Migrobiología General I

UNIDAD I: PRINCIPIOS
BSICOS DE
MICROBIOLOGIA
Curso Interciclo
CONCEPTOS DE MICROBIOLOGA
La ciencia de la microbiologa
La microbiologa es la ciencia que estudia los
organismos que son normalmente demasiado
pequeos para ser vistos a simple vista por el ojo
humano.
Principios bsicos de
microbiologa
La microbiologa gira en torno a dos temas
fundamentales. Uno bsico y otro aplicado:
1. Como ciencia biolgica bsica, la microbiologa
proporciona algunas de las herramientas de
investigacin mas adecuadas para estudiar la
naturaleza de los procesos vitales.
2. Como ciencia biolgica aplicada, la microbiologa

trata de muchos problemas prcticos importantes en
la medicina, la agricultura y la industria.
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Principios bsicos de microbiologa

Muchas de las enfermedades ms importantes
del hombre, y de otros animales y de las
plantas, son producidas por microorganismos.
Adems, muchos procesos industriales y
biotecnolgicos a gran escala, como la
produccin de antibiticos o de protenas
humanas, se basan en la utilizacin de
microorganismos.

Importancia de los microorganismos
Veremos cmo en ausencia de los microorganismos las
formas superiores de vida nunca habran surgido ni
podran mantenerse en la actualidad; consideremos, por
ejemplo, que el mismo oxgeno que respiramos es el
resultado de la actividad microbiana.
Adems, veremos cmo los hombres, las plantas y los
animales estn ntimamente ligados a las actividades
microbianas en cuanto al reciclado de los nutrientes
esenciales o a la degradacin de materia orgnica.
En efecto, ninguna otra forma de vida tiene una
importancia similar a la de los microorganismos en el
mantenimiento de la vida sobre la Tierra.
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De que trata la microbiologa?
Trata de las clulas vivas y de como trabajan.
Trata de microorganismos como una clase importante de
clulas que son capaces de tener una existencia y una vida
libre (independiente).
Trata de la diversidad y la evolucin microbiana de como
surgen las diferentes clases de microbios.
Trata de lo que hacen los microbios en todo el mundo en la
sociedad humana, en nuestros organismos, anmales y
plantas.
Trata sobre el papel central que la microbiologa
desempea como una ciencia
biolgica bsica y como
la comprensin de la microbiologa
nos ayuda a entender la biologa de
organismos superiores, incluyendo
los humanos.
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DESARROLLO HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA

Races histricas de la microbiologa
Aunque durante mucho tiempo se sospech la existencia

de criaturas demasiado pequeas para ser percibidas a
simple vista, su descubrimiento estuvo relacionado con la
invencin del microscopio.
En 1664 Robert Hooke describi los cuerpos fructferos de
mohos pero la primera persona que vi microorganismos
con detalle fue el holands Antonie van Leeuwenhoek,
aficionado a construir microscopios,
quien en 1684 utiliz microscopios
simples fabricados por l mismo.
Microscopio
usado por
Hooke para sus
investigaciones
Clulas en el
corcho
Observe una rebanada delgada de corcho. Llam a los

espacios vacos "clulas.
- Robert Hooke.
microbiologa
Comparados con los actuales, microscopios de
Leeuwenhoek eran bastante primitivos pero mediante una

cuidadosa manipulacin y un buen enfoque, fue capaz de
ver microorganismos tan pequeos como los procariotas.
Describi sus observaciones en una serie de cartas dirigidas

a la Royal Sodety de Londres, publicadas en 1684 en ingls.
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10
microbiologa
Sus observaciones fueron confirmadas por otros

investigadores, pero los avances en la comprensin
de la naturaleza e importancia de estos minsculos
seres fueron muy lentos.
No fue hasta el siglo XIX cuando los microscopios
fueron mejorados generalizndose su uso, lo que
permiti poner de manifiesto el alcance y la
naturaleza de las formas microbianas de vida.
La microbiologa no se desarroll como ciencia hasta
que las mejoras en microscopa permitieron una
mejor observacin de las bacterias y se idearon
tcnicas bsicas de laboratorio para el estudio de los
microorganismos.
11
microbiologa
Se saba que las enfermedades infecciosas se transmitan
de un individuo a otro pero los mecanismos de la
transmisin eran desconocidos.
Aunque las respuestas a estas preguntas se suelen asociar
con las figuras de Louis Pasteur y Robert Koch,
respectivamente, fue el botnico alemn Ferdinand Cohn
(1828- l898), un contemporneo de aqullos, quien fund
la bacteriologa.
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Cohn se interes especialmente por las
bacterias resistentes al calor, lo que le llev a
descubrir el genero Bacillus y el proceso de
formacin de esporas.
Ahora sabemos que las endosporas
bacterianas son estructuras muy resistentes al
calor, de hecho las ms resistentes de todas
las formas microbianas si exceptuamos unas
pocas bacterias que crecen mejor a
temperaturas notablemente elevadas.
Estos hallazgos de Cohn ayudaron 13
a explicar

Pasteur y el fin de la generacin espontnea
En el siglo XIX tuvo lugar una gran polmica sobre la
teora de la generacin espontnea.
La idea bsica de la generacin espontnea puede
comprenderse fcilmente. El alimento se pudre si
permanece durante cierto tiempo a la intemperie.
Cuando este material putrefacto se examina al
microscopio se encuentra que est repleto de bacterias.
De dnde provienen estas bacterias que no se ven en
el alimento fresco? Algunos pensaban que provenan de
semillas o grmenes que llegaban al alimento a travs
del aire, mientras otros opinaban que se originaban
espontneamente partir del material inerte.
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El adversario ms ferviente de la generacin espontnea fue el
qumico francs Louis Pasteur (1822-1895), cuyo trabajo sobre
este problema fue el ms riguroso y convincente.
En primer lugar, Pasteur demostr que en el aire haba
estructuras que se parecan mucho a los microorganismos
encontrados en el material putrefacto.
Describi que el aire normal contiene continuamente una
diversidad de clulas microbianas que son indistinguibles de las
que se encuentran en mucha mayor cantidad en los materiales
en putrefaccin.
Por tanto, concluy que los organismos encontrados en tales
materiales se originaban a partir de microorganismos presentes
en el aire.
Adems postul que dichas clulas en suspensin se depositan
constantemente sobre todos los objetos.
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Pasteur pens que si sus conclusiones eran correctas,
entonces no debera estropearse un alimento tratado, de tal
modo que todos los organismos que lo contaminaran fueran
destruidos.
Pasteur emple el calor para eliminar los contaminantes,
pues ya se saba que el calor destruye con efectividad los
organismos vivos.
De hecho, otros investigadores ya haban mostrado que si
una solucin de nutrientes se introduca en un matraz de
vidrio, se sellaba y se calentaba luego hasta ebullicin,
nunca se descompona.
Los defensores de la generacin espontnea criticaban tales
experimentos argumentando que se necesitaba aire fresco
para la generacin espontnea y que el aire dentro del
matraz cerrado se modificaba por el calentamiento, de modo
que no era capaz de permitir la generacin espontnea.
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microbiologa
Pasteur super esta objecin de modo simple y
brillante construyendo un matraz con forma de
cuello de cisne, que ahora se designa como un
matraz Pasteur.
En tales recipientes, las soluciones nutritivas se
podan calentar hasta ebullicin; luego, cuando el
matraz se enfriaba, el aire poda entrar de nuevo,
pero la curvatura del cuello del matraz evitaba que
el material particulado, las bacterias y otros
microorganismos, alcanzasen el interior del matraz.
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microbiologa
18
microbiologa
Sin embargo, bastaba con que el matraz se inclinara lo
suficiente como para permitir que el lquido estril
contactara con el cuello, para que ocurriera la putrefaccin
y el lquido se llenara de microorganismos.
Este sencillo experimento bast para aclarar
definitivamente la controversia sobre la generacin
espontnea.
Eliminar todas las bacterias o microorganismos de un
objeto es un proceso que ahora denominamos
esterilizacin.
Los procedimientos que usaron Pasteur, Cohn y otros
investigadores fueron finalmente mejorados y aplicados a
la investigacin microbiolgica.
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El fin de la teora de la generacin espontnea condujo, por
tanto, al desarrollo de procedimientos eficaces de
esterilizacin, sin los cuales la microbiologa no podra
haberse desarrollado como ciencia.
Pasteur consigui muchos otros xitos en microbiologa y
medicina, entre los principales destaca el desarrollo de
vacunas para enfermedades como el carbunco, el clera
aviar y la rabia, durante el periodo de 1880-1890.
Estos avances mdicos y veterinarios no slo tuvieron
importancia por si mismos, si no que permitieron que
arraigara el concepto de la teora microbiana de las
enfermedades infecciosas, cuyos principios estaban siendo
desarrollados por entonces por otro cientfico
contemporneo de Pasteur, Robert Koch
20
Koch y la teoria microbiana de las enfermedades

infecciosas
La demostracin de que los microorganismos podan causar
enfermedades impuls el desarrollo inicial
de la ciencia de la microbiologa.
En realidad, ya en el siglo XIX se pensaba que
se poda transmitir algo de una persona
enferma a una sana, y producir en esta ltima
la enfermedad de la primera, pero faltaban
las pruebas definitivas, los descubrimientos de
Ignaz Semmelweis y Joseph Lister suministraron
algunas pruebas indirectas sobre la
importancia de los microorganismos como
causa de enfermedades en el hombre, pero
la teora microbiana de las enfermedades
infecciosas no fue claramente concebida y
experimentalmente probada hasta los
trabajos del mdico Robert Koch.
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Koch llev este experimento aun ms lejos.
Tambin demostr que la bacteria poda ser cultivada
en caldos nutritivos fuera del animal y que, incluso
despus de muchas resiembras o transferencias de
cultivo, la bacteria poda causar la enfermedad aun
cuando se reinoculaba a un animal.
Es decir, la bacteria procedente de un animal
enfermo y mantenerlas en cultivo inducan los
mismos sntomas de enfermedad tras su inoculacin.
Basndose en este y en otros experimentos, Koch
formul los siguientes criterios, conocidos en la
actualidad como postulados de Koch, para demostrar
que un tipo concreto de microorganismo es el agente
etiolgico de una enfermedad especifica.
22
microbiologa
23

DESCRIPCION DEL MATERIAL Y EQUIPO.
Para el examen microscpico de los microorganismos se puede utilizar
el microscopio.
En general, el microscopio ptico se usa para observar clulas
intactas, mientras que los microscopios electrnicos se usan para
observar estructuras internas o detalles de las superficies celulares.
Todos los microscopios utilizan lentes para aumentar la imagen de una
clula de modo que se puedan observar sus detalles estructurales.
Adems del aumento, es importante la resolucin, propiedad que

permite observar dos puntos adyacentes como punto separados.
24
Descripcin de equipo
TIPOS DE MICROSCOPIO.
El microscopio ptico compuesto
El microscopio ptico ha sido una herramienta bsica para el
desarrollo de la microbiologa como ciencia y sigue siendo un
instrumento muy til en la investigacin microbiolgica.
Se utilizan en la actualidad varios tipos de microscopios pticos:
de campo claro, contraste de fases, campo oscuro y fluorescencia.
Muchas clulas bacterianas son difciles de observar bien con el
microscopio de campo claro debido a su falta de contraste con el
entorno.
Los microorganismos pigmentados son una excepcin, pues su
color aade contraste y mejora la visualizacin de las clulas.
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Aumento y resolucin
El aumento total de un microscopio compuesto es el producto

del aumento debido a la lente del objetivo por el aumento de
la lente del ocular.
Aumentos de l500 veces esta cercanos al lmite superior de
lo que se puede conseguir con un microscopio ptico
compuesto.
Este lmite viene impuesto por la propiedad de la resolucin
de las lentes.
El poder de resolucin es una funcin de la longitud de onda
de la luz utilizada y de una caracterstica propia de las lentes
denominada apertura numrica (una medida de la capacidad
de captacin de la luz por la lente).
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Como se ha indicado, la mxima resolucin alcanzable
en un microscopio ptico compuesto es de unos 0,2
um esto significa que dos objetos que estn ms
prximos que esa distancia no podrn verse como
entidades distintas y separadas.
La mayora de los microscopios utilizados en
microbiologa poseen oculares que aumentan de 10 a
15 veces y objetivos que aumentan de 10 a 100 veces.
Con aumentos de 1000 veces, los objetos de 0,2 m de
dimetro pueden apreciarse con dificultad
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Con los objetivos de 100 aumentos, y con otros

objetivos de apertura numrica muy elevada, se
emplea aceite de inmersin para que no exista aire
entre la preparacin y el objetivo. Las lentes con las
que se usa aceite de inmersin se denominan objetivos
de inmersin.
Este tipo de aceite se utiliza porque aumenta la
capacidad de captacin de luz por la lente, lo que
facilita que los rayos que emergen de la muestra con
gran ngulo (y que se perderan
por no llegar a la lente objetivo)
sean captados y percibidos.
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Tinciones: incremento del contraste para microscopia de
campo claro
Una de las limitaciones ya sealadas de la microscopia de campo
claro es el escaso contraste. Se pueden utilizar colorantes para
teir las clulas y aumentar as su contraste facilitando su
observacin.
Los colorantes son compuestos orgnicos y cada tipo de
colorante tiene afinidad por determinados componentes
celulares.
Muchos de los colorantes utilizados con frecuencia en
microbiologa estn cargados positivamente (catinicos) y se
combinan fuertemente con constituyentes celulares cargados
negativamente, como los cidos nucleicos y los polisacridos
cidos, entre los colorantes catinicos se pueden citar el azul de
metileno, el cristal violeta y la safranina.
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Dado que las superficies celulares estn, por lo general,
cargadas negativamente, estos colorantes se combinan
con estructuras de la superficie de las clulas y, por tanto,
son excelentes colorantes de aplicacin general. Las
tinciones ms simples se realizan sobre preparaciones
previamente secadas
Sobre un portaobjeto con una suspensin de
microorganismos previamente secada y fijada, se derrama
una pequea cantidad de una solucin diluida del colorante
y se mantiene en contacto durante una o dos minutos; a
continuacin, se lava varias veces con agua y se seca.
Este tipo de preparacin suele observarse con un objetivo
de inmersin
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Las tinciones diferenciales son aquellas que no tien del mismo
modo todos los tipos de clulas.
Una tincin diferencial muy importante y ampliamente usada en
bacteriologa es la denominada tincin de Gra m.
Dependiendo del resultado de esta tincin, las bacterias pueden
dividirse en dos grandes grupos.
Gram positivas y Gram negativas.
Una vez terminada la tincin de Gram, las bacterias Gram
positivas aparecen de color morado mientras que las Gram
negativas presentan color rojo.
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Estufas
Se hallan en el comercio estufas de varios tamaos.

Por lo general, es mejor adquirir el modelo ms
grande que sea posible colocar, aunque esto puede
crear problemas de espacio en los laboratorios en
los que se utilicen diferentes temperaturas de
incubacin.
Las estufas pequeas experimentan variaciones de
temperaturas ms amplias cuando se abren sus
puertas que los grades modelos.
Aunque las estufas es raro que tenga avera, es
aconsejable, antes de elegir una, asegurarse de
que disponen de servicio de mantenimiento. Los
circuitos no son complejos, pero requieren para
repararlos un experto conocimiento tcnico.
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Baos
El contenido de un tubo de ensayo introducido en un bao mara alcanza
la temperatura deseada mucho ms rpidamente que en una estufa. Por
eso dichos instrumentos se utilizan en incubaciones de corta duracin, si
el nivel de agua en el bao alcanza la mitad o los dos tercios de la altura
de la columna del lquido en el tubo, se producen corrientes de
conveccin que mantienen perfectamente mezclados el contenido del
tubo y aceleran algunas reacciones, como la de aglutinacin.
Todos los baos modernos van provistos de agitadores elctricos y en

algunos, el calefactor, el termostato y el agitador forman una unidad,
que se separa fcilmente del bao para utilizarla en otro lugar o para su
cuidado. Los baos deben estar aislados, para impedir que pierda calor a
travs de las paredes
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Los baos deben ir provistos de tapas que impidan
la prdida de calor y la evaporacin.
Dichas tapas deben estar inclinadas de forma que
el agua de condensacin no gotee sobre el
contenido.
Para evitar depsitos calcreos sobre los tubos y las
superficies internas, solamente debe usarse agua
destilada.
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AUTOCLAVES
nicamente deben usarse autoclaves diseadas para
trabajar en laboratorio. Los tipos de autoclaves son:
El tipo de olla de presin.
Los modelos de desplazamiento de la gravedad con
descarga automtica de aire y vapor condensado.
OLLA DE PRESIN
El tipo ms comn es un aparato para
agua hirviendo a presin. Tiene una
cmara vertical de metal provisto de
una tapa metlica fuerte que se aprieta
y cierra hermticamente mediante un aro
de goma. Se dispone en la tapa una
espita para la salida de aire y del vapor.
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EQUIPO DE VIDRIO, DE PLSTICO Y MATERIAL PEQUEO
En el trabajo microbiolgico ordinario son satisfactorios los
tubos y matraces de vidrio sdico.
En trabajos de investigacin est justificado el empleo de vidrio
resistente, ms caro. Es importante considerar si el material de
vidrio debe ser lavado o desechado.
En algunas circunstancias, puede ser ms econmico comprar
material de vidrio del ms barato, a granel, y usar placas de
petri de plstico, que emplear mano de obra para la limpieza.
El material de plstico se agrupa en dos categoras:
(1)Artculos de un solo uso, como placas de petri, recipientes
para muestras y asas de plstico, que pueden destruirse si se
esterilizan en el autoclave y no pueden esterilizarse por
mtodos laboratoriales ordinarios, y
(2)Material recuperable, que puede esterilizarse al autoclave
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Medios de cultivo
Los medios se emplean para tres fines principales
a) Para desarrollar y conservar cultivos bacterianos.
b) Para facilitar la produccin de microorganismos en
algn producto determinado o combinacin de productos.
c) Para estudiar la accin de los microorganismos sobre
algunas sustancias del medio
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Medios de cultivo
Elementos necesarios para el desarrollo de los
microorganismos
Agua (adecuada presin osmtica)
Concentracin de iones hidrogeno.
Tensin superficial,
No tener sustancias que puedan inhibir el crecimiento de los
microorganismos.
Carcter xido reduccin.

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Medios de cultivo: Clasificacin
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Medios de cultivo
Medios basales: se utilizan como una base de agar y
otras sustancias para prepara medios especiales.
Por definicin pueden ser:
M.Enriquecidos
M.diferenciales
M.para pruebas bioquimicas
Ejemplos:
Base de agar Trypticase
Base de agar Rojo Fenol
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Medios de cultivo
Medios para pruebas bioqumicas : Se utilizan para
detectar enzimas o sustancias existentes en los
microorganismo que sirven para diferenciar organismos que
tienen caractersticas morfolgicas y de tincin similares.
Ejemplo:
Caldo para prueba de Ureasa.
Preparacin de los Medios de Cultivo
Utensilios
No se deben usar recipientes de cobre o de zinc. Pueden
disolverse en los medios de cultivo pequeas cantidades de
estos metales que son bactericidas
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Medios de cultivo
Sustancias inhibidoras
Pueden hallarse presentes en peptonas, agar, hidratos de
carbono y otras sustancias qumicas, no preparadas
especialmente para medio de cultivo, metales como zinc y
cobre y otras sustancias inhibidoras tales como cidos
grasos.
Por razones de economa y de seguridad, no es conveniente
utilizar cualquier producto que no est garantizado de calidad
bacteriolgica y los encargados de compras deben ser
disuadidos seriamente de buscar, por razones de
economa, proveedores de ingredientes de medios, incluso
productos qumicos y colorantes, que sean desconocidos por
los bacterilogos.
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Medios de cultivo
Debe utilizarse agua destilada, agua destilada en
vidrio y agua desionizada, aunque debe verificarse
que algunos oligoelementos necesarios para el
desarrollo bacteriano se aportan realmente por el
agua destilada, por el vidrio o por las impurezas
identificadas en los reactivos qumicos de calidad
analtica.
El calentamiento excesivo y el fundido repetido
pueden destruir factores de crecimiento y la capacidad
de gelificacin y producir oscurecimiento o
modificacin del pH del medio de cultivo.
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Medios de cultivo
Ajuste del pH
El pH de los medios reconstituidos o preparados en el laboratorio

debe comprobarse con un pH-metro. Todas las lecturas finales del
pH deben hacerse con el medio a temperatura de laboratorio, ya
que el medio caliente puede dar reacciones falsas con algunos
indicadores
Envasado, distribucin en tubos y vertido de placas de

medios de cultivo
Los medios lquidos pueden distribuirse en tubos con llenadores
automticos comerciales.
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Medios de cultivo
Se han presentado varios millones de formula para cultivo

de bacterias. Pueden prepararse en forma de medios no
sintticos en el laboratorio.
1. Infusin de Carne.
2. Ebullicin de Carne.
Estas preparaciones las hizo Frost en 1909. Preparo,

grandes lotes de medios y despus deshidrato la mezcla.
En 1915 se comenz a elaborar comercialmente medios
de cultivo deshidratado en E.E. U.U.; Estos medios
deshidratados se rehidratan con agua purificada.
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Medios de cultivo
Preparacin recomendable de medios de cultivo.
1. La cantidad necesaria del material en polvo se le agrega la
mitad del volumen de agua.
2. Despus de mezclar se agrega el resto de agua, teniendo
cuidado de que los lados del recipiente se laven y se agita el
contenido. (El agua calentada de 4550C favorece la dispersin
y disuelve mas rpido).
3. El reposo de la preparacin de agar durante cinco minutos
mezclando ocasionalmente es de ayuda para obtener una
suspensin uniforme.
4. El calentamiento es directo. Se aplica calor suavemente y se
agita la preparacin para evitar que se queme. (Se hierve de 1 a
2 minutos).
Esterilizacin
Se siguen las instrucciones que aparecen en la etiqueta (15 Lb.
de presin por 15 minutos)
Los medio que contienen carbohidratos se esterilizan de 116 a
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118C como mximo.
Medios de cultivo
Almacenamiento de Medios Deshidratados
Cuando se ha abierto para su empleo los frascos de medios en
polvo, deben cerrarse lo antes posible para evitar su hidratacin.
Debe almacenarse en un lugar fro y seco lejos de los aparatos
de calentamiento y de las ventanas. Los frascos de medios que
se hidratan en su superficie deben desecharse.
54
Los microorganismos como clula

La clula es la unidad de vida fundamental.
Una clula es una entidad aislada de otras clulas por
una membrana celular (y tal vez por una pared
celular) que contiene en su interior diversos
compuestos y estructuras subcelulares.
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La membrana celular es la barrera que separa el interior de
la clula del exterior. Dentro de la membrana celular se
encuentran las diversas estructuras y componentes que
hacen posible que la clula funcione.
Son estructuras clave el ncleo o nuclolo, donde se
guarda la informacin gentica, el cido
desoxirribonucleico (DNA] necesario para hacer nuevas
clulas, y el citoplasma, donde se encuentra la
maquinara para el crecimiento y otras funciones
celulares.
Todas las clulas estn formadas por cuatro tipos de
componentes qumicos: protenas, cidos nucleicos,
lpidos y polisacridos. En conjunto, se denominan
macromolculas .
La naturaleza qumica y la disposicin de las
macromolculas de una clula de un organismo es lo que
diferencia una clula de otro organismo. 57

De dnde proceden las primeras clulas?
De
alguna forma, la primera clula debi de originarse a
partir de algo no celular, algo anterior a la clula, una
estructura pre-celular.
Aunque la formacin de la primera clula hace mas de
3.800 millones de aos fue un suceso poco probable, que
debi necesitar varios cientos de millones de aos para
que ocurriera, una vez que la primera clula apareci se
produjeron una serie de sucesos altamente probables,
tales como el crecimiento y la divisin, originndose
poblaciones de clulas a partir de la cuales tuvo lugar la
evolucin mediante la seleccin de nuevas caractersticas
y mayor diversidad.
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De ese modo, a travs de miles de millones de
aos de cambio evolutivo, surgi la impresionante
diversidad de tipos celulares que existen en la
actualidad.
Debido a que todas las clulas estn construidas
con los cuatro clases de macromolculas bsicas
mencionadas anteriormente y comparten muchos
rasgos en comn, se piensa que todas las clulas
descienden de un antecesor comn, el antecesor
universal de la vida.
59

Caractersticas de los sistemas vivos
Cuales son las propiedades esenciales de la vida? Qu

diferencia las clulas de los objetos inanimados?
Todos los organismos celulares son estructuras altamente
organizadas que muestran alguna forma de metabolismo.
Esto es, las clulas toman sustancias qumicas del medio
y las transforman, conservan parte de la energa de
dichas sustancias de modo que las clulas puedan usarla,
y luego eliminan los productos de desecho. Todas las
clulas poseen: metabolismo, reproduccin,
diferenciacin, movimiento, evolucin,
comunicacin.
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Caractersticas de los grupos principales que

estudia la microbiologa
GRUPOS PRINCIPALES QUE ESTUDIA LA MICROBIOLOGA
A quienes estudia la microbiologa? la microbiologa estudia
cinco grupos principales, estos son:
Hongos
Protozoarios
Algas
Bacterias
Procariontes
Virus
Eucariontes
Algas: Organismo que forman

oxigeno como producto de la
fotosntesis.
Protozoos: Son organismos no
fotosinttico hetertrofos.
Hongos: Protistas no
fotosinttico, son formas
miceliales
Segn la forma de organizacin
celular estos pueden ser:
Eucariontes y procariontes
63
Caractersticas de los grupos

principales que estudia la
microbiologa
Bacterias
Entre las principales caractersticas de las bacterias figuran

su tamao, su forma, su estructura y su tipo de agrupacin.
Estas caractersticas constituyen la morfologa de la clula.
El tamao de una bacteria no es exacta.
Segn su especie, las bacterias son esfricas, en forma de
bastn o de espiral.
En algunas especies, las bacterias se organizan en grupos,
siendo los ms comunes de ellos pares, racimos, cadenas y
filamentos, conviene conocer estas formas de agrupacin
porque con frecuencia son caractersticas de un grupo
taxonmico, por ejemplo un gnero.
Algunas especies de bacterias poseen tambin apndices
que se ponen de manifiesto gracias a las tcnicas
especiales de tincin o por el microscopio electrnico
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microbiologa
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microbiologa
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microbiologa
Las estructuras de las bacterias pueden ser:
Externas como: flagelo, capsula, fibrillas o pilli y pared
celular.
CAPSULA
Algunas bacterias estn rodeadas por una sustancia viscosa
que forma una cubierta o envoltura alrededor de la clula.
Esta estructura se denomina cpsula, o capa mucosa.
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microbiologa
Muchas bacterias G (-) poseen apndices rgidos en la superficie
denominados pili (pelo) o fibrias (flecos).
Son mas cortos y delgados que los flagelos y al igual que estos
se componen de sub unidades de protenas, pueden
diferenciarse en dos clases, los poliordinarios que intervienen en
la adherencia de las bacterias simbiticas a las clulas del
husped, y los pilisexuales que se unen a las donadoras y
aceptoras en la conjuncin bacteriana.
La virulencia de ciertas bacterias patgenas no solo depende de
la produccin sino tambin de los antgenos de colonizacin (pili
que da a la clula propiedades adherentes).
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microbiologa
69

microbiologa
FLAGELOS
Los apndices capilares sumamente finos que salen a travs de la

pared celular y que se originan en una estructura granular (cuerpo
basal) en el citoplasma inmediatamente por debajo de la
membrana celular, se llaman flagelos.
La longitud del flagelo suele ser varias veces la de la bacteria que
lo posee, pero su dimetro es slo una pequea fraccin del
dimetro de la clula, por ejemplo, 10 a 20 mm.
No todas las bacterias poseen flagelos; de las bacterias que se
conocen como eubacterias o bacterias verdaderas es posible
afirmar de manera general que muchas especies de bacilos tienen
flagelos, pero muy rara vez se aprecian en los cocos.
Por ejemplo, entre los bacilos gram negativos, el gnero
Pscudomonas se caracteriza por flagelos polares y el gnero
Escherichia por flagelos peritricos.
70

microbiologa
71

microbiologa
Internas: si se quita la pared celular a una bacteria, el
resto del cuerpo incluye la frgil membrana citoplsmica
que normalmente reventara por el choque osmtica, a
esta estructura le llaman protoplasto.
Los protoplastos son cuerpos redondos que toman la forma
esfrica desde el momento en que carecen de la pared
celular externa rgida.
La membrana citoplsmica es una estructura de extrema
importancia funcional. Es una membrana semipermeable
selectiva que regula el paso de nutrientes y productos de
desecho dentro y fuera de la clula, en la membrana
citoplsmica se localizan varias enzimas que intervienen en
el transporte de electrones y en la fosforilacin oxidativa.
El dao a esta membrana por maltrato con agentes fsicos o
qumicos ocasiona la muerte de la clula aunque no haya
alteraciones morfolgicas detectables
72

microbiologa
Introducciones membranosas
Las introducciones membranosas y las extensiones
dentro de la bacteria intervienen en varios procesos
metablicos y de la reproduccin. Participan en la
formacin del tabique durante el proceso de la divisin
bacteriana.
El sistema de los mesosomas est conectado de manera
compleja con el material nuclear y su replicacin.
Se puede llegar a la conclusin de que la estructura de
los mesosomas bacterianos es en extremo importante y
conectada con varios procesos vitales de la clula por
que son una extensin de la membrana citoplsmica.
73

microbiologa
Citoplasma
El material celular contenido dentro de la membrana
citoplsmica se divide en el rea citoplsmica de
aspecto granular, rica en RNA; el rea cromosmica o
nuclear rica en DNA; y la parte lquida que disuelve
las sustancias nutritivas.
El RNA en combinacin con protenas, forma cuerpos
particulados o macromolculas
74

microbiologa
Algunas bacterias
de pared gruesa
resistencia. Estas
ms comnmente
ENDOSPORA
tienen la facultad de producir cuerpos ovales

(uno por clula) que es una clula de alta
formas resistentes se llaman endosporas o
esporas.
Todos los organismos de los gneros Bacillus y Clostridium se

caracterizan en parte por la capacidad para producir endosporas.
Las bacterias que forman esporas se desarrollan y reproducen
durante muchas generaciones como clulas vegetativas.
Sin embargo en alguna etapa del desarrollo del cultivo en un
medio nutritivo adecuado, dentro del citoplasma vegetativo se
sintetiza un nuevo citoplasma destinado a convertirse en espora.
75

microbiologa
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77

microbiologa
Cuando las bacterias se siembran en un medio y condiciones

adecuadas, ocurre un incremento muy marcado en el nmero
de clulas en periodos muy cortos.
En algunas especies se alcanza la poblacin mxima en 24 h,
en cambio, en otras se necesita un periodo ms prolongado
para alcanzar el mximo desarrollo.
El termino desarrollo que suele aplicarse a bacterias y otros
microorganismos, se refiere a los cambios que sufren cada
organismo.
Reproduccin Asexual
El procedimiento ms importante en el ciclo de desarrollo de
las poblaciones bacterianas, es la fisin binaria transversal en
la cual una clula se divide en dos despus de desarrollar una
pared transversa, es un procedimiento de reproduccin
asexual.
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microbiologa
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microbiologa
El crecimiento se define como un aumento en el nmero de

clulas microbianas en una poblacin que tambin se puede
medir como aumento en la masa microbiana.
La tasa de crecimiento es el cambio en la cantidad de clulas
o de masa por unidad de tiempo.
CURVA DE CRECIMIENTO
Si se inocula un medio lquido con clulas microbianas,

tomadas de un cultivo que previamente ha crecido hasta la
saturacin el cual peridicamente se ha determinado el
nmero de clulas viables, por mililitro, y trazado una grfica
de l, generalmente se obtiene una curva del tipo siguiente.
80

principales que estudia la microbiologa
La reproduccin sexual consiste en la transferencia de material
gentico (nuclear) de una bacteria a otra. Este intercambio
requiere de DNA y puede realizarse por:
a) Conjugacin: Es un proceso de apareamiento en el que dos
bacterias se funden temporalmente.
b) Transformacin: Es el intercambio de DNA qumicamente
puro.
c) Transduccin: Es el intercambio de DNA por medio de un
virus bacteriano
81

microbiologa
82

microbiologa
Fases de la curva de crecimiento:
Fase de latencia: este periodo consiste en la
adaptacin de las clulas microbianas a su nuevo
ambiente.
Fase Exponencial: como el nombre lo indica, en esta
fase las clulas se encuentran en un estado de
crecimiento sostenido.
Fase Estacionaria Mxima: ante el agotamiento de
nutrimentos en el medio o la acumulacin de
metabolitos txicos el crecimiento cesa.
Fase de Declinacin: esta fase, tambin conocida como
fase de muerte, representa el decremento de clulas
debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad.
83

Un medio de cultivo adecuado debe contener todos los
nutrimentos requeridos por el microorganismo que va
ser cultivado y factores tales como:
pH,
temperatura,
presin osmtica,
Nutrientes
84

microbiologa
Los virus
Los virus son los agentes infecciosos ms pequeos (20 a
300 nm de dimetro), que contienen como genoma slo una
clase de cido nucleico (RNA o DNA).
El cido nucleico se encuentra encerrado en una cubierta
protenica, la cual puede estar rodeada por una membrana
que contiene lpidos. Toda la unidad infecciosa se denomina
virin.
Los virus son inertes en el medio extracelular; se replican
slo en clulas vivas y su parasitismo es a nivel gentico. El
cido nucleico viral contiene la informacin necesaria para
programar a la clula husped infectada y que sintetice
varias macromolculas especficas del virus requeridas para
la produccin de la progenie viral.
85

microbiologa
La gama del husped para un virus determinado puede
ser amplia o extraordinariamente limitada.
Se sabe que los virus infectan microorganismos
unicelulares como micoplasma, bacterias y algas, y todas
las plantas y los animales superiores.
Mucha informacin acerca de las relaciones virushusped se ha obtenido de los estudios con
bacterifagos, los virus que atacan a las bacterias.
86

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microbiologa
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microbiologa
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microbiologa
91
Los hongos
Los hongos constituyen un grupo de microorganismos de gran

inters prctico y cientfico para los microbilogos.
Sus manifestaciones nos son familiares pues hemos visto su
crecimiento azul y verde en las naranjas, limones y queso; o
blanco y gris sarroso en la superficie del pan y del jamn; tambin
hemos visto setas en el campo (o en los estantes de las
abarroteras), e incluso algunas especies venenosas en los
bosques.
As pues, los hongos tienen muchas manifestaciones morfolgicas.
En general, en los hongos se incluyen los hongos y las levaduras.
El trmino moho, se usa con poca precisin pues comprende lo
mismo al tejn, la roya, el aublo, las setas, el bejn y los mohos
limosos.

microbiologa
92
Aunque los hongos son un grupo grande y muy variado de

microorganismos eucarioticos, tres grupos de hongos tienen una
gran importancia prctica:
1. los mohos.
2. las levaduras.
3. las setas.
Los hbitats de los hongos, son muy diverso algunos son

acuticos, y viven principalmente en el agua dulce, pero tambin
se conocen algunos hongos marinos.
Sin embargo la mayor parte de los, hongos tienen hbitat
terrestres, sea en la tierra o en materia vegetal muerta, estos dos
tipos desempean una funcin crucial en la mineralizacin del
carbono orgnico de la naturaleza.

microbiologa
93
Los hongos son hetertrofos pues como saprfitos obtienen

su alimento de la materia orgnica muerta o como parsitos
se alimentan de huspedes vivos.
Como saprfitos destruyen plantas y restos de animales
degradndolos a formas qumicas simples que pasan a
formar parte del suelo y, finalmente, son absorbidas por
otras generaciones de plantas.
Esta actividad de los hongos es en gran parte, la causa de la
mayor o menor fertilidad de la tierra. El crecimiento
saproftico de los hongos tambin puede ser daino y causar
cuantiosas prdidas si ocurre en maderas, cereales,
alimentos u otros artculos comerciales e industriales.

microbiologa
94
Los hongos son microorganismos eucarioticos

quimioorganotrficos.
Se reproducen de manera natural por medio de esporas,
aunque hay algunas excepciones (adems, casi todas las
partes de un hongo son, en potencia, capaces de
desarrollarse; un pequeo fragmento es suficiente para iniciar
un individuo nuevo).
No tienen clorofila. Sus cuerpos son usualmente alargados o

filamentosos (5 a 10 um de grosor y por lo general,
ramificados). Los filamentos poseen pared celular que
contiene quitina o celulosa, o las dos. La mayor parte de los
hongos son inmviles, si bien pueden tener clulas
reproductoras mviles.

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El
talo
de
los
hongos
se
compone
caractersticamente
de
filamentos
tubulares
microscpicos llamados hifas. El conjunto de hifas
se denomina micelio.
La mayor parte de los hongos son filamentosos,
aunque algunos, como las levaduras comunes, son
unicelulares. La pared de las hifas es semirrgida.
Los mohos, al igual que los hongos, pueden tener
uno de los tres tipos de hifas.
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Los protozoos
Los protozoos son microorganismos sin clorofila, clasificados
como formas inferiores de vida en el reino animal, estos
pueden existir como clulas aisladas que pueden
distinguirse de otros protistas eucariticos por su capacidad
de desplazarse durante algn perodo de su ciclo biolgico.
Los protozoos son predominantemente de tamao
microscpico. A veces se forman colonias de protozoos, que
son agregados de clulas independientes.
100

microbiologa
Se estima que hay unas 45 000 especies de protozoos de

acuerdo con una recopilacin realizada recientemente.
Algunos son inofensivos, muchos tiles, y otros capaces de
causar enfermedades a los animales o a las plantas. De las
45 000 especies mencionadas, casi 20 000 son fsiles,
18000 de vida libre y 7000 parsitos.
101

Los protozoos ocupan un lugar importante en la cadena
alimentara de las comunidades naturales en donde hay
agua libre.
Los flagelados autotrficos abundan en el mar y agua
dulce, o viven en asociaciones simbiticas con animales a
varios niveles de organizacin que incluyen otros
protozoos.
Algunos grupos forman un rengln importante de la dieta
de gran nmero de animales. Otros son de particular
importancia para la economa de muchas comunidades.
102

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103
Una poblacin de protozoos en un ambiente acutico est

influenciado por los constituyentes qumicos del agua
Algunos protozoos prosperan en aguas ricas en oxgeno
pero pobres en materia orgnica (manantiales, arroyos o
lagunas), mientras que otros requieren agua rica en
minerales.
Algunos crecen en aguas donde hay oxidacin activa y
degradacin de la materia orgnica (la mayor parte de los
que viven en el agua dulce, como los ciliados); en
cambio, otros prefieren aguas con muy poco oxgeno pero
ricas en productos en descomposicin (por ejemplo en el
fango y aguas negras.
Como regla general, los protozoos que se nutren de una
gran variedad de organismos estn muy difundidos;
aquellos que se alimentan de unas cuantas especies,
tienen limitada su distribucin.

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106
Los miembros del filum nematelmintos, clase nematodos

son un grupo muy variado, que consiste en un nmero de
gusanos pequeos que ocupan esencialmente todo el
hbitat en los cuales pueden sobrevivir los organismos
multicelulares terrestres, marinos y de agua dulce.
Los nemtodos infectan casi todas las especies
vegetales y abundan en toda clase de huspedes.
Los nemtodos verdaderos son gusanos cilndricos o
fusiformes cubiertos por una cutcula muy resistente,
posee un aparato digestivo sencillo con boca y ano, una
cavidad corporal llena de lquidos, que no esta revestida
de epitelios como en otros animales y usualmente con
separacin de sexo, estando sus glndulas sexuales en
continuidad con sus conductos, en forma de finos tbulos.

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Los patrones de infeccin varan en forma amplia. Los

nematodos intestinales humanos se transmiten con los
alimentos, el agua y el suelo.
Ascaris y Trichuris trichiura (tricocfalo) se transmiten por
huevos que resisten la desecacin y otros factores
ambientales adversos; uncinarias y (el pequeo gusano
redondo del hombre), infecta por medio de larvas
infecciosas en su tercera etapa, que atraviesan la piel;
Trichinella spiralis (triquina) se transmite por carne mal
cocida, por lo comn , que contiene larvas enquistadas.

microbiologa
109
Eucariontes : Tienen un ncleo verdadero, una estructura

membranosa de separacin dentro de la cual se encuentran los
cromosomas que contienen el material de herencia.
Procariontes : No tienen ncleo verdadero y su material de
herencia esta contenido dentro de una molcula de cido
desoxirribonucleico (ADN), nico y desnuda.
.
Clasificacin de los organismos

microbianos genero y especie
110
Los microorganismos son tan diversos que es til darles

nombres y para hacerlo debe haber formas que nos
permitan diferenciarlos.
Los microorganismos emplean el sistema binominal de
nomenclatura. El nombre genrico se aplica a varios
organismos emparentado, mientras que cada tipo, diferente de
organismo del genero tiene un nombre especificos.
Saccharomyces
Saccharo en griego----------------azcar
Myces-----------------------------------hongo
111

112
ACTIVIDAD DE LOS MICROORGANISMOS

Una de las metas de los microbilogos es comprender como
trabajan los microorganismos y a travs de esta comprensin
disear procedimientos para incrementar los beneficios y
suprimir los perjuicios. La microbiologa ha jugado un
importante papel en el avance de la salud y el bienestar del
hombre.
Los microorganismos como agentes infecciosos.

Cuando en el siglo anterior se inicio las principales causas
de muerte eran las enfermedades infecciosas; actualmente
tales enfermedades solo son de importancia menor.

113
El control de las enfermedades infecciosas es el resultado

de nuestro entendimiento y comprensin de los procesos
infecciosos.
Adems, las enfermedades microbianas an constituyen la
causa principal de muerte en muchos de los pases menos
desarrollados del mundo. Pero por otro, lado, debemos
sealar que la mayor parte de los microorganismos no son
perjudiciales para la humanidad.
De hecho gran parte de los microorganismos no causan
dao alguno, y es mas en realidad son beneficios, al
efectuar procesos de gran valor para la sociedad humana.
Microorganismos en la
naturaleza
114
Microorganismos, energa y medio ambiente

En lo que respecta a la energa, los microorganismos desempean
funciones claves.
La mayor parte del gas natural (metano) es un producto
bacteriano, derivado de las actividades de las bacterias
metanognicas, los microorganismos fototrofo pueden utilizar la
luz como fuente de energa para la produccin de biomasa, es
decir, energa acumulada en biomasa de organismos vivos.
La biomasa microbiana y los materiales de desecho, como la
basura domestica, los excedentes de cosechas y los residuos
animales, se pueden convertir en combustible, como el metano y
etanol, por las actividades degradativas de los microorganismos.
115
naturaleza
POBLACION, COMUNIDADES Y ECOSISTEMA

En la naturaleza las clulas viven asociadas con otras clulas, en
conjunto llamadas poblaciones.
La ubicacin en el ambiente en que una poblacin vive se llama
habitat de esa poblacin.
Ecologa: En la naturaleza, las poblaciones de clulas
raramente viven solas. Ms bien, las poblaciones de clulas
viven en asociacin con otras poblaciones de clulas, en
conjunto llamadas comunidades.
Una comunidad es un conjunto de poblaciones que viven juntas
en el mismo hbitat.
naturaleza
116
Los microorganismos funcionan como poblaciones

(conjunto de organismos similares), y como comunidades
(mezcla de poblaciones microbianas diferentes).
Los microorganismos han evolucionado interactuando con
el mundo inanimado y con otros organismos, siendo esta
interaccin mayoritariamente beneficiosa.
Los microorganismos, al interactuar con otros organismos

y su ambiente, tambin contribuyen al funcionamiento de
los ecosistemas.
Microorganismos en la naturaleza
117
naturaleza
118
Ambientes acuticos y microorganismos

Un factor importante en los medios acuticos es el flujo
de materiales, ya sean en forma de gas, slido o en
disolucin, que provoca cambios en sus
concentraciones.
Estos cambios son caractersticos de los medios

acuticos y los microorganismos son capaces de
responder rpidamente para seleccionar su ambiente
ms adecuado.
La mezcla y el flujo de los nutrientes, O2 y productos
residuales que se producen en los medios de agua dulce
y marino son los factores dominantes que controlan la
comunidad microbiana.
naturaleza
119
120
naturaleza
La comunidad microbiana
El agua proporciona un ambiente que favorece la
existencia de muchos tipos de microorganismos.
La diversidad microbiana depende de diferentes

factores, como la disponibilidad y concentracin de
nutrientes (desde extremadamente bajas a muy altas),
las transiciones de zonas aerbicas a anaerbicas, y la
mezcla de oxidantes y reductores en este ambiente
dinmico.
Adems, la penetracin de luz en muchas zonas
anaerbicas crea ambientes propicios para ciertos tipos
de microorganismos fotosintticos.
naturaleza
Anlisis sanitario del agua
El control y la deteccin de microorganismos indicadores
y patgenos constituyen una parte importante de la
microbiologa sanitaria.
Las bacterias del tracto intestinal no suelen sobrevivir en
el medio acutico, estn sometidas a un estrs fisiolgico
y pierden gradualmente la capacidad para formar
colonias en medios diferenciales y selectivos.
Su velocidad de mortalidad depende de la temperatura
del agua, los efectos de la luz solar, las poblaciones de
otras bacterias presentes y la composicin qumica del
agua.
Se han desarrollado mtodos para intentar resucitar
estos coliformes estresados antes de su identificacin
con medios selectivos y diferenciales.
121
122
123
Los microorganismos del suelo
Los suelos son sistemas dinmicos y tardan un tiempo en
formarse, dcadas o incluso siglos; la materia orgnica del
suelo puede tener miles de aos de antigedad.
Debido a diversas alteraciones y erosiones, cambios en el
crecimiento de las plantas, la temperatura, la lluvia, un suelo
que ha tardado cientos de aos en formarse puede ser
degradado rpidamente si se activa una comunidad
microbiana. Esto puede ocurrir, por ejemplo, cuando se drena
una cinaga, al acceder el oxgeno a la materia orgnica
acumulada.
En la mayora de los suelos, los mayores productores de
materia orgnica son las plantas vasculares, aunque las algas,
cianobacterias y otras bacterias fotosintticas tambin
contribuyen a estos procesos, especialmente en los ambientes
desrticos.
124
El suelo es el hbitat de una gran variedad de organismos,

incluyendo
bacterias,
hongos,
protozoos,
insectos,
nematodos, lombrices y muchos otros animales. Los virus
tambin se encuentran en el suelo.
Esta compleja comunidad biolgica contribuye a la formacin,
mantenimiento en algunas situaciones, a la degradacin y
desaparicin de los suelos.
Dependiendo de las caractersticas fsicas del suelo, la lluvia o
el riego pueden cambiar rpidamente un suelo desde las
condiciones ideales, en trminos de reoxigenacin de las finas
pelculas de agua, hasta presentar miniambientes acuticos.
Si este proceso de encharcamiento contina, se puede formar
un suelo similar a un sedimento lacustre.
naturaleza
125
126
MICROORGANISMOS DEL CUERPO HUMANO
Numerosos microorganismos desarrollan la mayor parte de su vida
en una especial relacin ecolgica con otros seres vivos de
diferentes especies.
Se conoce muy poco sobre la naturaleza de estas asociaciones,
pero se piensa que son muy activas y no simples asociaciones de
mutua indiferencia.
Normalmente, la simbiosis deriva en algn tipo de beneficio para
el otro, siendo por tanto de tipo mutualista o comensalista.
La supervivencia del husped (p. ej., el hombre) va a depender de
una elaborada red de defensas que evitan que microorganismos y
otras sustancia extraas produzcan daos en el organismo.
naturaleza
127
El trmino gnotobitico [griego gnotos, conocido; biota,

seres vivos en una zona] se ha definido de dos maneras.
Algunos consideran que un ambiente o animal
gnotobitico es aquel cuya microbiota se conoce
totalmente, diferencindolo de un ambiente o animal
libre de microbiota. Sin embargo, este trmino debera
utilizarse de una forma ms general.
As, gnotobitico se puede referir a un ambiente o
animal controlado microbiolgicamente, ya est libre de
microbiota (axnico), como con una microbiota
totalmente conocida.
128
naturaleza
Los animales libres de microbiota son ms susceptibles a

los agentes patgenos.
Cuando carecen de la microbiota normal protectora, los
microorganismos, especialmente los patgenos, se
establecen muy rpidamente en estos animales.
De ah que el nmero de una enfermedad sea mucho
menor que en condiciones normales.
129
naturaleza
Distribucin de la microbiota normal del cuerpo

humano
Los tejidos internos de individuos sanos (p. ej., cerebro, sangre,
fluido cerebroespinal, msculos) normalmente estn libres de
microorganismos.
En contraste, los tejidos superficiales (p. ej., piel y membranas
de las mucosas) estn en contacto permanente con
microorganismos y por ello son rpida mente colonizados por
ciertas especies microbianas.
El conjunto de microorganismos que se encuentra regularmente

en el organismo se suele conocer como microflora, flora normal,
poblacin microbiana indgena o microbiota.
naturaleza
130
131
MICROBIOLOGA DEL AIRE
De los medios que se estudian, el aire es en muchas
formas el ms simple ya que consta de una sola fase, la
gaseosa, adems del vapor de agua condensada y el polvo.
En la atmsfera se distinguen varias capas hasta una altura
de casi 1,000 km. La parte que aqu interesa es la capa
ms cercana a la Tierra, la troposfera, que se extiende
hasta alrededor de 11 km en regiones templadas y 16 km
en los trpicos.
Adems de las irregularidades que hay cerca de la
superficie de la tierra, hay una disminucin constante en la
temperatura con respecto a la altura (aproximadamente
1C por 150m) hasta la parte superior de la troposfera, que
es donde la temperatura comienza a incrementar
132
La mayora de los microorganismos carecen de mecanismos

especiales para permanecer en el aire, aunque las esporas de
hongos pueden ser liberadas en forma activa.
Los microorganismos del suelo pueden ser llevados en el
polvo, la brisa marina puede contener organismos del plancton
y neuston y muchas de las actividades del hombre acentan
estos mecanismos pasivos para permanecer en el aire al crear
turbulencia y al perturbar el suelo y la vegetacin.
Las bacterias que estn protegidas en una partcula de suelo
pueden sobrevivir durante ms tiempo que las clulas
individuales que estn expuestas a las radiaciones ultravioleta
y al aire seco. Las gotitas de aereosol se secan rpidamente y
la partcula resultante puede proteger a los organismos.
133
Nmero y distribucin de microorganismos

El componente microbiano de las esporas del aire del exterior es
dominado por hongos excepto en lugares cercanos a
concentraciones de animales y edificios, donde las bacterias son
ms importantes.
El nmero de microorganismos vara, pero hay varios cientos de
bacterias por m3 en el campo y en ocasiones hasta varios millares
por m3 en las ciudades. Las esporas de los hongos son ms
comunes, y puede haber decenas de millares por m3 durante el
verano sobre suelo agrcola.
El efecto de la lluvia consiste primero en disminuir las esporas al
arrastrarlas y luego incrementarlas conforme las esporas de aire
hmedo y las especies dispersadas por salpicadura se hacen
temporalmente importantes.
Seguridad en laboratorios de
microbiologa
134
SEGURIDAD EN MICROBIOLOGIA
Se han referido en lo que va del siglo ms de 4,000
infecciones asociados al laboratorio. Probablemente ha
habido muchas ms no denunciadas.
La mayora de las vctimas trabajaban en laboratorios de
investigacin con microorganismos cuyo potencial
patgeno era desconocido en ese momento o usaban
tcnicas que actualmente se sabe son peligrosas.
Como resultado de las investigaciones de los ltimos 25

aos se han descubierto las causas de estas infecciones
y se han desarrollado mtodos para prevenirlas.
135
microbiologa
Las personas que trabajan en laboratorios de

microbiologa no se deben sentir en peligro de infectarse
por los microorganismos con los que trabajan, siempre que
tengan en cuenta:
Los riesgos potenciales de los microorganismos en
estudio.
Las vas por las que estos grmenes pueden penetrar en
el organismo y causar infecciones.
Los mtodos correctos de contencin de estos grmenes
para que no lleguen a acceder a dichas vas.
136
microbiologa
Clasificacin de los Microorganismos en Base a
Riesgo.
Los microorganismos varan en su capacidad para producir
infecciones.
Algunos son inofensivos; otros pueden ser responsables de
enfermedades con sntomas leves; algunos otros pueden
causar graves enfermedades; un pequeo nmero de ellos
poseen capacidad para difundirse en la comunidad y
ocasionar una grave enfermedad epidmica.
La experiencia y la investigacin en las infecciones
adquiridas en el laboratorio ha permitido a los
investigadores clasificar a los microorganismos y virus en
cuatro grupos siguientes:
microbiologa
Grupo de Riesgo I (bajo riesgo individual y comunitario).
Un microorganismo que es improbable produzca enfermedad
humana o enfermedad animal de importancia veterinaria.
Grupo de Riesgo II (riesgo individual moderado, riesgo
comunitario limitado)
Un patgeno que puede causar enfermedad humana o animal
pero que es improbable que sea un riesgo grave para el
personal de laboratorio, la comunidad, la ganadera o el medio
ambiente.
Las exposiciones en el laboratorio pueden producir infeccin
grave, pero son posibles el tratamiento efectivo y las medidas
preventivas y es limitado el riesgo de difusin.
137
microbiologa
Grupo de Riesgo III (riesgo individual alto, riesgo
comunitario bajo).
Un patgeno que produce generalmente enfermedad humana
grave, pero que no se difunde de ordinario de un individuo
infectado a otro.
Grupo de Riesgo IV (elevado riesgo individual y
comunitario).
Un patgeno que produce generalmente enfermedad humana
o animal grave y puede trasmitirse fcilmente de un individuo
a otro, directa o indirecta.
138
microbiologa
139
Vas de infeccin
Los microorganismos pueden penetrar en el organismo a
travs de la boca (ingestin), por los pulmones
(inhalacin), a travs de la piel (inyeccin) y por los ojos.
Pueden ser ingeridos cuando se pipetea con la boca y
pueden tambin penetrar en ella mediante los dedos y
artculos contaminados en las mesas de laboratorio, por
ejemplo, cigarrillos, comida, lpices.
Dicha contaminacin ambiental puede ser consecuencia
de derramamiento y salpicaduras que no se descubren o
que se desinfectan inadecuadamente.
microbiologa
140
microbiologa
141
La inhalacin de particulas infectadas trasmitidas

por el aire (aerosoles), que se liberan durante
muchas manipulaciones laboratoriales habituales,
han causado probablemente el mayor nmero de
enfermedades relacionadas con el laboratorio.
La inyeccin puede ser consecuencia de heridas
accidentales con agujas hipodermicas, pipetas
Pasteur o material de vidrio infectado roto.
microbiologa
Los grmenes pueden tambin penetrar en
el organismo a travs de cortes y
abrasiones de la piel, algunas de ellas de
tamao tan pequeo como para que pasen
desapercibidas para el propio investigador.
142
143
microbiologa
La salpicadura de lquidos infectados en los
ojos han sido la causa de un gran nmero de
infecciones, algunas mortales.
Las vas de infeccin en las enfermedades
adquiridas en el laboratorio no son
necesariamente las mismas que las de las
infecciones adquiridas naturalmente.
Adems, la dosis infectante puede ser mucho
mayor y, por lo tanto, los sntomas pueden
ser diferentes.
microbiologa
144
Prevencin de las infecciones adquiridas en el

laboratorio
Los principios de contencin suponen la creacin de:
a-Barreras primarias alrededor de los microorganismos
para impedir su dispersin en el laboratorio.
b-Barreras secundarias alrededor del operador para que
acte como una red de seguridad si se rompieran las
barreras primarias.
c-Barreras terciarias que impidan, alcance a la
comunidad, cualquier germen que no sea contenido por
las barreras primarias y secundarias.
microbiologa
145
Barreras Primarias
1- Debe prohibirse en todos los casos el pipeteo con la
boca. Es necesario proporcionar aparatos mecnicos para
pipetear.
2- No debe llevarse a la boca ningn objeto. Deben
incluirse entre ellos las piezas de vidrio para los tubos de
goma que se fijan a las pipetas, plumas, lpices,
etiquetas, comida, bebida.
3- Debe restringirse el uso de agujas hipodrmicas.
4- Las pipetas pasteur puntiagudas de vidrio deben
sustituirse por las de plstico blando.
5- Debe reemplazarse el material de vidrio agrietado y
astillado.
6- Los tubos de centrfuga deben llenarse solamente
hasta 2 cm del borde.
microbiologa
7-Las asas bacteriolgica deben ser totalmente
cerradas,de un dimetro no superior a 3 mm y con un
vstago no mayor de 5 cm y debe sujetarse en mangos
de metal, no de vidrio.
8- Los homogenizadores deben inspeccionarse con
regularidad para descubrir defectos que puedan
dispersar aerosoles .
9- Todos los productos del Grupo de Riesgo III deben
procesarse en un laboratorio de seguridad y en una
cabina microbiolgica de seguridad.
10- Debe disponerse en cada punto de trabajo
desinfectante adecuado a la dilucin de empleo.
11-Debe desinfectarse con regularidad y despus del
derrame de material contaminado.
146
microbiologa
147
12 Debe situarse en la proximidad de cada puesto de

trabajo recipientes desechables o bolsas sostenidas dentro
del recipiente. Deben retirarse y esterilizarse al autoclave
diariamente.
13- Los recipientes de cultivos rotos, por ejemplo tras un
accidente, debe cubrirse con un pao. Se debe derramar
sobre el pao un desinfectante adecuado y dejarlo as
durante 30 minutos. Los restos deben retirarse en un
recipiente adecuado y esterilizarse al autoclave. Debe
trabajarse con guantes y recoger los restos con cartulina
dura.
14-El material infeccioso que deba enviarse por correo o por
va area debe empaquetarse de acuerdo con las
regulaciones gubernamentales, de correos o de las lneas
areas, que pueden obtenerse de dichas autoridades. En
otros lugares se dan tambin instrucciones completas.
15-Los recipientes para muestras deben ser fuertes y
hermticos.
microbiologa
148
Barreras secundarias
Estas medidas estn encaminadas a proteger al personal si
fallan las barreras primarias. Sin embargo, deben observarse
tan estrictamente como las anteriores.
1-Las gabachas deben llevarse siempre y abrochadas.
Deben guardarse separados de los vestidos de calle y de
otras ropas.
2-Las indumentaria protectora de laboratorio debe quitarse
cuando el personal salga del laboratorio y no llevarla
puesta en otras reas.
3-Las manos deben lavarse despus de manipular material
infeccioso y siempre antes de salir del laboratorio.
4-Deben recubrirse con impermeables los cortes,
raspaduras visibles sobre las partes expuestas del cuerpo
del personal.
microbiologa
5-Debe haber supervisin mdica en los laboratorios
en los que se maneje grmenes patgenos.
6-Cualquier enfermedad debe denunciarse al mdico,
tambin debe manifestarse el estado de gestacin.
7-Cualquier miembro del personal que est recibiendo
esteroides u otro medicamento inmunodepresores
debe indicarlo al supervisor mdico.
8-Cuando sea posible el personal debe ser vacunado
contra las infecciones probables
149
microbiologa
Barreras terciarias
Estn pensadas para ofrecer una proteccin
adicional al personal y para prevenir la
difusin en la comunidad de los
microorganismos sometidos a investigacin
en el laboratorio. Est relacionadas con el
diseo arquitectnico.
150
microbiologa
151
El laboratorio bsico
Esta diseado para grmenes del tipo I y II. Debe
disponerse de espacio amplio. Las paredes, techos y suelos
deben ser lisos, no absorbentes, de fcil limpieza y
desinfeccin y resistentes a los agentes qumicos que se
utilicen probablemente.
Asimismo, los suelos deben ser antideslizantes. La
iluminacin y la calefaccin deben ser adecuadas. Es
esenciales separar el rea de lavado y lavamanos.
La parte superior del banco debe ser ancha, a la altura
correcta para trabajar confortablemente en posicin
sentada, el banco debe ser liso, fciles de limpiar y
desinfectar y resistentes a los agentes qumicos. El acceso
debe limitarse a personas autorizadas.
microbiologa
El laboratorio de seguridad
Est diseado para trabajar con grmenes del Grupo de
Riesgo III. Deben tener incorporados todos las
exigencias indicadas para el Laboratorio bsico,
adems de las siguientes.
La habitacin debe estar separada fsicamente de otras
habitaciones, sin comunicacin (por ejemplo, tuberas,
falsos techos) con otras reas, aparte de la puerta, que
debe poder cerrarse con llave y rejas transferibles para
ventilacin.
La ventilacin debe ser en una direccin, conseguida
mediante una presin ms reducida en el laboratorio
de seguridad que en las otras habitaciones y reas
adyacentes.
152
microbiologa
153
El aire debe eliminarse a la atmsfera (vertido total, sin

circulacin a otras partes del edificio) mediante un
sistema de extraccin acoplado a la cabina microbiolgica
de seguridad de manera que durante las horas de trabajo
el aire sea extrado continuamente por uno u otra y las
partculas transmitidas por el aire no puedan desplazarse
de un lado a otro del edificio. El aire de reemplazo
penetra a travs de las rejillas transferibles.
El acceso debe estar estrictamente regulado. Debe fijarse
en la puerta el signo internacional de advertencia de
peligro biolgico, con la expresin adecuada.
154
microbiologa
155
El laboratorio de mxima seguridad

Se requiere para trabajar con productos del Grupo de Riesgo IV y
queda fuera del objetivo de esta asignatura. Su construccin y
utilizacin requiere generalmente licencia y supervisin de las
autoridades.
Educacin en el trabajo de seguridad
Esta educacin debe formar parte del entrenamiento general que
debe recibir todo el personal de laboratorios microbiolgicos y
debe incluirse en lo que se conoce como Buena Prctica de
Laboratorio.
En general, los mtodos que protegen los cultivos de la
contaminacin protegen tambin al personal de la infeccin,
aunque esto no debe tomarse como una concesin. La proteccin
del personal nicamente puede obtenerse mediante un buen
entrenamiento y un trabajo cuidadoso. Se han publicado
programas para el adiestramiento en seguridad en microbiologa.

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