CROMATOGRAFA

CROMATOGRAFA
Separacin de los componentes de una mezcla (muestra),
disueltos en una fase mvil a medida que se van desplazando
con diferente velocidad a travs de una fase estacionaria.
Muestra

Funciones bsicas:
1 Separa los componentes de la mezcla para
obtenerlos ms puros y que puedan ser
usados posteriormente.
2 Mide la proporcin de los componentes
de la mezcla. En este caso las cantidades de
material empleadas suelen ser muy pequeas.

HISTORIA

1906: Botnico Ruso Tswett

Coloc un extracto de pigmentos vegetales en
una columna de vidrio rellena de carbonato de
calcio. Al agregar ter, observ que la mezcla se
separaba en diversas bandas coloridas que
descendan a travs de la columna a diferentes
velocidades.

 En1903 Mijal, logr separar una

mezcla de pigmentos de plantas
en una columna de carbonato de
calcio.
En el ao 1910 cromatografic un
extracto de yema de huevo. Pero
sus investigaciones no fueron
utilizadas hasta el ao 1931, ya
que
sus
investigaciones
se
publicaban en ruso y en una
revista que no tenia amplia
circulacin.

Sin embargo esto se ir modificando con el paso de

los aos.

TIPOS DE
CROMATOGRAFA

CROMATOGRAFA EN PAPEL

Sirve para realizar unosanlisis cualitativos, ya

que pese a no ser una tcnica muy potente no
requiere de ningn tipo de equipamiento.

Cromatografa en capa fina

Es una tcnica que utiliza una placa inmersa verticalmente. Esta
placa cromatogrfica (vidrio, plstico o aluminio) tiene una capa
uniforme de un adsorbente (gel de slice o almina).

Cromatografa de gases
Se opera en columna.
Se trabaja por elucin.
Separa:
Mezclas complejas.
Solutos muy parecidos.
Es rpida.
Utiliza poca muestra.
Utiliza instrumentacin especial.
Proporciona informacin cualitativa y
cuantitativa.

Elucin
La muestra se coloca al inicio como una
banda fina.
El eluyente tiene una menor afinidad por la
fase estacionaria que los solutos.
Los solutos avanzan por el sistema a
diferentes velocidades menores a la de la
fase mvil.
Los solutos se separan por bandas (eluyen)
por el final de la columna.

Elementos de un cromatgrafo

 GAS DE ARRASTRE:
Baja viscosidad.
Inerte
Seguro.
Alta pureza
Hidrogeno. (mxima eficiencia
con columnas capilares)
Helio. (Sistemas acoplados)
Nitrgeno. (empacadas)

Control de flujo
Vlvulas:
De agua.
Reguladores
de presin.
Diferenciales
de flujo.

Inyeccin de muestra

 TIPOS DE
COLUMNAS.
Empacadas.
Baja
eficiencia.
Capilares .

HORNO CROMATOGRFICO
La temperatura de la columna
es un parmetro bsico:
MAYOR TEMPERATURA
MAYOR PRESION DE VAPOR
ANALISIS MAS RAPIDO

Vidrio.
Slice fundida.

MENOR SEPARACION

Detectores

Sensor en lnea.
Mide alguna propiedad de eluyente,
o del soluto.
Genera una seal elctrica.
La seal es proporcional a la
concentracin del soluto.

Cromatografa lquida en fase

reversa

 Tambin es llamada como

cromatografa de
interaccin hidrofbica
(HIC).
Es semejante al de la
cromatografa en capa
fina.
Permite separar
molculas en base a su
polaridad.

 La fase estacionaria
es de partculas de
slica qumicamente
modificadas con
hidrocarburos
saturados,
insaturados o
aromticos de
diferentes tipos.
Se emplean mezclas
de solventes polares,
tales como agua,
acetato de etilo,
acetona y alcoholes
alifticos.

 Las molculas se retienen en la columna en virtud

de las interacciones hidrofbicas que establecen
con la slica modificada.
La cromatografa en fase reversa ha sido adaptada
para el uso de columnas.
Utilizan alta presin para mejorar la resolucin y
reducir los tiempos de separacin.

Cromatografa Lquida En Fase Normal

Fue el primer tipo de sistema HPLC utilizado en el
campo de la qumica.
Se caracteriza por separar los compuestos en base
a su polaridad.

 Utiliza una fase estacionaria polar y una

fase mvil apolar.
Se utiliza cuando el compuesto de inters es
bastante polar.

 El compuesto polar se asocia y es retenido por la fase

estacionaria.
La fuerza de interaccin no slo depende de los grupos
funcionales del compuesto de inters, sino tambin en

Cromatografa inica
Es un mtodo para la
separacin y determinacin
de iones, basado en el uso
de resinas de intercambio
inico.

Fase estacionaria
Se aplica una resina
de intercambio
inico, que lleva en
la superficie cargas
que retienen contraiones de la mezcla.

Fase mvil
Es una disolucin
acuosa.
Hay que cambiar su
composicin para
eluir los
componentes de la
mezcla

Cromatografa de exclusin

Separa los componentes por la adsorcin selectiva de los

constituyentes de una mezcla. La fase estacionaria, y una mvil
que fluye constantemente durante el anlisis, y que en este caso
es un lquido o mezcla de varios de ellos. La fase estacionaria por
su parte puede ser almina, slice o resinas de intercambio inico.
Los intercambiadores inicos son matrices slidas que contienen
sitios activos de carga electrosttica. De esta forma, la muestra
se fija al soporte slido por afinidad electrosttica.

Mtodo

Abreviatura

Mecanismo predominante

LSC

Adsorcin sobre la superficie

Lquido

LLC

Reparto entre fases lquidas,

una mvil y la otra
estacionaria.

Fase enlazada

BPC

Reparto y / o adsorcin entre

las fases mvil y enlazada.

Lquido,slidoo deadsorcin

Cromatografa de adsorcin
Se caracteriza por utilizar una fase estacionaria
slida de carcter polar y una fase mvil lquida
apolar, y se utiliza tanto con fines analticos como
con fines preparativos siendo su limitacin ms
importante la dificultad de separar sustancias de
polaridad parecida.

Cromatografa de fluidos supercrticos

Es una tcnica hbrida entre la cromatografa de
gases (GC) y la HPLC, que combina lo mejor de
ambas tcnicas.
Se aplica a compuestos no voltiles o inestables
A diferencia de la GC, en la SFC no se aumenta
la velocidad de elucin modificando la
temperatura, sino la presin del SF.

BIBLIOGRAFA
http://biomodel.uah.es/tecnicas/crom/inicio.htm
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/cromatografa
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700
http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/croma
tografia/principios_de_cromatografia
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_fonament
.html
http://www.ibt.unam.mx/computo/met/Cromatografia.
http://quimica.laguia2000.com/general/cromatografia
http://es.slideshare.net/ferccmx1/cromatografia-definiciones-y-tipos