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Les anarobies

Aspect microscopique
Bacilles Gram +
prsentant une spore
lEF : mobiles le
plus souvent par
ciliature pritriche

Spore trs rsistante,


non dtruite 100C
pendant 3 5 heures.

Classification

Elle se fait selon leur habitat, leurs caractres morphologiques et


culturaux et leur pouvoir pathogne. On distingue:
la flore tellurique: bactries saprophytes du sol et
commensales des cavits naturelles de l'homme et des
animaux.
Exemple: le genre Clostridium.
Rgle applique pour les conserves industrielles: 10
min 120C.
la flore de Veillon: bactries commensales des voies
respiratoires, digestives et gnitales de l'homme et des
animaux et qui ne peuvent survivre dans le sol, non
sporules.
Exemples: nombreux genres comme Bacteroides,
Peptococcus, Mobiluncus, Fusobacterium.

Pouvoir pathogne
Clostridium tetani

Forme vgtative : bacilles bouts


carrs en chanettes plus ou moins
longues Gram +
Forme de rsistance : spore dans un
environnement favorable permet le
dveloppement dun nouveau
Clostridium tetani.
Prsent dans le sol et les poussires
ttanos

Le ttanos est secondaire l'introduction dans


l'organisme de spores de Clostridium tetani conscutive
un traumatisme.
Si l'anarobiose est suffisante (plaies profondes,
multiplication de bactries arobies associes), les formes
vgtatives apparaissent par germination des spores.
Cependant, la multiplication bactrienne reste localise
la porte d'entre, la maladie est uniquement due la
toxine.
La toxine, libre au cours de la multiplication entre par
endocytose par les terminaisons nerveuses du site infect.
Elle empche la libration d'inhibiteurs du motoneurone
(glycine, GABA) et provoque une paralysie spastique.
(muscle restant en contraction)

Clostridium botulinum
Observation microscopique
Grand bacille (5 m de long, 1
m de large),
Gram +,
Formant une spore ovalaire
terminale dformante.
Caractres biochimiques:
ANS, glucose +, mobile.

Clostridium botulinum est l'agent d'une intoxication alimentaire, le botulisme.


La maladie nest pas due la bactrie mais lingestion de sa toxine prsent
dans un aliment mal strilis.
Cest une toxine thermolabile (sensible la chaleur), il y a risque de
contamination uniquement lors de lingestion daliments non chauffs.
L'intoxication se traduira par une paralysie des muscles lisses essentiellement.

Clostridium perfringens
Observation au MEB
Grand bacille (5 m de long, 1
m de large),
Gram +,
Formant une spore ovalaire
terminale dformante.

Responsable de gangrnes gazeuses post-traumatiques, de toxi-infections


alimentaires et d'entrites ncrosantes.
C'est l'anarobie le plus rpandu dans l'environnement (sol, eau, air,
poussires).
C'est aussi un commensal des flores de l'intestin, du vagin ou des voies
ariennes suprieures de l'Homme et des animaux.
Sa prsence dans les eaux est un critre de contamination fcale.

Angine fuso-spirochtienne de Vincent


Angine ulcro-ncrotique accompagne d'une fivre leve et d'une
raction ganglionnaire de voisinage.
Le diagnostic est bactrioscopique avec la prsence d'une
bactrie de type Fusobacterium et d'une bactrie de type spirochte.
Le traitement de cette angine est simple base de pnicilline G.

Les milieux de culture des Clostridium


Milieu de SCHAEDLER
Bouillon trypticase soja
Polytone Sg glucose
Extrait de levure
Tris-hydroxymthylaminomthane
Hmine
L-cystine
ED

pH = 7,6

Utilisation:

10 g
5g
5g
3g
0,01 g
0,40 g
qsp 1 L

Source N et de C, de vitamines
Tampon (maintien du pH constant)
Facteur de croissance (synthse
des cytochromes)
Acide amin, rducteur

Ce milieu peut-tre:
enrichi par addition de vitamine K3.
slectif par addition d'inhibiteurs .
solide par addition d'agar : glose Schaedler.

Bouillon ou glose Schaedler simple: bactries non exigeantes du genre


Clostridium .
Bouillon ou glose enrichi(e): bactries exigeantes de la flore de Veillon.
Milieu de culture utilis pour les bactries anarobies exigeantes : glose
Schaedler + vitamine K3 + sang frais une concentration de 5%.

Milieu de Rosenow cystine


Composition
Peptone trypsique
Extrait de viande de buf
Chlorure de sodium
Chlorhydrate de Cystine
Glucose
Indicateur dAndrade
(fushine acide dans de lED)
ED

pH = 7,2

10 g
3g
2g
0,3 g
2g
10 mL

Source N et de C
Sources minrales
Acide amin, rducteur
Source nergtique carbone
Indicateur doxydo rduction

qsp 1 L
Ajouter dans le tube:
Un morceau de marbre
Un morceau de cervelle de boeuf

Ensemencement
Rgnrer le milieu 20 min au BM 100C pour
assurer lanarobie
La prsence dun rducteur renforce lanarobie
Ensemencer en profondeur le tube en vitant les
bulles dair
Recouvrir de paraffine fondue
Incuber 24 heures 37C.

Milieu MRS
Composition
Peptone trypsique de casine
Macration de viande
Extrait de levure
Actate de sodium
Citrate dammonium
Phosphate bipotassique
Tween 80
Sulfate de magnsium
Sulfate de manganse
Glucose
Agar
ED

15 g
500 mL
5g
5g
2g
2,4 g
1 mL
0,2 g
0,05 g
20 g
12 g
qsp 1 L

Source N et de C, vitamines et
minraux, dacides amins
Inhjbiteurs (concentrations )
Source minrale
Apport dacides gras
Sources minrales
Source nergtique de C

pH = 6,5 inhibiteur
Cest un milieu disolement slectif et
enrichi des Lactobacillus utilis pour
lisolement et le dnombrement de ces
bactries dans les produits laitiers.

Ensemencement

Isolement par la technique des quadrants et incubation sous


atmosphre CO2 .

Lecture des milieux

Milieu de Rosenow Cystine

Coloration rose rouge carmin


au niveau de la cervelle
fermentation du glucose

Pas de coloration rose


glucose Dcoloration du milieu voir
virage au vert les bactries
sont rductrices
Apparition de bulles,
dcollement de la paraffine
production de gaz par les
bactries

Type respiratoire

Glose de Schaedler en ana

Culture sur la hauteur du


tube, lexception de la
surface en contact avec lO2
de lair bactries ANS.
Colonies blanches contours
rguliers, bombes,type S
culture sur milieu riche
en anarobiose

n impair:
Bacilles Gram -
culture sur milieu
riche , bactries
exigeantes faisant
partie de la flore de
veillon

Colonies blanches contours


rguliers, bombes, type S
culture sur milieu riche
en anarobiose

n pair:
Bacilles Gram +
sporogne
bactries faisant
partie de la flore
tellurique.

Glose MRS
Petites colonies blanches
caractristiques des
Lactobacillus

Culture sur les botes mises en anarobiose et


sous atmosphre CO2 bactries cultivant en
absence dO2 ncessaire la fermentation du
lactose du lait production dacides
responsables de lapparition du caill.

Frottis du yaourt

Coques en chanette Gram +


caractristiques des
Lactococcus

Bacilles Gram +
caractristiques des
Lactobacillus
La fermentation du yaourt est due deux types de bactrie
provoquant le caill du lait par production dacides lors de
lutilisation du lactose.