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Fig. 1. Protena
Cry1Ac (PDB, 2016)
Tabla de Contenido.
Resumen.
Antecedentes.
Materiales y Mtodos.
Resultados.
Discusin.
Conclusin.
Bibliografa.
Resumen.
El siguiente artculo tiene como objetivo
detectar la presencia o ausencia de
protenas transgnicas derivadas de cultivos
genticamente modificados.
Para esto se usaron 11 protocolos de
extraccin de protena en 17 harinas. Luego
se determin la presencia de 7 protenas
transgnicas (CP4EPSPS, Cry1Ab, Cry1Ac,
Cry1f,
Cry2A,
Cry34Ab1
y
Cry3Bb1)
utilizando kits de Eliza.
Antecedentes.
El maz se da en una basta cantidad en todo el
mundo. Para el ao 2013-2014 se produjeron 1.010
millones de toneladas. El maz genticamente
modificado ocupo, en 2013, 51 millones de
hectreas en todo el mundo. Colombia lo importa
de Estados Unidos, Brasil y Argentina.
Fig. 4. Bacillus
thuringiensis.
(www.bt.ucsd.edu)
Fig. 6.
Endotoxina
insecticida
Cry3Bb1 (PDB,
2016)
Fig. 7. Toxina
Cry34Ab1
(PDB, 2016)
Fig. 8. Protena
insecticida
Cry2AA (PDB,
2016)
Legislacin.
Ley 740 de 2002. Protocolo de Cartagena sobre
Seguridad de la Biotecnologa del Convenio sobre
la Diversidad Biolgica.
Resolucin 4254 de 2011 del Ministerio de Salud y
Proteccin Social.
Materiales y mtodos.
Se utilizaron harinas de maz, para consumo humano, que se
comercializaron en almacenes de cadena de Bogot D.C. en el
ao 2013.
Extraccin de protenas.
Para la extraccin de protenas se utilizaron diferentes
protocolos y las muestras B8, A5 y O2. Los protocolos se
definen por dos pasos principales:
Lisis o rompimiento celular.
Separacin y purificacin de las protenas.
Tcni
ca
T1
Protocolo de extraccin.
Extraccin con buffer carbonato
T2
Extraccin alcalina
T3
T4
T5
T6
T7
T8
Extraccin con buffer fosfato de sodio (PBS) con sonicacion por 20 minutos
T9
T10
T11
Extraccin con buffer fosfato de sodio (PBS) con sonicacion por 30 minutos
Tabla 2. Protocolos de
extraccin de protenas.
(Tabima. L, Chaparro. A, y
Trujillo, M. 2016)
Anlisis Estadstico.
Se utilizaron bloques completos al azar, con tres
repeticiones por tratamiento. Se realizaron una
serie de pruebas para detectar 3 elementos.
Prueba de Bartlett (Misma varianza)
Prueba de Shapiro-Wilk (Distribucin normal)
Prueba de Tukey (Diferencia de medias de
tratamiento)
Se determino que las muestras sern positivas si
presentan valores superiores a 0,2.
Resultados.
Mejor protocolo de extraccin de protena total:
Buffer
Carbonato
0.3 y 2.3 mg/g
Buffer PBS
A5 no se
detecta
protena.
Si
.
Extraccin
alcalina
5.7 y 10.7 mg/g
B8 y
O4
Fosfato
sdico+SDS
Concentracin
<
Tritn x-100
4.8 y 6.0 mg/g
Prueba de Tukey.
Discusin.
La eleccin del protocolo T4 para la extraccin de
protenas coincide con los estudios de Margarit
(2006), aunque en estos la extraccin por agua
alcalina no dio concentraciones superiores a 0,1
mg/g.
El proceso de sonicacion no permiti la separacin
efectiva de las protenas, por el contrario en
estudios de Oszvald (2008) se obtuvo hasta el
90% de las protenas contenidas
El mtodo de extraccin por Tritn X-100 es
efectivo ya que este es un detergente no
desnaturalizante, sin embargo para el caso del
SDS este acta rompiendo los enlaces no
covalentes desnaturalizando las protenas.
Fig.12. Epitopes de la
gliadina. (PDB, 2008)
Conclusin.
Siete de las 19 harinas de maz evaluadas
contienen trazas de protenas transgnicas (B2,
B8, A3, O3, O1, C1 Y C2)
que confieren
resistencia a lepidpteros o colepteros y
tolerancia al glifosato. Las protenas transgnicas
encontradas en las harinas de maz (CP4EPSPS,
Cry1Ab, Cry1F, Cry34Ab1, Cry3Bb1) estn
aprobadas para el consumo humano segn datos
del Ministerio de Salud y Proteccin Social,
aunque su etiquetado no es obligatorio ya que no
presentan modificaciones en las propiedades
organolpticas, nutricionales, condiciones de uso
o presencia de alrgenos.
Bibliografa.
Tabima. L, Chaparro. A, y Trujillo, M. (2016). Deteccin de protenas
transgnicas en harinas de maz comercializadas en Bogot,
Colombia. Revista de salud publica, 18 (3) 470,483.
Margarit E., Reggiardo MI, Vallejos RH, Permingeat HR. (2006)
Detection of BT transgenic maize in foodstuffs. Food Rest Int. 39(2);
250-5.
Oszvald M, Larroque O et al (2008) Characterization of rice storage
proteins by SE-HPLC and micro z-arm mixer. J Cereal Sci. 48(1):68-76
Luis R., et al (2009) Inmunochemical detection of Cry1A(b) protein in
model processed foods made with transgenic maize. Eur Food Res
Technol. 229(1):15-9.
PBD (2016) 1I5P. Recuperado el 14 de octubre de: http://
www.rcsb.org/pdb/explore/explore.do?structureId=1JI6
PBD (2016) 2PQB. Recuperado el 14 de octubre de: http://
www.rcsb.org/pdb/explore/explore.do?structureId=1JI6
PBD (2016) 4W8J. Recuperado el 14 de octubre de:
http://www.rcsb.org/pdb/explore/explore.do?structureId=1JI6