LABORATORIO Y

DIAGNSTICO EN
VIH
DRA. SILVIA ARREDONDO D.
MEDICO INMUNOLOGO-CLINICO
HOSPITAL REGIONAL DE TALCA

VIH

El VIH es un virus de la familia de los lentivirus.

Existen dos tipos de virus VIH-1 y VIH-2, que son muy
similares pero tienen diferencias genticas.
Se ha demostrado que son virus altamente complejos
tanto a nivel estructural como en su evolucin.
Los VIH-1 se clasifican en tres grupos distintos
(M,N,O), el ms importante es el grupo M que se
subdivide en 9 subtipos de la A a la K. En Amrica del
Norte, Central y Sudamrica predomina el grupo B.
La variabilidad de estos virus se expresa en nuevas
formas recombinantes que pueden generar una
mayor resistencia a la TARV.

VIH

GENERALIDADES

El diagnstico de la infeccin VIH, slo puede

establecerse mediante anlisis por mtodos de
laboratorio.
Los exmenes orientados a establecer el diagnstico
se pueden clasificar en mtodos indirectos y
directos.
Desde punto de vista del seguimiento y del
pronstico de la infeccin VIH, y del SIDA, tambin
es necesario el apoyo del laboratorio.
El laboratorio tambin es de gran utilidad en el
diagnstico de enfermedades oportunistas que
presentan los portadores de VIH.

PRUEBAS SEROLOGICAS

Deteccin de anticuerpos anti VIH-1, su

presencia reflejan estado de portacin actual.
Se realiza mediante pruebas de screening,
las que si resultan positivas luego son
confirmadas por test de mayor especificidad.
La seropositividad se define mediante la
reactividad repetida a las pruebas de
screening (2 TEST positivos) confirmados
posteriormente con una prueba
confirmatoria.

TEST DE SCREENING Y
CONFIRMACIN

TEST DE SCREENING

El mtodo ms utilizado es el
enzimoinmunoanlisis (EIA), existiendo tcnicas
de primera , segunda y tercera generacin
dependiendo del origen de los antgenos virales.
Sensibilidad de las tcnicas actuales alcanza un
99 %.
Los EIA de tercera generacin son los utilizados
en la actualidad por su mayor sensibilidad y
especificidad.
Existen tambin pruebas de deteccin rpida
basadas en principios de aglutinacin y las de
inmunoadherencia (dot-blot), siendo menos
especificas que las anteriores.
En la actualidad adems se dispone de kit que
permiten detectar ambos tipos de virus VIH (1 y
2).

TEST CONFIRMATORIOS

El Western blot es el ms utilizado en la confirmacin de los

resultados obtenidos por screening.
El WB, permite distinguir contra que antgenos virales se
dirigen los anticuerpos de la muestra a estudiar.
Existen diversos criterios de positividad de acuerdo a diferentes
instituciones que los han definido, la OMS en reunin de
expertos en 1990 recomend la presencia de al menos 2
bandas de la envoltura .El resto de los patrones se considera
indeterminado.
Las limitaciones del WB son la complejidad de la tcnica, su
alto costo, la necesidad de personal altamente especializado.
Adems la variabilidad de la reactividad de las bandas
( gp160,gp120,p24, p17 y la gp41). Tambin existe diferente
valor predictivo diagnstico la existencia de las diferentes
bandas. Las bandas de protenas de la envoltura son las ms
especificas con bajo % de falsos (+)

CAUSAS DE WB
INDETERMINADO PARA VIH-1

Infeccin por VIH-2.

Seroconversin para el VIH-1.
Pacientes en estadios muy avanzados
de la enfermedad.
Nios nacidos de madres
seropositivas.
Individuos africanos infectados.
Reactividad inespecfica.

PRUEBAS
SUPLEMENTARIAS

Inmunoanlisis de tipo lineal (LIA).

RIPA.
Antigenemia (medicin de p24), que
permite el diagnstico durante la
primoinfeccin, en hijos de madres VIH(+),
monitorizacin de respuesta a TARV en
algunos portadores, identificacin de
individuos seropositivos con elevada
infectividad.
Cultivo viral.
PCR (deteccin de cidos nucleicos ).

CAUSAS DE PCR (+) EN

INDIVIDUOS SERONEGATIVOS
PARA VIH

Perodo de ventana antes de la seroconversin.

Contaminacin de laboratorio.
Secuencias exgenos de tipo retroviral.
Secuencias endgenas retrovirales o no.
Hipogamaglobulinemia.
Infeccin por virus defectivos o incompletos.
Infecciones por variantes poco o no
replicativas.
Serorreversin por disfunciones en el sistema
inmunitario.

CAUSAS DE PCR (-) EN

INDIVIDUOS
SEROPOSITIVOS PARA EL
Transmisin pasiva ( materno-fetal,
VIH
transfusiones, etc.)

Mutaciones crticas en la regin analizada.

Presencia errtica de la secuencia estudiada.
Baja sensibilidad de la prueba.
Error tcnico.
Anticuerpos con reactividad cruzada en
pacientes con LES, FQ, post vacuna
antiinfluenza (slo en estos casos no hay
infeccin VIH).

ALGORITMO DE DIAGNSTICO DE
INFECCIN VIH EN INDIVIDUOS SIN
RIESGO

ALGORITMO DE DIAGNSTICO DE
INFECCIN VIH EN INDIVIDUOS CON
RIESGO

EL LABORATORIO EN EL
SEGUIMIENTO Y PRNOSTICO DE LA
INFECCIN VIH

Existen exmenes especficos para

establecer el pronstico y clasificacin de
los pacientes VIH (+), (Carga viral y
recuento de LTCD4(+)) y otros que se
solicitan en la primera consulta que sern
de utilidad en el seguimiento del paciente
y de las enfermedades oportunistas que
puedan aparecer (que se listan a
continuacin)
Los exmenes generales nos permiten
conocer la situacin basal del paciente en
relacin a otras infecciones latentes,
dislipidemias, alteraciones metablicas,
cncer, etc..

PRUEBAS COMPLEMENTARIAS QUE

DEBEN REALIZARSE A PACIENTES
VIH(+)
HEMOGRAMA Y VHS

SI

3-6 MESES

2 A 3 MESES

PERFIL BIOQUIMICO

SI

3 A 6 MESES

2 3 MESES

PERFIL LIPIDICO

SI

3 A 6 MESES

2 A 3 MESES

ACIDO RICO

SI

3 A 6 MESE

2 A 3 MESES

AMILASA Y LIPASA

SI

3 A 6 MESES

2 A 3 MESES

ORINA COMPLETA

SI

3 A 6 MESES

2 A 3 MESES

RX TORAX

SI

SP

SP

ECG

SI

SP

SP

PPD

IDEAL SI

SP

SP

SER. VIRUS HEPATITIS B Y

C

SI

NO

NO

SER. TOXOPLASMA GONDII

SI

SP

SP

SER. CMV.

SI

SP

SP

VDRL

SI

SP

SP

PSD

SI

SP

SP

COPROCULTIVO

SI

SP

SP

LT CD4(+)

SI

3-6 MESES

2-3 MESES

CARGA VIRAL VIH

SI

3-6 MESES

2-3 MESES

LT CD4 (+)

La cifra de LTCD4(+) de sangre perifrica

corresponde aproximadamente a un 2% de los LT
CD4 (+) totales.
Varan durante el da, y da a da, la variabilidad
usando mtodos automatizados es de un 2 a 5 %.
Se utiliza actualmente para su determinacin la
citometra de flujo (FACS).
Los errores se originan por la demora en el
procesamiento y tienden a aumentar por unin
inespecfica de los anticuerpos en las muestras
congeladas.
Se requieren a lo menos 2 determinaciones de
LTCD4(+) si se debe tomar una decisin teraputica
en los portadores y para su clasificacin.

SITUACIONES QUE ORIGINAN

ALTERACIN EN LOS LTCD4(+)

Ejercicio intenso: LTCD4(+).

Variaciones diurnas: aumenta en 50-150 clulas en
el da.
Tabaquismo: por efecto de la nicotina.
Corticoides: linfocitos totales y CD4(+).
Bazo: aumenta en pacientes esplenectomizados,
en los cirrticos con hipertensin portal disminuyen.
En las mujeres embarazadas disminuyen los
LTCD4(+) en el tercer trimestre.
En los procesos inflamatorios agudos sean o no
infecciosos disminuyen los CD4(+).

CARGA VIRAL

Consiste en la deteccin por medio de la amplificacin

de las secuencias de cidos nucleicos del ARN del VIH.
Se logra su deteccin gracias al avance que ha
experimentado la biologa molecular.
Su deteccin ha permitido demostrar la modificacin
que realiza la TARV sobre la historia natural de la
infeccin VIH.
Depende del mtodo empleado y la capacidad de
detectar mnimas cantidades de ARN del virus.
Se expresa en copias de ARNv /ml .
Posee las principales caractersticas se un buen
marcados de laboratorio: Sensibilidad, especificidad,
valor predictivo positivo y negativo y reproducibilidad.

PROPIEDADES DE LA CARGA
VIRAL

La CV plasmtica es la resultante del equilibrio

dinmico entre los distintos compartimientos
virales.
El descenso de la CV luego del inicio de la
TARV consta de tres fases ( LTCD4(+)
infectados productivos), (macrfagos tisulares,
y otros reservorios del virus)(incierto).
Son reproducibles.
No existe equivalencia directa entre los
diferentes mtodos utilizados comercialmente.

INDICACIONES CLINICAS Y USO

DE CV
INDICACIN
CLNICA
INFORMACIN
USO
SD. Compatible con
infeccin aguda VIH

Establece el diagnstico
cuando la prueba de
anticuerpos es negativa
o indeterminada

Diagnstico

Valoracin inicial de una

infeccin VIH
recientemente
diagnosticada

CV basal

Apoya decisin en
conjunto con CD4(+) de
iniciar o no tratamiento

Control de pacientes
VIH(+) sin TARV

Cambios de la carga
viral

dem

Luego de 4 semanas del

inicio o cambio de TARV

Valoracin inicial de
eficacia de TARV

Decisin de continuar o
cambiar esquema

Control c/3-4 meses en

pacientes con TARV

Duracin del efecto

antiretroviral

Decisin de continuar o
cambiar TARV

Acontecimientos clnicos Asociacin con CV

o disminucin
variable o inestable
significativa de LTCD4(+)

dem