Validacion

UNIVERSITAT DE BARCELONA
FACULTAT DE FARMCIA
Tesi doctoral de
ENCARNACIN GARCA MONTOYA
Optimizacin, validacin y modelizacin de un proceso de

fabricacin de comprimidos. Desarrollo de una
aplicacin interactiva multimedia
Data de lectura: 5 de juny de 2001

Lloc: Facultat de Farmacia
Directors de la tesi: Drs. Josep M. Su Negre, Josep R. Tic Grau i Jordi

Gratacs Roig
JUSTIFICACIN DEL TEMA Y

OBJETIVO
-1
-

OBJETIVO
Diversas frases premonitorias que aparecen a menudo en la prensa auguran un
futuro prometedor para la tecnologa multimedia y la formacin universitaria.
Frases como La enseanza a distancia ser la forma general de educar en la
sociedad de la informacin o Las Universidades tradicionales llegan a sus
lmites fsicos de capacidad de Reinar Roll (secretario del Internacional Council
for Distance Education, ICDE), en la conferencia inaugural del curso 1996 de la
UOC (Universitat Oberta de Catalunya), pueden ser constatadas ya hoy. A lo
largo de su conferencia, l mismo se encargaba de esclarecer el titular, para
concluir que los materiales
pedaggicos de la enseanza a distancia
comenzaban a converger y a mezclarse con las aulas tradicionales de
la
Universidad presencial. Y realmente, as ha sido, la mayora de asignaturas de la

licenciatura de Farmacia ofrecen hoy temas o prcticas por ordenador. Adems
de la creciente preocupacin de la Universidad por
este tipo de temas y
tecnologas y su aplicacin a la docencia (vase sino los trabajos o ponencias

desarrollados en los 5 congresos o jornadas (1-5) celebrados en Barcelona por
la Universidad de Barcelona durante el ao 2000).
En esta lnea el Departamento de Farmacia y Tecnologa Farmacutica de la
Facultat de Farmcia de la Universidad de Barcelona y ms concretamente el
equipo dirigido por los profesores JM Su Negre y JR Tic Grau acometi el
diseo de una aplicacin interactiva multimedia, como experiencia innovadora y
pionera dentro de la docencia farmacutica universitaria, creada por y para la
docencia universitaria. El proyecto fue integrado y aceptado por la Universidad
CAPTULO 1: VALIDACIN
FARMACUTICA
-7
-
C a p t u l o
1 :
VALIDACIN FARMACUTICA:
CONSIDERACIONES
BSICAS
1. 1 INTRODUCCIN
La vocacin de la industria farmacutica desde siempre ha sido producir
medicamentos de calidad y con total garanta de seguridad. Desde el hgase
segn arte hasta el cumplimiento de las ICH, con los aos, se
desarrollando
recomendaciones
evolucionado hasta una
incorporando
requerimientos
han ido
que
han
reglamentacin estricta. La industria farmacutica
disfruta de una imagen de calidad excelente. Al elaborar
sus productos
destinados a curar la enfermedad, salvar vidas o mejorar la calidad de vida, no

puede haber el
mnimo margen para el error. Sin embargo, a pesar de los
esfuerzos de control y fabricacin, se exige una mejora continua y mximas

garantas de la calidad. Y es en el avance para conseguir un total dominio de la
calidad, cuando surge el concepto de validacin.
Hoy en da, todos los tcnicos de la industria farmacutica, incluidos los de
distribucin, marketing, desarrollo, garanta de calidad, produccin, registros,
estn de acuerdo con el axioma de que la calidad no se
controla en un
producto, la calidad se construye durante su fabricacin (1). La calidad del

medicamento se consigue en todos y cada uno de los pasos de su proceso de
produccin, desde su investigacin hasta el ltimo anlisis sobre el producto
-8-
sus componentes y materiales, diseo (de producto y proceso) adecuado y

control (estadstico) del proceso.
Alcanzar este nivel de calidad de los
medicamentos requiere garantizar que cada una de las etapas de la produccin

se realiza de forma adecuada y cumpliendo aquellos parmetros de calidad que
se han
establecido previamente (cuadro 1). Y este mximo grado de
seguridad tan slo lo proporcionan los procesos de validacin. No hay

que olvidar que para obtener medicamentos seguros y eficaces de forma
continuada, es necesario que su calidad sea constante. Este objetivo slo se
alcanza cuando las
especificaciones que se aplican estn basadas en
procedimientos validados y por lo tanto, permiten comparar resultados de lotes

de reciente fabricacin con aquellos que fueron utilizados para ensayos
farmacolgicos y toxicolgicos (2-5).
ESPECIFICACIN MP
PREFORMULACIN
MEDICAMENTO
VALIDACIN MTODOS ANALTICOS
DESARROLLO
FRMULA Y FORMA FARMACUTICA
FORMULACIN
MEDICAMENTO
DESARROLLO
MTODO DE FABRICACIN
VALIDACIN MTODO FABRICACIN
VARIABLES
MTODO DE FABRICACIN
CRTICAS / NO CRTICAS
OPTIMIZACIN MTODO FABRICACIN
MEJORA CARACTERSTICAS PRODUCTO

COSTES
RENDIMIENTOS
Cuadro 1: Resumen de las fases de formulacin de un

medicamento e integracin de la validacin.
FARMACUTICA
-9
-
1.2 CONCEPTO DE VALIDACIN

La validacin ha sido un concepto amplio y comnmente definido. Sin embargo,
los mltiples artculos publicados por expertos y estudiosos, poco han aportado
a las ideas de Nash (6), quien en 1979 conclua en
un artculo pionero, ya
clsico en la materia, que la validacin tendra su apogeo y reconocimiento

dentro de al menos 15 aos 1. Hoy, 20 aos despus, resulta que ha sido as: la
validacin es una especificacin que se
sobreentiende cuando se est
desarrollando cualquier procedimiento farmacutico, ya sea de anlisis o de

produccin. Incluso los pasos y fases citados para desarrollar una validacin, no
difieren de algunas
validaciones que se llevan a cabo hoy en da. Nash
planteaba como parmetros bsicos a asegurar la calibracin de los equipos y

el mantenimiento del proceso y de los equipos, la cualificacin de equipos y
productos y una atencin especial a los cambios: debern ser auditados y
monitorizados los pasos claves en el proceso (6).
El concepto de validacin, en concordancia con la fabricacin de medicamentos,
surgi hace 20 aos (7-8) . Fue cuando la FDA (Food and Drug Administration)
revis las normas relativas al control de la fabricacin
de los productos
farmacuticos. Estas normas son conocidas como las GMP2 (Good Manufacturing
Practices) o cGMP3 (current Good Manufacturing Practices). En 1978, la
palabra validacin apareci por vez primera en algunas secciones de las GMP.
Sin embargo, en el captulo de definiciones, el trmino no apareca. Ms tarde
en un documento interno de la FDA se defina validacin de forma sencilla: un
proceso de fabricacin validado es uno que ha sido comprobado que hace lo se
propona o intentaba hacer. En este momento destacan las aportaciones que
hizo Loftus, como inspector de la FDA, a su entendimiento y difusin. Ni que
decir
tiene, que la definicin ha sido revisada, corregida, completada y
actualizada,...; en los 20 aos posteriores y hasta hoy se han aadido ideas que
pudieron parecer subliminales o incluso novedosas pero de las cuales se deben
destacar tres aspectos principales:
Necesidad de documentar el proceso de validacin, es decir disponer de todo
por escrito.
Necesidad de que provea un alto grado de seguridad de proceso, es decir la
certeza de que el sistema
- 10 -
trabajar correctamente.
Necesidad de que el proceso producir repetidamente productos aptos, es
decir que cumplan las especificaciones.
En el estado espaol, la validacin ha sido tambin motivo de trabajos y
revisiones de expertos, entre los
cuales cabe destacar los trabajos y
publicaciones llevados a cabo por AEFI [VI Jornadas Nacionales de AEFI (9)
(Pamplona, 1985) y X Encuentro de AEFI (2) (Toledo, 1989)], o los trabajos del
profesor Cemeli
(10-12) que son de los ms referenciados en trabajos
posteriores o los desarrollados ms recientemente por
el profesor Salazar
Macin (13-15), que forman hasta el momento, los nicos tratados publicados
en lengua castellana en nuestro pas.
La idea de cualificacin o validacin no es bsicamente una idea nueva (16-17),
sin embargo, siempre ha estado rodeada de confusin (18). Todos los expertos
coinciden (19) en que la validacin no es un descubrimiento innovador (10,
13), quizs lo nico innovador sea la exigencia de formalizar y documentar
todo4 lo que se vena haciendo hasta ahora, de una forma ms sistematizada. El
cumplimiento de la
capacidad de calidad de los aparatos o de su
funcionamiento adecuado tambin fue comprobado en el pasado. Sin embargo,

hoy, no slo es comprobar o calibrar, tambin se deben aplicar pruebas de
optimizacin, monitorizacin y verificacin tanto a los equipos como a los
procedimientos de produccin y de control. Estas actividades estaban menos
organizadas entonces y se hacan sin referirse a protocolos
establecidos o
prcticamente sin documentacin. ste es el elemento relativamente nuevo que

trae la
validacin: la documentacin. Debe quedar claro que el trmino
validacin como el de cualificacin se refieren al proceso formal y sistemtico

de establecer que el equipo es operativo y el procedimiento es adecuado para el
proceso previsto.
Quizs no existe otra definicin ms clara y a la vez sencilla que la que hizo
Chapman (20) hace ya algunos
aos: la validacin es el sentido comn
organizado y documentado. En esta frase vuelven a estar resumidos los pilares

bsicos de la validacin: la organizacin y la necesidad de documentar
resultados, es decir
disponer de documentacin que demuestre lo que se
afirma. Si no existe una estructura clara que marque qu hacer, cmo y para
qu se hace cada paso, la validacin puede resultar no vlida o incluso liosa.
FARMACUTICA
11
-
queda formalizado con la documentacin que demuestra que las pruebas

realizadas dan una uniformidad
entre lotes y stos cumplen los criterios de
calidad (entre lmites definidos).

Paradjicamente, existe todava alguna confusin sobre lo que es validacin de
un proceso y qu constituye la documentacin de un proceso de validacin. Un
problema claro es que genricamente se ha venido
usando el trmino
validacin para cubrir el concepto amplio de las NCF, que en realidad versan
mayoritariamente sobre locales, equipos, componentes, procedimientos y
cualificacin del proceso5 (21). El trmino especfico de proceso de validacin
debera reservarse para las pruebas de las etapas finales del producto y de la
secuencia de desarrollo del proceso. Las NCF y la validacin estn ntimamente
relacionadas: el objetivo principal de ambas es asegurar la consistencia del
proceso y del producto. Para ello
en la fase del diseo del proceso hay que
identificar los parmetros crticos del mismo y la influencia que
tienen en el
proceso. A continuacin se debe estudiar la tolerancia mxima de cada

parmetro identificado como crtico.
Otro concepto ntimamente relacionado con los estudios de validacin es aplicar
la filosofa del peor caso
(22). Este estudio proporciona los intervalos
seguros para el proceso, es decir aquellos que aseguran que
siempre se
obtendr producto correcto. Por supuesto que estos intervalos se habrn

obtenido con pruebas
documentadas que demuestran que si se sobrepasan
estas especificaciones hay probabilidad de que el
producto no cumpla las
especificaciones de calidad.
Por lo tanto, la validacin puede definirse como una aproximacin sistemtica
para asegurar la calidad del
producto, basada en la identificacin de las
variables del proceso que ms influyen en las caractersticas de calidad del

producto, con el objeto de obtener un mtodo de fabricacin y unos mtodos de
control establecidos, de manera que se asegure que si se siguen al pie de la
letra se alcanzarn todas las especificaciones del producto (23). Este estudio
puede y debe aprovecharse para optimizar el proceso. En la
fase de
optimizacin se tiene que estudiar aquella combinacin de parmetros que

Las llamadas
en formacin de personal:
M. Entendindose
por ellas:laMQUINAS,
llevan
a la consecucin
de unaFilosofa
mejora de
enlas
la 5calidad
del producto,
mejora del
5
MEDIOS, MTODOS, PERSONAL (MEN), MATERIALES .
rendimiento del proceso, un tiempo adecuado del mismo y un coste razonable.

De hecho, la validacin supondr una demostracin o prueba que un proceso
funciona tal y como se espera del mismo (24). Los parmetros escogidos para
- 12 -
operativos sin haber analizado al detalle el valor del cambio. Validar representa
la voluntad de invertir en el conocimiento del proceso, en la comprensin de las
relaciones entre los diferentes parmetros y en la
comprensin de las
relaciones entre proceso y su entorno para al final establecer las ptimas y

repetirlo (25). En caso de modificaciones o que se pretenda mejorar deber
procederse a un proceso de revalidacin u otra validacin nueva.
Sin embargo, la cualificacin y la validacin son vocablos que tambin se
Definitivamente, la cualificacin se refiere
confundan hace algn tiempo.
esencialmente al funcionamiento de la maquinaria, equipos y
aparatos de
laboratorio, de los cuales se ha de demostrar experimental y documentalmente

que funcionan
de acuerdo con el uso previsto. La validacin se refiere a
procesos, sistemas y mtodos y supone establecer una evidencia documentada

de que un proceso se realiza y produce un producto que est dentro de las
especificaciones predeterminadas (14). Finalmente, cabe destacar la definicin
de validacin promulgada por las autoridades oficiales de la FDA (26):
Establishing documented evidence wich provides a high degree of assurance
that a specific process will
consistently produce a product meeting its pre-
determinated specifications and quality attributes6

recogida a su vez por las NCF (27):
Validacin es la obtencin de pruebas, con arreglo a las Normas de Correcta
1.3 PRIORIDADES DE LA VALIDACIN.
Fabricacin, de que cualquier procedimiento, proceso, material, actividad o

Desde
puntoen
derealidad
vista industrial
(y previsto.
realmente prctico) los esfuerzos de
sistemaun
produce
el resultado
validacin deberan ir hacia los
productos comercialmente ms importantes
(23). Desde un punto de vista de seguridad farmacutica deben
incluirse,
adems, los productos con dosis muy bajas, los inestables qumicamente y los de
baja solubilidad o baja absorcin. He aqu el trabajo del profesional al aunar sus
conocimientos y experiencia para cumplir sus
objetivos de seguridad
farmacutica a la vez que provee un beneficio econmico para su Compaa.

Est
claro que la validacin slo puede convencer a los economistas con
rentabilidad y sus influencias positivas
en la cuenta de resultados7 y por
supuesto, no existe (como siempre) una nica visin o planteamiento para

6Validacin es establecer una evidencia documentada que provea un alto grado de garanta de que un
proceso especfico producir, de forma

predeterminadas y atributos de calidad.
adecuada, un producto que cumpla con sus especificaciones
7De hecho, segn Tazn (33) los trabajos de cualificacin y validacin en un proyecto suponen
FARMACUTICA
13
-
llevar a cabo una validacin, sino que a cada caso particular habr que aplicar
unos principios generales extrados de las guas publicadas por las agencias
oficiales FDA (26), NCF (27).
La validacin del procedimiento de fabricacin en lotes piloto e industriales es
indispensable para garantizar la calidad farmacutica del medicamento. Ni que
decir tiene que la validacin ms econmica es la que se inicia desde el primer
momento, ya que los cambios lote a lote cuestan dinero y tiempo, no slo por los
fallos o reprocesamientos, sino tambin por el despliegue de controles extras,
de personas o de tiempo. Si todas estas pruebas se practican desde el inicio,
dentro de la optimizacin del proceso, se ahorrarn recursos. El tcnico no slo
demostrar que dirige perfectamente sus procedimientos y que conoce sus
puntos crticos, debe igualmente demostrar a travs de su documentacin que
posee la experiencia necesaria
para llevar a cabo la fabricacin y la
comercializacin de su producto. La validacin aporta la garanta de una

transposicin de escala bien conducida, sin dificultad mayor, pero tambin
aporta la equivalencia del producto industrial con el utilizado para los ensayos
clnicos. Del xito de la validacin depende igualmente el aprovisionamiento del
mercado a tiempo y en cantidad adecuada sin rupturas de stock, que son tan
perjudiciales para la empresa.
Muchas han sido las razones que se han publicado para justificar la validacin
(1); entre las habituales se encuentran la reduccin de costes (derivados del
ahorro en el nmero de muestras a controlar, el propio coste del control, la
disminucin de anomalas en los productos y por ende de rechazos,
retratamientos y
recontroles), pero la ms importante es la garanta que
proporciona al fabricante ya que un proceso
validado es un proceso sin
problemas para producir calidad. Otra razn importante es la mejora de la

logstica
interna del flujo de fabricacin (se pueden adecuar los tiempos de
suministro y espera al flujo real) y la inestimable ventaja de detectar a tiempo

los errores (detectar una anomala en la misma fase donde se produce gracias a
los indicadores de control del proceso); por supuesto la ltima razn viene
impuesta por las exigencias de las autoridades sanitarias.
La validacin es una operacin costosa, pero desde un punto de vista de
productividad econmica puede
optimizarse en s mismo, si se aplican con
ciertos criterios ahorradores de recursos, es decir (28):
- 14 -
acondicionamiento,...).
Disponer de documentos tipo de PNT y Protocolos que se adapten a las
futuras validaciones.
Practicar reagrupamientos de validacin, prctica muy til en las
validaciones de limpieza, validando slo el producto ms problemtico y
extrapolando las conclusiones al resto de productos,...
Validar el caso ms desfavorable (por tipo de mquina o tipo de producto).
Utilizar herramientas estadsticas (diseo factorial, capacidad, planes de
experiencias).
Racionalizar la validacin en s misma (iniciarlo para los productos nuevos, o
los ms interesantes econmicamente, etc.).
1.4 TIPOS DE VALIDACIN
Hoy existen bsicamente tres aproximaciones a la validacin de un proceso de

fabricacin: validacin
retrospectiva, validacin prospectiva y validacin
concurrente (12, 29).

Validacin retrospectiva: estudio para demostrar y establecer una evidencia
documentada de que un proceso hace lo que estaba previsto sobre la base de
una revisin y anlisis de informacin histrica.
Validacin prospectiva: estudio para demostrar y establecer una evidencia
documentada de que un
proceso hace lo que est previsto basado en un
protocolo planificado.
Validacin concurrente: estudio para demostrar y establecer evidencia
documentada de que un proceso hace lo que debe hacer basado en informacin
generada durante una implementacin real del proceso.
Tambin se le
denomina revalidacin. La validacin concurrente es muy utilizada cuando se

ha variado una etapa del proceso, ante cambios de proveedores de excipientes,
para productos fabricados de tarde en
tarde, cambios en las frmulas de
recubrimiento, sustitucin o adicin de excipientes. Da una informacin muy

valiosa para modificar y corregir el proceso de fabricacin o para cuando
aparezcan problemas durante
la fabricacin. Podra considerarse como una
evaluacin continua del proceso, mientras se controla al mximo para procurar

que el producto final sea correcto (28).
Cualquiera de ellas es aceptada y vlida para dar evidencia documentada y
FARMACUTICA
15
-
aplicar una validacin prospectiva para controlar una superficie de variacin

conocida mayor tal como la variabilidad entre las distintas localizaciones del
mezclado, la cual es correcta si es lo que se pretende. Sin
embargo,
difcilmente puede ser utilizada la validacin prospectiva para documentar la

homogeneidad lote a lote, porque en la validacin prospectiva, slo se usan tres
lotes (es decir un nmero demasiado reducido). Si se quiere evaluar y estudiar
qu y cmo influyen los factores en el proceso de homogeneidad de mezclado,
ser ms adecuada una validacin concurrente o incluso retrospectiva (si
existen datos), con la cual evaluar la homogeneidad lote a lote. Para productos
nuevos se practica una validacin prospectiva,
mientras que para productos
existentes se suele aplicar la validacin retrospectiva (ver cuadro 2) (30). Sin

embargo, la validacin concurrente proporciona ms informacin y ayuda a
seguir estudiando el proceso previamente validado prospectivamente.
En la prctica, adems deben realizarse revalidaciones (29), que son
repeticiones parciales de la validacin completa, en funcin de los cambios
que se hayan practicado en el proceso. Cambios o hechos habituales
que
obligan a revalidar son:

cambios en componentes crticos (calidad materias primas, proveedores,),
cambios o sustituciones
acondicionado,
de
piezas
del
equipo o
de
materiales de
cambios en la planta o instalaciones (localizacin o tamao),

aumento o disminucin del tamao del lote,
si varios lotes secuenciales no cumplen los lmites.
Aunque
no
hayan
cambios
significativos,
peridicamente para evaluar que se
es
til
revalidar
el
proceso
siguen cumpliendo los parmetros
preestablecidos y no ha habido variaciones importantes en el proceso

influyan en su capacidad de calidad.
que
- 16
-
Disear
Instala
r
Preparar
Probar
Produccin
industrial
Iniciar
TIEM
P
DEFINICIN
PROCESO
Y
INSTALACI
N
PRUEBAS
VALIDACIN
PROSPECTIVA
OPERACI
I+
D
IQ +
OQ
VALIDACIN
CONCURRENTE
O
RETROSPECTIVA
P
Q
PROCESO DE VALIDACIN
Cuadro 2: Proceso de validacin e integracin de sus fases (DQ= Cualificacin del diseo, IQ=
Cualificacin de la Instalacin, OQ= Cualificacin de la
operacin, PQ= Cualificacin del procedimiento).
Otra responsabilidad del trabajo de validacin (31) de la planta piloto es la

validacin de los procedimientos
de limpieza para el equipo usado en la
fabricacin de medicamentos. La necesidad de este trabajo es obvia
por la
naturaleza sensibilizante de algunos principios activos y las consecuencias

potenciales de su
contaminacin cruzada. Se ha de comprobar si los
procedimientos de limpieza son suficientemente seguros para garantizar que

los restos de principios activos han sido retirados a un nivel eficaz. Adems las
conclusiones
de
la
validacin
pueden
ser
perfectamente
utilizadas
posteriormente en la fabricacin industrial. Suelen utilizarse tres mtodos de

validacin de limpieza:
Determinacin del residuo de principio activo en las aguas de lavado.
Valoracin del principio activo recuperado segn la prueba del algodn (se
pasa un algodn impregnado en disolvente sobre la superficie).
1.5
METODOLOGAS
PARA
LA VALIDACIN
Fabricacin
de un placebo en
la mquina
limpia; se asegura que existe el
mismo riesgo que en un lote normal y se valora el placebo respecto al principio
Es muy importante monitorizar el proceso constantemente de forma que los
activo del lote anterior.
cambios significativos se localicen antes o en el mismo tiempo que ocurren, con
lo cual podra ejercerse una accin correctiva
producto bajo control.
inmediata para mantener al
FARMACUTICA
17
-
Con objeto de alcanzar una validacin adecuada, es esencial un profundo

conocimiento del proceso farmacutico (32). El resultado final del proceso es
variable (esterilidad, riqueza, disolucin) por lo que el enfoque estadstico es
esencial para el proceso de validacin. No existe una recomendacin nica para
validar productos y cuales son los controles o ensayos a llevar a cabo durante
su fabricacin. Sin embargo, s hay unos procedimientos comunes a discutir:
muestreo, anlisis estadstico y control.
Hay que partir de la idea que un proceso de fabricacin es un proceso continuo
que implica un nmero de pasos determinados. Como ejemplo en este trabajo,
si se considera el proceso de fabricacin de
comprimidos a partir de una
materia prima, es posible comprobar que est compuesto por una serie de
etapas crticas, entre ellas: premezclas de excipientes y principio activo,
amasado, mezclado con el lubricante
y compresin. Cada etapa es crtica y
pueden sobrevenir problemas durante su proceso. Por ejemplo, si no existe una

mezcla uniforme en el primer mezclado, la segregacin puede ocurrir en el
amasado final y
pueden tenerse prdidas durante el trasvase del producto,
desde el mezclador a los bidones en cuyo caso la uniformidad de contenido de

los comprimidos puede presentar una variabilidad difcil de aceptar. Si aparece
un problema en alguna etapa de las crticas del proceso, el producto final puede
no cumplir las especificaciones de identidad, riqueza, calidad y pureza. En la
prctica, es preceptivo evaluar cada una de las etapas crticas del proceso de
fabricacin para asegurar
que los ingredientes estn adecuadamente
mezclados, que no ha habido segregacin, que no han habido prdidas de

principio activo y que se hace un adecuado control del proceso sobre el peso de
los comprimidos durante la compresin que redundar en la confianza de que
el producto ser apto.
Para alcanzar este objetivo, los materiales intermedios o acabados se analizan
sobre la base de su riqueza, uniformidad de dosis, disolucin o disgregacin de
acuerdo con los planes de muestreo premarcados (por la Farmacopea, normas
ISO, normas MIL STANDARD,...). Un proceso de fabricacin pasar test si para
cada etapa crtica del proceso de fabricacin y para el producto final cumple las
especificaciones requeridas de identidad, riqueza, calidad y pureza del principio
activo. En la prctica, para la validacin de un proceso
de fabricacin los
lmites de aceptacin se establecen en base a planes de muestreo y a las

especificaciones
de la Farmacopea. Estos lmites se marcan de manera que si
la muestra de validacin cumple los lmites, exista una alta probabilidad de que
- 18 -
proceso de fabricacin. El ms habitual desarrollado por la mayora de autores

es aplicar un mtodo de
anlisis para investigar cules son las fases ms
crticas del proceso. Como fase crtica se defini algo que puede ser o es
probable que sea la causa de un producto inaceptable. Esta tarea la deben
llevar a cabo los
departamentos de Investigacin y Desarrollo que deben
reflejar los puntos dbiles de la frmula y su grado de importancia, en funcin

del desarrollo y pruebas llevadas a cabo; en caso de que no se haya hecho en
esta fase, el tcnico de validacin deber recomponer la informacin de partida.
Es necesario establecer una metodologa de validacin, ya que no existe una
normativa al respecto. Partiendo de un producto medicamentoso, se establecen
los elementos que conforman su calidad que debern analizarse para ver si son
fases crticas, por ejemplo las siguientes para unos comprimidos:
Especificaciones que debe cumplir (iniciales y al caducar).
Ausencia de contaminacin (microbiolgica o cruzada o de sustancias
relacionadas,...).
Identificacin.
Utilizacin del producto (presencia y funcionamiento de los elementos y
accesorios para dosificar, aplicar o administrar el producto).
Inviolabilidad (hermeticidad, esterilidad,...).
Informacin ligada al producto (datos estabilidad, dosis).
Cualquier operacin que pueda afectar a estos elementos deber ser validada y,
en su caso, ser considerada como etapa crtica o con prioridad alta para ser
estudiada en la validacin.
El Plan de Trabajo se basar en:
Primera etapa: describir de forma detallada todas las operaciones o
funciones a identificar y justificar su
carcter crtico o no crtico. Slo las etapas consideradas crticas necesitarn
documentacin exhaustiva.
Segunda etapa: comprobar y controlar las funciones / operaciones crticas
separadamente y controlar las funciones crticas conjuntamente. Dar lmites
de variacin para cada parmetro crtico del procedimiento, basndose en
estudios estadsticos.
FARMACUTICA
19
-
resultados de cada fase crtica darn informacin til sobre el cumplimiento del
proceso de validacin.
Adems de los controles de proceso, Chapman (20)
clasific unas determinadas variables como importantes en la caracterizacin

del cumplimiento del proceso:
Parmetros de control: valores de las variables operativas que se usan como
nivel de control de la estabilidad del proceso. Por ejemplo: el peso mximo y
mnimo obtenidos a partir de 2,5% del peso terico del comprimido.
Variables operativas: factores (incluidas las variables de control), que pueden
afectar potencialmente al estado del proceso y de su control, que provocarn
un producto final correcto o no. Por ejemplo para comprimidos puede ser el %
de humedad relativa del granulado; si es excesiva puede provocar problemas de
compresin.
Estado de control: condicin en que todas las variables operativas que pueden
afectar al cumplimiento del
proceso permanecen entre los mrgenes del
sistema, de manera que el proceso cumple como estaba
previsto y produce
producto apto. Por ejemplo, comprimidos con dureza y peso dentro de los
mrgenes de control.
Margen de fallo: valor de un parmetro de control que si se supera indica
efecto adverso en el control o en
el cumplimiento del producto final. Por
ejemplo si por avera del temporizador se mezcla ms tiempo del especificado

en la gua podra ocurrir desagregacin de la mezcla; si se ha estudiado
previamente, se puede decidir sobre la marcha para resolver la incidencia.
Peor caso: valor ms alto y ms bajo de un parmetro de control que es
evaluado en la validacin. A partir de estos resultados se establece el margen
de fallo de los parmetros de control. Por ejemplo, la altura de los
comprimidos, puede provocar fallo de que no quepan en el blster o por ejemplo
un fallo de dureza de los comprimidos podra afectar al perfil de disolucin de
los comprimidos. Este parmetro ha evolucionado
con el tiempo hacia
mrgenes ms cortos coincidentes con los intervalos de trabajo.

Cualificacin de la instalacin: verificacin documentada de que todos los
aspectos claves de la instalacin cumplen con las normas y con su diseo previo
y que las recomendaciones del instalador se han considerado exactamente. Por
ejemplo, comprobar la velocidad de mezclado de un mezclador (rpm), si los
- 20 -
propona) todos los mrgenes de operacin previstos. Por ejemplo, comprobar

como tras 20 horas de
secado en estufa el granulado cumple las
especificaciones de humedad residual. Si se han instalado protecciones para el

operador, mandos de seguridad, etc.
Protocolo de validacin: plan experimental prospectivo que cuando se ejecuta
como se propone produce evidencia documentada de que el sistema ha sido
validado. El protocolo debe incluir informacin tal como:
formulacin,
procedimiento de fabricacin, objetivos, planes de muestreo, planes de anlisis y

criterios de aceptacin para cada ensayo que tenga que hacerse para cada fase
crtica del proceso.
Los planes de muestreo, anlisis y criterios de aceptacin si se establecen
estadsticamente (34) aseguran un alto grado de confianza de que el proceso
cumple con lo que estaba previsto. Para redactar el protocolo de validacin y
dado que los procedimientos varan de producto a producto, es importante tener
en cuenta los siguientes puntos para entender perfectamente el proceso:
cules son las fases crticas (establecer puntos para la monitorizacin de
estas fases),
equipos a usar en cada fase (que cumplan los requerimientos de
cualificacin),
posibles problemas (estudiarlos basndose en el peor caso posible),
controles a cumplir (conocer el estado de control, parmetros de control y
mrgenes de fallo),
planes de muestreo (representativos del lote),
planes de anlisis (sobre la base de tamao, riesgos, etc.),
criterios de aceptacin,
informacin pertinente del proceso,
controles o especificaciones de referencia (dados por las monografas
oficiales),
resumen y conclusin para la validacin.
Antes de disear el procedimiento de validacin, ser necesaria una revisin de
los pasos crticos en el
proceso de fabricacin. A modo de ejemplo para
comprimidos un anlisis simplificado del mismo sera el basado en:
FARMACUTICA
21
-
variables en base a la experiencia o la bibliografa consultada.

Mantenimiento de la homogeneidad durante el almacenamiento antes de
comprimir.
Efecto de compresin en la uniformidad, dureza, friabilidad, disgregacin y
disolucin.
El anlisis exhaustivo del proceso de fabricacin de los comprimidos por
granulacin hmeda se realiza en el captulo 5 de este trabajo.
1.6 CUALIFICACIN
Otro planteamiento ms moderno de la validacin (35-37) es desarrollarla
basndose en cuatro apartados
(ver cuadros 3 y 4) o bloques denominados:
cualificacin del diseo (DQ), cualificacin de la instalacin (IQ), cualificacin

de la operacin (OQ) y cualificacin de la prestacin (PQ). En este punto, la
traduccin del trmino anglosajn performance ha sido difcil, y los diferentes
expertos lo han ido traduciendo por
cumplimiento, proceso, funcionamiento,
pero quizs la que parece ms acertada es prestacin, es decir la capacidad de

prestar un servicio. Algunos autores han ampliado las Q con dos ms:
Cualificacin del Mantenimiento (MQ) y Cualificacin del cierre de la validacin
(CQ), que habitualmente son incluidas en la
PQ. Para ello el sistema se
subdivide en subsistemas o SECUENCIA

unidadesDEindivisibles
VALIDACIN a las cuales se les aplica el
estudio pormenorizado
de sus/ caractersticas,
cumplimientos,
etc. (38).
1. ORGANIZACIN
PLANIFICACIN: PLAN
MASTER
VALIDACIN:
CALENDARIOS, RESPONSABLES DE VALIDACIN
2. CUALIFICACIN DEL DISEO (DESIGN QUALIFICATION)
3. CUALIFICACIN DE LA INSTALACIN (INSTALLATION QUALIFICATION)
*
CALIBRACIONES
*
PROCEDIMIENTOS NORMALIZADOS DE
TRABAJO
4. CUALIFICACIN OPERACIONAL
5. CUALIFICACIN DE LA(OPERATIONAL
PRESTACIN (PERFORMANCE
QUALIFICATION)QUALIFICATION)
Cuadro 3: Secuencia de validacin de un

producto
- 22
-
FASES DE
CONSIDERACION
LA
ES
CUALIFICACIN PRCTICAS
Acordar
con
DQ
el
CUALIFICACI
proveedor
N DE
las condiciones,
DISEO
modificaciones,
reservar la
documentacin
relacionada,
IQ
CUALIFICACI
N DE
INSTALACIN
Identificar
que
los
elementos
crticos previstos
han
sido
instalados
PRUEBAS
DOCUMENTACIN
Verificar
documentalment
e que el sistema
corresponde a las
exigencias
definidas y
que
los
elementos
crticos han sido
tenidos
en cuenta,
Especificaciones
tcnicas
del
usuario,
Controles
estadsticos
segn
proveedor
(pruebas,)
Redaccin de los
Procedimientos
Normalizados
de
Trabajo:
PNTs
mantenimiento, utilizacin,
limpieza
Controles
estticos:
equipos, partes,....
Control de
calibracin
Documentos Tcnicos del

equipo: proporcionados por
el proveedor (planos, )
Manuales Tcnicos:
mantenimiento,
utilizacin, limpieza,
Planos, Fichas Tcnicas,

PNTs control de equipo
PNTs calibracin
PNTs cambios
OQ
Controlar
Controles
Manual de operacin
funciones
estticos
Cuadro 4: Resumen
de lasde
fases de laProcedimiento
cualificacin dede
equipos.
CUALIFICACI
puesta
crticas:
los
componentes
N DE
velocidad,
sin producto en servicio Gua de
OPERACIN
Aunque estos conceptos
tambin han
planteado confusiones
(39),
que en
temperatura,
ni placebo
Fabricacin
(paraya
placebo)
ocasiones se ha capacidad,
considerado sinnimos
validacin y cualificacin y se utilizan
Controles
dinmicos con
para cualquier concepto relacionado con la fabricacin, con este fin se ha
placebo
PNTs relacionados
preparado un cuadro resumen (cuadro 5). Estas confusiones se analizan en un
Controlar deficiencias
que el Controles
Guaque
de Fabricacin
(parason
PQ
artculo que ejemplifica
NCF y demuestra
seguramente
dinmicos con
producto)
CUALIFICACI equipo
consecuencia defunciona
que no se entendan
(y
entonces
no
se aplicaban) bien los
producto
con
N DE
PNTs relacionados
nuestro
PRESTACIN
conceptos.
procedimiento
de
trabajo,
producto y que
cumple
las
especificaciones
FARMACUTICA
23
-
Sistemas (agua, aire, vapor, etc.) Se validan

Procesos (produccin
comprimidos, etc.)
Se cualifican
Equipos
Materiales
Locales
Personal
Se forman y
certifican
Cuadro 5: Trminos relacionados con la validacin.
Normalmente la mayora de autores aplican esta metodologa desarrollando las

IQ y OQ individualmente en todos los equipos y a continuacin se integra una
PQ para el proceso completo que integrara la validacin de la elaboracin del
producto farmacutico. Por ejemplo, para un producto en emulsin semislido,
supondra
cualificar
todos
los
equipos
utilizados
en
su
elaboracin
individualmente (es decir que el bao es capaz de alcanzar las temperaturas

necesarias, o que el agitador hace una agitacin homognea y adecuada a las
revoluciones adecuadas, etc.) y a continuacin, comprobar que el paso por todos
ellos es capaz de proporcionar un producto dentro de especificaciones.
Respecto a la cualificacin de equipos puede hallarse una extensa bibliografa
para desarrollarlas, aunque dos guas interesantes son las documentadas en los
artculos referenciados como 37 y 40.
En el presente trabajo se respetarn las recomendaciones de la FDA sobre las
fases a desarrollar en una
validacin de un nuevo producto o bien en una
validacin concurrente
de un producto no validado previamente; todas estas
CONFORMIDAD
fases IQ
se han resumido Elenequipo
el se
cuadro
grficamente sus
ha iinnstaa7,
llaadmostrando
doo
M A T ERIA L
PARA
PUESTA
EN MARCHA!
interrelaciones, mientras que enLISTO
el cuadro
6 se
han resumido
los resultados
correctamente
OQ
de las fases de cualificacin.
El equipo ffuuncionnaa en condiciones estandares
DE BASE
LISTO PARA PRODUCIR!
PQ
El equipo trabaja con mis condiciones
particulares
FUNCIONAL
LISTO!
Cuadro 6: Resultados de las fases de la
cualificacin de un equipo
- 24
-
CUALIFICACIN DISEO
Planificacin preproduccin Diseo
especificaciones Revisin
diseo
CUALIFICACIN DE LA CONSTRUCCIN
PRE-CUALIFICACIN
EQUIPO E INSTALACIONES
Procedimientos
Normalizados
de
Trabajo
Calibraciones
Mantenimiento
Programas
control
CUALIFICACIN
EQUIPO E INSTALACIONES:
CUALIFICACIN INSTALACIN,
CUALIFICACIN OPERACIONAL
Y
CUALIFICACIN DE
PRESTACIN
Programa revalidacin
Programa mantenimiento preventivo
Programa cambios calibracin
Mtodos
cualificado
PRUEBAS
PRE- CUALIFICACIN DEL PROCESO
Programa de control rutinario

proceso Monitorizacin
Mtodos
( tendencias,..)
Desarrollo y
Proceso
Optimizacin
Monitorizacin
Producto
y proceso
CUALIFICACIN DE
PRESTACIN DEL PROCESO
CUALIFICACIN DEL PRODUCTO
PRODUCTO VALIDADO
Cuadro 7: Interrelacin de las fases y pruebas

de validacin (41, 42, 43)
FARMACUTICA
1.6.1 PLAN MASTER DE VALIDACIN

Documento que describe los propsitos o intenciones para alcanzar el objetivo.
Organiza la ejecucin de las siguientes fases (DQ, IQ, OQ, PQ) y de la
documentacin implicada.
Entre los puntos que suele incorporar el Plan Master de Validacin (15) se
encuentran los siguientes:
Introduccin
Alcance de la validacin
Glosario de trminos que aparecen en el documento de validacin
Diseo
Cualificacin de las materias primas
Clasificacin ambiental de las instalaciones (aire, temperatura,)
Descripcin del proceso
Descripcin de los equipos y complementos
Archivo histrico de los equipos
Documentacin de la instalacin y construcciones
Descripcin protocolos
Listas PNT
Programas de Plan de validacin
Requerimientos de los protocolos de validacin
Programas de monitorizacin del medio ambiente
Procedimientos de ensayos analticos
Programa calibracin
Programa formacin
Programa mantenimiento preventivo
Programa de control de cambios
Programa de control de documentos
25
-
- 26 -
Personal responsable
Equipos a cualificar
Protocolo de validacin
Procedimiento de fabricacin
Firmas de aprobacin.
Dependiendo del tipo de validacin el Plan Master de Validacin se compondr
de unas u otras pruebas. Ver cuadro 8, donde se resumen, segn la referencia
(15).
VALIDACIN
PROSPECTIVA
VALIDACIN
PROSPECTI
VA PREVIA
VALIDACIN
INDUSTRIAL
Desarrollo
farmacotcnico
de la forma
farmacutica:
Estudio de los
factores crticos del
proceso
Desarrollo
de
la
cualificacin del
equipo de
fabricacin (DQ, IQ,
OQ)
Validacin del
proceso de
fabricacin (PQ) con
lote a
escala industrial
Tres lotes a escala piloto

Ensayo de estabilidad
acelerada y a largo plazo
Un lote a escala industrial

acelerada y a largo
plazo8
Guas de fabricacin
Control proceso
Estadstica de los
datos:
INFORME
DE
VALIDACIN
MTODOpara un nuevo
DE
Cuadro 8: Programa de validacin
producto (adaptado de la referencia (15)
FABRICACIN
VALIDACIN
Validacin del proceso de fabricacin Tres primeros lotes (PQ)

(PQ) con
CONCURRENTE
tres lotes
acelerada y
Estadstica de los datos:
a largo plazo
INFORME DE
8 Las condiciones de estabilidad a largo plazo dependen del la zona climtica. En
VALIDACIN
nuestro pas 25C/ 60% HR.
VALIDACIN
RETROSPECTIVA
Validacin del proceso de fabricacin 10 lotes consecutivos

en base a
tamao lote
los resultados estadsticos de un real
FARMACUTICA
27
-
1.6.2 CUALIFICACIN DEL DISEO (DQ)

En este protocolo se definen los requerimientos, las especificaciones y
descripciones de los equipos. Es una fase eminentemente organizativa (saber
qu se necesita, qu posibilidades presenta el mercado, qu
prestaciones y
cmo satisfacen o no las necesidades y, en funcin del examen llevado a cabo,

qu deber
adaptarse). Constituir una evidencia documentada de que la
calidad es tenida en cuenta y construida desde su diseo. Debe ser una fase
previa a la fase de compra e instalacin del equipo. Deber requerirse
previamente a los proveedores ya que sino a posteriori resulta difcil recoger
esta informacin y
documentos; incluso si es un equipo a desarrollar por el
proveedor deben describirse ahora las especificaciones tcnicas.

Objetivos de la cualificacin del diseo:
Redactar un pliego de condiciones que debe cumplir el equipo: para ello
debe realizarse un anlisis de
las necesidades9 y es imprescindible la
colaboracin de los departamentos de ingeniera, produccin, garanta de

calidad y del suministrador.
Verificar la conformidad del equipo con los principios NCF
Incluir las especificaciones adecuadas al equipo: operacionales, elctricas,
medioambientales, fsicas..
Asegurar que el proveedor entregar el manual de operacin que incluya:
Requerimientos para la instalacin del equipo
Procedimientos de instalacin del equipo
Si la instalacin/equipo estuviera en uso, puede obviarse la DQ del equipo,

aunque
si fuera necesario llevarla a cabo, en la DQ se debera incluir:
Puntos a tener en cuenta en este anlisis:
9
Anlisis de las instalaciones (donde se ubicarn los
relacin
de productos
fabricados
el ltimo ao: fecha, n lote y
equipos):
clasificacin,
tipos,.. Descripcin,
esquemadurante
de las
resultado,
instalaciones/equipos.
Procedimientos de
utilizacin.
Procedimientos de
limpieza.
Procedimientos de
mantenimiento
(programas de
mantenimiento,
recambios,..).
- 28 -
relacin de intervenciones por averas.
1.6.3 FASE DE CUALIFICACIN DE LA INSTALACIN (IQ)

El protocolo de cualificacin de la instalacin (IQ) incluir la documentacin
completa que demuestra que
el equipo est instalado conforme con el diseo
aprobado previamente y las especificaciones tcnicas,
normas, cdigos y
reglamentaciones. Estas actividades se llevan a cabo durante el montaje. Para

ello se debe
elaborar previamente una planificacin de la instalacin. La
verificacin consistir en: controles, conformidad y contrastacin o calibracin.

La importancia de este paso est en la verificacin y comparacin de las
caractersticas diseadas para el equipo frente a las instaladas:
de las especificaciones (operacionales, elctricas,...) del diseo original,
de las rdenes de compra,
de los contratos,
identificacin del equipo, nombre, nmero de serie, planos, caractersticas,
etc.,
conexin a servicios (vapor, agua...),
programas de mantenimiento y limpieza,...
que las recomendaciones
consideradas,
del
fabricante
han
sido
adecuadamente
que existe una buena interrelacin con otros sistemas del laboratorio, SPC10,
que se han comprobado consideraciones referentes a seguridad operativa,
requerimientos de uso.
En este momento debe comprobarse que se dispone de toda la documentacin
(planos, fichas tcnicas, etc.). Se recomienda hacer un listado previo con los
puntos a comprobar y que en ste colabore el
proveedor e incluso la
verificacin se haga en presencia del mismo.

En resumen, el certificado IQ significa que las instrucciones han sido ledas,
10
Statistical ProcessyControl:
Controlha sido debidamente instalado, es decir que existe
comprendidas
el equipo
Estadstico del Proceso.
conformidad material pero todava no se ha puesto en marcha.
FARMACUTICA
1.6.3.1
EJEMPLO
CUALIFICACIN
29
-
DE
INFORME
PARA:
DE
LA INSTALACIN
1.6.3.1.1 INFORMACIN GENERAL DEL EQUIPO

Descripcin del equipo: planos, esquemas y medidas
Caractersticas del equipo: listado de componentes (bombas, vlvulas,
conexiones,), localizacin, fabricante, marca, modelo, n serie, etc.
Especificaciones del fabricante.
Materiales del equipo en contacto con el producto: certificacin y
compatibilidad con los productos.
Materiales del equipo que no entran en contacto con el producto:
instrumentos
crticos
(tipo, fabricante, equipo, localizacin, certificado calibracin, PNT

calibracin) y no crticos (dem).
Esquema, planos de las instalaciones (elctrica, mecnica,...).
Productos para la limpieza, certificacin de origen y comprobacin analtica.
Listado de software asociado a la instalacin y localizacin en archivos.
Relacin cambios introducidos en el sistema.
2.
CONEXIONES NECESARIAS: FLUIDOS Y ENERGAS
Localizacin y caractersticas a conocer: fuente, presin, calidad y capacidad del

vapor, agua, aire comprimido, electricidad, vaco, nitrgeno, extractores de
polvo, sistemas de acondicionamiento de aire...
3.
DOCUMENTACIN
Manual operacin.
Lista de referencias de los documentos tcnicos.
PNT instalacin, PNT mantenimiento preventivo (listas de recambios, PNT
sustitucin piezas), Sanitizacin (limpieza, productos, desinfeccin,...).
Lista y referencias de los PNT de mantenimiento.
Los procedimientos normalizados de trabajo estrictamente no son parte de la
secuencia de validacin. Son una parte importante para la correcta y
consistente funcionalidad del equipo.
- 30 -
redactar en base a la documentacin del proveedor si no se ha hecho ya en al

fase DQ. Los PNT deben contener considerables detalles y su preparacin
requerir una extrema minuciosidad y rigor.
1.6.3.1.4 CONTROLES ESPECFICOS
Controles de calibracin o de contrastacin.
Conformidad demostrada con patrones certificados o patrones de control. La
calibracin demuestra que
una medida o dispositivo sensor produce los
resultados deseados entre los lmites especificados comparado
frente a un
patrn dentro de un intervalo de medida adecuado.

Todos los elementos crticos para el proceso de validacin deben ser calibrados.
Los patrones de calibracin
usados deben compararse frente a patrones
certificados. Debe mantenerse un archivo documentado de los

incluir:
nombre
del
instrumento,
nmero
identificacin,
patrones que
localizacin,
procedimiento de calibracin, intervalo de incertidumbre, fecha de calibracin

inicial,
de recalibracin
y control
del instrumento
usado para realizar
1 intervalo
conformidad
con planos
y documentos
contractuales
.
la calibracin.
emplazamiento, dimensiones de los instrumentos (tolvas,
2
mandos de control,) naturaleza de los materiales:
.
Controles
de conformidad
certificados
de anlisis
3
detalles tcnicos: pendientes de tuberas,
.
soldaduras, conexiones, etc. identificacin de
4
.
equipos, componentes, redes de fluidos
5
controles elctricos y
.
Las modificaciones
o discrepancias
que de
se detecten debern registrarse y ser
neumticos
sincronizacin
6
descritas,
justificadas
consideradas antes de la certificacin, e incluso deber
bucles de y
instrumentacin
.
llevar a revisar
la IQ o OQ
conexiones
conprevias.
otros servicios
7
.
1.6.3.1.5
CERTIFICADO DE ACEPTACIN DE LA INSTALACIN
8
.
(firmado por fabricante y comprador).
FARMACUTICA
31
-
1.6.4 FASE DE CUALIFICACIN OPERACIONAL/ FUNCIONAL

(OQ)
Es la prueba documentada que establece que el equipo es capaz de funcionar
repetidamente
dentro
de
los
lmites
determinados
cumpliendo
las
especificaciones. Despus de que la cualificacin de la instalacin y de que la

calibracin se hayan completado, es necesario determinar si el equipo o
sistema trabaja como se pretenda entre los mrgenes operativos. Son ensayos
en dinmico es decir con la mquina en marcha.
Se hace basndose en dos tipos de ensayos:
1.- Recogida y registro de los valores actuales de los parmetros crticos del
equipo, para cada fase, ciclo y punto de consigna, sin placebo.
En este ensayo se comprueba la funcionalidad de base que proporcionan los
componentes elctricos, mecnicos, de instrumentacin, comandos de control y
de
telecomunicacin
(sealizaciones,
secuencias
de
alarma,
paros
de
emergencia, vlvulas y bombas).

2.- Pruebas de puesta en marcha con placebo
Esta prueba es una simulacin de las condiciones normales de trabajo. Se
probarn las condiciones de
trabajo normales, condiciones de trabajo
escalonadas (con diferentes condiciones de sobrecalentamiento,
sobrecarga,
altas vibraciones, ), alarmas, paros de emergencia.

Un mtodo para obtener un plan control completo ser utilizar un PROTOCOLO
DE OPERACIN o PNT de utilizacin o Procedimiento de puesta en servicio.
Este documento ser el que marque los pasos y criterios de aceptacin para
certificar el sistema o equipo.
Todas las caractersticas importantes de control del equipo se deberan
incluir en esta comprobacin:
usos, rpm, presiones, temperaturas, ciclos de
tiempo y registradores de datos.

Adems todos los aspectos de seguridad existentes deben controlarse,
incluyendo dispositivos de proteccin (para el personal y el equipo) sistemas de
cierre, indicadores y alarmas.
- 32 -
1.6.4.1 EJEMPLO DE INFORME PARA: CUALIFICACIN

OPERACIONAL
Los apartados que incluir son:
1.- PNTs APLICABLES
2.- LISTA DE PRODUCTOS CON QUE SE UTILIZAR EL EQUIPO
3.- DESCRIPCIN DEL PROCESO
4.- VARIABLES CLAVES DEL PROCESO
5.- EQUIPO AUXILIAR NECESARIO PARA REALIZAR LAS PRUEBAS
6.- CALIBRACIN DE LOS INSTRUMENTOS o certificado
de calibracin 7.- CALIBRACIN DEL EQUIPO auxiliar o
8.- VARIABLES DEL PROCESO A CONTROLAR;
objetivo,
criterios recomendados), procedimientos
certificado de calibracin
aceptacin
(valores
9.- PRUEBAS DE VALIDACIN: tres pruebas con placebo en condiciones ms

adversas dentro de las condiciones de trabajo normales (carga mxima, mnima
exposicin, vibracin ) => demostrarn que el
proceso es reproducible y
homogneo.
1.6.5 CUALIFICACIN DE PRESTACIN (PQ)

Programa documentado para demostrar que una operacin, cuando se lleva a
cabo entre unos parmetros determinados, cumplir perfectamente la funcin
propuesta
cumplir
los
criterios
de
aceptacin
predeterminados
repetitivamente, para cada una de las localizaciones y situaciones previstas

(funcionamiento normal y extremo).
Una vez transcurrido cierto tiempo de funcionamiento, es necesario demostrar
que el sistema se ha mantenido y calibrado de forma adecuada con el fin de no
perder las especificaciones funcionales.
FARMACUTICA
33
-
6. ANLISIS E INFORME
Tras el cumplimiento y verificacin satisfactoria de cada control y certificacin,
se redacta un informe
completo compilado incluyendo los resultados, fallos,
revisiones, puntos mejorados, mejoras a realizar en un futuro y las conclusiones

completas.
DICTAMEN FINAL: segn las conclusiones parciales de cada fase.
7. CERTIFICACIN
El paso final es tener el equipo y sistema certificado y aceptado por el Comit
de Validacin. En este momento la instalacin est validada e inspeccionable
segn las NCF por la FDA o la UE.
Archivo: Responsable de Validacin.
1.7 OPTIMIZACIN
FABRICACIN
DE
LOS
PROCESOS
DE
Otro concepto relacionado con la validacin es la optimizacin de los procesos.

Realmente, hoy nadie se
conforma con slo validar un proceso, siempre se
intenta optimizar a la vez el procedimiento de
elaboracin, con lo cual se
aporta alguna ventaja o mejora al proceso de fabricacin sin alterar sus

especificaciones fundamentales (dosis, biodisponibilidad, etc.) en caso de
productos existentes o si son
nuevos buscando una mayor eficacia y
rentabilidad del proceso. As, optimizar, ser obtener una
eficiencia
mxima del proceso manteniendo el estndar de calidad. La idea siempre

debera considerarse la posibilidad de que haya una forma distinta de hacerlo
mejor (44) es una idea muy vlida a tener en cuenta en los
trabajos de
validacin, con lo cual debera aplicarse esta metodologa de optimizacin en las

revalidaciones peridicas o revalidacin por cambios. Por otra parte no debe
perderse la idea de que un proceso ptimo es
aqul que permite obtener un
producto con la calidad establecida al mnimo coste (44); con lo cual no slo es
interesante desde un punto de vista farmacutico sino que la optimizacin es
imprescindible para cualquier proyecto. Es la gran respuesta de la validacin a
las personas que en sus inicios la vieron como una traba a la competitividad
econmica de la empresa. Realmente la optimizacin demuestra que la calidad
es barata (15).
- 34 -
respetada y reconocida por la sociedad, con lo cual puede servir de ejemplo

para la industria alimentaria y farmacutica.
La calidad de diseo debera establecerse tan pronto como fuese posible
durante la fase de desarrollo, porque los cambios lote a lote cuestan tiempo y
dinero. La experiencia adquirida de tales cambios conforma
el proceso de
optimizacin, pero no puede definirse como validacin. Un proceso con

continuos cambios y que no ha sido exactamente fijado no puede ser validado
(45-47). Es necesario, entonces, aunar los
objetivos del departamento de
desarrollo e investigacin galnica con los tradicionales de un proceso de

optimizacin (48-49), para dar lugar a unos resultados que deberan ir en torno
a:
Confirmacin de la frmula y forma farmacutica.
Confirmacin para empezar la fabricacin de los lotes industriales.
Descripcin y fijacin del proceso (parmetros de calidad, proceso, etc.).
Bases para desarrollar la validacin.
Los objetivos del desarrollo son establecer las especificaciones del producto, la
calidad de diseo, los parmetros crticos, los parmetros control de proceso,
las vas de optimizacin y de escalado del proceso.
Los objetivos de optimizacin son:
Encontrar los posibles puntos crticos de la formulacin durante el desarrollo
de la frmula para evitar que aparezcan ms tarde.
Mejorar, dentro de lo posible, los aspectos de calidad del producto.
Marcar tolerancias para los parmetros de proceso.
Mejorar el procedimiento de fabricacin hacia un ahorro econmico.
Ejemplos de parmetros para optimizar son: flujo de un granulado, tiempos
de disolucin, tiempos de disgregacin, otros parmetros farmacotcnicos,
etc.
Por lo tanto, muchas veces se ha considerado la optimizacin del proceso como
una consecuencia natural
del estudio de validacin, que ha sido tratado
cientficamente en base a las variables del proceso y su control (50).
FARMACUTICA
35
-
1.8 HERRAMIENTASESTADSTICASTILES PARA

VALIDACIN Y LA OPTIMIZACIN
LA
FARMACUTICA
Hay muchas herramientas
que pueden utilizarse como parte de una validacin
(51-53): cartas de control,
estudios de capacidad, diseo de experimentos,
anlisis de tolerancias, diseo de mtodos robustos, anlisis modal de fallos y

efectos, planes de muestreo y pruebas de fallos. Se ha preparado un resumen de
las mismas en el cuadro 8.
Aunque es til detenerse en las causas de las no conformidades del
laboratorio farmacutico, stas suelen
ocurrir por errores que cometen los
operadores (entonces evitables) o por exceso de variacin del proceso (ms

difciles de evitar). Obtener un proceso que cumpla repetitivamente las
especificaciones
requiere una aproximacin equilibrada usando herramientas
de pruebas de fallos y de reduccin de la variabilidad. Cuando una falta de

conformidad ocurre a causa de un error, debera utilizarse mtodos de pruebas
de fallos. Estos mtodos intentan hacer imposible que ocurra un error o al
menos que si ocurre no sea indetectable.
Sin embargo, algunas no conformidades no son resultados de errores, sino que
son resultado de variabilidades excesivas del proceso. Para reducir la variacin
y dirigir adecuadamente un proceso se requiere identificar el proceso y sus
caractersticas controlando las entradas variables (imputs) y
estableciendo
controles en dichas entradas para asegurar que las salidas (outputs) cumplan
los requerimientos. Una respuesta del plan de validacin es el desarrollo de un
plan de control: la fase final del proceso de validacin requiere demostrar que
el plan funciona (es decir que el proceso proporciona los resultados previstos).
Una herramienta ser el estudio de capacidad de calidad de un proceso o de
una mquina (54-58) concreta. Un estudio de capacidad mide la aptitud para
cumplir la especificacin repetitivamente11. Esta herramienta es apropiada para
caractersticas mensurables donde la ausencia de
conformidad se debe a
variaciones fuera de control o a la variabilidad del proceso. El anlisis debe

realizarse no slo en condiciones normales, sino tambin para las condiciones
peores (worst case); as en caso de errores potenciales durante la fabricacin,
las pruebas pueden demostrar que los mtodos designados para prevenir los
errores funcionan.
- 36 -
mquina en el valor nominal (Cpk) con la capacidad de la mquina respecto a la

variable estudiada. Se considera que un proceso es capaz siempre que el ndice
supere la unidad. Aunque actualmente el grado de exigencia de calidad en el
sector farmacutico impone que supere 1,33 para decir que una mquina es
capaz
( 4), mientras que para el proceso se asigna 1,0 ( 3). En otras
industrias incluso se requiere superar 1,67 ( 5) y las ltimas tendencias en

ingeniera de calidad requieren
(6).
LTS 2LTI
Cp
6
Cpk valor mn
LTS = Lmite tolerancia
LTS m LTI m
3
3
superior LTI = Lmite de

tolerancia inferior m =
media del proceso
= desviacin estndar
del proceso.
El Cpk indica la dispersin del proceso adems de controlar que no se excedan
las especificaciones, ya que un proceso descentrado puede dar un valor de Cp
mayor de uno y sin embargo existir valores que se salgan
del intervalo de
tolerancia.
Cuanto ms centrado se encuentre el proceso ms se acercar la media al valor
nominal, por lo que Cpk, siempre ser menor que Cp, pudiendo llegar a ser cero,
si estuviese el proceso centrado sobre un extremo del intervalo de tolerancias y
negativo si se encontrara fuera de tolerancias.
Los planes de muestreo pueden usarse para optimizar el nmero de muestras
que han de ser controladas y
demostrar con ellas que se cumple la
especificacin. Una nueva tendencia en ingeniera de calidad es plantear que el

proceso est centrado en la especificacin y que a cada lado del valor nominal
quede un margen de 6 sigmas (es decir 6 desviaciones estndares del proceso),
lo cual asegurara que el 99,999 % de la produccin cumplir tolerancias o lo
que es lo mismo slo 0,002 unidades por milln de las producidas
tiene
probabilidad de ser defectuosa lo que es lo mismo que decir que habr cero
defectos; el problema para
aplicar esta metodologa en el laboratorio
farmacutico es que es muy difcil o improbable que las mquinas tradicionales
FARMACUTICA
37
-
productos de cada milln sern defectuosos respecto a esta especificacin (59),

nmero inaceptable para otras industrias (electrnica, aeronutica,) pero no
para la industria farmacutica.
El objetivo se basar, para las caractersticas medibles de los productos
farmacuticos, en optimizar la media
y reducir la variacin del proceso.
Optimizar el proceso puede ser centrarlo, maximizar o minimizar la
media
segn convenga. Pero en todos los casos se requiere asegurar que todas las
unidades estn dentro de especificaciones. Reducir las variaciones requiere que
se
alcance
un
proceso capaz
estable
que
se
mantenga entre
especificaciones. A pesar de la gran variedad de herramientas estadsticas

aplicables a la validacin y optimizacin de los procesos, es de resaltar que la
mayora de trabajos publicados para la optimizacin de comprimidos utilizan el
diseo factorial (60, 61) y las superficies de respuesta (62) por su sencillez y
fcil aplicacin, frente a otros mtodos de mezclas o combinatorias ms
elaboradas (63, 64).
- 38
-
HERRAMIEN
TA
CARACTERSTICAS DE LA
HERRAMIENTA
Plan de muestreo
estadstico
Mediante una muestra representativa se rechaza o

aprueba un lote de producto
Estadstica
paramtrica (t
Student)
Anlisis de la media
(ANOM)
Anlisis
la
Estudios de capaci
variancia
(ANOVA)
dad
de
proceso
Control de
fallos
Intercambio
de (PCA)
Grfica de
control
APLICACIN
EN
FARMACUTICA
TECNOLOGA
El resultado permite dar resultados del

tipo: con un 95% de confianza el defecto
por debajo
delexisten
1%.
entreest
Decidir
si
ent
operadores,
significativas
re
Estudio estadstico para determinar si existen diferencias diferencias
dosificadores,
etc.
significativas resultados, muestras de poblaciones, etc.
entre Decidir si
diferencias
ent
operadores,
significativas
re
Estudio estadstico para determinar si existen diferencias existen
dosificadores,
etc.
significativas instrumentos, etc.
entre Decidir si
existen
ent
significativas
re
operadores,
dosificadores, etc. Para
Estudio estadstico para determinar si existen diferencias diferencias
demostrar
que
los
resultados
obtenidos
significativas instrumentos, etc.
cumplen
especificaciones.
del Se toman pequeas muestras durante el proceso, se calcula la media
y su las
intervalo
y Para determinar si los
procesos o equipos son estables: se representan grficamente respecto al tiempo. Indicadores: Cp y Cpk
media fallos
centrada
y variacin
pequea.
Se provocan
en el
proceso para
estudiar que
til para comprobar la estabilidad y
).
(12
reacciona de forma correcta.
fiabilidad del proceso bajo control ante el

peor caso
(WORST
CASE).
componentes Se comprueban qu causas provocan la diferencia entre dos unidades
deposible
producto,
til para
determinar
variables crticas ms importantes del introduciendo reducciones en los componentes. El anlisis se lleva a
cabo mediante
proceso.
tablas y grficas
especialmente
diseadas.
Para detectar cambios
de condiciones durante el proceso. Se toman 5 unidades til en validacin
retrospectiva y concurrente, para consecutivas, se calcula su media y su intervalo y se registran
grficamente. En la
determinar las causas de variacin del proceso.
grfica se dibujan los lmites de control, entre los que se deben mantener los puntos;
si se superan indicarn que ha existido un cambio y por lo
tanto debe ser investigado para determinar y anular la causa.
La estabilidad de la media indica si el proceso cambia,

Diseo de experimentos (doe)
Supone
cambios
controlados
en 1
o 2lavariables del proceso y comprobar
Optimizacin
mientras
que laintroducir
estabilidad
en el intervalo
indica
que
de fabricacin y en el desarrollo
de formas
variabilidad
del proceso no aumenta.
farmacuticas: encontrar las variables
que ms afectan a la
12
Cumplir un CpK >1,33 implica que el proceso puede dar 64 productos no conformes sobre 1 milln de producidos.
FARMACUTICA
- 39
-
el cambio en 1 o 2 respuestas del proceso, para establecer la relacin

ms interesante. calidad.
Utiliza: investigacin de experimentos, estudios de superficie
y el anlisis
de la variancia.
AL de
Serespuesta
realizan estudios
de superficie
de respuesta para modelar la media y la variacin
APROXIMACIN
Optimizacin de frmulas y de fabricacin.
DISEO
POR del proceso por separado. Los resultados se utilizan para
ROBUSTO
obtenersistemtico
mrgenes de
variables
que minimicen
variacin de modelos de til en el diseo del proceso
RESPUESTA
ANLISIS DE
Y Anlisis
delas
fallos
potenciales.
Incluye la la
identificacin
y
centren
la respuesta
en elfallos,
intervalo
de control. de causas y consecuencias y el desarrollo de un anlisis
DUAL
CAUSAS EFECTOS
para
identificar
problemas
determinacin
(FMEA)
de
potenciales.
riesgos asociados. Incluye establecer un plan de control detallado y el registro de las
acciones correctoras y controles implementados.
Se inicia desde el nivel de componentes (enfoque desde arriba)
Se listan las posibles consecuencias y se investigan hasta acabar en las causas.
Caracterizacin del
RBOL DE ANLISIS empezando con fallos potenciales y desarrollndolo hasta sus
consecuencias.
determinar las variables Los factores ( y sus distintos niveles) que pueden influir en la calidad
DE
FALLOS
o proceso:
DIAGRAMA
DE
crticas, para eliminar las causas de problemas.
o consistencia
ESPINA DE PEZ
Se
estudia
la precisin
exactitud
un equipo
medida yfinal.
la reproducibilidad con Imprescindible
se listan
y ensayan
paray conocer
sude
efecto
sobre de
la variable
para
cualquier
resultado
farmacutico.
respecto
a
diferentes
operadores.
ESTUDIOS
DE
Se disponen autocontroles o verificaciones dentro del proceso que hacen imposible Util en control de
CALIBRACIN
proceso,
al detectarse
se para la que ocurra un defecto o que si
ocurre
sea
imposible
que
no
se
detecte.
MTODOS
DE ENSAYO Grficamente se determina cual es la principal causa de variacinmquina.
HISTOGRAM
del proceso para su til para determinar
13
DE
AS, ERRORES
GRFICO
MULTIVARIA
NTE
las caractersticas crticas del proceso y control.
ESTUDIO DE
O
SUPERFICIES DE
RESPUESTA
DE
PARETO 13
Modelo basado en establecer relaciones entre los valores de las variables de entrada y Muy til en diseo
factorial, para desarrollo de formas sus respuestas en las variables de salida. El proceso se experimenta en
diferentes
farmacuticas.
sentidos (denominados
diseos factoriales/trials) y se establece la ecuacin que ajusta
la relacin entre variables de entrada y de salida. La ecuacin se utiliza para buscar la til para la
optimizacin del n de variables para control
Pareto demostr que el 80% de la variacin de un proceso es causada por

slo el 20% de las variables.
eliminar las causas principales de error.
- 40 -
DISEO
ROBUSTO
ANLISIS
TOLERANCI
AS
relacin ptima usando los mtodos de diseo robusto y estableciendo

intervalos del proceso. operativos usando anlisis de tolerancias. El
nmero de ensayos depender del
nmero de variables a estudiar, por lo que es importante introducir
las mnimas
variables de entrada pero asegurando que sean las crticas, ya
quetrata
si node
el reducir
estudio las
perdera
valor.basndose
Para ello se
utilizar
un
Se
variaciones
ensuele
ajustar
los blancos
(targets). El Muy til en diseo factorial,
estudio
previo de
(screening)
para se
determinar
las variables
para
desarrollo
formas objetivo
propone seleccionar
los blancos para las entradas de manera que
un
cumplimiento
con una mnima variacin (incluye
crticas.
resulte
farmacuticas.
til para la optimizacin del n de variables
los tres siguientes).
para control del proceso.
DE Implica desarrollar un diseo experimental para modelar la media de la variable de Muy til en diseo
factorial, para desarrollo de formas salida y entonces usando una aproximacin estadstica al anlisis
de
tolerancias
farmacuticas.
predecir
la variacin
de la variable de salida. Requiere estimar la cantidad que las til para la
variables de entrada variarn durante la
del
fabricacin a largo trmino.
proceso.
n de variables
para control
DE optimizacin
El objetivodel
principal
es determinar
las variables crticas. Se desarrolla el experimento
SELECCIN
O con diferentes
valores
paradel
lasproceso.
entradas (ensayos) y
Determinar
las variables
crticas
EXPERIMENT
DISEO
FACTORIALES
variables
de
salida.
Con
esto
se
puede definir que
medir los resultados en las
OS
F
RACCIONADOS
S
variables de entrada
afectan
a los
resultados.
Normalmente
se necesitan dos ensayos por variable
(29, 34)
y as se simplifica el tiempo, se recomienda empezar con todas
las posibles variables hasta encontrar las importantes. Las
superficies
de respuesta
ayudan a determinar
estas relaciones.
MTODO DE
Se
desarrollan
diseos experimentales
para entender
profundamente la relacin entre Muy til en diseo
TAGUCHI
factorial, para desarrollo de formas las entradas y las respuestas en la media y la variacin. Los resultados
se
utilizan
para yfarmacuticas.
centrar
la media
disminuir la variacin. En este caso las entradas deben variarse con til para la
pequeas modificaciones de unas a otras para
del
parecerse a una fabricacin.
proceso.
optimizacin
delmrgenes
n de variables
para control
ANLISIS
DE Se
establecen
de trabajo
para las variables de entrada que aseguren que los Optimizacin del
TOLERANCI
proceso de elaboracin y su autocontrol. resultados sern conformes. Es necesario disponer de una
AS
ecuacin que relacione
entradas y salidas (si no es posible utilizar una superficie de respuesta). Deben
establecerse intervalos (mediante estudios de capacidad) para las
tolerancias del proceso, se deben estrechar los intervalos de las entradas hasta
entradas que deben controlarse y comprobar el intervalo para
los resultados. Si el intervalo no entra en las
FARMACUTICA
ANLISIS
DE VARIANCIA
COMPONENTE
S
REGRESIN
MLTIPLE
GRFICAS DE
BURBUJA
FUNCIN
ANDREWS
- 41
-
conseguir que los resultados entren

dentro de tolerancias.
LA Se estima la contribucin a la variabilidad de diferentes
superficies de variacin. DE
Se busca la mejor relacin
variable y respuesta.
Representacin grfica de 4 variables
del experimento.
Conocer las variables

independientes del proceso.
Conocer el proceso y la incidencia de las
variables en el mismo.
Se calcula una funcin que relacione los

experimentos.
Optimizacin, separacin
de grupos.
Cuadro 8: Herramientas estadsticas tiles para la

validacin u optimizacin farmacutica.
- 42
-
1.9 Y DESPUS DE LA VALIDACIN QU?

Despus de lo expuesto, se puede comprobar la incidencia e implicacin
econmica de las validaciones en la rentabilidad empresarial del laboratorio
farmacutico; tanto el trabajo como los recursos destinados a la
como
el
desembolso
al
adquirir
nuevos
equipos
estn
validacin
perfectamente
compensados por la seguridad de obtener un producto final de calidad.

El principal objetivo de cualquier empresa, farmacutica o no, es producir
productos de calidad al mnimo
coste posible. Para lograr este objetivo la
filosofa de la validacin es esencial. En la industria farmacutica
utiliza
materiales caros, instalaciones y equipos sofisticados y personal altamente

cualificado, todo lo cual hace imprescindible el uso eficiente de estos recursos
para la supervivencia de la compaa. El coste de los
fallos de producto
(rechazos, reprocesos, retiradas, reclamaciones) es una parte significativa del

coste directo
de produccin. Y ste es uno de los nicos puntos de que se
dispone para mejorar la productividad (50) y la competitividad en la industria

del futuro. La industria farmacutica y su mbito est movilizada para definir y
realizar una mejor validacin con un mnimo coste (65).
La experiencia demuestra que la necesidad de validar debe unirse a otros
mbitos de la industria:
Integracin de las estrategias de validacin en la estrategia industrial y
econmica.
Transferencia o reagrupamiento de lugares de produccin con modificaciones
o revalidaciones de los equipos. Puntualizar claramente las modificaciones y su
documentacin para hacerlos conforme a la
reglamentacin en vigor.
Establecer la estrategia de validacin para una transferencia o cambio de

equipo, de ingredientes, de tamao de lote, etc. Analizar y definir la necesidad
real de la validacin y ejecutar la validacin.
Nuevos sistemas
proporcionados
por
de
soporte
proveedores
de
validacin
(por
ej.
para
equipos complejos
mquinas
de
comprimir
automatizadas, lneas de acondicionado, etc.).

La liberacin paramtrica para un proceso del cual est totalmente
controlada su evolucin.
Y como consideracin final, vale la pena reflexionar sobre las consideraciones
FARMACUTICA
43
-
1.10
BIBLIOGRAFA
18Neal
1 Rudolph
JS. Validation of solid dosage forms.

En: Berry IR y
Nash R, editores.
Pharmaceutical process validation. New York:
Marcel Dekker; 1993. p. 167-190.
2 La
Validacin de la teora a la prctica. Actas

del X Encuentro de AEFI: 5-7 octubre de 1989.
Toledo, 1989. p. 9-20, p. 79-101.
3 Berry
I.
Process
validation:
practical
applications to pharmaceutical products. Drug
Development and Industrial Pharmacy 1988;
14 (2&3): 377-389.
4 Baudrand
B. Prsentation du thme.
Pharma Pratiques 1997; 7 (5): 326.
STP
5 Ylla-Catal
M. La validacin un reto actual.

Normas para la
prctica de una correcta
validacin. Ciencia e Industria Farmacutica
1983; 2(2 poca) (1): 25-28.
6 Nash
R. Process validation for solid dosage

forms. Pharmaceutical
Technology 1979; 3
(June): 105-107.
7 Edwards
C. Validation of solid dosage forms,
the FDA
view.
Drug Development and Industrial Pharmacy
1989; 15 (6&7): 11191133.
8 Totzlaff
Rf, Sheperd. RE, Loblanc AJ. The

validation story: perspectives on the systematic
GMP inspection approach and
validation
development. Pharmaceutical Technology 1993;
(march): 100-116.
9 La
validacin, una contribucin a la mejora de

la Calidad en la
Industria. VI Jornadas
Nacionales de AEFI. Pamplona, 1985.
10Cemeli
J. La validacin: una filosofa y un

sistema. La validacin. VI Jornadas Nacionales
de AEFI. Pamplona, 1985.
11Cemeli
J. Validacin de procesos y anlisis de

medicamentos. En: Faul Trillo C. Tratado de
Farmacia Galnica. Madrid: Ed Luzn; 1993. p.
115-123.
12Dalmau
R, Su Negre JM, Cemeli J. Control

de calidad en la
industria farmacutica:
concepto de validacin. Industria Farmacutica
1989; IV (3): 85-91.
13Salazar R. Aplicacin del concepto de Calidad

Total a la
Industria Farmacutica. Real
Academia de Farmacia de Barcelona, discurso
de recepcin. Barcelona: Romargraf S.A.,
1.991.
14Salazar R. Normas de Correcta Fabricacin de
medicamentos y normas de Buenas Prcticas

de Laboratorios. En: Faul C.
Tratado de
Farmacia Galnica. Madrid: Ed Luzn; 1993. p.
105- 113.
15Salazar
R. Introduccin al estudio de la
validacin:
concepto
y
generalidades.
Validacin Industrial. Barcelona: Romargraf.
1999. p. 9-70.
C. Back to the basics. A philosophical

overview. Journal of
Validation Technology
1997; 3 (3): 281-283.
19Salazar
R. Validacin de procesos en la
fabricacin de formas
farmacuticas no
estriles: coordinador. Seminario del Programa
Superior
de
Formacin
Farmacutica.
Formacin continuada Les Heures. Universidad
de Barcelona. Barcelona. Marzo 1997.
Ponentes: Amela J, Bas E, Ylla-Catal M,
Raboso F, Salazar R.
20Chapman
KG. A suggested validation lexicon.

Pharmaceutical Technology 1983; 7: 51-57.
21Murray
S. Couper..Quality control in the

pharmaceutical industry. London: Ed. Academic
Press. 1979 p. 2-7.
22Chapman
K. Worlwide opportunities though

validation. STP Pharma Pratiques 1992; 2 (5):
415-422.
23Lieberman
A, Lachman L, Scwartz J.
Pharmaceutical Dosage
Forms: Tablets. 2
Edicin. New York: Marcel Dekker; 1990.
24Morris
JM. Development pharmaceutics and

process
validation. Drug Development and
Industrial Pharmacy 1990; 16 (11): 1749-1759.
25Acquier R. De la matrise lanticipation. STP

Pharma Pratiques
1997; 7 (5): 327-331.
26Guidelines
on General Principles of process

Validation. Food & Drug Administration. May
1987.
27Normas
de
Correcta
Fabricacin
de
medicamentos. Vol IV. Oficina de publicaciones
oficiales de las Comunidades
Europeas.
Luxemburgo. 1992.
28Roman
S. Pourquoi valider et comment

valider?. STP Pharma Pratiques 1997; 7 (5):
332-338.
29Shein-Chung
Chow, Jen-Pei Lin. Statistical

design and analysis in pharmaceutical science.
New York: Marcel Dekker; 1995. p. 8-22, p.
199-217.
30Chapman
KG, Amer G, Boyce G, Brower G,

Green C, Hall W, Llarpaz D, Mullendore B.
Proposed validation standard VS1.Journal of Validation Technology 2000; 6 (2):
502-509.
31Jeater
JP, Jacobs RA. Validation of new

formulations. En:
Carleton FJ, Agalloco JP.
Validation of aseptic pharmaceutical processes.
New York: Marcel Dekker; 1986. p. 507-525.
32Bolton S. Pharmaceutical Statistics. New York:

Marcel Dekker; 1997. p. 490-514.
33Philippon
F. FDA et inspection, cGMP et BPF:

differences et
similitudes. STP Pharma
Pratiques 1996; 6 (5): 374-377.
34Veit
E. Use of statistic to increase validation

efficciency. Journal of Validation Technology
1996; 2 (3): 207-214.
35Tazn F, Alonso MJ. Validacin de instalaciones
- 44
-
tratamiento de agua en la industria

farmacutica (I). Industria Farmaceutica 1999;
XIV (5): 97-106.
37Andr
T, Baner T, Fontaine L, Guillebert D,

Menozzi P,
Michel P, Nacher F. Guide de
qualification dun equipment
dans les
industries de la Sant. STP Pharma Pratiques
1999; 9 (3): 212-224.
38King
PG. Process
Processes. Journal of
1998 4 (3): 234-242.
Validation for New

validation (II). Journal of Validation Technology

1998 4(2): 143-150.
54Fuller. Process Capability Indices. Journal of

1997 3(5): 284-285.
55Daley J. A practical approach to conducting

capability studies.
Journal of Validation Technology 1997 4(1): 3137.
39Fuller
56 Kieffer
40King
57Nash RA. Understanding the process
R. Compliance and validation: a twoyear retrospective look at GMP deficiencies.

Journal of Validation Technology 1998 4 (4):
309-318.
J. A practical approach to equipment
validation. Jouranla of validation Technology
1997; 4 (1): 84-89.
41Vincent
DW, Revie The validation life cycle of

a biotechnology derived drug (part III of a
three-part series). Journal of Validation
Technology 1999; 5 (4): 365-402.
42Vincent
DW, Revie D. The validation life cycle

of a biotechnology derived drug (part II of a
three-part series).
Journal of Validation
Technology 1999; 5 (3): 272-294.
43Vincent
DW, Revie D. The validation life cycle

of a biotechnology derived drug (part I of a
three-part series). Journal
of Validation
Technology 1998; 5 (2): 167-188.
44Maosa
J, Gargallo A, Segado X, R Salazar

(coordinador). Optimizacin de los procesos
farmacuticos. Seminario del
Programa
Superior
de
Formacin
Farmacutica.
Formacin continuada Les Heures. Universidad
de Barcelona. Barcelona,
15 de Diciembre
1998.
45Derrieu
PH, Deutsch J. Droulement dune

validation: approche concrte. STP Pharma
Pratiques 1997; 7 (5): 340-344.
46Lingnau
J. Optimization and validation of

manufacturing processes. Drug Development
and Industrial Pharmacy 1989; 15 (6&7): 10291046.
47Porter
SC, Verseput RP, Cunningham CR.

Process
optimization using design of
experiments. Pharmaceutical
Technology
Europe 1998; april: 44-52.
48Doornbos
D,
DeHaan
P.
Optimization
techniques in formulation and processing. En:
J.Swarbrick, JC Boylan, editores. Encyclopedia
of pharmaceutical technology. New
York:
Marcel Dekker; 11, 1995: 77-160.
49Bolton. Statistical methods. En: J.Swarbrick, JC

Boylan,
editores.
Encyclopedia
of
pharmaceutical technology. New York: Marcel
Dekker; 14; 1996: 290-292.
50Kieffer
RG, Nally JD. Why validation?. En:

Carleton FJ, Agalloco JP, editores. Validation of
aseptic pharmaceutical processes. 2nd ed. New
York: Marcel Dekker; 1999. p.1-16.
51GHTF
Study Group 3. Quality Systems Drafts

for comments. Process Validation compliance.
R, Torbeck L. Validation and
process capability.
Pharmaceutical Technology 1998; (June): 6676.
capability index concept.
Journal of Validation Technology 1998; 4 (2):
152-160.
58Liria J. Estudios de capacidad de proceso. XIX
Symposium de AEFI. Barcelona, 1 diciembre de

1998: 149-158.
59Pozueta
L, Grima P, Tort-Martorell X: Seis

sigma: Nuevas ideas para la mejora de la
calidad. Cursos de Verano San
Sebastin.
Universidad del Pas Vasco. Agosto 2000.
60Porter
SC, Cunningham CR, Verseput RP.

Process
optimization using design of
experiments. Pharmaceutical Technology 1997;
21 (10): 60-70.
61Timmins P, Delargy AM, Howard JR, Rowlands

EA.
Evalaution of the granualtion of a
hydrophilic matrix sustained release tablet.
Drug Development and Industrial Pharmacy
1991; 17 (4): 531-550.
62Iskandarani B, Clair JH, Patel P, Shiromani PK,
Dempski RE.
Simultaneous optimization of
capsules and tablet formulation using response
methodology. Drug Devepment and Industrial
Pharmacy 1993; 19 (16): 2089-2101.
63Wherl
P, Nobelis P, Stamm A. Principales

mthodes doptimisation employes en gnie
pharmaceutique. I. Les mthodes exploratoires.
STP Pharma 1989; 5 (6/7): 481-489.
64Wherl
P, Nobelis P, Stamm A. Principales

mthodes doptimisation employes en gnie
pharmaceutique.
II.
Les
mthodes
doptimisation proprement dites. STP Pharma
1989; 5 (10): 661-673.
65Leroux
H, Tanu C. Validation. Matrise et

stratgie. STP Pharma Pratiques 1997; 7 (5):
368-371.
-2-
Para su diseo se necesita establecer una modelizacin matemtica del proceso

que se pretende simular mediante la tecnologa informtica. Para ello, se ha
escogido y desarrollado una formulacin sencilla de la
forma farmacutica
comprimidos, que fue dividida en diversos sistemas que, a su vez, fueron

estudiados en profundidad (para lo cual se ha desarrollado la cualificacin de
todos los equipos que integraban cada uno de los sistemas y la validacin del
proceso de fabricacin y de anlisis). Toda esta experimentacin llevada a
acabo en tiempo real, a fin de pormenorizar al mximo todas las pruebas,
caractersticas y requerimientos que estn establecidos para una especialidad
farmacutica habitual. Y ha servido para desarrollar algunas clases prcticas de
laboratorio de dos asignaturas del departamento.
El Plan de Trabajo se ha establecido para cumplir los siguientes subobjetivos:
Desarrollar una frmula de comprimidos sencilla aplicable a las prcticas de
la asignatura Farmacia Galnica II. Este desarrollo implica:
Fase de formulacin: en la cual se estudian las caractersticas de los
ingredientes de la frmula (captulo 2).
Fase de desarrollo analtico: en la cual se obtiene y optimiza un mtodo de
control validado para el principio activo y la forma farmacutica
desarrollada (captulo 3).
Fase de desarrollo farmacotcnico (I): formulacin y compatibilidad: en la
cual se desarrolla y ajusta la frmula y se completan los estudios de
compatibilidad (captulo 4).
Fase de desarrollo farmacotcnico (II): cualificacin del proceso: en la cual
se cualifican los equipos implicados en la produccin (captulo 5).
Fase de desarrollo farmacotcnico (III): optimizacin del proceso: en la
cual se establecen los mrgenes de elaboracin y de seguridad (captulo
6).
Fase de validacin prospectiva: en la cual se fabrican y analizan tres lotes
y se redacta la gua definitiva (captulo 7).
Fase de validacin retrospectiva: en la cual se analizan los datos obtenidos
en los lotes fabricados en las prcticas por alumnos de la licenciatura
(captulo 8).

OBJETIVO
-3
-
PNT1, guas de fabricacin,) tanto en el SDM2 (Servei de Desenvolupament del

Medicament) como en los laboratorios de prcticas previamente mencionadas.
Cualificar y optimizar el proceso de fabricacin de los comprimidos de
paracetamol.
Validar el proceso de fabricacin: prospectiva y retrospectivamente.
- validacin prospectiva del proceso:
validacin del mtodo de anlisis
validacin del proceso de fabricacin
- validacin retrospectiva (anlisis de los datos de los lotes fabricados por
los alumnos):
datos de fabricacin frente a datos de anlisis
Obtener un modelo informtico como base del programa de simulacin
multimedia del proceso de fabricacin anterior.
Evaluar la Aplicacin Interactiva Multimedia desarrollada.
Discusin y conclusiones.
Los planes de estudio universitarios se han ido reforzando con la voluntad de
ofrecer a los estudiantes una enseanza de calidad orientada a una formacin
adecuada a las perspectivas que demanda la sociedad. Las sucesivas reformas
suponen
la
reorientacin
de
los
enfoques
tradicionales,
superando
planteamientos exclusivamente tericos, y aumentando el carcter aplicado de

las materias. Con la utilizacin de las nuevas
tecnologas multimedia, podr
disponerse de materiales pedaggicos capaces de ofrecer temas, detalles o

informacin que escapa de los objetivos de la clase tradicional. Estos materiales
facilitarn a los estudiantes
otras vas opcionales de aprendizaje. Con la
asistencia de estos materiales el profesor puede disponer de una
gama de
recursos
en
considerablemente
mayor,
aunque
la
responsabilidad
estos
momentos recae en los propios docentes, ya que los sistemas educativos no se

adaptan a los cambios tecnolgicos con la rapidez
-4-
con que cambia su entorno y cuando lo han hecho de forma impuesta, han trado
al aula la llamada tecnofobia.
Existen muchos ejemplos de la enseanza multimedia con ptimos resultados.
Los mbitos ms comunes o de mayor implantacin de estas tecnologas a la
formacin son la educacin de adultos y la educacin
escolar, aunque
progresivamente estn llegando a todas las reas de la enseanza, incluida la

universitaria (1-
7). Por otra parte, segn la base de datos TESEO (del
Ministerio de Educacin Cultura y Deporte) en nuestro pas se han defendido

40 tesis doctorales sobre la temtica multimedia; 5 de ellas desarrollaron
sistemas de experto especialmente dirigidos a la enseanza de la medicina, ms
concretamente 3 a radiodiagnstico y 2 simuladores para casos clnicos. Todas
ellas concluyen la validez, adecuabilidad e
idoneidad de la utilizacin de
herramientas multimedia como material didctico para la enseanza a nivel

universitario de materias de Ciencias de la Salud.
Otro punto interesante que aportan las tecnologas multimedia aplicadas a la
educacin es el econmico: si
se demuestra su validez para la enseanza
prctica, ser posible formar a los profesionales en todos los
campos de la
tecnologa farmacutica1 Con el presente trabajo se aporta un acercamiento

real, prctico y til que supone el aprovechamiento de las nuevas tecnologas
de la informacin para la enseanza universitaria de la tecnologa farmacutica
y se investiga pedaggicamente la aplicabilidad del sistema y su validez.
En resumen en la presente memoria se estudiar en una primera fase la filosofa
de la validacin
farmacutica, las diferentes metodologas y aplicaciones
aplicadas hasta el momento. La segunda fase la componen varios captulos y

servir para definir el producto farmacutico que servir como base para la
programacin de la tercera fase. La ltima parte del trabajo est compuesta por
el estudio de los precedentes tecnolgicos a fin de transponerlos a la tecnologa
multimedia y analizar los resultados obtenidos con los grupos piloto de alumnos.
Con lo cual el trabajo ha sido dirigido a mejorar y optimizar (y en consecuencia
demostrar) que la tecnologa multimedia es perfectamente aplicable a la
1
Un ejemplo tpico (prohibitivo por sus connotaciones de contaminacin y coste) sera la fabricacin de
enseanza
las ciencias.
medicamentos de
estriles.
Mediante la
tecnologa multimedia es posible disponer de unidades didcticas prcticas especialmente preparadas para
la ejercitacin de los futuros profesionales, con las cuales de podr profundizar en el proceso tecnolgico y
en las Normas de Correcta Fabricacin (NCF).

OBJETIVO
BIBLIOGRAF
A:
1 Jornades de Creativitat
a lEnsenyament
Universitari. Barcelona, 5-7 octubre del 2000
2II Jornades Multimedia Educativa. Barcelona, 57 julio de 2000
31er
Congreso
Internacional:
Docencia
Universitaria e Innovacin. Barcelona, 26-28
junio de 2000
4 Primera
Trobada de Professors de Cincies
de la Salut (20-21
/enero/2000). Campus de Bellvitge. Universitat de
Barcelona.
5 IV
Jornada sobre la Docncia Universitria,

dedicada al tema Noves Tecnologies en la
Docncia Universitria. Barcelona, 7 novembre
del 2000.
6 Primera
Jornada de la Reflexi a la innovaci

pedaggica en
lensenyament de cincies
aplicades a Farmcia. Universitat de Barcelona.
Facultat de Farmcia. Barcelona, 13 de febrero
de 1998.
7I
Jornades Multimdia Educatiu. Institut de

Cincies de lEducaci. Barcelona, 5-7 julio de
1999.
-5
-
-6
-
CAPTULO 2: DESARROLLO FARMACOTCNICOS (I): FASE DE

PREFORMULACIN
- 45
-
C a pt u l o
2:
DESARROLLO FARMACOTCNICO (I):

FASE DE
PREFORMULACIN
2.1.
INTRODUCCIN:
PRINCIPIO ACTIVO
JUSTIFICACIN
DEL
Actualmente ms de la mitad de los medicamentos se administran en la forma

farmacutica comprimidos. La justificacin de ello radica en las numerosas
ventajas que presenta frente a otras formas farmacuticas, ya que desde un
punto de vista industrial es la forma farmacutica con una fabricacin industrial
ms fcil a gran escala gracias al desarrollo de su mecanizacin. El principio
de la fabricacin de los comprimidos es
muy sencillo, pero por contra su
realizacin suele ser bastante compleja: no es suficiente con situar una dosis de
polvo en una matriz de una mquina de comprimir y comprimirla con los
punzones. Para obtener un comprimido es necesario que el polvo tenga unas
propiedades fsicas y mecnicas1 muy especficas (1, 2).
El punto de partida, pues, se encuentra en desarrollar unos comprimidos
reproducibles desde el punto de
vista galnico, es decir que ante cualquier
eventualidad de fabricacin o control (por otra parte, hecho
habitual en la
enseanza prctica de la galnica) no se malogre el obtener los comprimidos

dentro de especificaciones. El proceso de desarrollo estudiado en detalle debe
aportar datos suficientes para ser transcrito como un modelo matemtico y as
- 46 -
formulacin deber pasar por unas etapas de optimizacin. Se inicia con una
preformulacin tentativa, en
que se considera la dosis de principio activo y
tamao final del comprimido. Igualmente se tendr en cuenta la finalidad del

comprimido, las incompatibilidades entre los componentes y los caracteres
reolgicos
de
los
mismos.
Tras
diversas
aproximaciones
sucesivas
de
perfeccionamiento, se llegar a la frmula definitiva.

ALMACN MATERIAL
ACONDICIONAMIENTO
APROBADO
ALMACEN DE MATERIAS PRIMAS LIBERADAS

MEZCLA
EXCIPIENTES
EXTRAGRANULAR
MATERIAS PRIMAS
A
MATERIAL ACONDICIONAMIENTO
PESADAS
CARTONAJE Y
PROSPECTO
BLISTER
TAMIZADO
EXCIPIENTES
INTRAGRANULAR
MEZCLADO
P.A.-EXCIPIENTES
SOLUCION
AGLUTINANTE
PVC/ALU
CC
VA
SECA
VA
HMEDA
COMPRESIN
DIRECTA
COMPRESION
AMASADO
PRECOMPRESIN
CP
GRANULACIN
HMEDA
CUARENTENA
SECADO
GRANULACIN
SECA
GRANULACIN
TAMIZACIN
CC
CP
EMBLISTADO
R
MEZCLA FINAL
ALMACEN
PRODUCTO
ACABADO
CP
R
ANLISIS
Y LIBERACIN
LOTE
A: ARCHIVO
R: RENDIMIENTO
CP: CONTROL DE PROCESO
CC: CONTROL DE CALIDAD
CC
CUARENTENA
ACONDICIONADO
VAS DE FABRICACIN DE COMPRIMIDOS
Cuadro 1: Secuencia de operaciones en la elaboracin de comprimidos
Entre las diferentes posibilidades de principios activos, se escogi el

paracetamol, por tratarse de una sustancia relativamente asequible y
accesible, con suficiente bibliografa publicada tanto analtica como

PREFORMULACIN
- 47
-
galnica (3) para facilitar establecer un modelo. Al limitar la variabilidad del

principio activo se pretendi
evitar variabilidades aleatorias que pudieran
influir en el establecimiento del modelo informtico de simulacin. Adems este

principio activo tambin es escogido repetidamente para modelar estudios de
compresin (por ejemplo el estudio de varios almidones pregelatinizados, (4)) y
es uno de los principios
activos ms utilizados hoy en da en la prctica
sanitaria. La dosis escogida fue 150 mg ya que es una dosis peditrica de la

que
existen bastantes productos comercializados) e
interesaba
fabricar
comprimidos pequeos para no elevar los costes de la prctica pero se quiso

mantener el carcter de realidad
(pedaggicamente es ms motivador
conocer que lo que se hace es til...).

Se estableci como va de fabricacin, la granulacin por va hmeda acuosa,
con la finalidad de que al ser
una aplicacin informtica eminentemente
educativa, los alumnos desarrollasen su formacin con el
mtodo ms
completo, pudindose as estudiar ms equipos y completar ms controles de
2.
CARACTERIZACIN
DEL PRINCIPIO ACTIVO
proceso
(ver cuadro 1).
1.
CARACTERIZACIN FARMACOLGICA (5-17)
Se trata de un derivado sinttico del para-aminofenol, con propiedades

analgsicas y antipirticas, pero sin actividad antiinflamatoria. Se administra
por va oral o rectal en el tratamiento del dolor leve o moderado y
para la
fiebre. Es el analgsico de eleccin en pacientes para los cuales estn

contraindicados los salicilatos u otros antiinflamatorios no esterodicos, tales
como asmticos, individuos con historial de lcera pptica,
o en nios en los
que los salicilatos no se pueden utilizar debido al riesgo del sndrome de Reye.
Por ello se
le considera uno de los antitrmicos-analgsicos ms seguros y
eficaces de la farmacoteraputica actual.

El paracetamol se usa extensamente como analgsico y antipirtico, sobre todo
en mezclas con otros analgsicos (cido acetilsaliclico, fenazona, amidopirina,
etc.), estimulantes (cafena), antitusivos (codena), etc. Se ha demostrado su
eficacia en el tratamiento de dolores de tipo agudo, con lo cual constituye uno
de
los frmacos ms utilizados para combatir procesos con dolor agudo de
intensidad moderada y asociado con codena para dolores intensos. Tambin se

recomienda para el tratamiento del dolor crnico (enfermedades reumticas).
Incluso la OMS lo considera tratamiento de primera eleccin farmacolgica
- 48 -
La estructura de acetaminofeno es la que le confiere actividad antipirtica, pero

la anilina posee elevada toxicidad para usarla en clnica. El acetaminofeno es el
metabolito que se produce a partir de la acetanilida y la fenacetina (pero no se
recomienda su uso ya que ambas producen metahemoglobina). Por ello se
introduce un grupo acetilo en el grupo amino para reducir la toxicidad
manteniendo la accin antipirtica (ver cuadro 2). El mecanismo de accin del
paracetamol no est determinado totalmente. Acta inhibiendo la sntesis de
prostaglandinas en el sistema nervioso central (SNC) especialmente en el
tlamo y bloqueando la generacin de los impulsos dolorosos a nivel perifrico.
Cuadro 2: Metabolismo del p-aminofenol
La antipiresis se debe a la accin del paracetamol sobre el centro hipotalmico

regulador de la temperatura
del SNC, para producir una vasodilatacin perifrica que da lugar a un aumento
del flujo de sangre a la piel, de sudoracin y de prdida de calor. La accin
central puede incluir la inhibicin de la sntesis de
hipotlamo.
prostaglandinas en el

PREFORMULACIN
- 49
-
2.2.1.1. CARACTERSTICAS FARMACOCINTICAS (5-11, 1820)
El acetaminofeno se absorbe rpidamente y casi por completo en el tracto

gastrointestinal . Cuando se
administran pequeas dosis la absorcin vara
considerablemente con la velocidad de vaciado gstrico y la
presencia de
alimentos (en este caso se retrasa). Se distribuye de manera relativamente

uniforme por la mayor parte de lquidos corporales (saliva,...), a excepcin del
adiposo y su conjugacin a protenas plasmticas es de un 10%, siempre que se
superen las concentraciones de 60 g/ml en plasma.
Experimenta metabolismo de primer paso y se metaboliza principalmente por
conjugacin para formar glucurnidos, sulfatos o conjugados de la cistena. La
3-hidroxilacin tambin ocurre seguida de conjugacin u o-metilacin del grupo
hidroxilo.
Las vas principales de biotransformacin (por los enzimas microsmicos
hepticos) son:
desacetilacin: formando metabolitos que dan lugar a metahemoglobina y
otros metabolitos txicos,
acetaminofeno conjugado (glucuronato y sulfato).
Aproximadamente el 2% se excreta inalterado por la orina (cuadro 3). Los
conjugados glucurnico (20-
30%) y sulfato (40-60%) no son txicos y
representan un 95% del producto excretado. Un 3% se oxida por el sistema

citocromo
P450
heptico
un
intermediario
qumicamente
reactivo
(probablemente la N- acetilbenzoquinona o n-acetilbenzoquinoneimida) que se

combina con el glutation heptico para dar una sustancia atxica: conjugado de
la cistena y el cido mercaptoprico.
En caso de dosis masivas nicas de paracetamol, el glutation heptico se agota
y el intermediario arilante (imidoquinona (16) reactivo en exceso se fija (hasta
10-12 das despus de la dosis) mediante enlaces
covalentes a las
macromolculas hepatocelulares ocasionando necrosis del tejido heptico.
- 50
-
METABOLITOS EXCRETADOS EN
ORINA
1-4 %
paracetamol inalterado
<1%
acetanilida
3-metiltio-4-OH-
20-30%
conjugado sulfato
40-60%
glucurnico
conjugado
5-10%
3-OH-3-sulfato
3conjugado
cistena
metoxiglucuronato y cido
mercaptopurnico
510%
3Cuadro 3: Metabolitos del paracetamol.
metoxisulfato
Tambin se ha descubierto un conjugado con cistena y
producidos por hidroxilacin y
metabolitos
desacetilacin. Los metabolitos hidroxilados son la base de la formacin de la

metahemoglobina y la hepatoxicidad.
Los parmetros farmacocinticos caractersticos son:
biodisponibilidad: 75-90%
semivida de eliminacin: 1,5-3 horas
tmxima: 30-90 minutos
aclaramiento total: 4,5-5,5 mg/kg /minuto
volumen distribucin: 1l/kg
2.2.1.1.1. CONCENTRACIN TERAPUTICA
En plasma, habitualmente entre 10 y 20 g/ml. Las concentraciones plasmticas
suelen variar segn los
individuos. En algunos sujetos con la funcin renal
deteriorada se acumulan los conjugados glucurnico y sulfato.

PREFORMULACIN
2.
- 51
-
REACCIONES ADVERSAS
A dosis teraputicas, se observan ligeros aumentos de enzimas hepticos sin

ictericia y de tipo reversible. Se han descrito tambin lesiones cutneas y muy
ocasionalmente leucopenias de diversos tipos.
Una intoxicacin aguda con una dosis nica de 6 g o ms, puede manifestarse
con mareos, nuseas,
vmitos, prdida del apetito, dolor abdominal,
somnolencia, confusin, hipotensin, sensibilidad heptica,
arritmia cardiaca,
ictericia e insuficiencia renal y heptica agudas, con necrosis heptica. En estos

casos se emplea como antdoto la acetilcistena en infusin intravenosa antes de
transcurrir 8 horas despus de la ingestin masiva.
El mecanismo de la intoxicacin aguda, origina un cuadro txico de necrosis
heptica, a veces complicado
con lesiones agudas renales, cardacas y
pancreticas. Dicha intoxicacin se debe a la actividad del metabolito reactivo

arilante N-acetilbenzoquinona, cuando se ha consumido el 70-78% del glutation
heptico y ya no puede fijar el metabolito, el cual reacciona con protenas
hepticas. La dosis hepatotxica en adultos es de 250 mg/kg/da y en nios no
se deberan superar los 150 mg/kg/da.
3.
INTERACCIONES
La absorcin del paracetamol se acelera con metoclopramida. Su excrecin

puede verse afectada y las concentraciones plasmticas alteradas cuando se
usa junto con probenecid.
Potencia el efecto de acenocumarol y warfarina, e inhibe la accin de bromuro
de glicopirronio y bromuro
de propantelina. Potencia la toxicidad del
cloranfenicol.
Su respuesta se ve alterada por barbitricos y su efecto se inhibe por colestipol,
colestiramina y estrgenos. Se incrementa su toxicidad por alcohol etlico y se
aumenta el efecto y la toxicidad por isoniazida.
El paracetamol puede alterar valores analticos en sangre, produciendo un
aumento biolgico de transaminasas (ALT y AST), fosfatasa alcalina, amonaco,
bilirrubina, creatinina, lactato deshidrogenasa (LDH) y urea; y un aumento por
interferencia analtica de glucosa, teofilina y cido rico. En orina origina una
reduccin biolgica por interferencia analtica de glucosa y un aumento por
- 52 -
2.2.1.1.4 SENSIBILIDAD CRUZADA

Los pacientes que presentan problemas con el cido saliclico pueden no
presentarlos al
paracetamol,
aunque se han descrito broncoespasmos causados por el paracetamol en
algunos asmticos sensibles al cido acetilsaliclico.
2.2.2 CARACTERIZACIN FSICO - QUMICA (6-8,

18-25)
Polvo cristalino, blanco, inodoro y ligeramente amargo. El paracetamol es un
cido dbil..
O
HN
CH3
OH
Paracetam
ol
Figura 1: Frmula del

paracetamol
2.2.2.1. SINONMIAS
acetaminofeno,
pacetamidofen
ol,
p-
acetaminofen
ol,
p-
acetilaminofe
nol,
N-acetil-paminofenol, 4hidroxiacetanilid
a,
phidroxiacetanilid
a,
4-

PREFORMULACIN
- 53
-
acetophenu
m,
paracetamo
lum,
paracetamo
l.
CAS [103C
90-2]
8H9N
O2
Pm:
151,16
4.
COMPOSICIN ELEMENTAL (18-20)
2.2.2.3.
FRMULA
MOLECULAR
C 63.56 %
H 6.00 % N 9.27 % O 21.17%
5.
SOLUBILIDAD (18-20, 26)
Soluble en 70 partes de agua y en 20 de agua hirviendo, en 7-10 partes de

etanol, en 13 partes de acetona,
soluble en metanol, dimetilformamida,
dicloruro de etileno, acetato de etilo y en soluciones de hidrxidos
alcalinos.
Muy ligeramente soluble en cloroformo (1 en 50) y prcticamente insoluble en

ter, ter de petrleo, pentano, benceno y diclorometano. Una solucin acuosa
saturada presenta un pH entre 5,1 y 6,5, a 25 C (ver cuadro 4).
DISOLVENTE
TEMPERATUR
A
20
SOLUBILIDAD
mg /ml
11,3-14,5
AGUA
25
37
11,66-13,85
19,20
100
52
Cuadro 4: Datos sobre la
SOL. REGULADORA
pH 37
solubilidad
del paracetamol.
6,0
23,8
- 54 -
6.
PUNTO DE FUSIN
Dependiendo de la monografa que se trate se especifican intervalos ms

anchos 168- 172C (26) o ms estrechos 169- 170,5 C (18-20).
7.
CONSTANTE DE DISOCIACIN (18-20)
pKa 9,5 (25 C)
8.
DENSIDAD (18-20)
d21c = 1,293
9.
ANLISIS TRMICO DIFERENCIAL (DTA) (19, 20)
Endoterma de fusin sobre 171 C
10.
CALORIMETRA DIFERENCIAL DE BARRIDO

(DSC) (19, 20)
Endoterma de fusin sobre 171 C (ver figura 11, ms adelante).

Calor latente de fusin: 6.8 kcaloras /mol.

PREFORMULACIN
- 55
-
2.2.2.11. ENSAYOS
COLORIMTRICOS (18, 27)
D RE
MEDID E F
REACTIVO
Violeta
(18,
Cloruro
frrico
A
COLORACIN
Reactivo de
Azul
19)
2
Nessler Reactivo
Pardo
(18)
Liebermanns
-naftol en
420
(18)
Viole
medio
nm
(27,
ta
Solucin
615
(2
Aril acilamidasa
y cresol cobre
No
28)
Verd
etanlica
de
nm
0)
amoniacado 4N-HCl diluido con
indicada
e
alcalino
395
(2
agua
No
nm
0)
5% de cido tricloroactico y
indicada
Azul
625
(2
615
(2
Sol. 1% de
No
No
nm
0)
nm
0)
ortocresol y 4M-NH4OH
indicada
indicada
625
(2
0.05N HCl y NaClO y Sol. 2% de
No
520
(2
nm
0)
fenol Etanol, Sol. de NaClO, 0.1N
indicada
nm
0)
HCl, 0.4% NaAsO2 y Sol. 6% fenol No
625
(2
4N NaOH, 2M-cloruro de hidroxil indicada
nm
0)
amonio y
No
627
(2
6% FeCl3
indicada
nm
0)
Oxidacin espontnea de mezclas No
430
(2
alcalinas de 4-aminofenol y fenol
nm
0)
indicada
10% HCl, 0.1M-K3(CN)6, 0.1M520
(2
Roja
fenol, y 5%
nm
0)
Azul
660
NaO 5: Relacin de mtodos colorimtricos
Azul utilizados para
Cuadro
el anlisis(2
del paracetamol.
nm
3)
H
620
(2
HNO
2.2.2.12.
SNTESIS
INDUSTRIAL
(17,
19,
20,
29)
nm
0)
2
2Existen diversas vas de obtencin del paracetamol, aunque la tradicional se
nitro
basa
en la reduccin del panili
nitrofenol
a p-aminofenol (por tratamiento con HCl/H2O en presencia de H2 y
nadi
azoti
Pd/C como catalizador y posterior reduccin hasta pH 6 con NH4OH) el cual se
zado
Ciocalteauacetila
calentando con una mezcla de anhdrido actico y cido actico glacial
Folin
(verClfigura
2). El producto se puede purificar mediante recristalizacin a partir
3CCOOH
de una mezcla de etanol y agua, agua caliente u otro disolvente apropiado.

Otra sntesis publicada (30) es la llamada Hoescht-Celonese (figura 3, parte B).
Textualmente en ingls brown,

traducido por pardo.
- 56
-
Figura 2: Sntesis del paracetamol

segn la referencia 19.
Figura 3: Sntesis del paracetamol segn la referencia

30.
2.2.2.13. CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Sistema TD (18): Rf 15 (determina paracetamol). Fase mvil:
cloroformo: acetona (4:1).
Sistema TE (18): Rf 45 (determina paracetamol).
Fase mvil: acetato de etilo: metanol: solucin concentrada de
amonaco (85:10: 5).
Sistema TF (18): Rf 34 (determina paracetamol). Fase mvil: acetato
de etilo.
Sistema USP 24 (23)
Para determinar paracetamol en comprimidos: Fase mvil: cloruro de
metileno : metanol (4:1). Para determinar impurezas (4-aminofenol):

PREFORMULACIN
- 57
-
Sistema RFE I (21) y Ph Eur III (22)

Para determinar impurezas (4-aminofenol): Fase mvil: metanol: 1,1,1tricloroetano: ter isoproplico (1:4:5).
Sistema Analytical Profiles (20)
Para identificar paracetamol: Fase mvil: cloroformo: isopropanol (19:5), agente
revelador: solucin de cido molibdenfosfrico (Rf = 0,40).
14.
CROMATOGRAFA DE GASES
Sistema GA (18, 20): RI 1687
15.
CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA PRESIN
Sistema HD (18):
Columna: ODS-silica (ODS-Hypersil, 5 m, 16 cm * 5 mm
interno).
Eluyente: alcohol isoproplico: cido frmico 0,1 M:
potsi 13,61
co
g/l
dihidrgeno fosfato (540:1:1000).

Sistema HW
(18):
Columna: ODS-silica (ODS-Hypersil, 5 m, 16 cm * 5 mm
interno).
Eluyente: alcohol isoproplico: cido frmico 0,1 M:
potsi 13,61
co
g/l
dihidrgeno fosfato (176:1:1000).

Sistema USP 24 (23) (para valorar comprimidos o cpsulas, no
para la materia prima):
Columna L1: ODS-silica (3-10 g, 30 cm *3,9 mm interno).
Eluyente: agua, metanol (3:1).
Sistema JPXIII (25):
Columna: ODS-silica (ODS-Silica, 5 m, 15 cm * 4 mm interno).
Eluyente: 0,05 mmol/l solucin fosfato potsico monobsico pH
4,7 : metanol (4: 1).
- 58 -
Resumen de tcnicas HPLC extradas de

la referencia 20, cuadro 6.
COLUMNA
Corasil (60 cm * 2,1 mm)
ELUYENTE
c. actico:
cloroformo:
diclorometano
Bio-Rad A-27 resina 100,015 M solucin
reguladora
12m (100 cm * 0,22 cm)
acetato sdico / cido
actico a pH 4,4
Pellidon (30 cm * 2 mm)
40 mM solucin
reguladora
fosfato pH 7,4
ODS-silica 6m (12.5 cm * 5 Agua: metanol: cido
frmico
o 7 mm)
(85: 15: 0,15)
Micropack CN (15 cm * 2,1 Hexano:
mm)
diclorometano:metanol:
1 ml/min
DETECCIN
254
8.5 ml/min
254 o 280
0.35 ml
/min
amperometr
a
No
indicado
254
FLUJO
No indicado 254
cido actico
Chrosorb SI-60
No indicado
No indicado
Bondapack C18 (20 cm * 3,99 Solucin 3,5 % de
2 ml/min
mm)
acetonitrilo
en solucin reguladora
de acetato de sodio
(pH 4)
Cuadro
6: Resumen
de algunas
tcnicas HPLC
para
Radial- PAK C18 (20
cm *8
Acetonitrilo:
metanol:
1.8-2.2
cuantificar Paracetamol.
mm)
agua (3:3:
ml/min
44)
1%
c. ActicoNo indicado
Bondapack C18 10 m (20
metanolcm * 3,9 mm)
etilacetato (900:150:1)
Nucleosil 5 C18 (15 cm * 4,6 Metanol: solucin
1 ml/min
mm)
reguladora de
fosfato pH 3 (4:5)
Metanol: agua (15:85)
1 ml/min
Corasil 37-50 m C18 +
precolumna
No indicado
254
254
No indicado
240
240

PREFORMULACIN
- 59
-
2.2.2.16. ESPECTRO ULTRAVIOLETA

(18-20, 26)
Solucin acuosa: banda principal a 244 nm (A1 668 a) y banda secundaria a
280 nm. La adicin de cido
1
no afecta a ninguna de las bandas (ver figura 4).
Figura 4: (de la referencia
Solucin cido clorhdrico

0,1N: mxi
20): Espectro
en
mo a 245
nm (E1 UV
661).
solucin1 acuosa.
Solucin alcalina de metanol neutralizado o hidrxido sdico 0,1 N: 257 nm (A1

= 715 a). La adicin de
1
metxido de sodio a la solucin metanlica de paracetamol causa un

deslizamiento del mximo de absorbancia de 243 nm a 262 nm (ver figura 5).
- 60
-
Figura 5: (de la referencia 20): Espectro

UV en solucin alcalina.

PREFORMULACIN
2.2.2.17. ESPECTRO INFRARROJO (18-20, 26)

Comprimido de bromuro potsico: picos principales a las frecuencias 1657,
1612, 1565, 1506, 1263, 1227 (ver figura 6) (18). Adems se pueden
interpretar las siguientes bandas generales en su espectro:
Frecuencia
Asignaci
-1
(cm )
n
800Anillo benceno sustituido en
860
posicin para
1440
Vibraciones
1505
aromticas
1560
1651
Enlace
3160
C=O
332
4
Enlace OEnlace
H
N-H
Cuadro 7: Identificacin de las bandas de la

molcula de paracetamol.
Figura 6 (de las referencias 19 y 20):

Espectro IR del paracetamol.
- 61
-
- 62 -
2.2.2.18. ESPECTRO DE MASAS

Principales picos del paracetamol a 109, 151, 43, 80, 108, 81, 53, 52 (figura
7); principales picos del
conjugado de cistena 141, 43, 183, 44, 140, 80, 108, 52; principales
picos del conjugado del cido
mercaptorico 43, 141, 183, 42, 87, 41, 140, 165 (18).
Figura 7: Espectro
NMR H.
2.2.2.19. PERFIL DE IMPUREZAS

Las impurezas que suelen acompaar al paracetamol estn relacionadas con sus
precursores (cuadro 4). Las distintas Farmacopeas destacan dos principales
(19-23, 25).
p-cloroacetanilida
p-aminofenol o amino-4-fenol.
La monografa de la materia prima exige su anlisis (por cromatografa en capa
fina para la paminofenol)
cloroacetanilida o colorimtrica (21-23, 25) para el pespecifica
los
lmites
mximos
(<0,001%
<0,005%,
respectivamente), mientras que para los comprimidos de paracetamol, no

aparece
especificacin
al
respecto.
diferentes impurezas relacionadas con
En
el
el
cuadro
aparecen
las

PREFORMULACIN
- 63
-
paracetamol en la bibliografa (19, 20).

IMPUREZA
ORIGEN
p-nitrofenol
Precursor sinttico
p-aminofenol
Intermediario sinttico
p-cloroacetanilida
Impureza
p-acetoxiacetanilida
Impureza de sntesis (38)
o-acetilparacetamol
Impureza (por acetilacin del
paracetamol) Azobenceno Producto de reduccin del

nitrobenceno (precursor) Azoxibenceno
Producto de
reduccin del nitrobenceno (precursor) Quinona

Oxidacin del p-aminofenol (intermediario sinttico)
Cuadro 8: Impurezas y productos de degradacin del
paracetamol.
2.2.2.20. ESTABILIDAD (5-7, 18-23, 25, 27)

Las principales recomendaciones de conservacin que se dan en las
monografas (6,7, 21, 22) son:
mantener el producto por debajo de 40 C (preferiblemente entre 15 y 30
C),
almacenar en recipientes hermticos y protegidos de la luz.
Analizando la influencia de los diferentes factores sobre la estabilidad del
paracetamol, se ha confeccionado el siguiente resumen (cuadro 9):
- 64
-
FACTOR
LUZ
REFERENCI
A
(19)
(31)
CALOR
HUMEDAD
(19)
(32)
(19)
RESULTADO
Muy sensible a la luz en solucin (se disocia el enlace NC)
En solucin etanlica, se mostr una importante
fotodegradacin, que
puede retardarse si se acondiciona en frascos topacio.
En estado slido es muy estable a T 45 C
A altas temperaturas (99 C durante 80 minutos)
aparece degradacin
(Figura 7, parte b).
Cuadro 8: Estabilidad del paracetamol

a diferentes factores.
OXIDACIN (19)
Si existen trazas del p-aminofenol, se produce

degradacin por hidrlisis
del p-aminofenol, que despus se oxida y que al final da
coloracin parda o
negra, produciendo la quinonimina y sustancias
relacionadas.
Relativamente estable excepto por la hidrlisis del paminofenol
Figura 8: Curvas UV de degradacin del paracetamol.

PARTE A: Paracetamol tratado con molibdato: espectro del producto coloreado: curva 1 (3
g/ml) y curva 2 (5,5 g/ml). Blanco referencia: el reactivo. El mximo a 670 nm corresponde
al azul de molibdeno formado por reduccin del Mo(VI) provocado por el frmaco.
PARTE B: Paracetamol puro: Curvas 3 y 4: Paracetamol (3,0 g/ml). Curvas 5 y 6. Paracetamol
(5,5 g /ml). Curvas 3 y 5 Paracetamol sin tratar. Curvas 4 y 6 tratado a 99C y 80 minutos.
En cuanto a la estabilidad en solucin, la degradacin del paracetamol aparece

catalizada tanto en medio cido como en medio bsico. Se mostr degradacin
segn cintica de reaccin de primer orden tanto con
respecto a la
concentracin de paracetamol como con respecto a la concentracin de iones

hidroxilo o hidrogeniones.

PREFORMULACIN
- 65
-
Otros ensayos sobre la estabilidad en solucin, en el intervalo de pH que va de

2 a 9, mostr que el pH entre 5 y 6 es el ms estable y arrojaba valores de t a
25 C entre 19,78 y 21,80 aos, mientras que a pH 2 la vida media es 0,73
aos y a pH 9 de 2,3 aos (19, 20).
En general las frmulas galnicas comercializadas son adecuadas ya que, segn
un estudio publicado en 1991 de comprimidos de paracetamol comercializadas
en Espaa (33), de las diez formulaciones analizadas tras 5 aos en estabilidad
8 se mostraron estables y slo dos tenan problemas con la disolucin del
producto.
2.2.2.21.
ACTIVOS
COMPATIBILIDAD
CON
OTROS
PRINCIPIOS
La compatibilidad con excipientes ha sido revisada en algunos trabajos,

mostrndose en su mayora como compatibles (19). El principal problema
se presenta cuando se combina el cido acetilsaliclico
en
comprimidos, ya que puede darse acetilacin del p-aminofenol (34) con

formacin de o-acetil-p-
aminofenol y diacetil-p-aminofenol (ambos aparecen
en comprimidos efervescentes a los 45 meses del

estudio de estabilidad a temperatura ambiente).
2.2.3. CARACTERIZACIN GALNICA

NACIONAL
1.ESPECIALIDADES
ES
FARMACUTICAS COMERCIALIZADAS DE
Segn el Catlogo de Especialidades Farmacuticas del Consejo General de
PARACETAMOL
Colegios Oficiales de Farmacuticos, las formas farmacuticas que contienen

1.
VA ORAL
cpsulas
500 mgson (36):
paracetamol
en el mercado espaol
2. sobre efervescente
500 mg, 1 g
3. solucin (por 5 ml)
120 mg
4. gotas solucin (por

ml)
100 mg
5. suspensin (por 5
ml)
160 mg, 250 mg, 500

mg, 650 mg
6. comprimidos
160 mg
7. comprimidos
masticables
500 mg
8. comprimidos
recubiertos
9. comprimidos
efervescentes
120 mg
500 mg, 1 g
- 66
-
2.2.3.1.2. VA
RECTAL
supositor 125 mg, 150 mg, 250 mg, 300 mg, 325 mg, 500
ios
mg, 600 mg, 650 mg
2.ESPECIALIDADES
COMERCIALIZADAS
EXTRANJERAS
DE PARACETAMOL
Por otra parte, en la bibliografa extranjera se han encontrado las siguientes

formas farmacuticas y dosis para el paracetamol (5):
1.
VA ORAL
1. cpsulas
2. cpsulas (polvo para preparar solucin)
3. sobre (polvo para preparar solucin)
4. granulado
5. suspensin (por 5 ml)
6. comprimidos
7. comprimidos masticables
8. comprimidos recubiertos
9. liofilizado oral (35) (microencapsulado
con etilcelulosa)
10.solucin
(por
ml)
11.solucin (por
5 ml)
2.2.3.2.2. VA
RECTAL
supositorios
2.2.3.2.3. VA INYECTABLE
500 mg
80 mg y 160 mg
1g
80
mg
100
mg,
160
mg
325
mg,
500
mg,
650
mg
60
80 mg, 120 mg, 125 mg, 325
mg,
mg, 650 mg
160
mg
160
En este caso se presenta como proparacetamolmg,
(DCI) clorhidrato en la dosis de
1 g y 2 g que expresadas en paracetamol son325
500 mg y 1 g, respectivamente.
mg,
Va IM e IV (35).
500
mg
Existen, a su vez, diferentes combinaciones en 500
el mercado con otros productos,
entre stas son de destacar por el nmero de mg
especialidades existentes: las de
48
paracetamol-AAS, paracetamol-fosfato de codena,
paracetamol-citrato de
mg,
difenilamina, paracetamol-AAS-cafena (5, 36), paracetamol-cido ascrbico
100
(35). Todo lo cual demuestra que es un principio
mg activo muy utilizado como
analgsico y de amplia difusin en la teraputica
actual.
120
mg,

PREFORMULACIN
3.
- 67
-
CARACTERSTICAS GALNICAS ESPECIALES
En este punto interesa conocer si el principio activo presenta polimorfismo,

eutcticos, etc. que pudieran
influir en la solubilidad y disolucin del principio activo a partir de la forma
farmacutica, etc. Y todas
aquellas caractersticas que los autores hayan
detectado y pudieran influir en la formulacin, para establecer unos intervalos

que faciliten su modelizacin posterior.
1.
CARACTERSTICAS CRISTALINAS
En los primeros artculos

(19) sobre la sntesis del paracetamol se describi
que cristalizaba en forma de
cristales blancos monoclnicos. Ms tarde se describieron cambios en la
estructura cristalina del paracetamol, durante el proceso de fusin.
Finalmente, se ha concluido que existen dos tipos de cristales para el
paracetamol:
Prismas hexagonales: obtenidos por cristalizacin con alcoholes, esteres,
cetonas, agua, dioxano y acetonitrilo.
Agujas rombodricas finas: por cristalizacin con benceno,
diclorometano y otros disolventes clorados.
Figura 9: Difraccin por RX

del paracetamol
tolueno,
- 68 -
El examen de ambos tipos de cristales por calorimetra diferencial de barrido,

IR y difraccin de rayos X (figura 9), no demostr evidencia de polimorfismo ni
de hidratos. Aunque estudios posteriores han planteado la tesis de que s son
polimorfos (37) (ver figuras 10 y 11, comparativas de ambos cristales, para los
anlisis DSC y difraccin de rayos-X) y proponen la utilizacin de la forma
desarrollada por ellos para
compresin directa, ya que se han mejorado las
caractersticas de compresibilidad del paracetamol. Otro estudio demostr que

las caractersticas de superficie especfica y velocidad de disolucin del frmaco
podra modificarse o controlarse mediante la cantidad de agua de cristalizacin
de la materia prima si durante la cristalizacin se aadan aditivos (38) (en
concreto la p-acetoxiacetanilida que es una impureza
paracetamol).
Figura 10: Polimorfos del

paracetamol, anlisis R-X (37).
de sntesis del

PREFORMULACIN
Figura 11: Anlisis por DSC del

paracetamol (37).
- 69
-
- 70
-
2.
CARACTERSTICAS DEL PARACETAMOL (POLVO) (19)
1.
CARGA ESTTICA
Las partculas de paracetamol al fluir por una tolva adquieren carga esttica
negativa. Esta carga puede reducirse si se adicionan lubricantes o pequeas
cantidades de agua (0,5%).
2.
FLUIDEZ
La densidad aparente de los grnulos de paracetamol disminuye segn se

incrementa el contenido de agua.
Esto representa un aumento en la cohesin interna y causa deterioro en la
capacidad de flujo. La esferonizacin de los grnulos para compresin mejora
la velocidad de flujo. La presencia de agua en los
grnulos de paracetamol
incrementa el ngulo de reposo.

3.
CARACTERSTICAS DE COMPRESIN
La compresin uniaxial de los cristales de paracetamol da un ciclo de presin

tpico, produciendo comprimidos laminados y en capas. Los efectos de la
humedad y de granulacin por va hmeda
mejoran
la compresibilidad del paracetamol. Un trabajo reciente comprob que la

compresin con ultrasonidos en la tolva facilita la compresibilidad del
paracetamol, incluso ms que la adicin de aglutinantes (39).
4.
POROSIDAD Y SUPERFICIE (SURFACE AREA)
Se ha demostrado que varan con el contenido en humedad y la presin de

compresin.
5.
VELOCIDAD DE DISOLUCIN
La disolucin de muestras de paracetamol puro sigue una cintica de orden

pseudo-cero a los 5 minutos.
Partculas groseras (pasadas por un tamiz de 300 m de luz de malla) arrojan
datos que se ajustan a la cintica de raz cbica. Partculas finas (pasadas por
un tamiz de 150-125m de luz de malla) dan un
Weibull.
modelo de disolucin de

PREFORMULACIN
- 71
-
2.3. CARACTERIZACIN DE LOS EXCIPIENTES

2.3.1 CELULOSA MICROCRISTALINA (AVICEL PH
101) (40)
El Avicel PH 101 es una celulosa microcristalina que se obtiene a partir de
una -celulosa
despolimerizada de alta pureza microbiolgica y qumica, de
peso molecular alrededor de 36000 y con frmula emprica (C6H10O5)n donde n

es aproximadamente 220.
El nmero de registro CAS de la celulosa es 9004-34-6.
Est formado por polvos cristalinos, de tipo poroso, de color blanco, inodoro,
inspido y dotados de cierta fluidez. Es un producto higroscpico pero estable,
insoluble en agua (forma dispersiones), insoluble en cidos (es resistente) y en
la mayora de disolventes orgnicos (es inerte), ligeramente soluble en
soluciones de hidrxido sdico al 5% p/v (presenta hinchamiento).
Su densidad aparente es de 0,32 g/cm3 y su densidad compactada 0,45 g/cm3. El
rea superficial especfica es de 1,18 m2/g. El tamao medio de partcula es de
50 m (en el tamiz 250 m queda retenido 1% y en el tamiz de 63 m queda
retenido 30,0%).
Es incompatible con oxidantes fuertes. Es un producto higroscpico pero estable
y debe almacenarse en zonas de humedad controlada (secas y frescas).
Se puede utilizar como diluyente en comprimidos y cpsulas, tambin en
procesos de compresin va
hmeda o directa. Otras aplicaciones son como
lubricante y disgregante en formulacin de comprimidos. Su uso est permitido

en productos cosmticos y en productos alimentarios.
Se adjunta el certificado de anlisis del proveedor (ver anexo).
- 72
-
2.3.2 ALMIDN DE MAZ (41,
42)
El almidn de maz es un polisacrido de amilosa y amilopectina, basado en la

-glucosa (C6H10O5)n donde n=300-1000. El nmero de registro CAS es 900525-8.
Se presenta como un polvo de color blancuzco, inodoro, inspido, como grnulos
esfricos
pequeos
ovoides
de
tamao
forma
(caracterstica de cada variedad botnica). Es importante
caractersticos
destacar que las
diferentes variedades botnicas presentan diferentes relaciones amilasa /

amilopectina, con lo cual se obtienen diferencias en las propiedades fsicas.
Producto muy higroscpico (es su mayor inconveniente) (43), absorbe
fcilmente la humedad atmosfrica debido a que presenta valores de equilibrio
relativamente altos (12-18%). Es prcticamente insoluble en etanol fro (95%) y
en agua fra. En agua a 73C a concentraciones de entre el 5 y el 10% se
hincha instantneamente formando engrudo de almidn.
La densidad aparente del almidn es de 0,462 g/cm3 y la densidad compactada
es de 0,658 g/cm3. El rea superficial especfica es de 0,6-0,75 m2/g. El tamao
medio de partcula es de 17 m (entre 2-32 m).
No presenta incompatibilidades. Presenta una buena estabilidad en ambiente
seco y sin precalentar, aunque
las pastas y soluciones de almidn son
inestables y presentan fcil contaminacin por microorganismos.
Estos
problemas pueden ser ms o menos severos en funcin de la variedad del

almidn utilizado. En general se debe conservar en condiciones hermticas y en
ambiente seco y fro (44, 40).
El almidn es un excipiente principal dentro de las formulaciones orales como
aglutinante, diluyente y
disgregante. Como diluyente se utiliza para la
preparacin de trituraciones estandarizadas de colorantes o frmacos potentes

para facilitar las operaciones de elaboracin. En comprimidos, se utiliza como
aglutinante en la granulacin por va hmeda (engrudo de almidn entre el 5 y
el 25% p/p), como disgregante (en concentraciones entre el 3 y el 15% p/p). El
engrudo de almidn se usa aplicado sobre la piel como emoliente.

PREFORMULACIN
- 73
-
2.3.3 TALCO (45)

El talco es un silicato magnsico purificado e hidratado estable que corresponde
a la frmula Mg6(Si2O5)4 (OH)4 y puede contener pequeas cantidades de silicato
de aluminio y hierro. El nmero de registro CAS es 14807-96-6.
Es un polvo cristalino muy fino, de color blanco grisceo, inodoro, impalpable y
graso al tacto, se adhiere a
la piel, es suave al tacto y libre de arena. Es
prcticamente insoluble en cidos y bases diluidas, en disolventes orgnicos y

en agua.
La densidad aparente del talco es de 0,538 g/cm3 y la densidad compactada es
de 0,862 g/cm3. El rea superficial especfica es de 12 m2/g.
Es incompatible con compuestos de amonio cuaternario. El talco es estable y
puede ser esterilizado mediante calor seco a 160 C sin exceder de una hora.
Tambin puede ser esterilizado por radiacin gamma o por exposicin a xido
de etileno. Debe conservarse en contenedores bien cerrados y en un lugar seco
y fro.
El talco se usa como lubricante en formulaciones slidas por va oral. Tambin
se utiliza en preparaciones tpicas como polvo, aunque no debe utilizarse como
polvo en guantes quirrgicos ya que el talco es una
frecuentemente
contaminada
por
microorganismos.
Se
materia natural
utiliza
por
sus
propiedades lubricantes en cosmticos y productos alimentarios.

El talco se utiliza principalmente en las formulaciones de comprimidos y
cpsulas. Sin embargo, por va
intranasal o intravenosa los productos que
contengan talco pueden producir granulomas, especialmente en los pulmones.

Es imprescindible el uso del talco libre de asbesto (impureza habitual), ya que
ste s es carcinognico.
El consumo de talco en grandes cantidades produce efectos laxantes o
irritantes de la mucosa. Se adjunta el certificado de anlisis del
proveedor (ver anexo).
- 74
-
2.3.4 ESTEARATO MAGNSICO (46)

El estearato magnsico es un compuesto de magnesio mezclado con cidos
orgnicos
slidos
obtenidos
de
grasas
consiste
principalmente
proporciones variables de estearato magnsico (C32H70MgO4) y
en
palmitato
magnsico (C36H66MgO4). El nmero de registro CAS es 557-04-0.

El estearato magnsico es un polvo fino, blanco, precipitado o molturado,
impalpable de baja densidad
aparente y presenta un ligero olor y un gusto
caracterstico. El polvo es graso al tacto y se adhiere a la piel.
Es
prcticamente insoluble en etanol (95%), ter y agua, ligeramente soluble en

benceno caliente o etanol caliente (95%).
La densidad aparente del estearato de magnesio de 0,143 g/cm3 y la densidad
compactada es de 0,224 g/cm3. El rea superficial especfica es de 2,45-16,0
m2/g.
El estearato magnsico es incompatible con cidos fuertes, bases fuertes y sales
de hierro. No se debe
mezclar con materiales fuertemente oxidantes. Es
estable, se debe guardar en recipientes bien cerrados y en
lugares fros y
secos.
Se utiliza principalmente como lubricante en cpsulas y comprimidos entre las
concentraciones de 0,25 y 2,0 %. Tambin puede utilizarse en cosmtica y en
productos alimentarios.
El estearato de magnesio es hidrfobo y su presencia excesiva puede retardar la
disolucin de los frmacos slidos y disminuir la dureza de los comprimidos o
aumentar la friabilidad. El tiempo de mezclado ha de
controlarse ya que
tambin puede provocar aumento de variabilidad del proceso y disminucin en

la velocidad de disolucin. La inhalacin de polvo de estearato magnsico es
nociva y puede tener graves consecuencias.

PREFORMULACIN
- 75
-
2.4.
BIBLIOGRAFA
18
1 Le Hir A Farmacia Galnica. Barcelona:
Masson; 1995. p. 236-237.
2 Aiache JM, Aiache S, Renoux R. Introduccin

al estudio del medicamento. Barcelona:
Masson; 1996. p. 191.
3 Guyot JC, Tete L, Tak fak S, Delacourte A.
Clarkes Isolation and Identification of

drugs. 2 ed. Londres: The Royal
Pharmaceutical Press; 1986. p. 849-850.
19Fairbrother J E. Acetaminophen. Anal.
Profiles Drug Subs
1974; 3: 1-109.
20Humeida A El-Obeid, Abdullah A. Al-Badr;

Acetaminophen. Anal. Profiles Drug Subs
1985; 14: 552-590.
Practical interest of the cohesion index for

the technological formulations of tablets. 6th
International Congress Pharmaceutical
Technology APGI; 1992. p. 246-254.
21Real Farmacopea Espaola. 1 ed.
4 Joachim J, Kalantzis G, Joachim G, Reynier JP,
Strasbourg: Editions du Conseil de

lEurope; 1996. p. 753-755.
Piccerelle P, Ruiz JM. Pregelatinized starches

in wet granulation.
Experimental design and data analysis II.
Case of tablets.
STP Pharma Sciences 1994; 4 (6): 482-486.
5 Acetaminophen.
AHFS
99
Drugs
Information. Bethesda: American Society
of HeatlhSystem Pharmacists, Inc.; 1999. p.
1826-1834.
6 Paracetamol. Martindale. The Extra
Pharmacopoeia. 32 ed. Londres: Ed The

Royal Pharmaceutical Society. 1999 p.72.
7 Acetaminophen. The Index Merck. 12Ed.

New York: Ed. Merck & Co. Inc. Rahway;
1996 p.9.
8 M
T Castao, L Ruiz, J Vidal. Monografas

Farmacuticas.
Alicante: Colegio Oficial
Farmacuticos de la provincia de Alicante;
1998; p. 753-755.
9 N02 analgsicos no narcticos. Catlogo de

Especialidades Farmacuticas. Madrid:
Consejo General de Colegios Oficiales de
Farmacuticos; 2000. p. 1563-1565.
10Remington. Farmacia., 19 ed. Vol 2.

Buenos Aires: Editorial Mdica
Panamericana; 1995. p. 2500.
11Flrez J. Farmacologa Humana. 3 ed.

Barcelona: Masson; 1997. p. 370-371.
12Nadal A: Farmacovigilancia.
Paracetamol (toxicidad heptica).

Offarm 1996; 15 (11): 95-96.
13Ruiz MD, Bravo JL: Historia del
paracetamol. AINE 1998; 2: 118-124.
14http://www.pharmweb.netpwmirror/pwy/Para
cetamol.
15Cullar S. Introduccin a la qumica de los
medicamentos. Madrid: Consejo General de
Colegios Oficiales de Farmacuticos; 1996.
p. 205.
16Avendao C. Introduccin a la qumica

farmacutica. Madrid: Ed.
Intermamericana; 1993. p.175-176
17Korolkovas A, Burckhalter JH. Compendio
Madrid: Ministerio de Sanidad y Consumo;

1997. p. 1416.
22Pharmacope Europenne. 3 ed.
23USP 24 NF19. Rockville: United States
Pharmacopeial Convention, Inc; 2000. p.

17-40.
24AOAC
Association of official analytical

Chemists. Official methods of analysis. 15
ed. Vol 1. Arlington: AOAC, 1990. p. 553556.
25The Japanese Pharmacopoeia. 13 ed.

Tokyo: The Society of Japanese
Pharmacopoeia; 1996. p. 183-184.
26Formulario de AEFI. Mtodos de anlisis

y control de medicamentos. Madrid:
Consejo General de Colegios Oficiales de
Farmcuticos; 1988 p. 247-249.
27Del Pozo A. Farmacia Galnica
Especial. Tomo I. Barcelona: Romargraf;

1977. p. 97-98.
28Ustun M, Sungur S, Ersoy l.
Comparison of HPLC spectrofotometric

method for the determination of
pracetamol (acetaminophen) and
acetylsalicylic acid in tablets. Pharmazie
1992; 47 (Jul): 558-559.
29Pharmaceutical Manufacturing
encyclopedia. 2 edicin. Park Ridge:

Noyes Publications; 1988. p. 11-15.
30Kleemen A, Engel J Pharmaceutical
Substances. 3 edicin. New York: Thieme;

1999. p. 1444-1445.
31Mursyidi A. Photostability of paracetamol
solution. Majalah Farmasi Indonesia 1995;

6(3): 68-74.
32Morelli B. Spectrophotometric determination

of paracetamol in pure form in tablets.
Journal of Pharmaceutical & Biomedical
Analysis 1989; 7 (5): 577-584.
33Su Negre JM, Jurado F, Lizcano J,
Salvad MA, Garca Celma Mj, Mir ML.

Estudio galnico y de estabilidad a tiempo
real de distintas especialidades
farmacuticas de comprimidos de
paracetamol. Ciencia Pharmacutica 1992; 2
(6): 401-410.
- 76
-
35Vidal. Vidal
le dictionnaire. 75 ed.
Paris: Editions du Vidal; 1999. p. 3-4.
36Paracetamol y derivados. Catlogo de
Especialidades Farmacuticas. Madrid:

Consejo General de Colegios Oficiales
de Farmacuticos; 2000. p.1589-1592.
37Di Martino P, Guyot-Hermann AM, Conflant P,

Drache M, Guyot JC. A new pure paracetamol
for direct compression: the orthorhombic
form. International Journal of pharmaceutics
1996; 128: 1-8.
38Chow AHL, Chow PKK, Wang Zhongshan,
Grant DJW. Modification of acetaminophen

crystals: influence of growth in aqueous
solutions containing p-acetoxyacetanilide on
crystals properties. International Journal of
Pharmaceutics 1985; 24: 239-258.
39Rubinstein MH, Levina M. The effect of
ultrasonic vibration on the compaction

characteristics of paracetamol.
Pharmaceutical Tecnology Conference. 1113, april 2000. Baveno- Shesa (Italy). Vol.2.
83-120.
40Microcrystalline cellulose. Handbook of
Pharmaceutical excipients. American

Pharmaceutical Association 3 ed. London:
The Pharmaceutical Press. 2000. p. 102106.
41Starch. Handbook of Pharmaceutical
excipients. American Pharmaceutical

Association 3 ed. London: The
Pharmaceutical Press. 2000. p. 522-527.
42Newman A, Vitez I, Kiesnowski C, Mueller R.

Starches and starch derivates. En:
Encyclopedia of pharmaceutical technology.
Editors J Swarbrick, JC Boylan. New York:
Marcel Dekker Inc.; 1996; 14: 223-248.
43Garca MJ, Santos D. Formas orales slidas

(III). En: Monografas Galnicas. Madrid:
Laboratorios Glaxo. 1993: 10-15.
44Helman J. Farmacotecnia terica y
prctica. Mxico: CECSA. 1980. p.1710.
45Talc. Handbook of Pharmaceutical
excipients. American Pharmaceutical

Association 3 ed. London: The
Pharmaceutical Press. 2000. p. 555-557.
46Magnesium stearate. Handbook of
Pharmaceutical excipients. American

Pharmaceutical Association 3 ed.
London: The Pharmaceutical Press. 2000.
p. 305-308.
CAPTULO 2: DESARROLLO FARMACOTCNICO (I): FASE DE

PREFORMULACIN
ANEXOS: CERTIFICADOS DE ANLISIS DE LAS

MATERIAS PRIMAS
- 77
-
- 78
-
ANEXO: FICHA DE SEGURIDAD DEL

PARACETAMOL
CAPTULO 3: DESARROLLO
ANALTICO
- 79
-
C a pt u l o
3:
DESARROLLO ANALTICO:
VALIDACIN DEL MTODO DE
ANLISIS DEL
PARACETAMOL
COMPRIMIDOS
3.1 MTODOS ANALTICOS DEL PARACETAMOL
Se ha realizado una bsqueda de las metdicas analticas habituales utilizadas
para el anlisis del paracetamol en medicamentos (1-3) y se han clasificado las
diferentes metdicas segn su aplicacin para
la identificacin o para la
valoracin del paracetamol en formas farmacuticas, no documentndose las

mltiples metdicas utilizadas en el anlisis clnico del paracetamol.
3.1.1 MTODOS DE IDENTIFICACIN DEL PARACETAMOL

3.1.1.1 PUNTO DE FUSIN
El paracetamol puede ser identificado por su punto de fusin (el producto
purificado presenta un punto de fusin entre 169 y 171C) en funcin de los
reactivos utilizados o de los eutcticos formados (2,3), aunque el intervalo es
ampliado en otras referencias oficiales (4, 5, 6).
- 80 -
3.1.1.2 MTODOS
FLUORIMTRICOS
REACTIVO
K3Fe(CN)6
3.
COLORACIN
Azul Violeta
DE MEDIDA REFERENCIA
303 nm
(3)
RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR
El paracetamol aparece en el espectro entre 400 y 500 Hz (3).
4.
MTODOS DE ESPECTROMETRA DE MASAS
En la referencia (3) se indican las condiciones particulares de este mtodo, el

cual se separa del objetivo del trabajo, por lo que no se detalla.
5.
MTODOS ESPECTROFOTOMTRICOS Y
COLORIMTRICOS
REACTIVO
DE
COLORACIN
MEDIDA
Violeta Cloruro
frrico (2,
Azul
7) Reactivo de
Nessler (2)
Pard
Reactivo
420
o1
Liebermanns (2)
nm
Viole
Solucin etanlica de -naftol en
615
ta
medio alcalino (8, 9)
nm
Verd
Aril acilamidasa y cresol cobre
395
e
amoniacado (2)
nm
No
HCl diluido con agua 4N (2)
615
indicada
520
No
cido tricloroactico 5% y solucin
No
nm
indicada
nm
indicada
ortocresol 1% y NH4OH 4M (2)
625
No
625
No
HCl 0.05N, NaClO y solucin fenol
nm
indicada
nm
indicada
2% (2)
625
No
627
Azul
Etanol, sol. de NaClO, HCl 0.1N,
nm
indicada
nm
No
NaAsO2 0.4 % y solucin fenol 6%
No
430
indicada
(2)
indicada
nm
NaOH 4N, cloruro de hidroxil amonio 2M y FeCl3 6%
Roja
520
(2) VALORACIN DEL PARACETAMOL
Azul
3.1.2 MTODOS DE
nm
Oxidacin espontnea de mezclas alcalinas de 4No
MATERIA PRIMA
660
aminofenol y fenol (2)
indicada
nm
HCl 10%, K3(CN)6 0.1M, fenol 0.1M y
Azul
249
NaOH 5% HNO2 (2)
nm
3.1.2.1 VALORACIN
QUMICA
2-nitroanilinadiazotizado
(2)
620
Ciocalteau-Folin (2)
nm
La Farmacopea
Europea
la Real
Metanol-HCl
0.1y M
(2) Farmacopea Espaola (4, 10) indican que se
Cl3CCOOH (2)
debe valorar con sulfato crico amnico, hasta coloracin amarilla y se aplica la
equivalencia de 1 ml de reactivo gastado 7.560 mg
1
Textualmente en ingls brown, traducido por pardo.
ANALTICO
- 81
-
paracetamol.
3.1.2.2 MTODOS
ULTRAVIOLETA
REACTIVOS
Agua + Metanol + Eter
etlico
Metanol + Agua
DE MEDIDA
264 nm
REFERENCIA
(3)
244 nm
USP 24(5), RFE(10), F Eur III

(4), (11).
BP 1963(2)
Etanol + cido clorhdrico

249 nm
diluido
Metanol + cido clorhdrico
249 nm
Formulario Nacional US XI(2)
diluido
0.01N NaOH
257 nm
BP 1968 (2)
3.1.2.1
POTENCIOMTRICOS
0.1 M NaOH MTODOS
257 nm
BP 1980, 1988 (12-14)
Cloroformo + Etanol
249 nm
Formulario Nacional US XII y
Reactivo: (3:1)
Tetrabutilamonio hidrxido. Solvente: Dimetil formamida
(3).
XIII (2)
n-butanol y NaHCO3
250 nm
Formulario Nacional US XII y
XIII (2)
Mtodo conductimtrico
para
utilizando como reactivo de
la
determinacin del
paracetamol (15)
valoracin una solucin acuosa de NaOH,
determinando potenciomtricamente el punto final de la valoracin.
3.
MTODOS CROMATOGRFICOS
1.
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (TLC)
Es
un
mtodo
muy
utilizado
para
la
determinacin
(principalmente
identificacin) del paracetamol y su impureza (4-cloroacetanilida), existiendo

diferentes fases mviles tiles (10). Ver el captulo 2 de preformulacin (4, 5,
10, 12, 13).
2.
CROMATOGRAFA GASEOSA (GC)
Este mtodo se utiliza para identificar (tiempo de retencin) y analizar

cuantitativamente, en comprimidos, la presencia de paracetamol junto a otros
componentes. Ver el captulo 2 de preformulacin (4, 5, 10, 12, 13).
3.
CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA PRESIN (HPLC)
La utilizacin de este mtodo se ha dirigido para la determinacin de

acetominofeno en formulaciones
farmacuticas y en fluidos biolgicos. Es el
mtodo ms utilizado ya que permite determinar y valorar conjuntamente el

principio activo y la impureza p-aminofenol (4, 5, 10, 12, 13).
- 82 -
3.MTODOS DE ANLISIS DE COMBINACIONES DE

PARACETAMOL CON OTROS PRINCIPIOS ACTIVOS
1.
MTODOS POTENCIOMTRICOS
Referenciado para la determinacin de paracetamol combinado con diclofenaco

sdico (16).
2. USP
HPLC
La
24 (5) documenta diferentes tcnicas para la determinacin de
varios principios conjuntamente:
activ
os
paracetamol y cido acetilsaliclico

paracetamol, cido acetilsaliclico y cafena
paracetamol y cafena
paracetamol, clorfeniramina, dextrometorfano y fenilpropanolamina
Por otra parte, se han publicado diversos trabajos relacionados para la

determinacin de:
acetominofeno, pseudoefedrina y cafena (17).
paracetamol y cido acetilsaliclico (8, 18).
paracetamol, fenilpropanolamina, cafena, glicerilguaiacolato y maleato de
clorfeniramina es mediante HPLC junto con diodo array (19).
paracetamol, cido acetilsaliclico y cido ascrbico (20).
paracetamol, cafena y propifenazona (21).
paracetamol, cafena y cido acetilsaliclico (22).
3.1.3.3MTODOS ESPECTROFOTOMTRICOS
Para la determinacin de paracetamol y cafena (23).
Utilizacin de mtodos colorimtricos a travs de nitracin y subsiguiente
quelacin para la determinacin de
ANALTICO
- 83
-
paracetamol y salicilamida (24).

Otro mtodo interesante basado en la funcin ortogonal del espectro del
paracetamol (25), permite su
determinacin incluso en presencia del p-
aminofenol (producto de degradacin principal).
4.
ESPECTROSCOPA DE DIODE ARRAY
Para la determinacin de paracetamol y fosfato de codena (26).
5.
CROMATOGRAFA DE CAPA FINA
Este mtodo junto con una espectrodensitometra se ha utilizado para la

determinacin de paracetamol, propifenazona y cafena conjuntamente. Es un
mtodo especfico, rpido y que presenta una buena reproducibilidad para el
control de calidad de los comprimidos (27).
3.1.4 CONCLUSIN DE LOS MTODOS DE ANLISIS

Tras el anlisis y valoracin tcnica de los apartados anteriores sobre los
mtodos de anlisis de paracetamol, y debido a que la aplicacin del mtodo es
para anlisis rutinarios (laboratorio de prcticas,...)
y a los resultados de los
parmetros de validacin (es un mtodo validado), se escogi un mtodo

espectrofotomtrico UV-VIS por su practicabilidad. Adems una referencia
encontrada (8), que compar un mtodo UV-VIS y un mtodo por HPLC para
valorar paracetamol, lleg a la conclusin de que los resultados obtenidos con
el mtodo espectrofotomtrico eran ms rpidos, ms precisos y de mayor
3.2 METODOLOGA
PARA
ELevaluaciones
DESARROLLO
sensibilidad,
corroborado todo
ello por
estadsticasDEL
que
demostraron
no haba diferencias significativas entre ambos.
MTODOque
ANALTICO.
Para el desarrollo del mtodo analtico de valoracin del principio activo, se tuvo
en cuenta la monografa de Acetaminophen materia prima, particularmente el
mtodo de valoracin de materia prima especificado
en la USP24 (5) y la
Farmacopea Japonesa (6), al tratarse de un mtodo espectrofotomtrico,

sencillo y exacto, fcilmente extrapolable al laboratorio de prcticas, frente al
propuesto por la Real Farmacopea Espaola (10), que exige extracciones con
disolventes orgnicos y al no disponer del equipo necesario para
- 84 -
llevar a cabo en el laboratorio de prcticas el mtodo por HPLC especificado

para el anlisis de comprimidos por la USP24. Aunque la especificidad de la
tcnica de espectrofotometra de absorcin ultravioleta - visible no es muy alta,
es muy til en anlisis rutinario ya sea cuantitativo (la absorcin estar
relacionada directamente con la concentracin de la sustancia absorbente de la
muestra) o cualitativo (como mtodo de identificacin adicional basado sobre
las longitudes de onda caractersticas de la sustancia).
Segn la bibliografa consultada, se han publicado dos estudios comparativos
entre el anlisis por HPLC y UV, para anlisis de comprimidos concluyendo uno
que ambos mtodos presentaban precisiones similares
(18) y el segundo que no haba diferencias estadsticamente significativas
entre ambos mtodos a un nivel
de confianza del 95% (8). Destacan los mtodos espectrofotomtricos por
proporcionar resultados rpidos, precisos y selectivos (2, 3, 18).
Metodologa de ensayo:
Pesar exactamente 60 mg de paracetamol problema y disolver con 5 ml de
metanol en un matraz de 250 ml y enrasar con agua. Tomar 5 ml, filtrar por
papel, lavar el filtro con cantidad suficiente de agua y diluir con agua hasta 100
ml y mezclar. Paralelamente siguiendo exactamente el mismo procedimiento se
prepara una disolucin en agua de concentracin 12 g/ml, con paracetamol
patrn de referencia.
Leer la absorbancia de ambas soluciones en el mximo de absorcin (alrededor
de 244 nm), usando agua
como blanco. Calcular la cantidad en mg, de
C8H9NO2, mediante la frmula:

5 c (AU / AS)
en la que;
c:
es la concentracin en g/ml del patrn de
referencia de paracetamol AU:
es la absorbancia de
solucin problema
AS:
referencia
es la absorbancia de la solucin patrn de
Se plantea como partida el mtodo anterior y otro idntico con la salvedad de
ANALTICO
- 85
-
cumplimiento o no de los parmetros de validacin.

Una vez comprobada la validez del mtodo (medio disolucin agua/metanol y
solucin reguladora fosfato)
para la cuantificacin del paracetamol en
comprimidos, se intent optimizar el mtodo, tanto su practicabilidad como su

fiabilidad, teniendo como objetivo final la mxima simplificacin analtica y
desde
un punto de vista econmico, el mnimo coste de anlisis, lo cual se
concluy en:
Evitar el uso del metanol en el desarrollo analtico, con el ahorro econmico
que supone teniendo en cuenta que el mtodo se utilizar en el laboratorio
de prcticas de Farmacia Galnica III (60-70 veces al ao). Adems se evitan
los riesgos derivados de la peligrosidad inherente al metanol en
cuanto
disolvente orgnico inflamable y txico.

Evitar el uso de la solucin reguladora fosfato, con el ahorro de tiempo y
dinero que ello supone, por las razones anteriormente expuestas y desde un
punto
de
vista
medioambiental
evitar
la
produccin
de
residuos
innecesarios. En la medida de lo posible se aplican los criterios de las

normas ISO 14000 (28).
Para ello se extrapolan los mtodos anteriores a agua desionizada (teniendo en
cuenta que el pH de trabajo
debera oscilar entre 5,1 y 6,02) y se estudian los parmetros de validacin. En
3.3
VALIDACIN
ANALTICA:
PARMETROS
DE
caso de obtener resultados fiables, precisos y exactos, ser el mtodo escogido
VALIDACIN ANALTICA
para el anlisis rutinario del paracetamol en comprimidos.

Por validacin analtica (29-54) se entiende la obtencin de pruebas
(adecuadamente documentadas) que demuestren que un mtodo de anlisis es
lo suficientemente fiable para asegurar que el resultado obtenido
corresponde
a la realidad. Las caractersticas de fiabilidad son las que demuestran la

capacidad de un
mtodo analtico para mantener a lo largo del tiempo los
criterios fundamentales de validacin; junto a
stas cabe destacar las
caractersticas de practicabilidad o facilidad de llevar a cabo el mtodo, as

como las
pruebas de idoneidad. Segn la Conferencia Internacional de
Armonizacin ICH (36), los criterios
fundamentales de la validacin analtica
incluyen el clculo de la precisin, la exactitud, los lmites de
deteccin y
cuantificacin, la selectividad, la linealidad y el intervalo de anlisis, aunque no

necesariamente son aplicables a todos los casos de anlisis y depender de si
se analiza slo materias primas, productos
- 86 -
acabados o impurezas (ver tabla de recomendaciones de la ICH, en el apartado

3.3.6 de este mismo captulo).
Por otra parte, tambin en el laboratorio analtico, validacin, cualificacin y
calibracin son conceptos que se suelen emplear indistintamente por el
personal, sin embargo, conceptualmente son diferentes (29):
VALIDAR
comprobar y demostrar que un mtodo o proceso cumple la
verificar o dotar a un aparato de las cualidades o
CUALIFIC
funcin
prevista
caractersticas para que pueda cumplir su funcin
AR
CALIBRA
R
verificar mediante patrones la cualificacin

de un aparato.
3.3.1 PRECISIN
La precisin de un mtodo analtico es el grado de acuerdo entre los resultados
individuales de un ensayo,
cuando ste se realiza repetidamente sobre una
muestra homognea, comenzndolo desde el principio.

La precisin es una medida de grado de repetibilidad del mtodo analtico,
realizado en condiciones
normales y refleja el error aleatorio del mtodo. Se
expresa como la desviacin tpica o coeficiente de
variacin (desviacin
tpica relativa), del mtodo repetido un mnimo de 6 veces (suele considerarse

suficiente este nmero).
Los valores aceptables para la precisin dependern de la concentracin del
analito3, nmero de
repeticiones del ensayo y del propio mtodo. Para ello
existen estudios (55, 56) (la mayora de Horwitz) con recomendaciones sobre la
mxima variabilidad permisible segn dichos parmetros.
3.3.1.1REPETIBILIDAD
Precisin del mtodo bajo condiciones idnticas: mismo analista, mismo equipo,
mismos reactivos y cortos espacios de tiempo.
Se llama repetibilidad instrumental a la precisin (CV%) que dara una misma
muestra analizada repetidas y
2Intervalo
de mxima solubilidad del paracetamol.
ANALTICO
- 87
-
consecutivas veces.
Se llama repetibilidad del mtodo a la precisin (CV%) de muestras de
concentraciones diferentes, analizadas varias y consecutivamente.
2.
PRECISIN INTERMEDIA
Precisin de las variaciones dentro de un laboratorio: distintos analistas,

distintos equipos o distintos das.
3.
REPRODUCIBILIDAD
Precisin
en
condiciones
completamente
diferentes
de
analistas,
instrumentacin, reactivos, laboratorios y das de anlisis.
2.
EXACTITUD
La exactitud de un mtodo analtico es la capacidad para obtener resultados

prximos al verdadero.
La exactitud es una medida del rigor del mtodo analtico y refleja los posibles
errores sistemticos del
mtodo. Se expresa como el porcentaje de
recuperacin de una cantidad de analito aadida a la
muestra, tanto a
niveles superiores como inferiores a la concentracin que se espera en la

muestra. Para comprobar que el mtodo tiene una exactitud adecuada se aplica
la frmula, derivada de la aplicacin del anlisis estadstico paramtrico de t de
Student:
texperimetnal = (|100-R| n ) / s
De esta forma en funcin del porcentaje de recuperacin ( R), del nmero de
muestras (n) y del coeficiente
de variacin de los resultados obtenidos se
calcula el valor de t experimental. Si el valor es inferior al t tabulado para n-1

grados de libertad y 95% de confianza, se deduce que no hay diferencia
significativa entre el analito puesto y el recuperado por lo que se deduce que
el mtodo es suficientemente exacto.
Para determinar el valor verdadero se extrapola la respuesta obtenida en una
recta patrn de referencia y se compara con el terico que se haba pesado.
- 88 -
3.
SELECTIVIDAD
La selectividad es la capacidad para medir exacta y especficamente, sin

interferencias de impurezas de sntesis, productos de degradacin, sustancias
relacionadas o excipientes que puedan estar presentes en la
frmula. Los
estudios de selectividad varan segn el tipo de mtodo analtico;

mtodos de identificacin: se debe demostrar que el mtodo funciona en
presencia de otras sustancias que pueden interferir y de las de composicin
similar.
ensayos de pureza: se debe demostrar que el mtodo de evaluacin permite
una evaluacin de las impurezas a analizar.
determinacin cuantitativa de un componente: se debe asegurar que la seal
medida con el mtodo
analtico procede nicamente del analito, sin
interferencias de excipientes, productos de degradacin y/o impurezas.

La selectividad se expresa como el grado de error de los resultados obtenidos
en anlisis de muestras aadidas de impurezas, frente a muestras sin adicin.
x a x b
Para demostrar la selectividad,
se comparan
las
t exp
precisiones del anlisis de
sin
s 2 adicionar.
muestras adicionadas de impurezas sy 2 otras
Para ello:
n
n
se calcula Fexp, dividiendo la variancia de uno de los mtodos por la del otro. Si
la Fexp es inferior al Ftab para los grados de libertad establecidos (na-1 y nb -1) y
95% de probabilidad se deduce que no hay diferencias significativas entre las
precisiones de ambos mtodos. Si no existen diferencias significativas, se
calcula la texp, si la texp as calculada es inferior a la ttab para [(na-1)+(nb-1)] grados
de libertad y 95% de confianza se deduce que no hay diferencia de exactitud
entre ambos mtodos.
3.3.4 LINEALIDAD E INTERVALO DE ANLISIS

Linealidad es la capacidad de un mtodo analtico para dar resultados
directamente proporcionales a la
concentracin de analito de la muestra,
dentro de un intervalo determinado. Se expresa como la variacin alrededor

de la pendiente de la lnea de regresin lineal o coeficiente de regresin
lineal. Se calcula basndose en la relacin matemtica (clculo de regresin
lineal) obtenida en base a muestras con concentraciones variables de analito
a las cuales se les ha aplicado el ajuste matemtico de mnimos cuadrados.
ANALTICO
- 89
-
Intervalo de anlisis es el comprendido entre la concentracin ms baja y la

concentracin ms alta entre los que se demuestra que el analito puede ser
determinado con precisin, exactitud y linealidad.
Para calcular la linealidad se preparan muestras de concentraciones crecientes
del principio activo, cada una de ellas con un mnimo de dos replicados.
Las muestras se analizan restando escrupulosamente el mtodo a validar. A los
resultados (rea, lectura de
absorbancia, etc.) se les aplica el test de
homogeneidad de variancias o test de Cochran.

El Test de Cochran o de homogeneidad de las variancias intragrupo, consiste en
calcular (Gexperimental), que es
la relacin entre la variancia mxima del grupo
elevado al cuadrado respecto a la suma de todas las variancias de los datos al

cuadrado. Las variancias de los grupos de datos se obtienen aplicando a los
resultados un anlisis de la variancia (en este caso se utiliza la opcin de Excel).
La Gexperimetnal se compara con la Gtabulada, n grupos , n replicados. Si2 la Gexperimental <Gtabulada, entonces
maxima
G EXPERIME
= no influye y2 existe homogeneidad
puede considerarse
que el factor comparado
N
de variancias entre los grupos de resultados.
En caso de obtener que no hay diferencias entre las variancias de los grupos se
aplicara la regresin lineal a
los datos para ajustarlos a una recta segn el
mtodo de mnimos cuadrados. Aunque en caso de que no exista homogeneidad

de variancias se suele aplicar el llamado test del factor
de respuesta, que
debera dar
un CV menor del 5%, para considerar suficiente y aplicar el mtodo de mnimos
cuadrados para ajustar los datos a una recta de regresin.
El factor de respuesta se calcula dividiendo la respuesta del mtodo analtico
por la concentracin de la
muestra, aunque algunos autores lo calculan al
revs, lo cual no influye en el resultado ni en su anlisis
posterior. Si el
intervalo es lineal, los CV% de los factores de respuesta deben ser semejantes
entre s y cercanos al valor de la pendiente. Si el coeficiente de variacin de los
factores de respuesta es menor de un
5%, se considera que presenta una
linealidad suficiente.
Otro mtodo para demostrar la linealidad del mtodo se fundamenta en el
estudio de los lmites de
confianza de la pendiente y en el test de
proporcionalidad; el primero se halla en base a la expresin:
- 90 -
siendo t el valor de la distribucin t Student para n-2 grados de libertad y una

probabilidad del 95% y sb la
desviacin estndar de la pendiente, que se lo
proporciona el ANOVA de la regresin (mediante el
programa informtico
Excel).
Otro test estadstico se deduce de la expresin:
b
tEXPERIMENTAL
Si el valor de t experimental es mayor que

s el t de las tablas de t Student,
incluso para p=0,001, indica que la probabilidad de que la pendiente
sea distinta de cero es muy elevada. Tambin es orientativo comprobar que
el intervalo de confianza de la pendiente de la recta calculada no incluye el
valor de b=0, ya que en caso de que lo incluyera no existira recta).
Respecto al test de proporcionalidad. El valor de la ordenada en el origen ()
indica el error sistemtico del
mtodo, de manera que para considerar que existe una proporcionalidad
adecuada entre concentracin y respuesta del mtodo, el 0 debe encontrarse
dentro de los lmites de confianza. El caso ideal de
proporcionalidad se da
cuando el trmino independiente de la recta de regresin es cero. Los lmites de

confianza se calculan a partir de la expresin:
a t sa
Siendo t el valor de la distribucin de t-Student para n-2 grados de libertad con
una probabilidad del 95%,
donde sa es la desviacin estndar del trmino independiente. La significacin
estadstica de () se puede
deducir
tambin de la expresin:
t
EXPERIMENTAL
s
Si el valor de t experimental es menor
que el valor de t de las tablas tStudent, la probabilidad de que a() sea igual a 0 es muy elevada. En
este caso se comprueba que el cero s est incluido en el
intervalo de confianza del trmino independiente, ya que interesa que est lo
ms cerca posible del cero, lo cual indicara que el sesgo es mnimo.
3.3.6 LMITES DE ANLISIS

La determinacin de los lmites de deteccin (Ld) y cuantificacin (Lc) es
laboriosa, por lo que slo se
ANALTICO
- 91
-
efecta cuando el nivel inferior del intervalo del mtodo analtico se acerca a los
lmites de deteccin o cuantificacin, como ocurre en el caso de las impurezas y
productos de degradacin. Si las concentraciones a determinar son elevadas, se
puede sustituir su estudio por la determinacin de la precisin y la exactitud a
la concentracin ms baja que presenta el analito en la prctica.
El lmite de deteccin es la concentracin ms baja de analito en una
muestra que puede detectarse,
pero no necesariamente cuantificarse, en las
condiciones experimentales definidas. Se expresa como
concentracin de
analito en la muestra, en tanto por ciento o partes por milln.

El lmite de cuantificacin es la menor concentracin o cantidad de analito
de una muestra que puede
ser determinada con precisin y exactitud
aceptables bajo las condiciones experimentales establecidas. Se expresa como

la concentracin de analito (porcentaje, partes por milln, etc.) en la muestra.
Para calcular estos parmetros, se aplican diferentes mtodos y se aplican las
mismas frmulas ajustadas. Si se hacen replicados se multiplican las frmulas
generales por 1/n:
(a)determinar la relacin seal - ruido de fondo (para mtodos instrumentales)
Se prepara una muestra blanco o placebo (con todos los excipientes y sin
principio activo) y se compara su
respuesta frente a la respuesta de varias
muestras de principio activo de concentraciones conocidas prximas a cero.

se determina el nivel de ruido o respuesta del blanco o placebo (B),
se analizan las muestras con el blanco adicionado de pequeas
10B
3B
cantidades deLprincipio
activo,
Lc
D
b
b
Otro
mtodo similar yse muy
(52)
por su practicidad
similar
al
comparativamente,
halla utilizado
la cantidad
de analito
que coincideescon
la seal
anterior,
pero en 1
este
se basapor
en2realizar
una recta
delmite
calibracin
con al
de la muestra
y secaso
multiplica
o 3 (aceptado
como
de
menos
tres puntos
concentracin
baja
repetidos varias veces (entre 3 y 6
deteccin)
y por de
10 (para
el lmite de
cuantificacin).
veces). Se llevan a cabo todas las analticas y se determinan las desviaciones
estndares para
cada proporcin ensayada. Con las desviaciones estndares
obtenidas para cada proporcin se calcula la
desviacin estndar media. El
nivel o seal de ruido se estima por la relacin DSMEDIA/ b, siendo b la pendiente

Se
considera
de la
recta. el lmite de deteccin la seal de ruido multiplicada por tres y el
lmite de cuantificacin la
- 92 -
seal de ruido
multiplicada por 10. (b)
menor cantidad
detectable
Se preparan soluciones conteniendo unas cantidades decrecientes de analito
desde el mximo. El lmite de deteccin de calcula a partir de la dilucin en que
no se puede distinguir la respuesta del analito de la del blanco.
( c) anlisis repetido del blanco
Se repite el anlisis del blanco (placebo) n 10 veces y se calcula su media ( Yb )
y la desviacin estndar de
la respuesta de los n blancos (sb), el valor b
corresponde a la pendiente de la recta de calibrado del analsita que se calcul

para la linealidad. Para los mtodos espectrofotomtricos donde se utiliza un
Yb 10s b
Y 3sb
Lc utilizar
blanco como correccin de
se recomienda
ste mtodo. Las
LD lab medida
b
b
o
de mtodos
frmulas
para su clculo varan si se trata de mtodos cromatogrficos:
espectrofotomtricos:
10s
LC b
b
LD3sbb
(d) estimacin del lmite de deteccin mediante el valor de la ordenada en el

origen expresado en unidades de concentracin
Se confecciona una recta de calibrado para un intervalo concentraciones bajas

(requiere que la recta sea lineal en este intervalo); se admite tomar a, como una
estimacin del lmite de deteccin. El lmite inferior de la respuesta se toma
como 3 // y el lmite de deteccin expresado en las mismas unidades que las
abscisas en la recta de calibracin es:
3a
b
ANALTICO
- 93
-
e) extrapolacin a concentracin
concentraciones de analito
cero
de
muestras
conteniendo
bajas
A partir de muestras con baja concentracin de analito se extrapola grfica o

matemticamente la respuesta para concentracin cero, la cual se tomar como
estimacin de la respuesta de un hipottico blanco. A continuacin se calcula la
desviacin estndar de la respuesta a concentracin cero por
extrapolacin
grfica o bien por clculo matemtico, la cual se tomar como estimacin de la

desviacin estndar de la respuesta de un hipottico blanco. Este mtodo se
aplica cuando no se hace blanco de la muestra.
LD
Y 3sb
LC
Y 10sb
b
b
3.3.6 PARMETROS DE VALIDACIN: REQUERIMIENTOS

Segn la finalidad de los anlisis, hay que considerar unos parmetros de
validacin u otros. Segn la Comisin Internacional de Armonizacin, estos son
TIPO DE ANLISIS
IDENTIFICACIN
EXACTITUD
REPRODUCIBILIDAD
REPETIBILIDAD
PRECISIN
INTERMEDIA
ESPECIFICIDAD
LMITE DETECCIN
los que se muestran en el cuadro 3:
IMPUREZAS
CUANTIF IDENTIF
SI
-
SI
-
CUANTIFICACI
N
SI
SI
SI (1)
SI
SI (1)
SI
SI
SI
SI
SI
-
LMITE
CUANTIFICACIN
(1) Si se comprueba la reproducibilidad, la precisin intermedia no es necesaria.
LINEALIDAD
SI
SI
INTERVALO
SI
SI
En el caso del desarrollo experimental de la tesis doctoral, se est ante una

valoracin
analtica
de
cuantificacin
de
paracetamol
en
farmacutica, por lo que los parmetros de validacin mnimos
una
forma
a tener en
cuenta sern: exactitud, repetibilidad, reproducibilidad, especificidad, linealidad

e intervalo de anlisis.
- 94
-
3.4
CUANTITATIV
O
ANLISIS
DE
COMPRIMIDOS
DE
PARACETAM
Para la validacin del mtodo se han efectuado los ensayos siguientes:
OL
Controles generales: equipo de anlisis, patrones, reactivos y material

utilizados. Control de cubeta, control de medio disolucin, segn la RFE
(57).
Redaccin de los PNTs de anlisis.
Linealidad con soluciones patrn de paracetamol (patrn secundario de
materia prima).
Se pesan individualmente y con exactitud cantidades crecientes de paracetamol
patrn secundario para
preparar soluciones con concentraciones entre 70-
130%, preparando dos soluciones para cada porcentaje
(mtodo de doble
pesada). Se preparan 5 puntos para el intervalo (70-85-100-115-130%).

Los x mg pesados con exactitud son llevados a 250 ml en matraz aforado con el
medio de disolucin que aplique4 y de sta se toman 5 ml que son llevados con
exactitud a 100 ml con el medio de disolucin de que se trate.
Se leen las absorbancias de las muestras finales frente a blanco de medio de
disolucin
los
datos
(concentracin
absorbancia)
se
relacionan
estadsticamente en una hoja de clculo de Microsoft Excel 97 y se le aplica el

test de regresin lineal por el mtodo de mnimos cuadrados. Se considera que
el mtodo es lineal si el coeficiente de regresin entre las dos variables es
0,99 y tras aplicar el ANOVA a la regresin, se comprueba que la pendiente y
sus lmites de confianza no incluyen el cero (test de sensibilidad) ya que en caso
de incluir el cero quiere decir que no habra recta. Para comprobarlo se aplica la
frmula t
= |b|/sb
exp
siendo |b| el valor de la pendiente y sb la variabilidad del coeficiente de la

pendiente que nos lo
proporciona Excel con el ANOVA de la regresin. El
mismo resumen nos proporciona la tterica o ttabulada con lo cual se comparan ambas,
4
si
texperimetnal
< ttablas
lametanol
probabilidad
que
de
Para
el mtodo
Agua-metanol
sera: 5que
ml de
y completade
con
aguab asea
250 diferente
ml. Para solucin
95% significar
reguladora, sera diluir a 250 ml con solucin
reguladora. Para el mtodo Agua ser diluir con agua
cero
es superior
al 95-99%
deldurante
nivel de
probabilidad
con el yque
se
desionizada
sin completar
el enrase, (dependiendo
poner en ultrasonidos
10 minutos,
dejar atemperar
enrasar
hasta 250 ml.
compare).
De la misma manera se calcula el test de proporcionalidad, para el cual se toma
ANALTICO
- 95
-
partir del ANOVA de la regresin. Si texp< ttab significar que es probable que a=0
(nivel 95% de confianza).
Otro test estadstico utilizado para demostrar la linealidad de los resultados es
a partir del ANOVA de la regresin completo, calcular la Fexperimental para el
error SSreg y comparada con la Ftabulada, si Fexperimental
>Ftabulada significa que existe una pendiente diferente de cero y por lo tanto una
recta de ajuste. A continuacin se calcula la Fexperimetnal para la flata de ajuste Sslof
y se compara con la Ftabulada.. Si la Fexperimetnal es menor que la Ftabulada significar que
existe linealidad entre los datos.
Selectividad.
Este ensayo servir para determinar si los excipientes interfieren en el intervalo
de anlisis de manera
importante, para ello se prepara suficiente placebo con
la proporcin que llevarn en el principio activo:

Avicel
pH
101
mg/comprimido
Almidn maz
90
/comprimido
00000
mg
Estearato
100
Talco
/
mg
Venecia
comprimido
Mg
mg/comprimido
Todos los componentes se mezclan por volteo en un recipiente de plstico
adecuado durante 10 minutos.
De la mezcla se tomarn las muestras de
aproximadamente 200 mg que es la cantidad de excipiente que
llevan los
comprimidos.
Linealidad, precisin (repetibilidad y reproducibilidad) y exactitud para
placebo cargado de patrn paracetamol.
En este caso se prepara el placebo cargado de la siguiente manera, se preparan
los excipientes necesarios para por ejemplo 30 comprimidos y a continuacin se
pesa el 70% del paracetamol que les correspondera (entonces se pesara 1050
- 96 -
Los analistas realizan las determinaciones por duplicado (doble pesada) de

estos resultados se calcula la media, la desviacin estndar y el coeficiente de
variacin para cada para de anlisis, es decir se dispone de una medida de
repetibilidad dentro de las condiciones previstas. Se considerar repetibilidad
del mtodo el intervalo mximo de variabilidad encontrado (debera estar por
debajo del 2% de CV).
Para cada porcentaje (incluyendo datos de los dos analistas y los dos das, ocho
datos) se calcula la media y
la desviacin estndar y los coeficientes de
variacin, con lo cual se obtiene una valoracin de la exactitud o recuperacin

del mtodo analtico para cada nivel estudiado (dada por la media) y una
valoracin de la reproducibilidad del mtodo analtico para cada nivel estudiado
(proporcionada por los coeficientes de variacin de los grupos).
Como parmetro de exactitud global se considerar la media de las exactitudes
parciales.
El procedimiento se repite para cada una de las metdicas propuestas: agua
desionizada adicionada de
metanol, solucin reguladora de fosfatos y agua
desionizada. Al final para el mtodo escogido se calcularn
1. ANLISIS EN AGUA/METANOL:
anlisis
y la especificidad.
RESULTADOS
1.
los lmites de
GENERALIDADES
Instrumentacin analtica
Espectrofotmetro
HELWLETT
VECTRA
(8452 SOTWARE: UV-VIS HP
286/12
89532A UV-VIS Software Rev 1.00.00

Patrones de referencia
patrones primarios:
nombre: Paracetamol patrn.
Riqueza: 99,84% proveedor: SDM
n lote: SDM/ PAR/ PAJ/ 95
(31/03/95)
nombre: 4-cloroacetanilida patrn.
Riqueza: 97% proveedor: SDM
PACKARD
A DIODE
ARRAY).
ANALTICO
- 97
-
n lote: SDM/ 23121 (03/04/95)

nombre: p-aminofenol patrn.
n lote: 98473 (03/04/95)
patrones secundarios:
nombre: Paracetamol materia prima.
Riqueza: 99,2% proveedor:
Mallinckrodt Chemical Inc.
n lote: 6375994M349 (caducidad:
10/2000)
Reactivos:
Agua desionizada (SDM, conductividad <0,2 S)
Metanol HPLC JT Baker (fabricante) Lote: 9902640006
Caducidad: 02/2001
Control de la cubeta
Se determina la absorbancia de la
cubeta a 240 nm.
1 -4,4 10-4
2 +2,3 10-4
3 -2,9 10-4
La absorbancia que aparece es mnima y en principio no afectar a las lecturas

de muestras. En caso de salir
absorbancia, se limpia la cubeta llevndola a
ebullicin con HNO3 reactivo, se saca del bao y se deja en
agua desionizada
durante 48 horas. Se adjunta la grfica de absorbancia obtenida (figura 1):
- 98
-
Figura 1: Absorbancia de la cubeta vaca.
Control de los disolventes

Se determina la absorbancia del disolvente (agua - metanol) frente al aire a 240
nm. En esta longitud de onda, la absorbancia ser inferior a 0,40 y
preferiblemente <0,20.
1 0.04849
2 0.04463
3 0.04562
Figura 2: Absorbancia del disolvente (agua - metanol) frente al aire.
Se adjunta el grfico de absorbancia obtenida (figura 2), donde puede

comprobarse que es menor que 0,20 en todo el espectro.
ANALTICO
- 99
-
Comprobacin de los mximos de absorbancia para el patrn secundario

paracetamol
Se adjunta el grfico de absorbancia obtenida (figura 3), observndose un
mximo de absorbancia hacia 244 nm, atribuible al paracetamol.
Figura 3: Mximos de absorbancia en agua - metanol

del patrn MP Paracetamol.
3.4.1.2 LINEALIDAD CON PATRN DE MATERIA PRIMA

La linealidad del mtodo se ha comprobado con 6 soluciones de paracetamol
patrn (doble pesada) de
distinta concentracin, abarcando un intervalo que
incluye la concentracin terica de la muestra problema (50-150%).

Los resultados obtenidos son los siguientes (tabla 1):
CONCENTRACIN Absorbanci
(g/ml)
a
5,642
0,39945
5,984
0,38630
10,100
0,67101
10,001
0,64322
12,102
0,80508
12,325
0,80857
14,900
0,96424
14,871
0,96024
17,523
1,11539
17,475
1,11510
20,100
1,27507
20,125
1,28000
Factor de
respuesta
0,070799362
0,064555481
0,066436634
0,064315235
0,066524541
0,065604057
0,064714094
0,064571313
0,063652913
0,063811159
0,063436318
0,063602484
Tabla 1: Resultados Agua-Metanol

para MP paracetamol.
- 100 -
A estos datos (concentraciones y absorbancias) se ha aplicado el test estadstico

de homogeneidad de variancias de Cochran (tabla 3), obtenindose una Gexperimental
de 0,77404, que se compara con la Gtablas= 0,7808 para p=0,05 de probabilidad,
para 6 concentraciones estudiadas y 2 replicados de cada concentracin (tabla
2). Dado que el valor experimental de G es inferior al tabulado (tabla 4), puede
afirmarse que no existen diferencias estadsticamente significativas entre las
variancias de los diferentes
niveles de concentracin y puede aplicarse la
hiptesis de un modelo lineal, estimado por el mtodo de mnimos cuadrados.

A1
A2
A3
A4
A5
A6
0,3994 0,6710 0,8050 0,9642 1,1153 1,2750
5
1
8
4
9
7
0,3863
0,6432
0,8085
0,9602
1,2800
Tabla
2: Datos
tabulados
para1,1151
el
0 clculo2 del Test7de Cochran
4
0
0
Anlisis de variancia de un factor

RESUMEN
Grupos
Columna 1
Columna 2
Columna
Columna
Columna
Columna
3
4
5
6
Cuenta
2
2
Suma
0,78575
1,31422
Promedio
0,392875
0,65711333
3
2
1,61365
0,806825
2
1,92448
0,96224
2
2,23049
1,115245
Tabla 3: Resultados del ANOVA de los
2 de la tabla 2,55507
1,277535
datos
1.
G experimental
G tabulada (95%, 6 concentraciones y
2 replicados)
Tabla
4: Resultados de G de Cochran.
Variancia
8,6461 E-05
0,00038623
6,0901 E-06
8 E-06
4,205 E-08
1,2152 E-05
0,774
04
0,78
08
El factor de respuesta se calcula dividiendo la concentracin (en g/ml) por la

absorbancia (tabla 1). Se determina el valor medio, la desviacin estndar y el
coeficiente de variacin de los factores de respuesta calculados.
Estadstica factores respuesta
0,065168
Media
633
Desviacin
CV%
3,158419458
0,002058
estndar
299paracetamol Agua-Metanol.
Tabla 5: Estadstica de los factores de respuesta para MP
El coeficiente de variacin presenta un valor menor al establecido como

indicador de linealidad (<5%), con lo cual puede afirmarse que existe una
relacin de linealidad entre ambas variables.
ANALTICO
- 101
-
Se determina la ecuacin de la recta de calibrado y = bx + a, tomando en

abscisas las concentraciones (en
g/ml) y en ordenadas las correspondientes absorbancias:
Absorbancia
= pendiente * concentracin
+ ordenada origen y
= 0,061698832 x
+ 0,040085278
Curva de regresin ajustada: patrn (agua
metanol)
1,40000
Absorbancia
1,20000
1,00000
0,80000
0,60000
Pronstico para Y
0,40000
Lineal (Pronstico para Y)
0,20000
0,00000
0
10
20
25
15
concentracin
(g/ml)
Figura 4: Recta de calibracin de MP

paracetamol en agua.
Estadsticas de la
Coeficiente de regresin
correlacin mltiple 0,999309244
r
Coeficiente de determinacin r2 0,998618965
r2 ajustado
0,998480861
Observaciones
12
Error
tpico
0,011891193
Tabla 6: Estadstica de la regresin MP Agua-Metanol.
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r=0,99930) como el

de determinacin r2, indican una buena linealidad (tabla 6). El coeficiente de
determinacin da una indicacin del grado de aproximacin de los puntos a la
relacin lineal. Por lo tanto, puede afirmarse que esta relacin lineal explica en
un 99,86% la variancia de la absorbancia.
Para acabar de comprobar la linealidad y estudiar la proporcionalidad, se
calculan los lmites de confianza de la pendiente (b); b sb t, y de la ordenada
en el origen (a); a sa t (tabla 7).
- 102 -
TEST DE PROPORCIONALIDAD
Mxi
Mni
Observacio
Test
0,063315
mo
0,06008
mo
nes
85,0349
de t
Lmite
no
incluye el
402
226
665
cero
sb
0,063102
0,01706
3,88022
presenta
Lmite t (GL (n-2)=10,
p=0.05%)
Coeficien
Error
Estadsti
Probabili
005
855
13
sa
sesgo 2,228
0,040085
tes
0,010330
tpico
co
3,88022
t
dad
0,00305
Ordenada
278
668
132
783
origen (a)
0,061698
0,00072
85,0349
1,237
EPendiente
Tabla 7: Test de proporcionalidad MP Agua-Metanol.
832
557
665
15
(b)
Test de sensibilidad:
Tomando los lmites de confianza de la pendiente se comprueba que no incluye
el cero, es decir que existe una pendiente y por lo tanto una recta. El test de t:
texp = |b| / sb = 85,0349665
texp > ttablas incluso para p= 0,001, lo que indica que la probabilidad de que b
# 0 es superior al 99,9%. Test de proporcionalidad:
Tomando los lmites de confianza para la ordenada en el origen y calculando, se
observa que estos lmites no incluyen el cero por lo que el mtodo presenta un
ligero sesgo. El test de t:
texp = |a| / sa = 3,88022132
Este valor de t es mayor al ttablas = 2,228 (para p= 0,05 y GL= 10), por lo que la
probabilidad de que a # 0 es muy elevada.
Otro test estadstico de alta significacin es aplicar un anlisis de la variancia
(ANOVA) completo a la recta de regresin:
Grados
libertad
ANLISIS DE VARIANCIA
Regresin (SSreg)
Falta de ajuste (Sslof)

Error puro (SSpe)
4
6
Residual (SSr)
Total
Suma de Promedio de los

F
F
cuadrados
cuadrados
experimen tablas
tal
1,02245911 1,02245911
7230,9455 4,96
27
0,00091502 0,00022875
2,750681 4,53
0,00049898 0,00008316
Tabla 8: ANOVA MP Agua-
10 Metanol.
0,00141400
11
1,02387311
0,00014140
ANALTICO
- 103
-
Del cual puede concluirse, que dado que Fexp>Ftablas (p=0,05; 1; 10)= 4,96 queda
demostrada la existencia de una pendiente # 0.
Por otra parte, dado que Fexp<Ftablas (p=0,05; 4; 6)= 4,53 queda demostrada
la linealidad entre los resultados obtenidos.
3.4.1.3 SELECTIVIDAD
Se ha preparado una muestra problema de placebo en las mismas condiciones
en que se trataran los comprimidos y se ha efectuado un espectro UV completo
(figura 5). Se observa que sobre la longitud de
onda de absorcin del
paracetamol, existe una seal de ruido debida a alguno de los excipientes. Se

analiza la absorbancia a = 244 nm, para evaluar su interferencia en el anlisis
del paracetamol.
Figura 5: Absorbancia del

placebo en agua metanol.
205,0 mg
placebo
199,3 mg
placebo
0,008
40
0,00790
0,007
0,005
57
62
0,004
52
0,00471
Teniendo en cuenta estas lecturas de absorbancia, pueden considerarse

despreciables cuando se valoran los comprimidos, ya que la absorbancia sera
>0,9, lo cual supondra un error de lectura espectrofotomtrica de alrededor
del 0,55% por exceso. Sin embargo, cuando se trabaje a bajas absorbancias, el
error pasara a
ser
- 104 -
ms importante con lo que debera corregirse este exceso por un mtodo

adecuado, lectura previa de absorbancia del placebo, o aadir placebo al patrn
de paracetamol que se prepara para cada ensayo.
Figura 6: Espectro de absorbancia de placebo cargado con MP patrn de paracetamol.
Se comprueba que el pico correspondiente al principio activo es puro

dado que los espectros UV
ANALTICO
- 105
-
completos [para muestra placebo (figura 5), patrn paracetamol (figura 3) y

placebo cargado de patrn paracetamol (figura 6)] son idnticos y muestran los
mximos caractersticos del paracetamol de referencia.
3.4.1.4 PRECISIN (REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD)

Y EXACTITUD CON PLACEBO CARGADO.
Para realizar este ensayo se ha preparado un placebo con la proporcin de
excipientes del comprimido y a diferentes alcuotas del mismo se han aadido
cantidades
conocidas
de
paracetamol
patrn,
de
manera
que
las
concentraciones de dicho producto expresadas como g/ml, quedan entre 70 y

130% del contenido
terico. Se han efectuado 8 valoraciones de cada una de
las concentraciones, en 2 das diferentes y por 2 analistas.

Durante el primer da, tanto el analista A como el analista B han efectuado 2
determinaciones de cada nivel de concentracin (tablas 9-12):
%
70
85
100
115
130
% Concentracin real ABSORBANCIA

ANALISTA 1concentracin extrapolada
%
REAL
(g/ml)
(g/ml)
RECUPERACIN
71,2
8,54
0,5668
8,51
99,6
71,3
8,56
0,5726
8,59
100,4
81,9
9,82
0,6610
9,92
101,0
82,0
9,84
0,6671
10,01
101,7
103,
12,40
0,8247
12,38
99,8
3
12,43
0,8320
12,49
100,4
103,
6
116,
14,01
0,9568
102,5
Tabla 9: Resultados14,36
7
13,98
0,9498
101,9
analista 1, da 1. 14,26
116,
5
129,
15,59
1,0452
15,75
101,0
9
15,06
1,0251
15,39
102,2
130,
2
- 106
-
ANALIST
A2
%
% Concentraci ABSORBANCI Concentracin extrapolada

%
REAL
n
A
(g/ml)
RECUPERACIN
real
(g/m
l)
70 68,2
8,18
0,5420
8,14
99,4
67,5
8,10
0,5213
7,82
96,5
85 83,5
10,02
0,6758
10,14
101,2
84,3
10,12
0,6781
10,18
100,6
100 100,
12,02
0,8124
12,19
101,5
1
12,50
0,8457
12,69
101,6
104,
1
115 116,
13,98
0,9400
14,112, da 1.
100,9
Tabla
10: Resultados analista
5
14,02
0,9325
14,00
99,9
116,
En el8segundo da, tanto el analista A como el B efectuaron 2 determinaciones
130
132,nivel 15,88
1,0587
15,99
100,7
de cada
de concentracin:
3
15,79
1,0555
15,84
100,3
131,
6
ANALISTA 1
%
70
85
% Concentraci ABSORBANCI Concentracin extrapolada %

REAL
n
A
(g/ml)
RECUPERACIN
real
(g/m
l)
69,3
8,32
0,5432
8,15
98,0
70,0
8,40
0,5589
8,39
99,9
83,3
86,7
10,00
10,40
0,6785
0,6958
10,18
10,44
101,8
100,4
100 102,
0
101,
5
115 116,
5
116,
2
130 130,
1
130,
7
12,24
0,8305
12,46
101,8
12,18
Tabla 11: Resultados

0,8320
12,49
102,6
13,98
0,9456
14,19
101,5
13,94
0,9498
14,26
102,2
15,62
1,0147
15,54
99,5
15,68
1,0626
15,95
101,7
analista 1, da 2.
ANALTICO
- 107
-
ANALIST
A2
%
% Concentraci ABSORBANC Concentracin extrapolada %

REAL
n
IA
(g/ml)
RECUPERACIN
real
(g/m
l)
70 70,0
8,40
0,5568
8,36
99,5
70,5
8,46
0,5600
8,41
99,4
85 84,9
10,18
0,6748
10,13
99,5
85,3
10,24
0,6758
10,14
99,1
100 101,
12,14
0,8025
12,04
99,2
1
12,17
0,8204
12,31
101,2
101,
4
115 116,
14,01
0,9422
14,14
101,0
Tabla
12: Resultados 14,25
analista 2, da 2.
7
14,24
0,9495
100,1
118,
En el 7cuadro resumen de la validacin (tabla 13) se adjuntan todos los clculos
130 133,
16,00
1,0599
15,99
99,9
efectuados:
3
16,09
1,0690
16,04
99,7
134,
la 1media de los dos resultados y su coeficiente de variacin (repetibilidad
del mtodo), para cada analista, nivel de concentracin y da.

la media (exactitud o recuperacin), desviacin estndar y coeficiente de
variacin global (reproducibilidad) para cada una de las cinco
concentraciones.
En la tabla 14, aparece el resumen de los parmetros estudiados.
- 108
-
70%
VALIDACIN PARACETAMOL (AGUA

METANOL)
ANALISTA
1 M
CV %
m
SD
CV
%
99,49
96,55
97,97
2,06
99,40
99,44
0,06
101,03
101,84
ANALISTA 1
100,50
100,42
100,77
101,13
CV %
0,37
101,19
1,00
99,45
ANALISTA 2
100,57
99,05
100,88
99,25
0,31
0,20
99,82
101,83
ANALISTA 1
100,44
100,40
100,13
101,12
0,44
1,00
101,48
99,25
SD
ANALISTA 2
101,58
101,19
101,53
100,22
CV %
100
%
97,99
99,86
98,93
1,34
99,40
ANALISTA 2
M
CV %
85%
99,62
DA
1
100,40
100,01
DA 2
0,55
Tabla 13: Resultados totales para

Placebo Agua-Metanol.
CV %
99,1
1,231765
13
1,243087
71
m
SD
100,5
0,906659
42
CV % 0,902090
28
100,7
0,919756
74
CV % 0,91292
25
ANALTICO
- 109
-
REPETIBILIDAD
CV% entre
2,06
REPRODUCIBILIDA
D
CV %
(n=8)
70%
0,06
1,24
85%
100%
115%
0,90
0,91
0,96
130%
0,94
70%
85%
99,09
100,51
100%
115%
100,75
101,24
EXACTITUD
RECUPERACIN
(%)
(n=8)
Tabla 14: Resumen de las estadsticas de validacin.
130%
100,63
CONCLUSIONES EXACTITUD
SOBRE LA REPETIBILIDAD
M
100,44
GLOBAL
(n=5)
SD
0,8073
Los coeficientes de variacin
estn comprendidos
entre 0,06 % y 2,06%, por lo
CV %
0,8037
tanto puede concluirse que el mtodo analtico es repetitivo dado que, en todos
los casos, excepto para el analista 2t el da 1,22899265
1 al 70% que
obtuvo un alto
experimental
coeficiente de variacin fuera de lmites (lmite mximo especificado por las
t tablas
2,776
normas ICH (2%)). La investigacin de los datos primarios no dio indicios de

error, con lo cual en caso de ser ste el
P= 0.05
GL= 4 verificar este
mtodo
se debera
resultado o reducir el intervalo de validacin.

CONCLUSIONES SOBRE REPRODUCIBILIDAD
Viene dada por el coeficiente global para cada concentracin ensayada los CV%
son similares para todos
los niveles de concentracin ensayados. Puede
afirmarse que el mtodo es reproducible (tabla 14).

CONCLUSIONES SOBRE LA EXACTITUD
De los resultados anteriores (tabla 14) se desprende que el intervalo de
concentraciones en estudio se encuentra comprendido entre el 99 y 101,24%,
por lo que la tcnica cumple con el requisito de exactitud,
siendo la
recuperacin media para todo el intervalo en estudio de 100,44 %, la cual es

satisfactoria.
- 110 -
texp= |100 - R| * n / SD =
1,228 ttab (p=0.05 y GL=
4) = 2,776
texp < ttab, lo que significa que ambos valores no son estadsticamente diferentes,
es decir no existen diferencias significativas entre la exactitud a nivel bajo (70,
85% 100%
115% 130
85%), medio (100%) o alto 70%
(115, 130%)
de concentracin
del analito.
%
99,6 101, 99,8 102,5 101,
0
0
100,4 100, 100,4 101,9 102,
5
2
98,0 101, 101,8 101,5 99,5
8
99,9 100, 100,4 102,2 101,
Tabla 15: 4
Datos tabulados para7el clculo del ANOVA.
99,4 101, 101,5 100,9 100,
2
7
Si se aplica un ANOVA de96,5
una 100,
direccin
15) sobre los resultados de
101,6 (cuadro
99,9 100,
6
recuperacin individuales obtenidos
para cada 3
nivel, se obtiene una Fexperimental
99,5 99,5 99,2 101,0 99,9
=5,1855, frente a la Ftablas(p=0,05;
4; 35)
de 100,1
2,641, 99,7
lo que indica que el factor de
99,4 99,1
101,2
concentracin afecta a la recuperacin, lo cual es a priori una dificultad del

mtodo, ya que a bajas concentraciones las recuperaciones son menores que a
altas concentraciones. Si interesase
definitivamente este mtodo sobre los
otros dos, debera reducirse el intervalo de validacin para
comprobar que
todos los parmetros de las validacin demuestran la validez del mtodo

propuesto. Sin embargo, la exactitud del mtodo se considera adecuada ya
que todas las recuperaciones estn comprendidas en un margen estrecho entre
Origen de las
Suma de
Grados de
Probabilidad Valor crtico
para F
99-101,2%, en todo
el grupo
de concentraciones estudiado.
Promedio
de variaciones
Entre
grupos 20,854494
5,21362363
5,18552 0,002181
cuadrados
libertad4
los
5
2 0
cuadrados
ANLISIS
VARIANCIA35 1,00541951
Dentro
de losDE35,189683
grupos
0
6
Total
56,044177
39anlisis de la variancia del mtodo
Tabla 16:
6
de anlisis agua-metanol.
2,64146393
6
3.4.1.5 LINEALIDAD PRINCIPIO ACTIVO Y PLACEBO

La linealidad del mtodo para las muestras placebo adicionadas de patrn ha
sido comprobada con las 5 concentraciones de paracetamol patrn (doble
pesada) adicionadas de placebo, abarcando un intervalo que
ANALTICO
- 111
-
incluye la concentracin terica de la muestra problema (70-130%) efectuando 8

replicados de cada concentracin.
Los resultados obtenidos son los siguientes:
CONCENTRACI
ABSORBANCI
FACTOR DE
N
A
RESPUESTA
8,54
0,5668
0,06637
8,56
0,5726
0,06689
8,32
0,5432
0,06529
8,40
0,5589
0,06654
8,18
0,5420
0,06623
8,10
0,5213
0,06433
8,40
0,5568
0,06629
8,46
0,5600
0,06623
9,82
0,6610
0,06731
9,84
0,6589
0,06696
10,00
0,6785
0,06785
10,40
0,6958
0,06690
10,02
0,6758
0,06742
10,12
0,6781
0,06701
10,18
0,6748
0,06626
10,24
0,6758
0,06600
12,40
0,8247
0,06650
12,43
0,8320
0,06692
12,24
0,8305
0,06785
12,18
0,8145
0,06689
12,02
0,8124
0,06761
12,50
0,8457
0,06768
12,14
0,8025
0,06613
12,17
0,8204
0,06742
14,01
0,9568
0,06830
13,98
0,9498
0,06792
13,98
0,9456
0,06762
13,94
0,9498
0,06811
13,98
0,9400
0,06722
14,02
0,9325
0,06653
14,01
0,9422
0,06726
14,24
0,9495
0,06668
15,59
1,0452
0,06703
15,06
1,0251
0,06807
15,62
1,0147
0,06498
15,68
1,0626
0,06777
15,88
1,0587
0,06667
15,79
1,0555
0,06684
16,00
1,0599
0,06624
16,09
1,0690
0,06645
Tabla 17: Resultados Placebo en Agua-Metanol.
A estos datos (concentraciones y absorbancias, tabla 18) se ha aplicado el test

estadstico de comparacin
- 112 -
de variancias de Cochran, obtenindose una Gexperimental de 0,36855, que

comparado con la Gtablas para p=0,05, 5 concentraciones y 8 replicados que es
0,4564, el valor experimental es inferior al tabulado, con lo
cual no existen
diferencias significativas entre las variancias de los diferentes niveles de

concentracin y puede aplicarse la hiptesis de un modelo lineal, estimado por
70
85
el mtodo de mnimos
cuadrados.
0,5668
0,6610
0,5726
0,5432
0,5589
0,5420
0,5213
0,5568
0,5600
0,6589
0,6785
0,6958
0,6758
0,6781
0,6748
0,6758
100
0,8247
0,8320
0,8305
0,8145
0,8124
0,8457
0,8025
0,8204
115
0,9568
0,9498
0,9456
0,9498
0,9400
0,9325
0,9422
0,9495
130
1,0452
1,0251
1,0147
1,0626
1,0587
1,0555
1,0599
1,0690
Tabla 18: Absorbancias obtenidas tabuladas para el

clculo del Test de Cochran

RESUMEN
Grupos
Cuenta
Suma
Promedi Variancia
o
70 %
8
4,42166 0,55270 0,00027
75
075
85 %
8
5,39874 0,67484 0,00013
313
008
Tabla 19: ANOVA de los datos obtenidos
100Placebo
%
8
6,58257 0,82282 0,00018
Agua-Metanol.
156
073
0,368
115 % G experimental
8
7,56609 0,94576
5,5699EG tabulada (95%, 5 concentraciones y 125 55
05
replicados)
0,45
130 %Tabla8 20:
8 de8,39062
1,04882
0,00037
Resultados
G de Cochran.
64 194
75

absorbancia. Se determina el valor medio, la desviacin estndar y el
Media
0,06686
Desviacin estndar
0,000853
CV%
1,27654
Tabla 21: Estadstica de los factores de respuesta.
El coeficiente de variacin presenta un valor menor que el establecido como

relacin de linealidad entre ambas variables (tabla 21).
ANALTICO
- 113
-
g/ml) y en las ordenadas las correspondientes

absorbancias (figura 9):
Absorban
cia
= pendiente * concentracin +
ordenada origen
y = 0,06777 x 0,010237
Curva de regresin ajustada (agua metanol): placebo +

patrn
ABSORBANCIA
1,2000
1,0000
0,8000
0,6000
0,4000
Pronstico para Y
0,2000
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
CONCENTRACIN (mcg/ml)
Figura 7: Recta de
calibracin Placebo +
Paracetamol patrn en agua metanol.
Coeficiente de correlacin mltiple

r
Estadsticas
la
Coeficiente
de de
determinacin
r2
regresin
r2 ajustado
Observaciones
Error
tpico
0,99849
0,99699
0,99691
40
0,01009
Tabla 22: Estadsticas de la regresin Placebo Metanol-Agua.
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r=0,99849, tabla 22)

como el de determinacin r2 indican una buena linealidad. El coeficiente de
en el origen (a); a sa t (tabla 23).
- 114 -
Mximo
Mnimo
Observaciones
LMITES DE b
0,0665481 No incluye el
0,068993057
cero
LIMITES DE a
-0,025365 Incluye el cero
0,004889072 Tabla 23: Anlisis de los parmetros de la regresin.
Test de sensibilidad:t (GL(n-2)=38,
P=0.05%)
Coeficientes
Test de t
112,26054
54
1,3705103
22
2,025
Error
Estadstico t
Probabilida
Tomando los lmites de confianza de la pendiente

se comprueba que no incluye
tpico
d
Ordenada en el origen (a) -0,010237783
0,0074701 -1,370510322
0,1785697
el
cero, es decir que existe una pendiente
y por lo tanto una recta. El
test de t:
Pendiente (b)
0,067770585
0,0006037
texp = |b| / sb = 112,26
112,2605454
57
1,55677E49
observa que estos lmites incluyen el cero por lo que el mtodo no presenta
sesgo. El test de t:
texp = |a| / sa = -1,37
Este valor de t es menor que el de ttablas = 2,228 (para p= 0,05 y GL= 10), por lo
que la probabilidad de que a = 0 es muy elevada.
Grados de
ANOVA DE LA REGRESIN
libertad
Suma de Promedio de Fexperimen F tablas

cuadrado
los
tal
s
cuadrados
Regresin (SSreg)
1
1,28395942 1,283959426 12602,430 4,098168
6
06
915
Falta de ajuste (SSlof)
3
-0,0102602 -0,003420066
2,874187
8,4704758
999
9
Tabla 24: Anlisis completo de la Regresin
Error puro (SSpe) Placebo
35Agua-Metanol.
0,01413170 0,000403763
9
Residuos (SSr)
38
0,00387151 0,000101882
2
Total
39
1,28783093
8
ANALTICO
- 115
-
Por otra parte, dado que Fexp<Ftablas (p=0,05; 3; 35)= 2,874 queda
demostrada la linealidad entre los resultados obtenidos.
3.4.1.6 CONCLUSIN SOBRE EL MTODO AGUA-METANOL

La mayora de los parmetros de validacin cumplen las especificaciones para
considerar como validado el
mtodo, aunque se han encontrado ciertas
dificultades que deberan ser resueltas si ste es el mtodo
escogido como
mtodo de anlisis final. Las dificultades son las siguientes:

la
absorbancia
del
placebo
es
importante
aproximadamente un 1% por exceso en
(provoca
un
error
de
las lecturas), lo cual exigir
preparar patrn cargado como patrn cuando se analicen comprimidos por

este mtodo.
la recuperacin resulta algo afectada (probabilidad del 2,2%) por el
porcentaje de principio activo
presente en la muestra (aunque no es
importante ya que pasa del 99% para el placebo al 70% a por encima del
100% para el resto).
Ha habido un fuera de especificaciones en la repetibilidad de 1 anlisis de
los 12 realizados, el correspondiente al analista 2, da 1, placebo cargado al
70%, aunque es casi insignificante CV 2,06%
frente a la especificacin
prevista de 2% CV.
En todo caso las acciones a seguir seran acortar el intervalo de anlisis para
verificar si la recuperacin no resulta afectada.
3.4.2 ANLISIS EN SOLUCIN REGULADORA: RESULTADOS

3.4.2.1 GENERALIDADES
Instrumentacin analtica
Espectrofotmetro
(8452
HELWLETT
PACKARD
ARRAY). SOFTWARE: UV-VIS
DIODE
VECTRA
286/12
- 116 -
patrones primarios:
n lote: SDM/PAR/PAJ/95 (31/03/95)
n lote: SDM/23121 (03/04/95)
n lote: 98473 (03/04/95)
Mallinckrodt Chemical Inc
lote: 6375994M349 (caducidad
10/2000)
Reactivos:
Agua desionizada (SDM, conductividad <0,2 S).
cido fosfrico 85% Probus Lote: 25587 Caducidad: no
aparece. Hidrxido sdico lentejas para anlisis ACSISO. Panreac. Lote: 139853270. Disodiohidrogenofosfato
trihidrato Merck Lote: A232099.
cubeta a 240 nm.
1
-4,0 104
+4,1
La absorbancia que aparece es mnima10
y -4en principio no afectar a las lecturas
3 -2,3 10de muestras. En caso de salir
4
ANALTICO
- 117
-
absorbancia, se limpia la cubeta llevndola a ebullicin con HNO3 reactivo, se

saca del bao y se deja en agua desionizada durante 48 horas.
Se adjunta la grfica de absorbancia obtenida (figura 8):
Control de los disolventes

Se determina la absorbancia del disolvente solucin reguladora fosfato a pH 5,8
a 240 nm frente al aire. En esta longitud de onda, la absorbancia ser inferior a
0,40 y preferiblemente <0,20.
1 + 5 10-4
2 -1,5 10-3
3 +0,1 104
Se adjunta el grfico de absorbancia obtenida (figura 9), donde puede

comprobarse que es menor de 0,20 en todo el espectro:
- 118
-
Figura 9: Absorbancia del disolvente (solucin

reguladora de fosfatos a pH 5,8).
Por otra parte, se comprueba el mximo de absorbancia del paracetamol (=

244 nm) en el medio especificado (figura 10):
Figura 10: Mximo de absorbancia del paracetamol en

solucin reguladora de fosfatos pH 5,8.
3.4.2.2 LINEALIDAD CON PATRN DE MATERIA PRIMA

patrn (doble pesada) de distinta concentracin, abarcando un intervalo que
incluye la concentracin terica de la muestra problema
ANALTICO
- 119
-
(60-140%).
Los resultados obtenidos son los
siguientes (tabla 25):
CONCENTRACIN
Absorbancia
Factor de
(g/ml)
respuesta
9,30
0,63271
0,068033
10,01
0,68127
0,068059
12,45
0,82288
0,066095
13,01
0,86549
0,066525
14,63
0,96443
0,065921
15,10
0,99477
0,065879
18,11
1,20250
0,066400
19,97
1,29100
Tabla 25:
Resultados MP solucin
reguladora.0,064663

estadstico de homogeneidad de variancias de Cochran (tabla 27), obtenindose
una Gexperimental de 0,605908 que se compara con la
tabulada (Gtablas) para una
probabilidad de p=0,05, para 4 concentraciones ensayadas y 2 replicados de

cada concentracin, que toma un valor de 0,9065. Como el valor experimental
es inferior al tabulado, no existen
diferencias estadsticamente significativas
entre las variancias de los diferentes niveles de concentracin y
puede
aplicarse la hiptesis de un modelo lineal (estimado por el mtodo de mnimos

cuadrados). Por otra parte, tambin se aplica el test estadstico de los factores
A1
A2
de respuesta, que corrobora
la existencia
de A3
linealidadA4
entre ambos factores.
0,6327
0,6813
0,8229
0,8655
0,9644
0,9948
1,2025
1,2910
Tabla 26: Absorbancias tabuladas para

el Test de Cochran.

RESUMEN
Grupos
Columna 1
Cuenta
2
Suma
1,31398
Promedio Variancia
0,65699 0,0011790
4
Columna 2
2
1,68837 0,844185 0,0009078
1
Tabla 27: ANOVA de MP en
Columna 3
2
1,9592
0,9796 0,0004602
Solucin Reguladora.
6
Columna 4 G experimental
2
2,4935
1,24675 0,0039161
0,6059
2
G tabulada (95%, 4 concentraciones y
08
2 Tabla
replicados)
0,9065
28: Resultados de G
de Cochran.
- 120 -
El factor de respuesta (tabla 25) se calcula dividiendo la concentracin (en

g/ml) por la absorbancia. Se determina el valor medio, la desviacin estndar
y el coeficiente de variacin de los factores de respuesta calculados.
Media
0,066446897
Desviacin estndar
0,001135679
CV%
1,709152503
Tabla 29: Estadstica factores de respuesta MP Solucin Reguladora.

g/ml) y en ordenadas las correspondientes absorbancias (figura 11):
Absorbancia
= pendiente *
concentracin + ordenada origen y=
Absorbancia
Curva de regresin ajustada: patrn (solucin reguladora)

0,062712906 x + 0,049393073
1,40000
1,20000
1,00000
0,80000
0,60000
0,40000
0,20000
-
Y
Pronstico para Y
-
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
concentracin (g /ml)
Figura 11: Recta de calibrado de MP paracetamol en

solucin reguladora de fosfatos a pH 5,8.
de la regresin
Coeficiente Estadsticas
de correlacin
mltiple r Coeficiente de
determinacin r2
r2
ajustado
Error
Tabla
30: Estadstica de la regresin Mp
tpico Reguladora.
Solucin
Observacio
nes
0,999
35
0,998
70
0,998
48
0,009
04
8
ANALTICO
- 121
-
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r=0.99935) como el

de determinacin r2, indican una buena linealidad (tabla 30). El coeficiente de
en el origen (a); a sa t.
Mximo
Mnimo
Observaciones
Test de t
TEST DE
Lmites
b PROPORCIONALIDAD
0,06498
0,06044
no incluye el
67,7952220
9
cero
Limites a
0,08219
incluye el cero 3,68513813
0,07147
2
t (GL(n-2)=6, Tabla 31: Estadsticas de
2,4470
los parmetros de la regresin.
P=0.05%)
Error tpico Estadstico t Probabilidad
Test de sensibilidad: Coeficient
es
Ordenada en el
0,04939
0,013403
3,685138
0,01026782
Tomando
los lmites de confianza de la pendiente se comprueba que0 no incluye
origen (a)
Pendiente
0,06271
0,000925
6,9282
E- de t:
el cero,
es decir (b)
que existe
una pendiente
y por 67,795222
lo tanto una recta.
El test
10
texp = |b| / sb = 67,79522203

ligero sesgo. El Test de t:
texp = |a| / sa = 3,685138132
Este valor de t es mayor que el tabulado (2,4470) para una probabilidad del
95% y 6 grados de libertad, por lo que la probabilidad de que a # 0 es muy
elevada.
- 122 -
ANLISIS DE LA
VARIANCIA
Grados
de
Suma de
libertad
cuadrados
Regresin (SSreg)
Falta de ajuste
(SSlof)
Error puro (SSpe)
1
2
Residual (SSr)
Promedio de
F
F
los
Experiment tabla
cuadrados
al
s
0,375323748 0,375323748 4596,192 5,987
-0,005973267
-1,848 6,944
0,002986634
0,006463226 0,001615806
Tabla 32: ANOVA MP Solucin Reguladora.
0,000489958
8,16597E-05
Total
0,375813706

que se trataran los comprimidos y se ha efectuado un espectro UV completo
paracetamol, existe una seal de ruido debida a los excipientes. Se analiza la

absorbancia a = 244 nm, para evaluar su interferencia en el anlisis del
paracetamol.
200,5 mg
placebo
195,3 mg
placebo
0,02
82
0,0392
0,03
0,02
42
45
0,0471
0,03
10
ANALTICO
- 123
-
Figura 12: Absorbancia del placebo en solucin reguladora de fosfatos a

pH 5,8.

despreciables cuando se valoran los
comprimidos, ya que la absorbancia
esperada sera >0,9, lo cual supondra un error de lectura espectrofotomtrica

de alrededor del 1% por exceso. Sin embargo, cuando se trabaje a bajas
absorbancias,
el error pasara a ser ms importante con lo que debera
corregirse este exceso por un mtodo adecuado, lectura previa de absorbancia

del placebo, o aadir placebo al patrn de paracetamol que se prepara para
cada ensayo o se extrapolan en la recta patrn con placebo.
Se comprueba que el pico correspondiente al principio activo es puro dado que
los espectros UV completos (para muestra placebo 100% (figura 12), patrn
paracetamol (figura 10) y placebo cargado de
patrn paracetamol (figura 13))
son idnticos y muestran los mximos caractersticos del paracetamol de

referencia.
- 124
-
Figura 13: Espectro de absorbancia del placebo cargado con paracetamol en solucin
reguladora de fosfatos a pH 5,8.

Para realizar este ensayo se ha preparado un placebo y a diferentes alcuotas
del mismo se han aadido
cantidades conocidas de paracetamol patrn, de
manera que las concentraciones de dicho producto
expresadas como g/ml,
quedan entre 70 y 130% del contenido terico. Se han efectuado 8 valoraciones

de cada una de las concentraciones, en 2 das diferentes y por 2 analistas.
Durante el primer da, tanto el analista A como el analista B han efectuado 2
determinaciones de cada nivel de concentracin:
ANALTICO
- 125
-
ANALIST
A1
%
% Concentracin ABSORBANCI Concentracin extrapolada

%
REAL
real
A
(g/ml)
(g/ml)
RECUPERACIN
70
58,
8,75
0,6047
9,01
103,0
3
9,40
0,6390
9,53
101,3
62,
7
85
81,
12,20
0,8147
12,14
99,5
3
12,60
0,8398
12,52
99,4
84,
0
10
102,
15,30
1,0075
15,02
98,2
0
0
15,40
1,0179
15,17
98,5
102,
analista 1, da 1.
7
11
114,
17,20
1,1591
17,28
100,5
5
7
17,80
1,1660
100,0
ANALISTA 2 17,80
118,
% % REAL
Concentraci ABSORBANCI
Concentracin
%
7
n
A
extrapolada
RECUPERACIN
13
130,
19,50
1,2688
19,25
98,7
(g/ml)
Real
0
0
19,40
1,2664
18,88
97,3
(g/m
129,
l)
3
70
61,3
9,2
0,6139
9,21
100,2
70
64,0
9,6
0,6453
9,69
100,9
85
79,3
11,9
0,7959
11,95
100,4
85
85,3
12,8
0,8488
12,74
99,5
100 100,0
15,0
0,9931
14,90
99,4
100 100,0
15,0
1,0029
15,05
100,3
115 118,7
17,8
1,1660
17,50
98,3
115 115,3
17,3
1,1471
17,22
99,5
130 126,7
19,0
1,2547
18,80
99,0
Tabla 34: Resultados analista 2, da 1.
130 132,7
19,9
1,2879
19,33
97,1
En el segundo da, tanto el analista A como el B efectuaron 2 determinaciones

de cada nivel de concentracin:
- 126
-
ANALIST
A1
%
%
REAL
Concentraci ABSORBANC Concentracin extrapolada %

n
IA
(g/ml)
RECUPERACIN
real
(g/m
l)
70
59,3
8,9
0,6077
9,06
101,8
61,3
9,2
0,6265
9,34
101,5
85
79,3
11,9
0,7959
11,86
99,7
80,7
12,1
0,8084
12,05
99,6
100
100,
15,0
1,0021
14,94
99,6
0
15,2
1,0029
14,95
98,4
101,
3
115
110,
16,6
1,0998
16,39
98,8
Tabla 35: Analista
7
16,9
1,1090
16,53
97,8
1, da 2.
112,
7
ANALISTA
2 18,81
130
124,
18,7
1,2840
100,6
7
19,3
1,2758
19,02
98,5
%
%
Concentraci
ABSORBANCI
Concentracin
extrapolada
%
128,
REAL
n
A
(g/ml)
7
RECUPERACIN
real
(g/m
l)
70
64,7
9,7
0,6453
9,69
99,8
64,0
9,6
0,6516
9,78
101,9
85
83,3
12,5
0,8298
12,45
99,6
85,3
12,8
0,8564
12,85
100,4
10
105,
15,8
1,0524
15,80
100,0
0
3
15,4
1,0154
15,24
99,0
102,
7
11
113,
17,0
1,1409
17,12
100,7
5
3
17,4
1,1534
17,31
99,5
116,
0 resumen de la validacin (tabla 37 y 38) se adjuntan todos los
En el cuadro
13 efectuados:
128,
19,3
1,2602
18,94
98,2
clculos
0
7
19,5
1,2854
19,29
98,9
la media130,
de los dos resultados y su coeficiente de variacin (repetibilidad),
0 analista, nivel de concentracin y da.
para cada

concentraciones.
ANALTICO
70%
- 127
-
VALIDACIN PARACETAMOL (SOLUCIN

REGULADORA)
DA 1
103,02
101,78
ANALISTA 1
101,34
101,51
102,18
101,64
CV %
1,16
100,16
0,19
99,85
m
SD
ANALISTA 2
100,89
101,88
CV %
100,52
100,86
0,51
1,42
99,54
99,35
99,45
0,13
99,69
99,59
99,64
0,07
CV %
85%
ANALISTA 1
m
CV
%
100,38
ANALISTA 2
m
CV %
100%
ANALISTA 1
m
CV
%
99,53
99,96
0,60
98,16
98,53
98,34
0,27
99,37
ANALISTA 2
m
CV %
115%
ANALISTA 1
m
CV
%
100,35
99,86
0,70
100,45
100,00
100,23
0,32
99,64
100,41
100,03
0,55
99,59
98,35
98,97
0,88
99,97
98,96
99,47
0,72
98,76
97,82
98,29
0,68
Tabla 37: Resultados98,32

en conjunto100,73
Placebo solucin regualdora.
ANALISTA 2
m
CV %
130%
ANALISTA 1
m
CV
%
99,52
98,92
0,86
98,72
97,30
98,01
1,02
99,49
100,11
0,87
100,57
98,54
99,55
1,44
DA 2
101,3
1,0085089
2
0,9312531
m
SD
CV
%
99,8
0,4012789
8
0,3762336
8
m
SD
CV
%
99,2
0,7924135
1
0,7475193
9
m
SD
CV
%
99,4
0,9579215
3
1,0303983
1
m
SD
98,5
1,0070351
- 128
-
REPETIBILIDAD
REPRODUCIBILID
A
D
CV %
(n=8)
EXACTITUD
RECUPERACIN
(n=8)
CV%
entre
70%
1,44
0,07
0,93
85%
100%
115%
0,38
0,75
1,03
130%
1,09
70%
85%
100%
115%
101,30
99,77
99,16
99,38
130%
98,54
Tabla 38: Estadstica de los resultados Placebo Solucin Reguladora.
(n=5)
m
SD
99,63
0,9259
CV %
0,9293
CONCLUSIONES SOBRE LA REPETIBILIDAD
Los coeficientes de variacin estn comprendidos entre 0,07 % y 1,44 %,

0,88903032
(tablas37 y 38). por lo tanto puede t concluirse
que el mtodo analtico es
repetitivo dado que, en todos los

casos, se obtienen valores por
experimen
debajo del
talICH (2%).
lmite mximo especificado por las normas
t tablas
2,776
CONCLUSIONES SOBRE LA REPRODUCIBILIDAD

P= 0.05 GL= 4
Viene dada por el coeficiente global para cada concentracin (tabla 38); los CV%
son similares (sobre el 1%) para todos los niveles de concentracin ensayados.
De los resultados anteriores (tablas 37 y 38) se desprende que la exactitud en
el intervalo de
concentraciones que se estudia (70-130%) se encuentra
comprendido entre el 98,54 y 101,3%, por lo que la
tcnica cumple con el
requisito de exactitud, siendo la recuperacin media para todo el intervalo en

estudio del 99,63%, la cual es satisfactoria. Se confirma con una t student, que
no hay diferencias significativas entre
las recuperaciones medias para cada
nivel de concentracin:
texp= |100 - R| * n / SD =
0,889 t (p=0.05 y GL=
ANALTICO
- 129
-
es decir no existen
diferencias significativas entre la exactitud a nivel bajo
(70%), medio (100%) o alto (130%) de
concentracin del analito, aunque
parece que si las haya ya que el intervalo 85-115% presenta recuperaciones del
99%, mientras que los dos extremos presentan recuperaciones ms alejadas.
Si se aplica un ANOVA de una direccin o con un slo criterio de clasificacin
sobre los resultados de
recuperacin individuales obtenidos para cada nivel
(tabla 39), el test de F, da una Fexperimental =10,679, frente a la Ftablas(p=0,05; 4; 35)

de 2,641, lo que indica que el factor de concentracin s afecta a la
recuperacin
(aunque con una probabilidad baja), como se supona por los
datos. Sin embargo, la exactitud del mtodo
se considera adecuada ya que
70
85
100
115un130
todas las recuperaciones estn
comprendidas
en
margen estrecho entre 96103,0 99,5
98,2
100,5 98,7
101,8 99,7
99,6
98,8 100,
6
97,8 98,5
98,3 99,0
99,5 97,1
100,7 98,2
99,5 98,9
102%, en todo el intervalo

de concentraciones
estudiado.
101,3 99,4
98,5
100,0 97,3
101,5
100,2
100,9
99,8
101,9
99,6
100,4
99,5
99,6
100,4
98,4
99,4
100,3
100,0
99,0
Tabla 39: Resultados de recuperacin tabulados

para el clculo de ANOVA.

RESUMEN
Grupos
70 %
Cuenta
8
85 %
100 %
115ANLISIS
%
8
DE
Origen
Suma
130VARIANCI
%de
8 de
las A
cuadrad
variacione os
s
Entre
34,29073
grupos
25
Dentro de 28,09610
los
77
grupos
Total
62,38684
01
Suma
Promedio Variancia
810,4123 101,30153 1,0170902
7
4
798,14676 99,768345 0,1610248
6
8
2
793,27436 99,159295 0,6279191
6
8
7
795,07986 99,384983 1,0487013
7
4
2
Grados 98,538409
Promedio 1,1589941
F
Probabilida
Valor
788,30727
de
de 3
d
crtico
4
2
libertad los
para F
cuadrados
4
8,572683 10,679198 9,1888E-06 2,641463
12
4
94
35
0,802745
93
del
anlisis de la variancia.
39
- 130 -
3.4.2.5 LINEALIDAD
sido comprobada con 5 concentraciones de paracetamol patrn (doble pesada)
adicionadas de placebo, abarcando un intervalo que incluye la concentracin
terica de la muestra problema (70-130%) y obteniendo 8 replicados de cada
concentracin. Los resultados obtenidos aparecen en la tabla 41:
CONCENTRACI ABSORBANCI
FACTOR DE
N
A
RESPUESTA
8,75
0,6047
0,06911
9,40
0,6390
0,06798
8,90
0,6077
0,06828
9,20
0,6265
0,06810
9,20
0,6139
0,06673
9,60
0,6453
0,06722
9,70
0,6453
0,06653
9,60
0,6516
0,06788
12,20
0,8147
0,06678
12,60
0,8398
0,06665
11,90
0,7959
0,06688
12,10
0,8084
0,06681
11,90
0,7959
0,06688
12,80
0,8488
0,06632
12,50
0,8298
0,06638
12,80
0,8564
0,06690
15,30
1,0075
0,06585
15,40
1,0179
0,06610
15,00
1,0021
0,06681
15,20
1,0029
0,06598
15,00
0,9931
0,06620
15,00
1,0029
0,06686
15,80
1,0524
0,06661
15,40
1,0154
0,06594
17,20
1,1591
0,06739
17,80
1,1660
0,06550
16,60
1,0998
0,06625
16,90
1,1090
0,06562
17,80
1,1660
0,06550
17,30
1,1471
0,06630
17,00
1,1409
0,06711
17,40
1,1534
0,06629
19,50
1,2688
0,06507
19,40
1,2664
0,06528
18,70
1,2840
0,06866
19,30
1,2758
0,06610
19,00
1,2547
0,06604
19,90
1,2879
0,06472
Placebo
19,30
1,2602
0,06530
Solucin-Reguladora.
19,50
1,2854
0,06592
ANALTICO
- 131
-

estadstico de homogeneidad
de variancias de Cochran, obtenindose una
Gexperimental de 0,34119, que comparada con la Gtablas para p=0,05, 5 concentraciones

y 8 replicados que es 0,4564, el valor experimental es inferior al tabulado, con
lo
cual no existen diferencias significativas entre las variancias de los diferentes
70
100
130un modelo lineal,
niveles de concentracin
y 85
puede aplicarse
la 115
hiptesis de
0,6047
0,6390
0,6077
0,6265
0,6139
0,6453
0,6453
0,6516
0,8147
0,8398
0,7959
0,8084
0,7959
0,8488
0,8298
0,8564
1,0075
1,0179
1,0021
1,0029
0,9931
1,0029
1,0524
1,0154
estimado por el mtodo de mnimos cuadrados.
1,1591
1,1660
1,0998
1,1090
1,1660
1,1471
1,1409
1,1534
1,2688
1,2664
1,2840
1,2758
1,2547
1,2879
1,2602
1,2854
Tabla 42: Resultados tabulados

para Test Cochran.

RESUMEN
Grupos
Cuenta
Suma
Promedio
Varianci
a
70 %
8
5,0340458 0,6292557 0,000346
8
4
05
85 %
8
6,5896537 0,8237067 0,000551
4
2
17
Tabla 43: anlisis de la variancia de la respuesta
100segn
%
8
8,0941552
1,0117694
0,000331
el factor concentracin.
5
1
54
G experimental
0,341
115 %
8
9,1411913 1,1426489 0,000638
G tabulada (95%, 6 concentraciones
y2
3
119
0,45
replicados)
130 % Tabla2 44:
8
10,183218
Resultados
de G 1,2729023
de Cochran. 0,000151
6
3
9664

Estadstica factores
respuesta
Media
0,066570438
Desviacin estndar
0,000971225
CV% de respuesta
1,458943764
Tabla 45: Estadstica de los factores
Placebo Solucin Reguladora.
El coeficiente de variacin presenta un valor menor (tabla 45) que el

establecido como indicador de
- 132 -
linealidad (<5%), con lo cual puede afirmarse que existe una relacin de
linealidad entre ambas variables.
g/ml) y en las ordenadas las correspondientes absorbancias (figura 14):
Absorbancia
= pendiente *
concentracin + ordenada origen y =

0,063378053 x + 0,0429532
Curva de regresin ajustada (solucin reguladora): placebo + patrn

1,4000
ABSORBANCIA
1,2000
1,0000
0,8000
ABSORBANCI
A
0,6000
Pronstico ABSORBANCIA
0,4000
Lineal (Pronstico
ABSORBANCIA)
0,2000
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
CONCENTRACIN (mcg/ml)
Figura 14: Recta de calibracin del placebo cargado de paracetamol

en solucin reguladora fosfato a pH 5,8.
de la regresin
CoeficienteEstadsticas
de correlacin
0,998722677
mltiple (r)
Coeficiente de
0,997446985
determinacin r
r2 ajustado
0,9973798
Error
tpico
0,011875626
Tabla 46: Estadsticas de la regresin Placebo solucin Reguladora.
Observaciones
40
2
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r=0,998722) como el

de coeficiente de
determinacin r2 indican una buena linealidad. El coeficiente
de determinacin da una indicacin del grado de aproximacin de los puntos a

la relacin lineal. Por lo tanto, puede afirmarse que esta relacin lineal explica
el 99,74% de la variancia de la absorbancia.
calculan los lmites de confianza
CAPTULO 3: DESARROLLO ANALTICO
- 133 -
de la pendiente (b); b sb t, y de la ordenada en el

origen (a); a sa t.
Mximo
Mnimo
0,065256508
LMITES DE b
Observaciones
Test de t
0,0631229
no incluye el 121,84564
cero
42
LIMITES DE a
0,048840903
0,0165762 no incluye el 4,1057066
25
Tabla 47: Test de proporcionalidad del recta de calibracin Placebo cero
Solucin Reguladora.
t (GL(n-2)=38,
2,025
P=0.05%)
Coeficientes
Error tpico Estadstico t Probabilida
d
Ordenada
el
0,03270
0,0079664
4,685138que 0,0217820
Tomando
losen
lmites
de confianza
de la pendiente
se comprueba
no incluye
origen (a)
el cero,
es decir
pendiente
y por lo tanto57,795222
una recta. El
test de
Pendiente
(b) que existe una
0,06154
0,0005051
5,5982
E- t:
10
texp = |b| / sb =121,8456442

observa que estos lmites no incluyen el cero, con lo cual el mtodo presenta un
ligero sesgo. El test de t:
texp = |a| / sa = 4,105706625
Este valor de t es superior al tabulado (para p= 0.05 y GL= 38), por lo que la
probabilidad de que a # 0 es muy elevada y por otra parte el mtodo presenta
un ligero sesgo.
Otro test estadstico de alta significacin estadstica es aplicar un anlisis de la
variancia (ANOVA) completo
la recta
dede
regresin:
Gradosade
Suma
Promedio de Fexperime F tablas
libertad
cuadrad
los
nta
os
cuadrados
l
Regresin (SSreg)
1
2,09378949 2,093789499 14846,361 4,098168
9
915
Falta de ajuste (SSlof)
3
-0,002924184
2,874187
0,00877255
7,2423246
999
66
Error puro (SSpe)
35
0,0141317 0,000403763
09
Residuos (SSr)
38
0,0053591 0,00014103
58
- 134 -
Tabla 48: ANOVA de la regresin Placebo Solucin Reguladora.
3.4.2.6
CONCLUSIN
MTODO
DE
ANLISIS
CON
SOLUCIN REGULADORA
En esta validacin analtica se han comprobado la bondad del mtodo para el
intervalo 70-130%, lo nica salvedad que aparece es que en el anlisis el factor
de concentracin para la recuperacin influye y presenta
ligeras diferencias
aunque stas son significativas. Adems presenta un ligero sesgo positivo lo cual
ya se conoca pues el placebo absorbe en la misma longitud de onda que el
paracetamol.
En caso de ser este el mtodo escogido, debera reducirse en el intervalo de
anlisis y ser utilizado con un patrn adicionado de placebo para corregir el
sesgo positivo del anlisis.
3.4.3 ANLISIS EN AGUA: RESULTADOS

Espectrofotmetro
HELWLETT
3.4.3.1 GENERALIDADES
PACKARD VECTRA
286/12 SOTWARE: UVInstrumentacin
analtica
VIS
HP 89532A UV-VIS
Software Rev 1.00.00
patrones primarios:
n lote: No aparece (31/03/95)
(8452 A DIODE
ARRAY).
ANALTICO
- 135
-

Mallinckrodt Chemical Inc.
n lote: 6375994M349 (caducidad
10/2000)
Reactivos:
Agua desionizada de red (SDM) obtenida por intercambio inico
(conductividad <0,2 S).
cubeta a 240 nm.
1 -2,1 10-4
2 -1,9 10-4
3 +2,3 104
La absorbancia que aparece es mnima y en principio no afectar a las lecturas

de muestras. En caso de salir absorbancia, se limpia la cubeta llevndola a
ebullicin con HNO3 reactivo, se saca del bao y se deja en
- 136 -
agua desionizada durante 48 horas. Se adjunta la grfica de

absorbancia obtenida (figura 15). Control de los disolventes
Se determina la absorbancia del disolvente agua desionizada frente al aire a
240 nm. En esta longitud de onda, la absorbancia ser inferior a 0,40 y
preferiblemente <0,20.
1
- 4,6 *105
+3,4 *
Se adjunta el grfico de absorbancia 10-4
3 +2,4 *
obtenido (figura 16):
10-4
Figura 16: Absorbancia del disolvente (agua desionizada) frente al aire.
Se hace la comprobacin del mximo de absorbancia de la materia prima

(paracetamol) en agua que coincide con el de Farmacopea (244 nm). Se
adjunta el grfico de absorbancia obtenido (figura 17):
ANALTICO
- 137
-
Figura 17: Mximo de absorbancia del patrn

paracetamol en agua desionizada.
3.4.3.2 LINEALIDAD CON PATRN DE

MATERIA PRIMA

patrn (doble pesada) de
distinta concentracin, abarcando un intervalo que
incluye la concentracin terica de la muestra problema (50-150%).

CONCENTRACIN Absorbancia
(g/ml)
7,47
0,5067300
7,70
0,5088940
10,00
0,6371300
10,20
0,6628310
15,03
0,9602500
15,20
0,9707040
20,04
1,2634000
20,11
1,2701200
22,57
1,4258000
22,50
1,4269000
MP en Agua.
factor de
respuesta
0,067835
0,066090
0,063713
0,064983
0,063889
0,063862
0,063044
0,063159
0,063172
0,063418

estadstico de homogeneidad
de variancias de Cochran, obtenindose una
Gexperimental de 0,805863 que se compara con la Gtablas de 0,8412 para p=0,05, 5

concentraciones y 2 replicados. El valor experimental es inferior al tabulado,
con lo cual no
existen diferencias estadsticamente significativas entre las
variancias de los diferentes niveles de concentracin y
puede aplicarse la
hiptesis de un modelo lineal, estimado por el mtodo de
mnimos
- 138 -
cuadrados. Por otra parte, tambin se aplica el test estadstico de los factores de
respuesta, para averiguar la existencia o no de linealidad entre ambos factores.
50%
0,5067
75%
0,6371
100%
0,9603
125%
1,2634
150%
1,425
8
0,5089
0,6628
0,9707
1,2701
1,426
Tabla 50: Resultados de Absorbancia tabulados para
9
el clculo de Test de Cochran.
Anlisis de varianza de
un factor RESUMEN
Grupos
Cuent Suma Promedio Varianza
a
50%
2
1,0156 0,507812 2,3414E24
06
75%
2
1,2999 0,649980 0,000330
61
5
27
100%
2
1,9309
0,965477
5,4643ETabla 51: ANOVA de MP
54
05
en Agua.
125%
2
2,5335 1,26676 2,2579EG experimental
0,8058
2
05
G tabulada
(95%,
5
concentraciones
y
63
150%
2
2,852 1,42635 6,05E-07
2 52:
replicados)
Tabla
Resultados de7G de Cochran. 0,8412

coeficiente de variacin de los factores de respuesta calculados (tabla 53).
Media
0,06462037
Desviacin estndar
0,00160821
CV%
2,48870445
Tabla 53: Estadstica factores respuesta MP en Agua.

relacin de linealidad entre ambas variables.
Absorbancia
= pendiente *
concentracin + ordenada origen y=

0,0615592 x + 0,034840041
ANALTICO
- 139
-
Absorbancia
Curva de regresin ajustada (agua): patrn

paracetamol
1,5000000
1,0000000
0,5000000
0,0000000
-
Y
5,00 10,00 15,00 20,00 25,00
Pronstico para Y
concentracin (g/ml)
Figura 18: Recta de calibrado del

patrn paracetamol en agua.
de mltiple
la regresin
CoeficienteEstadsticas
de correlacin
0,999834141
r
Coeficiente de determinacin r2 0,999668309
R2 ajustado
0,999626848
Observaciones
10
Error tpico
0,007125855
Tabla 54: Estadsticas de la regresin MP en Agua.
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r=0,99983, tabla 54)

como el de determinacin r2, indican una buena linealidad. El coeficiente de
Mximo
Lmites b
0,06247
Lmites a
0,04957
Mnimo Observaciones
Test de t
0,060645 no incluye el 155,2767394
cero
0,020105 no incluye el
5,4524817
cero
2,306006
t (GL(n-2)=8,
Tabla 55:P=0.05%)
Test de proporcionalidad de la regresin MP en Agua.
Coeficientes
Error
Estadstico t Probabilidad
tpico
Test
de sensibilidad:
Ordenada
en el origen (a)
0,0348400 0,0063897
5,452481
0,00060692
58
Pendiente
(b)
0,0003964
3,3102
E-15
Tomando los lmites de confianza de la pendiente se155,276739
comprueba que
no incluye
0,0615592
48
el cero, es decir que existe
- 140 -
una pendiente y por lo tanto una recta. El test de t:

texp = |b| / sb = 155,2767394
ligero sesgo. El Test de t:
texp = |a| / sa = 5,452481758
Este valor de t es mayor de 2,306 (para p= 0,05 y GL=8), por lo que la
probabilidad de que a # 0 es muy elevada.
Grados de
Suma de Promedio de
F
F tablas
libertad
cuadrad
los
Experiment
ANLISIS DE
LA VARIANCIA
os
cuadrados
al
Regresin
1
1,2242970 1,224297092 24110,865 5,317644
(SSreg)
92
99
Falta de ajuste
4
-0,9996 6,388233
(SSlof)
1,2238866 0,305971663
94
53la variancia de la regresin MP en Agua.
Tabla 56: Anlisis de
Error puro
4
1,2242928 0,306073219
(SSpe)
75
Residual (SSr)
8
0,0004062 5,07778E-05
23
demostrada la existencia de una pendiente
# 0.
Total
9
1,2247033
15
que se trataran los comprimidos y se ha efectuado un espectro UV completo
paracetamol, existe una seal de ruido debida a alguno de los excipientes. Se

analiza
ANALTICO
- 141
-
la absorbancia a = 244 nm, para evaluar su interferencia en el

anlisis del paracetamol.
200,0 mg
placebo
0,010
99
0,01075
0,013
0,008
41
50
0,00951
0,008
71
183,0 mg
placebo
Figura 19: Absorbancia del placebo en agua desionizada.

despreciables cuando se valoran los
comprimidos, ya que la absorbancia
esperada sera >0,9, lo cual supondra un error de lectura espectrofotomtrica

de alrededor del 0,55% por exceso. Sin embargo, cuando se trabaje a bajas
absorbancias, el error pasara a ser ms importante con lo que debera
corregirse este exceso por un mtodo adecuado: lectura previa de absorbancia
del placebo, o aadir placebo al patrn de paracetamol que se prepara para
cada ensayo o extrapolar la absorbancia en una recta adicionada de placebo.
Se comprueba que el pico correspondiente al principio activo es puro dado que
los espectros UV completos (para muestra placebo 100% (figura 19), patrn
paracetamol (figura 17) y placebo cargado de
patrn paracetamol (figura 20))
son idnticos y muestran los mximos caractersticos del paracetamol de

referencia.
- 142
-
Figura 20: Espectro de absorbancia del placebo

cargado con MP paracetamol.

Para realizar este ensayo se ha preparado un placebo y a diferentes alcuotas
del mismo se han aadido
cantidades conocidas de paracetamol patrn, de
manera que las concentraciones de dicho producto
expresadas como g/ml,
quedan entre 50 y 150% del contenido terico. Se han efectuado 8 valoraciones

de cada una de las concentraciones, en 2 das diferentes y por 2 analistas.
Durante el primer da, tanto el
analista A como el analista B han efectuado 2
determinaciones de cada nivel de concentracin:
ANALTICO
- 143
-
ANALIST
A1
%
% REAL
50
50,5
50,9
74,7
74,1
103,7
100,9
125,7
125,4
149,9
150,7
75
100
125
150
Concentracin
real
(g/ml)
7,57
7,63
11,20
11,11
15,55
15,14
18,86
18,81
22,48
22,61
ABSORBANCI
A
0,5090
0,5102
0,7540
0,7510
1,0350
1,0069
1,2436
1,2531
1,5104
1,5047
Concentracin
extrapolada
(g/ml)
7,61
7,62
11,27
11,22
15,47
15,04
18,58
18,72
22,46
22,48
%
RECUPERACIN
100,5
99,9
100,6
101,0
99,5
99,4
98,5
99,5
99,9
99,4

analista 1, da 1.
ANALISTA 2
%
% REAL
50
49,7
50,8
72,7
74,0
97,3
96,7
130,0
132,7
151,0
151,7
75
100
125
150
concentracin ABSORBANCI Concentracin

real
A
extrapolada
(g/ml)
(g/ml)
7,45
0,4952300
7,43
7,62
0,5124000
7,69
10,90
0,7169703
10,76
11,10
0,7401200
11,11
14,60
0,9750300
14,63
14,50
0,9623410
14,44
19,50
1,2799667
19,21
19,90
1,3214000
19,83
22,65
1,4985647
22,49
22,75
1,5142510
22,73
analista 2, da 1.
%
RECUPERACIN
99,8
100,9
98,7
100,1
100,2
99,6
98,5
99,7
99,3
99,9
- 144 -
En el segundo da, tanto el analista A como el B efectuaron 2 determinaciones

de cada nivel de concentracin:
ANALISTA 1
%
% REAL
50
50,9
50,3
82,0
82,9
99,5
99,6
113,5
122,1
143,5
142,8
75
100
125
150
concentracin
real
(g/ml)
7,63
7,55
12,30
12,43
14,20
14,94
17,40
18,32
21,53
21,01
ABSORBANCI
A
0,5301
0,5296
0,8546
0,8577
1,0020
1,0304
1,2010
1,2780
1,4752
1,4567
Concentracin
extrapolada
(g/ml)
7,58
7,57
12,21
12,26
14,32
14,73
17,17
18,27
21,23
20,82
%
RECUPERACIN
99,3
100,3
99,3
98,6
100,9
98,6
98,7
99,7
98,6
99,1

analsita1, da 2.
ANALISTA 2
%
% REAL
50
49,3
50,1
80,0
80,7
94,7
95,0
126,7
127,0
150,1
150,5
75
100
125
150
concentracin
real
(g/ml)
7,35
7,52
12
12,1
14,2
14,25
19,01
19,05
22,51
22,57
ABSORBANCI
A
0,4851019
0,4978108
0,7927535
0,7985200
0,9282177
0,9306807
1,2503412
1,2745360
1,4875000
1,5061000
Concentracin
extrapolada
(g/ml)
7,28
7,47
11,90
11,99
13,93
13,97
18,77
19,13
22,54
22,61
%
RECUPERACIN
99,1
99,4
99,2
99,0
98,1
98,0
98,7
100,4
100,1
100,2
En el cuadro resumen de la validacin (tabla 60 y tabla 61) se adjuntan todos los

clculos efectuados:
la media de los dos resultados y su coeficiente de variacin (repetibilidad),
para cada analista, nivel de concentracin y da.
concentraciones.
ANALTICO
50%
- 145
-
VALIDACIN PARACETAMOL (AGUA

DESIONIZADA)
100,47
DA 1
99,30
ANALISTA 1
DA 2
99,92
100,26
100,19
99,78
CV %
0,39
99,77
0,68
99,06
ANALISTA 2
100,93
99,36
100,35
99,21
0,81
0,21
100,59
99,30
ANALISTA 1
101,01
98,62
100,80
98,96
CV %
0,29
98,72
0,49
99,15
ANALISTA 2
100,08
99,05
99,40
99,10
0,96
0,07
99,46
100,85
ANALISTA 1
99,37
98,58
99,41
99,71
0,06
100,23
Tabla 61: Resultados completos
1,62
98,11
CV %
75%
CV %
100%
CV %
validacin Placebo en Agua.
ANALISTA 2
99,61
98,03
m
99,9
SD 0,641311
37
CV 0,642075
55
%
m
99,6
SD 0,885889
98
CV 0,889750
11
%
m
99,3
SD 0,998341
9
CV 1,005583
95
%
- 146
-
REPETIBILIDAD
REPRODUCIBILIDA
D
CV%
(n=8)
EXACTITUD
% RECUPERACIN
(n=8)
CV% entre
50%
1,62
0,02
0,64
75%
100%
125%
0,89
1,01
0,71
150%
0,55
50%
75%
100%
125%
99,88
99,57
99,28
99,22
150%
99,57
Tabla 62: Resultados validacin Placebo en Agua.
EXACTITUD
m
GLOBAL
CONCLUSIONES SOBRE LA REPETIBILIDAD
(n=5)
SD
CV %
99,50
0,2658
0,2672
Los coeficientes de variacin estn comprendidos entre 0,02 y 1,62% (tabla 62) ,
t experimental
4,15693372
por lo tanto puede concluirse que
el mtodo analtico
es repetitivo dado que, en
todos los casos, se obtienen valores

por debajo 2,776
del lmite mximo especificado
t tablas
por las normas ICH (2%).
P= 0.05 GL= 4
CONCLUSIONES SOBRE LA REPRODUCIBILIDAD

Viene dada por el coeficiente global para cada concentracin; los CV% son
similares para todos los niveles de concentracin ensayados (tabla 62).
De los resultados anteriores se desprende que la exactitud en el intervalo de
concentraciones que se estudia (50-150%) se encuentra comprendido entre el
99,22 y 99,88%, por lo que la tcnica cumple con el requisito de exactitud,
siendo la recuperacin media para todo el intervalo en estudio del 99,5%, la
cual es
satisfactoria (tabla 62). Se confirma con una t student, que no hay
diferencias significativas entre las recuperaciones medias para cada nivel de

concentracin:
texp= |100 - R| * n / SD =
ANALTICO
- 147
-
es decir no existen
diferencias significativas entre la exactitud a nivel bajo
(50%), medio (100%) o alto (150%) de concentracin del analito.

Si se aplica un ANOVA de una direccin sobre los resultados de recuperacin
individuales obtenidos para
cada nivel, el test de F, da una Fexperimental =0,9438
frente a la Ftablas(p=0,05; 4; 35) de 2,641, lo que indica que
el factor de
concentracin no afecta a la recuperacin. Y la exactitud del mtodo se

considera adecuada ya que todas las recuperaciones estn comprendidas en un
margen estrecho entre 98-100%, en todo el
intervalo de concentraciones
50%
75%
100%
125%
150%
100,465 100,5937 99,45524 98,5246 99,93014
48
59
04
95
57
99,91567 101,0051 99,37194 99,54389 99,44136
61
68
8
95
43
99,29666 99,30476 100,8536 98,65204 98,62443
57
78
69
27
57
100,2554 98,62071 98,57517 99,70517 99,09606
25
92
93
67
08
99,77073
98,72499
100,2345
98,51821
99,30240
Tabla 63: Resultados en %recuperacin
03
79 en Agua.
86
33
58
del Placebo
100,9268 100,0763 99,61241 99,66294 99,90079
29
92
41
23
55
ANLISIS
DE
VARIANCIA
Origen
de
Suma
de Grados
de 98,11016
Promedio 98,71858
F
Probabilid
99,05995
99,15380
100,1234
las
cuadrado23 libertad
de 3
ad
34
09
59
variaciones s 99,35710 99,04964 98,02533
los
100,4175 100,1554
cuadrados
59
11
46
46
83
Entre grupos 2,2615087
4
0,5653771 0,943868 0,450232
3
8
95
55
Dentro de
20,964988
35
0,5989996
los
1
Tabla 64: ANOVA6de la
grupos
tabla 63.
Total
23,226496
39
9
estudiado.
Valor
crtico
para F
2,641463
94
3.4.3.5 LINEALIDAD

sido comprobada con 5 concentraciones de paracetamol patrn (doble pesada)
adicionadas de placebo, abarcando un intervalo que incluye la concentracin
terica de la muestra problema (50-150%) y obteniendo 8 replicados de cada
concentracin.
- 148
-
CONCENTRAC
ABSORBANCI
FACTOR DE
IN
A
RESPUESTA
7,57
0,5090
0,06724
7,63
0,5102
0,06687
7,63
0,5301
0,06947
7,55
0,5296
0,07014
7,45
0,4952
0,06647
7,62
0,5124
0,06724
7,35
0,4851
0,06600
7,52
0,4978
0,06620
11,20
0,7540
0,06732
11,11
0,7510
0,06760
12,30
0,8546
0,06948
12,43
0,8577
0,06900
10,90
0,7170
0,06578
11,10
0,7401
0,06668
12,00
0,7928
0,06606
12,10
0,7985
0,06599
15,55
1,0350
0,06656
15,14
1,0069
0,06650
14,20
1,0020
0,07056
14,94
1,0304
0,06897
14,60
0,9750
0,06678
14,50
0,9623
0,06637
14,20
0,9282
0,06537
14,25
0,9307
0,06531
18,86
1,2436
0,06594
18,81
1,2531
0,06662
17,40
1,2010
0,06902
18,32
1,2780
0,06976
19,50
1,2800
0,06564
19,90
1,3214
0,06640
19,01
1,2503
0,06577
19,05
1,2745
0,06690
22,48
1,5104
0,06719
22,61
1,5047
0,06655
21,53
1,4752
0,06852
21,01
1,4567
0,06933
22,65
1,4986
0,06616
22,75
1,5143
0,06656
22,51
1,4875
0,06608
22,57
1,5061
0,06673
Tabla 65: Resultados Placebo en Agua

estadstico de homogeneidad de variancias de Cochran (tabla 67), obtenindose
una Gexperimental de 0,431634 que comparado con la Gtablas
para p=0,05, 5
concentraciones y 8 replicados que es 0,4564, el valor experimental es inferior

al tabulado (tabla 68), con lo cual puede afirmarse que no existen diferencias
significativas entre las variancias de los diferentes niveles de concentracin y
puede aplicarse la hiptesis de un modelo lineal, estimado por el
ANALTICO
- 149
-
mtodo de mnimos
cuadrados.
50%
0,5090
0,5102
0,5301
0,5296
0,4952
0,5124
0,4851
0,4978
75%
0,7540
0,7510
0,8546
0,8577
0,7170
0,7401
0,7928
0,7985
100%
1,0350
1,0069
1,0020
1,0304
0,9750
0,9623
0,9282
0,9307
125%
1,2436
1,2531
1,2010
1,2780
1,2800
1,3214
1,2503
1,2745
150%
1,5104
1,5047
1,4752
1,4567
1,4986
1,5143
1,4875
1,5061
Tabla 66: Resultados en Absorbancia para el

clculo del Test de Cochran.
Anlisis de variancia de
un factor RESUMEN
Grupos
Cuent Suma
Promedi Varianci
a
o
a
50%
8
4,069396 0,50867 0,00025
01
45 24
75%
8
6,265647 0,783205 0,002729
07
88 06
100%
8
7,870536
0,983817 0,001729
Tabla 67: ANOVA
del
02 25
Placebo en Agua. 13
125%
8
10,10191 1,262738 0,001219
G
05
820,431
41
634
experime
150%
8
11,95341 1,494176 0,00039
0,456
ntal
G
Tabla 68:
Resultados
de la57
G de Cochran.96 25
4
tabulada
Por otra parte, tambin se aplica el test estadstico de los factores de respuesta,
para comprobar la existencia de linealidad entre ambos factores.. El factor de
respuesta se ha calculado dividiendo la concentracin (en
g/ml, tabla 65) por la absorbancia. Se determina el valor medio, la desviacin
estndar y el coeficiente de variacin de los factores de respuesta calculados.
0,0671
Media
789
Desviacin
CV%
2,136968
0,0013
estndar
Tabla 69: Estadstica de los factores de559
respuesta.

- 150 -
Absorbancia
= pendiente * concentracin
+ ordenada origen y = 0,065341402x +
Absorbancia
0,016331568
Curva de regresin ajustada (agua): placebo +
patrn
1,6000
1,4000
1,2000
1,0000
0,8000
0,6000
0,4000
0,2000
-
Y
Pronstico para Y
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
concentracin (g/ml)
Figura 21: Recta de calibracin del placebo cargado con MP

paracetamol en agua desionizada.
Estadsticas de la
Coeficiente de regresin
correlacin mltiple
r
Coeficiente de determinacin r2
r2 ajustado
Observaciones
Error tpico
0,99817084
0,996345
0,996248
40
0,021615
Tabla 70: Estadstica de la regresin Placebo en Agua.
Tanto el valor del coeficiente de correlacin (cercano a 1, r =0,99817, tabla 70)

como el de coeficiente de
determinacin r2 indican una buena linealidad. El
coeficiente de determinacin da una indicacin del grado de aproximacin de

los puntos a la relacin lineal. Por lo tanto, puede afirmarse que esta relacin
lineal explica el 99,63% de la variancia de la absorbancia.
ANALTICO
- 151
-
TEST DE
PROPORCIONALIDAD
Mximo
Mnimo Observaciones Test de t
LMITES DE b
0,068005563
LIMITES DE a
0,027735216
0,0653522 no incluye el 101,77817

cero
61
-0,01439 incluye el cero 0,6414979
32
2,025
t (GL(n-2)=38,
P=0.05%) de la regresin Placebo en Agua.

Tabla 71: Test de proporcionalidad
Coeficientes
Error
Estadstico t Probabilid
tpico
ad
Ordenada en el
0,006672453
0,010401 0,641497932 0,5250499
origen (a)
4
78
Tomando
los
lmites
de
confianza
de
la
pendiente
se
comprueba
que
no
incluye
Pendiente (b)
0,066678905
0,0006551 101,7781761 6,37886Eel cero, es decir que existe una pendiente y por lo tanto una recta. El test 48
de t:
texp = |b| / sb =101,778

observa que estos lmites incluyen el cero y el mtodo presenta un ligero sesgo.
El test de t:
texp = |a| / sa = 0,641497
Este valor de t es inferior al tabulado (para p= 0.05 y GL= 38), por lo que la
probabilidad de que a = 0 es muy elevada.
Grados de
libertad
Suma de Promedio de Fexperiment F tablas

cuadrado
los
al
s
cuadrados
Regresin (SSreg)
1
4,840040
4,84004055 10358,7971 4,0981689
55
2
2
15
Falta de ajuste
3
2,8741879
(SSlof)
0,0265033
0,00883443 6,98636090
99
1
6
8
Tabla 72: ANOVA de la regresin Placebo en Agua.
Error puro (SSpe)
35
0,044258
0,00126452
41
6
Residuos (SSr)
38
0,017755
0,00046724
demostrada
la existencia
11
Total
39
4,857795
66
- 152 -
de una pendiente # 0.
3.4.3.6 CONCLUSIN MTODO ANLISIS EN AGUA

Todos los parmetros estudiados demuestran que el mtodo es vlido para el
anlisis del paracetamol en
comprimidos. La exactitud o reproducibilidad es
adecuada en todo el intervalo analizado. El nico
problema analtico es la
absorbancia de los excipientes que puede ser corregida aadiendo al patrn de

referencia la mezcla de excipientes a fin de que se tenga en cuenta.
3.5 ANLISIS COMPARATIVO DE LOS MTODOS DE

ANLISIS VALIDADOS
En base a los resultados obtenidos, los tres mtodos se han demostrado como
vlidos y fiables para la determinacin del paracetamol como materia prima y
en comprimidos. Se resumen los parmetros tabulados, todos ellos similares:
MATERIA
PRIMA
INTERVALO
LINEALIDA
D
PLACEBO CARGADO DE PRINCIPIO

ACTIVO
r
INTERVALO
r
EXACT. REPET REPROD
LINEALIDA
GLOBA (CV%) AL
D
L
100% (CV
%)
Agua -Metanol
50-150
70-130
0.9985validados.
100.44 2.06-0.06
0.91
Tabla 73:0.999
Parmetros
de los mtodos
3
8
Sol. Reguladora
60-140
0.999
70-130
0.9987 99.63 1.44-0.07
0.75
Para la materia prima el mtodo
de
anlisis
en
agua
desionizada
presenta
el
3
2
Agua de anlisis
50-150
0.9981
99.50 1.62-0.02
1.01
intervalo
ms 0.999
amplio 50-150
de entre
los ensayados
(50-150%)
y el
Desionizada
8
7
coeficiente de correlacin es ms alto aunque probablemente las diferencias no

seran significativas. No obstante los tres mtodos resultan interesantes ya que
los parmetros de validacin cumplen en todos los casos y las diferencias (si
existen no parecen significativas).
Para el anlisis del placebo cargado, la
reproducibilidad de las muestras al 100%, la exactitud son similares
con la
salvedad de que el intervalo de linealidad es mayor (50-150%) frente a 70-130%

del resto, con lo cual parece el ms interesante a priori.
Con el fin de concluir si existen diferencias estadsticamente significativas
entre ellos o no, se prepara una
ANALTICO
- 153
-
misma muestra homognea (una de paracetamol materia prima y otra de

placebo y paracetamol de
concentraciones aproximadas a 12 g /ml) que se analizan seis veces por los tres
mtodos. De cada grupo
de resultados obtenidos se hace un estudio
comparativo entre las tres tcnicas mediante un anlisis estadstico de ANOVA

en una direccin.
3.5.1 ANLISIS DE LA MATERIA PRIMA

Se prepararon 6 muestras de paracetamol patrn de una concentracin
SOLUCIN
AGUA
AGUA- fueron analizadas
SOL. en paralelo segn
aproximada de
12,00 g/ml,
las muestras
METANOL
REGULADORA
los tres mtodos, los

74.
1 resultados
0,800 se muestran
0,8010 en la tabla0,8032
8
0,801
0,7961
0,8030
9
3
0,805
0,7949
0,8057
7
4
0,804
0,7972
0,7980
Tabla 74: 3Absorbancias de las 6 soluciones patrn preparadas por los tres
mtodos.
5
0,811
0,8082
0,8000
3
6 mtodo
0,799
0,7976
0,7956un anlisis de la
Para ver si el factor
influye en
la respuesta se aplica
4
2
variancia (ANOVA), ver tabla 75 y tabla 76.
GruposAnlisis de variancia
Cuentade un factorSuma
AGUA
6
4,82323
AGUA-METANOL
SOL. REGULADORA
4,79491
4,80539
Tabla675: Anlisis de
la
variancia de los grupos.
Promedio
0,80387233
3
0,79915166
7
0,80089833
3
Variancia
1,847 E05
2,372 E05
1,393 E05
ANLISIS
Origen
de lasDE VARIANCIA
Suma de Grados
variaciones
cuadrado
de
s
libertad
Promedio
F
Probabilid Valor
de
ad
crtico
los
para F
cuadrados
Entre grupos
6,836 E-05
2
3,41802 E- 1,8272 0,194890 3,68231
05
95
6
del ANOVA.
Dentro de los grupos 0,00028058
15
1,87054
E05
Total del ANOVA
0,00034894
17
Los resultados
de una direccin
da una F
=1,82729 frente a la
experimental
Ftablas(p=0,05) de 3,6823, lo que indica que el factor de mtodo analtico no

afecta al resultado obtenido y por lo tanto las
variancias
- 154 -
entre los mtodos son similares. Es decir, no existen diferencias

estadsticamente significativas entre los tres mtodos ensayados.
3.5.2 ANLISIS SOBRE PLACEBO CARGADO DE PRINCIPIO

ACTIVO
Las muestras analizadas contenan una concentracin de 12,00 g/ml en
paracetamol y estaban cargadas con la parte correspondiente de placebo.
SOLUCIN
PLACEBO
1
AGUA
AGUAMETANOL
0,82593
SOL.
REGULADORA
0,81876
0,8177
2
2
0,8261
0,81955
0,82172
9
3
0,8079
0,81914
0,81853
7
4
0,7928
0,81331
0,80093
de
absorbancia
de
las
soluciones
6
placebo
analizadas
por los tres 0,81458
mtodos.
5
0,8112
0,80467
9
0,81308
0,80374
Anlisis6de Cuenta
variancia0,8125
de unSuma
factor
Grupos
Promedio
Variancia
4
AGUA
6
4,86857
0,8114283
0,0001231
AGUA-METANOL
6
4,90557
0,8175965
2,472 E-05
SOL. REGULADORA
6
4,86835
0,8113916
8,502 E-05
Tabla 78: Anlisis de las variancias de
los grupos estudiados.
ANLISIS
Origen
de las DE VARIANCIA
Suma de
Grados Promedio de
F
Probabilid
variaciones
cuadrad
de
los
ad
os
libertad cuadrados
Entre grupos
0,0001531
2
7,65476E- 0,9862 0,39589
05
7
Dentro de los grupos 0,0011641
15
7,76128ETabla 79: Parmetros del ANOVA de los grupos
estudiados.
05
Total
0,0013172
17
Valor
crtico
para F
3,68231
6
Los resultados del ANOVA de una direccin da una Fexperimental =0,98627 frente a la
Ftablas(p=0,05) de 3,6823, lo que indica que el factor mtodo analtico no afecta
al resultado obtenido y por lo tanto las variancias
entre los mtodos son
similares. Es decir, no existen diferencias estadsticamente significativas entre

los tres mtodos ensayados.
Con lo cual y en base a los resultados obtenidos puede considerarse el mtodo
de anlisis en agua desionizada como vlido, por lo que, siendo el ms prctico
respecto al resto de mtodos, es lgico, que se
ANALTICO
- 155
-
escoja como el mtodo de anlisis a aplicar en las prcticas de Farmacia

Galnica III. Para completar la validacin analtica del paracetamol en agua se
llevan a cabo el estudio de los parmetros de:
reproducibilidad (misma muestra leda en diferentes espectrofotmetros)
lmite de deteccin y lmite de cuantificacin
selectividad
3.6 REPRODUCIBILIDAD O
ROBUSTEZ
DEL
DE ANLISIS
MTODO
EN AGUA DESIONIZADA
La reproducibilidad es la medida de la precisin de los resultados de un mtodo
analtico efectuado sobre la
misma muestra pero en condiciones diferentes
(analista, aparato, da, etc.). Para llevar a cabo el estudio de reproducibilidad se

prepararon
muestras
de
paracetamol
en
concentraciones
crecientes
correspondientes a un ensayo de linealidad. Las muestras se analizaron en tres

equipos espectrofotomtricos diferentes5
calibrados segn el procedimiento
ESPECTROF. ESPECTROF. 2 ESPECTROF. 3

general aprobado del SDM (cal01001.doc).
De cada muestra se realizaron tres
1
rplicas de
absorcin y se confeccionaron
las 0.999739
rectas de calibracin
de los tres
Coeficiente
0.999804
0.999814
correlacin
espectrofotmetros siendo los resultados los siguientes:
Coeficiente
0.999960
0.999479
0.999628
determinacin
Factor deTabla 80: Resumen
1.000345
1.001125
de los resultados
de robustez. 0.999365
respuesta
DS factor de
0.001035
0.003661
0.001680
Se demuestra
que las rectas en los tres casos son lineales y proporcionales. A
repuesta
CV factor
de el resultado
0.103473
0.365780
continuacin
se tabula
medio obtenido
para cada 0.168125
espectrofotomtro
respuesta (%)
y se calcula la media, desviacin estndar y coeficiente de variacin de las tres

respuestas:
Espectrofotmetro n 1: UNICAM del SDM (sala control galnico, n cdigo ), espectrofotmetro n 2:

UNICAM (laboratorios generales de prcticas de la Facultat de Farmacia) y espectrofotmetro n 3 (HP del
SDM de control de calidad, n cdigo ).
- 156
-
CONCENTRACIN
PATRN (mg)
7,5
ESPECT ESPECT ESPECT A

DS
CV (%)
1
2
3
MEDIA
0,4776667 0,4713333 0,4803633 0,47645 0,003784 0,794372
44
8
7
7,6
0,4883333 0,4800000 0,4907833 0,48637 0,004615 0,948968
22
5
7
9,9
0,6286667 0,6146667 0,6371833 0,62683 0,009282 1,480891
89
8
4
10,1
0,6470000 0,6390000 0,6566033 0,64753 0,007196 1,111363
44
5
3
15,2
0,9700000 0,9480000 0,9750300 0,96434 0,011737 1,217150
33
5
3
15,1
0,9483333
0,9293333
0,9550900
0,94425
0,010903
1,154767
Tabla 81: Resultados de Absorbancia de los tres espectrofotmetros
22
9
3
utilizados.
20,0
1,2866667 1,2553333 1,2799667 1,27398 0,013472 1,057471
89
1
2
Se puede 20,1
observar que1,3080000
todos los1,2713333
coeficientes
de variacin
son 0,015037
inferiores
al 5%,
1,2866333
1,28865
1,166894
56
2 Se adjunta
1
luego aceptables para todos los casos (cumple la reproducibilidad).
22,7
1,4570000 1,4170000 1,4323333 1,43544 0,016477 1,147898
los parmetros de la recta de calibrado calculada y su
grfica
44 representacin
4
4
22,8
1,4573333
1,4196667
1,4514000
1,44280
0,016536
1,146112
(figura 22) con los resultados obtenidos.
00 ajustada
1
5
CONCENTRACIN PATRN (mg) Curva de regresin
1,8000000
A MEDIA
y = 0,0635x + 0,0016
1,2000000
A MEDIA
Pronstico A MEDIA
0,6000000
Lineal (Pronstico A MEDIA)
0,0000000
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
CONCENTRACIN PATRN (mg)
Figura 22: Recta de calibrado obtenida con las lecturas

medias de tres espectrofotmetros.
Estadsticas
de la
Coeficiente
de correlacin
regresin
mltiple
Coeficiente de determinacin r2
R2 ajustado
Error tpico
Observaciones
Tabla 82: Estadsticas de la
regresin de robustez.
0,99985104
0,99970211
0,99966488
0,00704464
10
ANALTICO
ANLISIS
DE
- 157
-
VARIANCIA
Grados de
libertad
Regresin
Residuos
Total
1
8
Suma de Promedio de los

cuadrado
cuadrados
s
1,3323694
1,3323694
0,0003970
4,9627 E-05
Valor crtico de F
26847,690
2,1534 E-15
Tabla 83: Anlisis de la variancia

del ensayo robustez.
Ordenada en el origen
(a)
Pendiente (b)
1,3327665
Coeficientes Error
Estadstico Probabilidad
tpico
t
0,00164361 0,0062511 0,2629272 0,79925127
8
7
Tabla 84: Parmetros
del ANOVA.
0,06346739 0,0003873 163,85264 2,1534E-15
4
9
Por lo tanto, queda demostrada la robustez del mtodo aunque se vare de

espectrofotmetro para determinar la Absorbancia, hecho altamente probable
en las prcticas de laboratorio de alumnos.
3.7
LMITE
DE
DETECCIN
DEL
MTODO
DE
ANLISIS EN AGUA DESIONIZADA

El lmite de deteccin es la cantidad o concentracin mnima de analito a
partir de la cual es factible
realizar el anlisis para dar un resultado
significativo. De entre los diferentes mtodos existentes para su clculo se han

escogido dos:
Anlisis repetido del blanco de la muestra (entendindose como blanco el
placebo sin principio activo) y se ha determinado diez veces su absorbancia.
Recta patrn a baja concentracin.
7.1 LMITES DE ANLISIS SEGN EL MTODO DE ANLISIS

REPETIDO DE UN BLANCO (PLACEBO)
De la mezcla placebo disponible, se prepararon 10 soluciones que fueron
diluidas por el mtodo en estudio.
- 158
-
soluci
n
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
MTODO DEL BLANCO

(ABSORBANCIA)
- 0,015000
- 0,011000
- 0,015000
- 0,011000
0,003500
0,003700
- 0,004400
0,005200
- 0,003500
- 0,004300
Tabla 85: Absorbancias ledas

de los blancos.
Se halla el valor medio y la desviacin estndar de

los datos:
Estadstica
Media
-0,0052
Desviacin estndar
0,0077
-147,6909
Tabla 86:CV%
Estadstica bsica
de las lecturas de los blancos.
Al tratarse de un mtodo espectrofotomtrico, se hace correccin frente al

blanco, con lo cual se aplican las frmulas indicadas en el apartado 3.3.5 c) de
este mismo captulo:
un replicado
tres replicados
(ppm)
(ppm)
LIMITE DE DETECCIN
0,18258
0,10541
LIMITE DE CUANTIFICACIN
0,60859
Tabla 87: Lmites de anlisis por el mtodo del blanco. 0,35137
Para su clculo se utiliza la pendiente de la recta de calibrado calculada para un

intervalo amplio que incluya
concentraciones muy bajas del analito(ver a
continuacin). Adems no debe aplicarse ningn factor de correccin al clculo

ya que el ajuste de la recta de calibrado es bueno (r= 0.99987) y la desviacin
estndar
del blanco (0,0077) es mayor que la desviacin estndar de los
trminos de la recta (0,004586104 y 0,000805979), con lo cual puede asumirse

que la mayor fuente de error se debe a la desviacin estndar del blanco.
En el caso de hacer las lecturas por triplicado, puede observarse que los lmites
de deteccin y cuantificacin disminuiran ostensiblemente, de aqu el inters
en anlisis de llevar a cabo los ensayos por duplicado (como mnimo).
Un resultado negativo de deteccin de paracetamol debe darse como inferior
a 0.1825 g/ml y uno
ANALTICO
- 159
-
positivo solo podr expresarse en su valor numrico si es superior a 0,60859

ppm. En caso de que los anlisis se realicen por triplicado los lmites se hacen
menores.
3.7.2 LMITES DE
CONCENTRACIONES
ANLISIS
POR
RECTA
BAJAS
Por otra parte se ha calculado una recta de calibrado con paracetamol patrn
que abarca concentraciones bajas de paracetamol desde la concentracin 0,34
ppm hasta 13,66 ppm. Cada muestra se analiza tres veces
y se calcula la
desviacin estndar de los 3 anlisis. Todas las desviaciones estndares

calculadas son
promediadas para obtener la desviacin estndar del mtodo
analtico. La desviacin estndar media se divide por la pendiente de la recta de

calibracin para obtener una estimacin del ruido asociado al mtodo analtico.
Este valor de ruido analtico multiplicado por 3 ser una estimacin aceptable
CONCENTRACI
ABSORB
ABSORB ABSORB
ABSORB.
SD
Factor
del
lmite de deteccin
y multiplicado
por 10 ser
una estimacin
del lmite
de
N
de
respuest
a
0,0489
0,0479y sus
0,0487
0,0485
0,141972
La recta0,3415
ajustada es
la siguiente
parmetros
de ajuste 0,0005
demuestran
la
0,6830
0,0928
0,0940
0,0938
0,0936
0,0007 0,136979
calidad del ajuste.
1,3660
0,1786
0,1783
0,1780
0,1783
0,0003 0,130517
2,0490
0,2633
0,2623
0,2625
0,2627
0,0005 0,128189
2,7320
0,3724
0,3711
0,3710
0,3715
0,0008 0,135991
3,4150
0,4385
0,4396
0,4422
0,4401
0,0019 0,128871
6,8300
0,8797
0,8816
0,8790
0,8801
0,0013 0,128856
Tabla 88: Lecturas de las soluciones patrn en
13,6600
1,7206
1,7227
1,7218
1,7217
0,0011 0,126040
cada
espectrofotmetro
estudiado
cuantificacin.
(g/ml)
SD media
Pendiente
0.008844
0.1257075
MEDIA
muestra
NIVEL DE RUIDO =
0.00740
LMITE DE DETECCIN
0.02111 ppm
LMITE DE
0.07035 ppm
Tabla 89: Clculo de
CUANTIFICACIN lmites de anlisis.
de la
Coeficiente Estadsticas
de correlacin
0,99987669
regresin
mltiple
Coeficiente de determinacin 0,99975341
r2
r2 ajustado
0,99971231
Error tpico
0,00947838
Observaciones
8
Pendiente
0,125707551
Coeficientes
Error tpico
0,000805979
Interseccin
0,011229912
0,004586104
Tabla 90: Estadstica de la regresin.
- 160
-
Se obtiene la recta de calibrado:

y = 0,125707551 x + 0,011229912
siendo x = concentracin de paracetamol en g/ml en la muestra, mientras que
y = absorbancia de la muestra.
CONCENTRACIN (mcrg/ml) Curva de regresin ajustada
media
1,8000
1,200
0
media
Pronstico media
Lineal (Pronstico media)
0,600
0
2,0
0,
0
2,0
4,0
6,
8,0
0
10,0
CONCENTRACIN (mcrg/ml)
12,
0
14,
0
Figura 23: Recta de calibrado para determinar el lmite de deteccin del mtodo
espectrofotomtrico de anlisis
Ambos mtodos arrojan unos lmites de anlisis bajos (menos de 1 ppm) lo cual
significa que el mtodo de anlisis es muy sensible y es capaz de detectar seal
aunque haya poco principio activo en la muestra.
3.8 SELECTIVIDAD O ESPECIFICIDAD DEL MTODO

DE ANLISIS
En el caso que nos compete la selectividad del mtodo espectrofotomtrico UV
de anlisis est
comprometida ya que tanto la impureza 4-cloroacetanilida
(figura 24), como el p-aminofenol (figura 25)
absorben en esta zona del
espectro.
Con lo cual la propia definicin de este parmetro, la no interferencia de
impurezas o productos de degradacin o compuestos relacionados o excipientes
en la muestra. La determinacin de la selectividad se realiza por comparacin
de los resultados analticos de un patrn de referencia con los de un patrn
conteniendo todas las sustancias anteriores que potencialmente pudieran
estar presentes. Respecto al
ANALTICO
- 161
-
anlisis de las MP, este mtodo no es suficiente puesto que la monografa obliga
a determinar y cuantificar las impurezas, con lo cual si el test de impurezas no
pasa, el resultado de contenido no importa puesto que la MP ser rechazada
por no cumplir las especificaciones.
Respecto al anlisis de comprimidos la USP24 no requiere que se realice anlisis
de impurezas en el comprimidos. Para comprobar que realmente no influirn en
los resultados del anlisis se han analizado y
comparado los siguientes
muestras:
Placebo (recin preparado, figura 19) Placebo (envejecido dos aos, figura
26). Puede comprobarse que no se han encontrado seales o un incremento
importante de la absorbancia.
Placebo + patrn (figura 20) Patrn (figura 17). No hay modificacin del
espectro ni superposicin de picos, etc.
Placebo + patrn (figura 20) Producto en estabilidad de 2 aos (figura 27).
Tampoco en este caso
aparecen seales que indiquen problemas de
degradacin o similar.
Figura 24: Espectro de absorcin de la impureza 4cloroacetanilida al 0,001% en metanol.
- 162
-
Figura 25: Espectro de absorcin de la impureza p-aminofenol al 0,001% en

agua - metanol.
Por otra parte, para comprobar la selectividad del mtodo del anlisis en los
comprimidos tambin se haba analizado las muestras:
placebo (figura 19)
placebo envejecido (figura 26)
comparacin de un placebo cargado de patrn y patrn (figura 20 y
figura 17, respectivamente) comparacin de un medicamento
degradado (prximo a la fecha de caducidad, figura 27)
Figura 26: Espectro de absorbancia de un

placebo envejecido (2 aos)
ANALTICO
- 163
-
Figura 27: Espectro de absorbancia de un

comprimido caducado (2 aos)
- 164
-
3.9
BIBLIOGRAFA
1 Base de datos en cd-rom: IPA 1979-2000
2Fairbrother J. Acetaminophen. Analytical Profiles
of Drug Substances
1974; 3: 40-72.
3 Humeida
A El Obeid, Abdullah A Al Badr.
Acetaminophen.
Analytical Profiles of Drug Substances 1985;
14: 567-585.
4Farmacopea Europea. Addendum 1999 p.737738.
5 Acetaminophen.
USP 24 The United States

Pharmacopeial Convention, Inc. 2000 p.17-18
6 Acetaminophen. The official Monograph JP XIII.

The society of Japanese Pharmacopeia. 1996:
183-184.
7 Clarkes Isolation and identification of drugs. 2
ed. Londres: The Royal Pharmaceutical Press;

1986. p. 849-850.
8 Ustun
M, Sungur S, Ersoy l. Comparison of

HPLC
spectrofotometric method for the
determination of pracetamol (acetaminophen)
and acetylsalicylic acid in tablets. Pharmazie
1992; 47 (Jul): 558-559.
9 Del
Pozo A. Farmacia Galnica Especial. Tomo

I. Barcelona: Romargraf; 1977. p. 97-98.
10Paracetamol. Real Farmacopea Espaola. 1

12ed.
British
Pharmacopoeia.
London:
Her
Madrid:
Ministerio de
Sanidad
y Consumo.
Station
Majestys
Office, 1980; 2: 800.
1997. p. 1416-1417.
ery
13
Pharmacopoeia.
London:de
Heranlisis y
11British
Formulario
AEFI. Mtodos
Station
Majestys
1988; 2: 980.Madrid: Consejo
control deOffice,
medicamentos.
ery
General Colegios Oficiales de Farmacuticos,
141988;
Su247-249.
Negre JM, Jurado F, Lizcano J, Salvad
MA, Garca
Celma MJ, Mir ML. Estudio
galnico y de estabilidad a tiempo real de
distintas especialidades farmacuticas de
comprimidos
de
paracetamol.
Ciencia
Pharmacutica 1992; 2 (6): 401-410.
15El
Fatatry HM, Aboul Enein HY, Lotfi EA.

Conductimetric
determination
of
acetaminophen. Can J Pharm Sci 1980; 15
(Jan): 19-20.
16Parimoo
P, Bharathi A, Babu RJ, Gupta CN,

Sudha Rao S.
Simultaneous and selective
determination of diclofenac sodium
and
paracetamol
in
tablet
preparations
by
titrimetry. East Pharm 1997; 40 (Apr): 111112.
17Jin
JZ. HPLC determination of three main

components in Paragesic tablets. Chin J Pharm
Anal Yaowu Fenxi Zazhi 1997;17(Jan): 25-27.
18Atay O, Dincol F. Quantitative determination of

aspirin
and
paracetamol in tablets. Farm Bilimler Derg

1995; 20(1): 13-19.
19Indrayanto
G; Sunarto A; Adriani Y.
Simultaneous assay of phenylpropanolamine
hydrochloride,
caffeine,
paracetamol,
glycerylguaiacolate
and
chlorpheniramine
maleate in Silabat tablets using HPLC with
diode array detection. ). J Pharm Biomed Anal
1985; 13(12); 1555-1559.
20Thomis R; Roets E; Hoogmartens J. Analysis of

tablets containing aspirin, acetaminophen and
ascorbic acid by high
performance liquid
chromatography. J Pharm Sci 1984; 73(Dec);
1830-1833.
21Mamolo
MG; Vio L; Maurich V. Simultaneous

quantitation of
paracetamol, caffeine and
propyphenazone by high pressure
liquid
chromatography. J Pharm Biomed Anal 1985;
3(2); 157164.
22Mamolo MG; Vio L; Maurich V.
High pressure
liquid
chromatographic
analysis
of
paracetamol, caffeine and acetylsalicylic acid
in tablets. Salicylic acid quantitation. Farmaco
Ed Prat 1985; 40(Apr); 111-123.
23Dogan
HN. Simultaneous spectrophotometric

determination of acetaminophen and caffeine
in tablets by absorbance ratio technique. Il
Farmaco 1996; 51(Feb): 145-146.
24Belal SF; Elsayed MAH; Elwalily A; Abdine H.
Spectrophotometric
determination
of
acetaminophen and
salicylamide through
nitrosation and subsequent chelation. Analyst;
1979; 104(Oct); 919-927.
25Hassan
SM, Shaaban AM. Application of

ortoghogonal functions to spectrophotometric
analysis: a stability indicating
method for
27
Tomankova H;
Vasatova M. TLC
determination
of acetaminophen.
J. Pharm.
spectrodensitometry
in pharmaceutical
(HPTLC)
Belg. 1983; 38 (5): 258-260.
analysis. Part 2. TLC
spectrodensitometric
simultaneous
26determination
Ueda H; Pereira
Rosario R; Rileyparacetamol
CM; Perrin
of propyphenazone,
JH.
Diode in array
spectroscopy
in
and caffeine
the preparation
in progress
pharmaceutical
analysis:
determination
of
Valetol tablets. Cesk Farm 1988; 37(7); 291-294
acetaminophen/codeine phosphate tablets. J
28Pharm
Sistema
de Gestin
Mediambiental.
ISO
Biomed
Anal 1979;
7(3); 309-320
14000.
29Castro M, Gascn S, Pujol M, Sans JM,
Vicente L. Validacin de mtodos analticos.
Barcelona: Monografas de AEFI; 1989.
30Benetez
C. Good manufacturing practices. La

gestin
farmacutica en la fabricacin de
medicamentos, consejos
prcticos. Madrid.
CSIF. 1996.
31Salazar R,
Validacin Industrial. Su aplicacin

a la industria farmacutica y afines. Barcelona:
Romargraf 1999.
32Caporal
Gautier J, Nivet JM. Guide de

validation
analitique:
Report
SFTP.
Methodologie et exemples STP Pharma
Practiques 1992; 2 (4): 227-239.
ANALTICO
33Nuez JL, Ballesteros P, Lastres JL. Validacin

de un mtodo
espectrofotomtrico para la
determinacin analtica de
clorhidrato de
diltiazem. Industria Farmacutica 1996; XI (1):
4145.
34La Validacin de la teora a la prctica. X

Encuentro
de AEFI.
Toledo, 5-7 methods.
octubre 1989.
35
Validation
of compendial
<1225>.Chapter
USP 24. The United States
General
Pharmacopeial Convention, Inc. 2000 p. 21492152.
36International
Conference on Harmonization.
Validation
of
analytical
procedures:
methodology.1996.
37Daz A. Cromatografa Lquida de alta eficacia

HPLC. Curso IQS. Barcelona. 30 junio-1 julio
1998.
38Caturla
MC, Azcona MT, Sans JM. Validacin

de anlisis de frmacos. Curso de Formacin
Farmaceutica Superior. Les Heures. Barcelona.
28 de abril de 1998.
39Lpez
JR. Estadstica aplicada a la validacin

de mtodos analticos. 4 Conferencia-Coloquio
sobre Estadstica Aplicada a
la Industria
farmacutica.
Comisin
de
Estadstica
Farmacutica AEFI. Barcelona. 3 mayo 1995.
40Roman E. Validacin de mtodos analticos en
el entorno de control de calidad. Industria

Farmacutica 1993;
octubre: 137bioequivalence
and septiembrepharmacokinetic
142.
studies.
Journal of Pharmaceutical Sciences
411992;
Shah81
VP(3):
, Midha
K, Dighe S, McGilveray IJ,
309-312.
Skelly
J,
Yacoobi
A
et methods
al.
Analytical
42Pasteelnick L. Analytical
validation.
Methods
Validations:
bioavailability,
En:
Berry
IR y
Nash R, editores.
Pharmaceutical Process Validation. New York:
Marcel Dekker; 1993. p.411-428.
43Gardner
JA, Coleman S, Farrow SG. Why

worry about your
analytical methods?.
Analytical Proceedings 1993; 30 (april):183185.
44Garcs
J, Marin J, Codony R. Evaluacin y

control de calidad de los mtodos de anlisis
qumico. IV Parmetros que caracterizan al
mtodo analtico: criterios de fiabilidad
(exactitud,
precisin,
sensibilidad
y
selectividad). Ciencia e Industria Farmacutica
1988; 7:182-189.
45Garcs

qumico. V Comparacin de mtodos analticos.
Ciencia e Industria Farmacutica 1988; 7:373379.
46Garcs

qumico. VI Control de calidad intralaboratorio.
Parte A: control del proceso analtico, control
de los tcnicos, control de los materiales.
Ciencia e Industria Farmacutica 1989; 8: 2329.
47Garcs

qumico. VI Control de calidad intralaboratorio.
Parte A: control de materiales (agua, reactivos
y patrones). Ciencia e Industria Farmacutica
1989; 8: 60-68.
- 165
-
de los mtodos de anlisis qumico. VII Control

de calidad interlaboratorio: determinacin de
la repetibilidad y reproducibilidad por ensayos
interlaboratorios (primera parte). Ciencia e
Industria Farmacutica 1989; 8: 137-142.
49Garcs

qumico.
VII
Control
de
calidad
interlaboratorio:
determinacin
de
la
repetibilidad y reproducibilidad por ensayos
interlaboratorios (segunda parte). Ciencia e
Industria Farmacutica 1989; 8: 191-202.
50Garcs

qumico.
VIII
Control
de
calidad
interlaboratorios: Estudios de colaboracin
segn la AOAC. Consideraciones finales sobre
lso estudios en colaboracin. Parte A: Estudios
en colaboracin segn la AOAC (primera
parte). Ciencia e Industria Farmacutica 1989;
8: 249-254.
51Garcs

qumico.
VIII
Control
de
calidad
interlaboratorios: Estudios de colaboracin
segn la AOAC. Consideraciones finales sobre
los estudios en colaboracin. Parte A: Estudios
en colaboracin segn la AOAC (segunda
parte). Ciencia e Industria Farmacutica 1989;
8: 255-260.
52Paul LW.USP Perspectives on analytical

methods validations.
Pharmaceutical Technology. 1991 march: 130141.
53Guidelines
for collaborative study procedure.

AOAC official methods of analysis. New York:
AOAC ed. 1990: 673-684.
54Brittain H.
Journal of
280.
Validation of Analytical Methodoly.

Validation Technology. 1996 :275-
55Horwitz
W. Evaluation of analytical methods

used for regulations of foods and drugs. Anal.
Chem. 1982; 54 (1): 67 A76 A.
56Horwitz
W. Evaluation of analytical methods

used for regulations. Assoc.Off.Chem. 1982; 65
(3): 525-530.
57Real
Farmacopea
Espaola.
Madrid:
Ministerio de Sanidad y Consumo; 1997. p.2930.

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UNIVERSITAT DE BARCELONA

ENCARNACIN GARCA MONTOYA

Optimizacin, validacin y modelizacin de un proceso de

Data de lectura: 5 de juny de 2001

Directors de la tesi: Drs. Josep M. Su Negre, Josep R. Tic Grau i Jordi

JUSTIFICACIN DEL TEMA Y

JUSTIFICACIN DEL TEMA Y

pedaggicos de la enseanza a distancia

comenzaban a converger y a mezclarse con las aulas tradicionales de

Universidad presencial. Y realmente, as ha sido, la mayora de asignaturas de la

este tipo de temas y

tecnologas y su aplicacin a la docencia (vase sino los trabajos o ponencias

evolucionado hasta una

reglamentacin estricta. La industria farmacutica

disfruta de una imagen de calidad excelente. Al elaborar

destinados a curar la enfermedad, salvar vidas o mejorar la calidad de vida, no

mnimo margen para el error. Sin embargo, a pesar de los

esfuerzos de control y fabricacin, se exige una mejora continua y mximas

producto, la calidad se construye durante su fabricacin (1). La calidad del

sus componentes y materiales, diseo (de producto y proceso) adecuado y

Alcanzar este nivel de calidad de los

medicamentos requiere garantizar que cada una de las etapas de la produccin

establecido previamente (cuadro 1). Y este mximo grado de

seguridad tan slo lo proporcionan los procesos de validacin. No hay

especificaciones que se aplican estn basadas en

procedimientos validados y por lo tanto, permiten comparar resultados de lotes

VALIDACIN MTODOS ANALTICOS

VALIDACIN MTODO FABRICACIN

OPTIMIZACIN MTODO FABRICACIN

MEJORA CARACTERSTICAS PRODUCTO

Cuadro 1: Resumen de las fases de formulacin de un

1.2 CONCEPTO DE VALIDACIN

clsico en la materia, que la validacin tendra su apogeo y reconocimiento

sobreentiende cuando se est

desarrollando cualquier procedimiento farmacutico, ya sea de anlisis o de

validaciones que se llevan a cabo hoy en da. Nash

planteaba como parmetros bsicos a asegurar la calibracin de los equipos y

tiene, que la definicin ha sido revisada, corregida, completada y

cuales cabe destacar los trabajos y

(10-12) que son de los ms referenciados en trabajos

posteriores o los desarrollados ms recientemente por

capacidad de calidad de los aparatos o de su

funcionamiento adecuado tambin fue comprobado en el pasado. Sin embargo,

prcticamente sin documentacin. ste es el elemento relativamente nuevo que

validacin: la documentacin. Debe quedar claro que el trmino

validacin como el de cualificacin se refieren al proceso formal y sistemtico

aos: la validacin es el sentido comn

organizado y documentado. En esta frase vuelven a estar resumidos los pilares

disponer de documentacin que demuestre lo que se

queda formalizado con la documentacin que demuestra que las pruebas

entre lotes y stos cumplen los criterios de

calidad (entre lmites definidos).

en la fase del diseo del proceso hay que

identificar los parmetros crticos del mismo y la influencia que

proceso. A continuacin se debe estudiar la tolerancia mxima de cada

(22). Este estudio proporciona los intervalos

seguros para el proceso, es decir aquellos que aseguran que

obtendr producto correcto. Por supuesto que estos intervalos se habrn

documentadas que demuestran que si se sobrepasan

estas especificaciones hay probabilidad de que el

producto no cumpla las

producto, basada en la identificacin de las

variables del proceso que ms influyen en las caractersticas de calidad del

optimizacin se tiene que estudiar aquella combinacin de parmetros que