibilidad antimicrobiana de aislamientos individuales de meningococos.

 Otras especies de Neisseria

Como no se han establecido criterios acerca del tamao del halo de inhibicin para
otras especies de Neisseria el mtodo de eleccin para determinar la sensibilidad a
los agentes antimicrobianos es el mtodo de dilucin en agar. Ancdotas afirman
que el procedimiento de difusin con discos, el procedimiento de dilucin en agar y
los criterios de interpretacin publicados por el NCCLS para los gonococos tambin
pueden ser utilizados para otras especies de Neisseria.
Estos microorganismos generalmente crecen bien en agar de Mueller-Hinton.

 Moraxella catarrhalis
Las pruebas de sensibilidad a la ampicilina por dilucin en caldo para aislamientos de
M. catarrhalis puede producir resultados confusos. Algunas cepas productoras de lactamasa tendrn CIM altas para la ampicilina (12,5 a 25,0 g/mL) en tanto que otras
mostraran CIM bajas para dicho antibitico (0,10 a 0,40 g/mL).
Las pruebas de dilucin en caldo para estas ltimas cepas son dependientes del
inculo.
Con inculos pequeos (10 UFC/mL estas cepas parecen sensibles a la ampicilina y
a otros antibiticos -lactmicos.
Co inculos mas grandes (10 UFC/mL) estas cepas tienen CIMs mayores y son
resistentes.
Este efecto del inoculo a sido observado en el caso de la ampicilina, la penicilina G, la
cefalotina, el cefamandol, la cefuroxima y el cefaclor.

Los estudios de -lactamasa de M. catarrhalis por procedimientos de

purificacin e isoelectroefoque han demostrado que se encuentran tres tipos
de enzimas en las cepas de este microorganismo. Dos de estas enzimas
denominadas BRO-1(o tipo Ravisio) y BRO-2 (o enzimas tipo 1908) parecen
ser las mas comunes y la tercena es BRO-3 ha sido descrita recientemente.
Las cepas que producen BRO-1 representan alrededor del 90% de las M.
catarrhalis productoras de sa aisladas a partir de muestras clnicas humanas.
Las cepas que producen BRO-2 representan el 10% restante.
Las cepas que producen enzimas del tipo BRO-1 poseen una actividad
enzimtica significativamente mayor que las cepas que producen enzimas
del tipo BRO-2.
Es probable que las cepas de M. catarrhalis productoras de -lactamasa
para las cuales las CIM para la ampicilina son bajas sean productoras de la
enzima BRO-2.
Los aislamientos de M. catarrhalis generalmente son sensibles a las
cefalosporinas de segunda y tercera generacin (cefixima y cefaclor), a la
azitromicina, claritromicina, eritromicina, la combinacin de trimetoprimasulfametoxazol y a combinaciones de drogas -lactmicas con inhibidores de la
-lactamasa.