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TCNICAS DE CLONACIN Y AMPLIFICACIN DEL ADN.

QU ES LA CLONACIN?
La clonacin se puede definir como el procedimiento tcnico
mediante el cual se puede obtener un individuo a partir de una
clula de otro individuo ya existente, con lo que ambos seran
genticamente iguales, es decir, tendran la misma dotacin
gentica.
El proceso puede tener lugar de forma espontnea o natural en la
naturaleza, o bien de forma artificial en un laboratorio con la ayuda
de la tecnologa.

EN QU CONSISTE?
La tcnica de la clonacin consiste bsicamente en introducir el
ncleo de una clula somtica dadora, es decir una clula de
cualquier tejido u rgano, en un vulo al que se le ha extrado
previamente el ncleo.
Una vez fusionados, se estimula la divisin celular y finalmente se
implanta en el tero del animal para que se desarrolle el embrin.

Clonacin reproductiva
Clonacin teraputica

AMPLIFICACIN DEL ADN


La amplificacin gnica es aumento en el nmero de copias de un
fragmento de ADN particular. Una clula tumoral amplifica o copia
segmentos de ADN en forma aberrante, como resultado de las
seales celulares y en ocasiones debido a daos causados por
efectos ambientales. Tambin pueden tener su uso en medicina
como tcnicas de diagnstico, Reaccin en cadena de la
polimerasa.

REACCIN DE CADENA DE POLIMERASA


La reaccin en cadena de la polimerasa es, sin lugar a dudas, la
tcnica ms importante y revolucionaria en biologa molecular,
debido a que permite obtener in vitro millones de copias de un
fragmento de cido desoxirribonucleico (ADN) a partir de una sola
molcula.
La PCR se basa en la replicacin celular en la que actan varias
protenas para sintetizar dos nuevas hebras de ADN a partir de otra
que funciona como molde. En procariontes se han encontrado al
menos 12 protenas involucradas en la replicacin.

REACCIN DE CADENA DE POLIMERASA

SECUENCIACIN DE ADN
La secuenciacin del
ADN es un conjunto
de mtodos y tcnicas
bioqumicas
cuya
finalidad
es
la
determinacin
del
orden
de
los
nucletidos (A, C, G y
T)
en
un
oligonucletido
de
ADN

SECUENCIACIN ENZIMTICA
La tcnica enzimtica se basa en la interrupcin controlada de la replicacin del
ADN in vitro
1.

Deben realizarse en cuatro tubos diferentes, cuatro mezclas de reaccin.

. Nucletidos trifosfato (dATP, dCTP, de dTTP y dGTP)


. ADN polimerasa I
. un cebador marcado radiactivamente
. Didesoxinucleotidos

2. El nucletido didesoxi utilizado competir con su homlogo para incorporarse


a la cadena de ADN

3. La sintetizacion se terminara cuando se incorpore el didesoxinucleotido,


formando molculas e ADN de diferente logintud

SECUENCIACIN AUTOMTICA.
Diferencias entre secuenciacin de enzimtica y automatica
En vez de radiactividad se utiliza fluorescencia y lo habitual es
realizar cuatro mezclas de reaccin
Cada nucletido trifosfato (dTTP) marcado con un fluorocromo
distinto
La deteccin del tipo de fluorescencia correspondiente a cada
reaccin se lleva a cabo al mismo tiempo que la electroforesis.

Los fragmentos de ADN migran de


acuerdo a su tamao (los pequeos
migran ms rpido)
El fluorforo con el que van marcados es
detectado por un lser, ste enva una
seal que es interpretada por el equipo
en
forma
de
un
pico
en
un
electroferograma.

APLICACIONES DE LA SECUENCIACIN DE ADN


Deteccin de mutaciones
Diagnstico de enfermedades genticas
Identificacin de especies y control de cruces entre animales
Proyecto genoma humano

TECNOLOGA DEL ADN RECOMBINANTE


ADN recombinante es una molcula que proviene de la unin
artificial de dos fragmentos de ADN. Por lo tanto, la tecnologa de
ADN recombinante es el conjunto de tcnicas que permiten aislar
un gen de un organismo, para su posterior manipulacin e
insercin en otro diferente. De esta manera podemos hacer que un
organismo (animal, vegetal, bacteria, hongo) o un virus produzca
una protena que le sea totalmente extraa.

TECNOLOGA DEL ADN RECOMBINANTE


Estas tcnicas se emplean normalmente para la produccin de
protenas en gran escala, ya que podemos hacer que una bacteria
produzca una protena humana y lograr una superproduccin, como
en el caso de la insulina humana, que actualmente es producida
por bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados
biorreactores.

CASOS EXITOSOS EN MXICO Y EN EL


MUNDO
Estudio detecta la base gentica del sndrome de EDS
El llamado sndrome de Ehlers-Danlos tipo III (EDS) engloba a un grupo
de trastornos hereditarios, que se caracterizan por provocar
articulaciones extremadamente laxas, hiperelasticidad en la piel, en la
que se forman hematomas muy fcilmente, y propensin de los vasos
sanguneos a daarse con facilidad.

CASOS EXITOSOS EN MXICO Y EN EL


MUNDO
Cientficos producen tres tipos de maz tolerantes a la
sequa