Introduccin

Descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich

bacterilogo alemn, quin la denomin Bacterium coli.

Bacilo gram negativo, mvil

Anaerobio facultativo
Coloniza el intestino del hombre pocas horas despus
del nacimiento
Flora normal, pero hay cepas que pueden ser patgenas
y causar dao
Sindromes clnicos mas comunes que causan
Escherichia coli patgenos: infeccin del tracto urinario,
sepsis/meningitis y enfermedades diarreicas/entericas

Escherichia coli
Clasificacion taxonomica
Corresponde a:
Reino: Bacteria
Filo: proteobacteria
Orden: enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Gnero: Escherichia
Especie: Escherichia coli

Flora comensal
Bacilo Gram negativo
Anaerobio facultativo

Serotipificacin de
Kauffman
176 antigenos somticos O
112 antigenos flagelares H
60 antigenos capsulares K
O indica el serogrupo
O:H indica el serotipo, en
casiones se asocia a cuadro
clinico en particular.

fcilmente recuperados de
medios comunes o
selectivos a 37C y en
condiciones aerbicas.
se recuperan desde agar
MacConkey o agar EMB
selectivamente los miembros de
la familia Enterobacteriaceae
permite la diferenciacin de
bacilos entricos basados en
su morfologa.

Por qu estudiar
Las enfermedades diarreicas siguen siendo un
Escherichia
coli?
problema importante de salud pblica
a nivel mundial.
Uno de sus principales agentes son las Escherichia
coli diarreognicas.
Mas de 10 millones de nios menores de 5 aos
fallecen por esta causa, a pesar de ser vacunados
contra enfermedades infecciosas.
Se destacan ETEC y EPEC.
En el ultimo tiempo han sido reportado grandes brotes
de Escherichia coli entero hemorrgica (EHEC) en
paises desarrollados .
EPEC es el mas extendido de las coli diarreognicas,
proporciona un modelo de virulencia para otras
infecciones de Escherichia coli, como para otras
bacterias patgenas.

Escherichia coli
diarreognicas
Escherichia coli enteropatgena

(E.P.E.C.)

Escherichia coli enterotoxignica (E.T.E.C.)

Escherichia coli enteroagregativa (E.Ag.E.C.)
Escherichia coli difusa adherente (D.A.E.C.)
Escherichia coli entero invasiva (E.I.E.C.)
Escherichia coli enterohemorrgica (E.H.E.C.)

Virulencia de escherichia
coli
Colonizacion de la mucosa
Evasion de las defensas del huesped
Multiplicacion
Dao a los tejidos del huesped

Principales
causas
de diarrea

Adherencia intima (EPEC y EHEC)

Produccion de entertoxinas (ETEC y
EAEC)
Invasion (EIEC)

Identificacion de Escherichia
coli en el laboratorio.

Identificacion mediante antisueros

Identificacion mediante factores de virulencia

- Ensayos de adherencia en celulas Hep-2
- Ensayos de toxicidad de celulas.
- Ensayos in vivo como el asa ligada o la prueba de Sereny

Pruebas de biologia molecular: presencia de fragmantos de genes

involucrados en el macanismo de patogenicidad.

Diarre
as

Diarrea: Presencia de deposiciones lquidas al menos tres veces en un perodo de

24 horas (OMS).

Peso global de las diarreas

Mayor incidencia en nios < 5 aos
y la menor en > 65 aos
Alta frecuencia
6%- 10% ha sufrido un episodio de
diarrea en el ltimo mes
Sin cambios importantes en la
incidencia en los ltimos 20 aos (1
billn de casos/ao)
Descenso importante en la
mortalidad (4,6 2,5 mill)
En EEUU U$ 23 billones en gastos
de atencin y productividad

En paises subdesarrollados
Frecuencia de 6 a 7
episodios/ao
Tercera causa de mortalidad
en nios <5 aos (15 a 21%)
Chile: Muerte por Enf
Infecciosas Intestinales 200
casos ao (Lugar 19)
Difcil estimar los costos
asociados

bacterianos asociados a cuadros

de diarrea aguda en nios
menores de 14 aos
(Marzo 2004 Marzo 2007)

C. Toro U., MT Ulloa, MT Valenzuela y J. Zamorano

Proyecto FONDECYT 1040539

enteropatgenos asociados a
gastroenteritis agudas en
nios.

Prado V. and ORyan M.

Infect Dis Clin North America, 1994.

 Primer grupo que se identific serolgicamente.

Serogrupos y serotipos ms comunes: O55, O86, O142, O111:H- O127.
Nios menores de 6 meses hasta los 2 aos.
Su principal factor de patogenicidad es la Adherencia, efecto
histopatologico A/E attaching and effacing, plsmidos y fimbrias.

Escherichia coli
enteropatgena (ECEP)

Escherichia coli
EPIDEMIOLOGA
Enteropatgena
(ECEP)
TRANSMISIN
Puede ocasiona brotes o casos aislados
de diarrea.
Afecta principalmente a nios menores
de 6 meses hasta los 2 aos de edad.
Puede aislarse en adultos
Factor predisponente: Diabetes

Fecal-Oral
Manos contaminadas de
manipuladores de alimentos.
RESERVORIOS
Nios y adultos con o sin sintomas.

CUADRO CLNICO
Diarrea aguda, leve o grave; vmito, fiebre baja y mala absorcin .
DIAGNSTICO
Ensayos in vitro en cultivos celulares.
Mtodos moleculares.

Cepas:
- tipicas: genes eae +
plasmido EAF.
-atpicas: genes eae.

Escherichia coli
Agente ms frecuente de Diarrea del viajero en adulto
enterotoxignica
(ECET)
Importantes en lactantes, nios menores de 2 aos,y en particular durante
los primeros seis meses de vida.

Factores de patogenicidad: Toxina termolbil, toxina termoestable y factor

de colonizacion antignico.

Escherichia coli
Enterotoxignica (ECET)

Escherichia coli
Enterotoxignica
(ECET)
EPIDEMIOLOGA
TRANSMISIN
Nios menores de 2 aos.
Frecuencia de aislamiento en nios con
diarrea es de 10 a 30%.
En los nios en edad escolar y adultos
puede ser asintomtica y poco frecuente.
Diarrea del viajero.

Contaminacin fecal de agua y

alimentos.
Serogrupos y serotipos ms
comunes: O8:H9, O15:H11,
O20:H-, O25:H-,
O27:H7,O78:H12, O148:H28,
O159:H20.

CUADRO CLNICO
Incubacion de 14 a 15 hrs.
Diarrea acuosa aguda, sin sangre, moco, ni pus.
Pocos casos presentan fiebre y vmito.
Diarrea puede ser leve, breve y autolimitada pero tambin puede ser grave.

Escherichia coli
Enteroagregativa
(ECEAg)
Se caracteriza por autoaglutinacin de las bacterias
entre s y por ser
inespecifica.
Negativa a la prueba de EAF.
Incrementan en la mucosa la produccin y secrecin de moco que
atrapa a las bacterias que se autoaglutinan en una fina pelcula en el
epitelio intestinal.
Hemaglutinacion en humanos y adherencia a clulas
Serogrupos y serotipos ms comunes: O44:H18.
Factores de patogenicidad: Fimbria AAFI, toxina termoestable de
cepas enteroagregativas I (EAST I), proteinas Pet y Pic, proteina de mb.
externa (OMP), plsmido y toxina.

Factores de patogenicidad
Protena Pet (plasmid-encoded toxin):
citoptico en clulas Hep-2,
deEfectoECEAg
caracterizado por arredondamiento y
desprendimiento de las clulas,
contraccin del citoesqueleto y prdida
de fibras de actina. El gen para esta
protena se encontr en un plsmido de
65 Mda.
Protena Pic: Codificada en el
genoma,tiene actividad de proteasa.
Fimbria I de adherencia agregativa
(AAF/I): Codificada por el gen aggA que
se encuentra en un plsmido de 60 MDa.
Fimbria AAF/II: Inmunolgicamente
diferente a AAF/I, codificada por el gen
aafA.
No todas las EAEC presentan estas fimbrias*

PATOGENIA
Sitio blanco de dao: mucosa del intestino grueso y delgado.
Periodo de incubacin: menor a 8 horas.
Duracin del cuadro: 18 o 20 das.

CUADRO CLNICO
Diarrea lquida, verde
mucosa, sin sangre.
Diarrea persistente hasta 20
das.
Diarrea con moco con o sin
sangre, vmito y sin o con
poca fiebre.
EPIDEMIOLOGA
Recin nacidos
Nios menores de dos aos.

DIAGNSTICO
Observacin de la adherencia
agregativa en clulas Hep-2 de
cultivos bacterianos, previamente
inoculados en medio Luria e
incubados en condiciones
estacionarias y a 37 C.

Escherichia coli de
Caracterizada por una fimbria de
adherencia difusa
superficie, conocida como F1845,
involucrada en el fenmeno de adherencia
difusa.
Los genes que codifican para esta fimbria
se pueden encontrar en el cromosoma o en
un plsmido.
El fenmeno de adherencia difusa tambin
se ha asociado con una protena de
membrana externa de 100 kDa.
EPIDEMIOLOGA
Se puede aislar tanto de personas sanas
como en personas con diarrea, siendo
ms importante en nios de 4 a 5 aos.

En una cepa del serotipo 0126:H27, cuyos

genes se han secuenciado pero slo se
han encontrado en una minora de las
cepas aisladas.

CUADRO CLNICO: diarrea acuosa sin sangre y sin leucocitos.

SEROGRUPOS Y SEROTIPOS ms comunes: O126:H27

Escherichia coli
Los genes involucrados en la
Enterohemorrgica
(ECEH)

patogenesis del EHEC son similares

a aquellos que estan implicados en
la de EPEC, excepto por:
Bacteriofagos codificantes-Stx en el
cromosoma de EHEC y
Presencia de un plasmido
caracteristico de EHEC 60-MDa en
plasmido EAF en EPEC.
El plasmido de EHEC es conocido
por la enterohemolisina (ehx) asi
como el antigeno fimbrial
potencialmente involucrado en la
colonizacin.

Sntomas y signos

Sindrome hemolitico
Diarrea con presencia o ausencia de sangre, sntomas generales, introsuscepcin.
uremico (SHU)
Complicacin ms importante de la infeccin por E. coli O157:H7.
Es una entidad clnica caracterizada por anemia hemoltica microangioptica,
trombocitopenia y dao renal agudo.
Factores predisponentes
Gentico
Embarazo
Frmacos
Edad
Gastrectomas

http://aristotelizar.com/web/2008/10/02/se-inicia-unacampana-para-prevenir-el-suh/

Shigatoxina
o Codificada por un bacterifago Stx, insertado en
el cromosoma bacteriano.
o Es el principal factor de patogenicidad y la
caracterstica distintiva de ECEH.
o Stx contiene 2 miembros principales Stx1 y Stx2
o Posee una estructura A-B
Subunidad A ( 2 subunidades A1 y A2
el pentmero B se fija a la clula blanco el
receptor el glucolpido Gb3

Stx2 tiene solo 56% de identidad con Stx1.

Variantes de Stx2 son ms virulentas en humanos

OTROS FACTORES DE VIRULENCIA

Enterohemolisina.
Producida en el plsmido de 60 MDa en las cepas de E. coli O157:H7
cepas O:111H Stx positivas, implicadas en SHU produciran esta toxina
El gen que codifica para su sntesis, ehxA, podra desempear algn papel
en la lisis de los eritrocitos.
Intimina
Codificada por el gen eae.
2 subunidades: eaeA necesaria para
producir la lesin A/E en los enterocitos
y codifica para la intimina.
eaeB codifica la secrecin de una protena de 37
kDa, implicada en el mecanismo disparador de
la transduccin y fosforilacin de la tirosina
en la clula hospedera.

http://www.nature.com/nrmicro/journal/v4/n5/images/nrmicro1391-f3.jpg

La virulencia de las cepas

Disminuye notablemente cuando muta el gen eae.

DIAGNOSTICO .
Anormalidades radiogrficas
Aislamiento del microorganismo a partir de las evacuaciones del enfermo
empleo del medio SMAC, agar MacConkey en el que se
ha sustituido la lactosa por D-sorbitol ,a diferencia de
otras cepas de la misma especie, ECEH no fermenta
dicho carbohidrato
Las colonias sorbitol-negativas
reacciones inmunolgicas que confirmen o descarten la
presencia de alguno de los serotipos de ECEH (serologa)

http://download.imaging.consult.com/ic/images/S1933033206708552/gr1-midi.jpg

ECEI

enteritis por un mecanismo invasor semejante, al de Shigella.

enfermedad diarreica y disentera en nios en los pases menos desarrollados
brotes de enfermedad entrica por alimentos en adultos de pases industrializados.
.
630 millones de casos de diarrea en el mundo
775.000 muertes, poblacin infantil del tercer mundo
El agua contaminada es el principal vehculo de transmisin
presencia en alimentos que son cocinados, lavados o regados con agua .
Personas sintomticas y asintomticas son el principal reservorio.
Las cepas de EIEC son bioquimicamente,
geneticamente, y en patogenia parecido a
Shigella spp. Tal como Shigella spp , las
cepas de EIEC son lisina decarboxylasa negativa,
inmovil , y lactosa negativa

http://www.flickr.com/photos/paultseng/169118630/

Patogenesis.
Todava no est completamente dilucidado.
Los estudios sugieren que las caracteristicas patogenicas son virtualmente
Iguales a los de Shigella spp
Ambos organismos muestran invasion del epitelio del colon.
Tanto EIEC como Shigella spp. Elaboran exotoxinas que podrian tener un rol importante el la
patogenesis de la diarrea.
Serotipos patgenos
O29
O124
O136
O152
O164

Invasividad.
Ocurre en clulas de la mucosa del colon
El actual modelo de patognesis comprende:
Penetracin de la clula epitelial
Lisis de la vacuola endocitica
Multiplicacin intracelular
Movimiento direccionado a travs del citoplasma
Extensin a las clulas epiteliales adyacentes
Si la infeccin es severa se llega a una reaccin
inflamatoria que se manifiesta como ulceracin
http://cmr.asm.org/cgi/content/full/11/1/142#SEC7

Los genes necesarios para la

invasividad : plasmido pInv.
locus mxi y spa : genes que codifican un aparato secretor
produccion de proteinas
vitales para una capacidad patogena completa:
Las proteinas Ipa (IpaA - IpaD) son una de estas:
Efectoras de la invasion .
Lisis de la vacuola fagocitica
Induccion de apoptosis en macrofagos.
http://cmr.asm.org/cgi/content/full/11/1/142#SEC7

Produccion de enterotoxinas
Caracterizada por un periodo de diarrea acuosa que precede a episodios de diarrea disentrica con
mucus y/o sangre .
Nataro et al clonaron el gen sen ,sin el gen la actividad enterotoxica de la cepa disminuye
drasticamente.
El rol de las enterotoxinas no est confirmado pero podrian explicar la diarrea acuosa caracteristica
de EIEC.

Mecanismos patognicos de
Escherichia coli, doctor Fernando Navarro Garca.

DETECCIN.
Dificil identificacion, parecida bioquimicamente a las demas E.coli
Busqueda fenotipica prueba de sereny keratoconjunctivitis relaciona la habildad de invadir epitelios y
dispersarse a otras celulas .
ELISA para detectar el gen ipaC gen
Ventaja no require grandes costos, equipos ni animales vivos.

Mecanismos patognicos de
Escherichia coli, doctor Fernando Navarro Garca.

Aislamiento, identificacin y
caracterizacin de Escherichia
coli patgena

Mtodos tradicionales

Diagnstico fenotpico
Ensayo de adherencia con celulas Hep-2
Diagnstico de EPEC,DAEC y EAEC
Se conocen 3 apatrones de adherencia:
Adherencia Localizada BFP
Adherencia Agregativa AAF/ I y II
Adherencia difusa (DA) F185

Mtodos de biologa
molecular

Una de las herramientas de diagnstico ms recientes

Uso de sondas para la hibridacin en fase slida como es el colony blot.

Las sondas son fragmentos pequeos de DNA que contienen parte de los
genes que codifican para algn factor de virulencia y pueden estar
marcadas radioactivamente con P o no radiactivamente con biotina o
digoxigenina y se pueden usar en ensayos sensibles y especficos para
detectar cepas patgenas de inters clnico.

Actualmente para E. coli hay sondas especficas para la toxina termolbil

(LT) y termoestable (ST) del grupo ETEC, para la fimbria Bfp de EPEC, para
el locus asociado con invasividad (ial) de EIEC y para la enterohemolisina
(hlyA) de EHEC, entre otros factores de patogenicidad caractersticos de las
bacterias.

Colony blot

Agar Luria / 4 h a 37C

Incuba
12 h

a) Desnaturalizacin
b) Hidroxido de sodio
c) Fijacion del ADN
1. Hibrdacion con sonda
marcada con digoxigenina

Resistencia a los
antibioticos

Una revisin de Faculty of 1000 Medicine Reports subraya que el incremento en todo el
mundo de bacterias resistentes a antibiticos es un importante motivo de preocupacin.

En los ltimos aos se ha producido un drstico incremento de infecciones adquiridas en

la comunidad causadas por una sola cepa de Escherichia coli productora de
betalactamasas.

Rpida propagacin de esta cepa se debe, al menos en parte, a los viajes internacionales
a zonas de alto riesgo, como el subcontinente indio.

Utilizar carbapenems como primera respuesta a estas infecciones aumenta el riesgo de

inducir resistencias en la comunidad, anulando de ese modo uno de las estrategias
antibiticas ms potentes que existen en la actualidad.

*DR. JOHANN PITOUT, DE LA UNIVERSIDAD DE CALGARY, CANAD, Y MIEMBRO DE FACULTY OF 1000.

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