FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

EFP INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

MICROBIOLOGIA GENERAL
GENETICA MICROBIANA
TEMARIO
Genetica de los procariotas
Genetica de los virus.

Blgo. Julio IBAEZ OJEDA

Docente D.E.N.
jibanezo@hotmail.com
Cel: 976799595 RPM:
#976799595

GENTICA DE PROCARIOTAS
El sistema gentico de los procariotas en
mucho ms sencillo de estudiar que el
de
los
eucariotas
y
condujo
a
conclusiones fundamentales proveyendo
las
actuales
herramientas
de
la
"ingeniera gentica".

La informacin gentica en bacterias est

codificada
en
la
molcula
de
cido
desoxirribonucleco, ADN, cuya propiedad de
replicacin es esencial para la herencia de todos los
rasgos genticamente determinados (genotipo) y
que en su conjunto definen las caractersticas
observables del microorganismo (fenotipo).
Se ver los elementos bsicos relacionados con la
organizacin de la informacin gentica en las
bacterias, su relacin con rasgos fenotpicos
(factores
de
virulencia
y
resistencia
a
antibiticos), as como, los mecanismos por los
cuales estos organismos procariticos pueden
adquirir variabilidad gentica.

NATURALEZA DEL MATERIAL HEREDITARIO EN BACTERIAS

La molcula de ADN, es un polmero de c. nucleico, cuya unidad
es el nucletido. Cada nucletido posee un grupo fosfato, una
azcar desoxirribosa y una base nitrogenada (purina o
pirimidina). Las purinas son adenina (A) y guanina (G) y las
pirimidinas: timina (T) y citocina (C). Los nucletidos se unen
por un enlace llamado unin fosfodiester.
El ADN es una molcula de doble hebra, con forma helicoidal,
donde las dos hebras en la hlice son antiparalelas. La doble
hlice se encuentra estabilizada por uniones dbiles del tipo
puente de hidrgeno, entre una base purina y otra pirimidina, en
hebras opuestas. En cada posicin del ADN, la adenina se aparea
por dos puentes de hidrgeno a timina en la hebra opuesta,
mientras que guanina se aparea por tres puentes de hidrgeno a
una citocina. Por lo tanto, las dos hebras de la doble hlice son
complementarias.

El ADN posee dos funciones esenciales en los

microorganismos, la replicacin y la expresin.
a. Replicacin: Durante la replicacin, cada hebra
de la doble hlice sirve como templado para la
sntesis de una hebra complementaria. Cada nueva
molcula de doble hebra de ADN debe contener, por
lo tanto, una hebra polinucleotdica vieja y una hebra
recientemente sintetizada. Este tipo de replicacin
del ADN se denomina semiconservativa. Por otro
lado, la replicacin del ADN cromosomal en bacterias
comienza en un sitio especfico llamado origen y se
realiza bidireccionalmente hasta que el proceso se
completa. De este modo, cuando una bacteria se
divide por fisin binaria, luego de haber completado
la replicacin de su ADN, cada clula hija hereda un
genoma replicado.

Expresin: La informacin gentica codificada en el

ADN se expresa a travs de la sntesis de otro cido
nucleico, el ARN y protenas. La sntesis de ARN,
dependiente del ADN, se denomina transcripcin,
mientras que la sntesis de las protenas a partir del
ARN se llama traduccin. La direccin del flujo de
informacin entre estas molculas esta definido por el
Dogma de la Biologa Molecular.

Escherischia coli y los virus que los infectan

siguen
constituyendo
una
herramienta
fundamental para el estudio de la estructura y
transmisin de los genes.
Entre las ventajas de
organismos encontramos:

trabajar

con

estos

1.Menor tamao y mayor nmero de organismos

por rea de cultivo
2.Mayor velocidad de reproduccin: Escherischia coli
duplica su poblacin en 20, todos los
descendientes son clones de la clula original.
3.Son haploides, por lo que cualquier cambio o
mutacin se expresa inmediatamente.

El cromosoma de Escherichia coli

El cromosoma de la bacteria intestinal
Escherichia coli es nico, circular y contiene
cerca de 4.7 millones de pb. Tiene cerca de 1
mm de longitud pero solo 2 nm de ancho. El
cromosoma se replica produciendo una figura
que asemeja a la letra griega theta.
El promotor es la parte del ADN en donde se
pega la ARN polimerasa antes de abrir el
segmento de ADN a ser transcrito.

Un segmento del ADN que codifica para un polipptido

especfico se conoce como un gen estructural. Escherichia coli
puede sintetizar 1.700 enzimas, por lo tanto esta pequea
bacteria tiene genes para 1.700 mARN.

RECOMBINACIN EN PROCARIOTAS
A pesar de ser haploides y reproducirse asexualmente
por fisin binaria originando colonias de clones
(organismos genticamente idnticos), las bacterias
tienen diversas formas de recombinar sus genes. En
los eucariotas la recombinacin se produce entre los
dos padres, en los procariontes es el resultado de la
interaccin del genoma de una clula con una
muestra mas pequea de genes provenientes de otra
clula. Entre los mecanismos que facilitan esta
recombinacin encontramos:

CONJUGACIN
Transferencia directa de material gentico, promovida por
un plsmido, desde una clula donadora a otra
receptora, por medio de contactos ntimos entre ambas
(puentes de unin o pili). Una bacteria (receptora) recibe
material gentico de otra clula donante. Una vez que el
fragmento de ADN de la donante est dentro de la clula
receptora es posible la recombinacin: de la misma
manera que los cromosomas se aparean, gen por gen en
la profase meitica, el ADN de la donante se alinea con el
de la receptora y por entrecruzamiento se intercambian
genes, pasando a formar parte del genoma.
Una variante de la conjugacin es la SEXDUCCIN: en
ella, un trozo definido de material gentico de la
donadora es transferido como parte de un plsmido
conjugativo.

TRANSFORMACIN
cuando clulas mueren, su ADN sale al
medio y es capturado por otras bacterias
que lo incorporan a su propio genoma.
Recuerde el factor de transformacin de los
pneumococos de la neumona.
TRANSDUCCIN
Los bacterifagos (fagos) pueden llevar en
sus cpsides fragmentos del ADN de la
bacteria husped, que luego incorporarn a
otra bacteria.

PLSMIDOS

Son pequeos fragmentos circulares de ADN,

estn presentes prcticamente en todas las
clulas
bacterianas
adems
de
su
cromosoma principal, contienen de 2 a 30
genes. Algunos tienen la capacidad para
incorporarse
o
salir
del
cromosoma
bacteriano.

TIPOS DE PLASMIDOS
Existen varios tipos de plsmidos,
clasificados de acuerdo al tipo de
genes que transportan:
1. F ("factor sexual"): en Escherichia coli el
plsmido F contiene 25 genes, algunos de los
cuales controlan la produccin de los pilis, "tubos"
que se extienden desde la superficie de las clulas
bacterianas "machos"(F+), a la de las clulas
bacterianas hembras ( F-).

2.Episoma Se denomina episoma a un

plsmido
incorporado
al
cromosoma
bacteriano. Los plsmidos se replican en
manera similar al cromosoma bacteriano.

3. El plsmido R confiere, a las clulas que lo poseen,

resistencia a los antibiticos o drogas. Un plsmido R
puede llegar a tener hasta 10 genes que confieren
resistencia y pueden transferirse a otra bacteria de la
misma especie, a virus e inclusive, a bacterias de
diferentes especies. La resistencia a los antibiticos ha sido
encontrada en: tifoidea, meningitis, gonorrea y otras.
Actan proporcionando la informacin necesaria para
destruir el antibitico o para circunvalar el bloqueo que
produce el antibitico en la va metablica bacteriana.
En el caso de una infeccin viral, el uso indebido o
innecesario de antibiticos matar a la poblacin bacteriana
normal, quedando (o seleccionando) las que tengan el factor
R; stas pueden reproducirse an en presencia del
antibitico. La prxima vez que tenga una infeccin
bacteriana, las bacterias con factores R estarn listas para
transferir su factor a la nueva bacteria invasoras, que se
harn resistentes a los antibiticos.

EL MODELO OPERN
El ADN procariota se organiza en paquetes
coherentes denominados OPERONES, en los cuales
se
encuentran
los
genes
para
funciones
interrelacionadas. El modelo opern de la regulacin
de los genes procariotas fue propuesto en 1961 por
Francois Jacob y Jacques Monod. El fenmeno que
inspir la idea fue el de la induccin enzimtica.
La transcripcin se detiene colocando un obstculo
entre el promotor y los genes estructurales; ese
obstculo es el operador (una secuencia corta de
ADN).

Un opern consiste en:

1.un operador: controla el acceso de la
ARN polimerasa al promotor
2.un promotor: donde la ARN polimerasa
reconoce el sitio de inicio de la
transcripcin
3.un gen regulador: controla el tiempo y
velocidad de transcripcin de otros genes
4.un gen estructural: codifican las
enzimas relacionadas o las protenas
estructurales

El gen regulador codifica para una protena que

se pega al operador, obstruyendo al promotor (y
a la transcripcin), del gen estructural. El
regulador no tiene que estar adyacente a los otros
genes en el opern. Cuando se remueve la
protena
represora,
puede
producirse
la
transcripcin. El operador y el promotor son
sitios de unin sobre el ADN y no se trasncriben.

Los operones son inducibles o reprimibles, de

acuerdo al mecanismo de control. En Escherichia
coli se identificaron 65 operones diferentes que
controlan 250 genes estructurales. Tanto la
represin como la induccin son ejemplos de control
negativo, dado que la protena represora detiene ("
turn off ") la transcripcin.
La lactosa es hidrolizada por la enzima betagalactosidasa. Esta enzima es inducible: solo se
produce en grandes cantidades cuando la lactosa.
En cambio, las enzimas para la sntesis del
aminocido triptfano se producen continuamente a
menos que el triptfano este presente en el medio
de cultivo, se dice en este caso que las enzimas
sintetizadoras de triptfano estn reprimidas.

OPERONES INDUCIBLES
Cuando no hay lactosa en el medio, la protena
represora se encuentra unida al operador impidiendo
la transcripcin de los genes para las enzimas que
metabolizan la lactosa. Cuando hay lactosa en el
medio (intestinos de un mamfero durante la
lactancia), sta funciona como inductor, se une al
represor cambiando su forma lo que evita que se
pueda unir al operador, de este modo la polimerasa
puede transcribir los genes correspondientes.
Este opern lac solo se activa cuando hay lactosa
en el medio.

Esquema de un opern inducible

OPERONES REPRIMIBLES
Cuando un producto del metabolismo, el triptofano
por ejemplo, est en cantidades suficientes la
bacteria puede dejar de fabricar las enzimas que los
sintetizan. En este sistema, el producto funciona
como correpresor unindose al represor y de este
modo detiene la sntesis proteica.

Esquema de un opern reprimible

Virus
A diferencia de los restantes reinos son organismos
acelulares, no metabolizan energa. Los Virus
consisten en un cido nucleico (ADN o ARN)
envueltos en una cubierta de protena (conocida
como cpsido). El cpsido puede ser una sola
protena que se repite una y otra vez, como en el
virus del mosaico del tabaco (ingls: TMV), tambin
puede estar formado por varias protenas, como en
los bacterifagos de la serie T. Fuera de la clula
husped, los virus se encuentran como viriones.
No surgen de virus preexistentes, son parsitos
intracelulares estrictos, se desarrollan y reproducen
solamente dentro de las clulas husped, a las cuales
destruyen en este proceso.

CICLOS REPRODUCTIVOS
Una vez que los virus inyectados su ac. nucleico
(ADN o ARN) a la clula husped pueden suceder dos
tipos de ciclos reproductivos: lticos o lisognicos.
a) El ciclo ltico
Ocurre cuando el material gentico del virus (virus
virulento) penetra (a,b) en la clula husped y
comienza a fabricar nuevos virus (c,d). Para ello, 1
transcribe genes tempranos que estimulan la
replicacin del genoma viral. Luego, genes tardos
codifican la sntesis de protenas para empaquetar el
cpside y lisar la clula husped. Eventualmente los
nuevos virus causan la ruptura o lisis (e) de la clula
y continan el ciclo infeccioso (f).

Ciclo Ltico

b) El ciclo lisognico
Ocurre cuando el ADN viral es incorporado al ADN del
husped (a,b,c) como profago, como parte de
genoma bacteriano el profago permanece quieto
dentro de la bacteria y cuando la clula husped se
divide, se duplica como si fuera ADN del husped
(d,e).
Algunas veces el profago emerge del cromosoma de
la clula husped y entra en el ciclo ltico
espontneamente (aprox. 1/10.000 divisiones). La
luz ultravioleta y los rayos X tambin pueden producir
este fenmeno

LISOGENIA

LA TRANSDUCCIN
Es el fenmeno por el cual una porcin del ADN del
husped es transferido de una clula a otra por un
virus (ver abajo, fig. a, b, c ye).
Algunos
bacterifagos
son
"temperados"
o
atenuados dado que tienden a ser lisognicos mas
que lticos.
Estos tipos de virus estos virus son capaces de
transducir fragmentos de ADN.

Los
retrovirus,
como
el
Virus
de
la
Inmunodeficiencia Humana (VIH, fig. a), poseen
una enzima: la transcriptasa reversa amn del
ARN viral (figs. a, b). La transcriptasa reversa fabrica
ADN de una sola cadena, copiando el ARN viral (fig.
b). El ADN viral monocatenario se transforma luego
en bicatenario, se inserta en al ADN nuclear (figs. c,
d), y es procesado por la maquinaria celular que
sintetiza sus partes (fig. e) y finalmente emerge (fig.
f)

LOS TRANSPOSONES
Son fragmentos de ADN incorporados en el ADN
cromosmico. A diferencia de los episomas y
profagos, los transposones contienen un gen que
produce una enzima que cataliza la insercin del
transposn a un nuevo sitio. Tambin tienen
secuencias repetidas de cerca de 20-40 nucletidos de
largo pegadas a cada extremo. Las secuencias de
insercin son cortas (60 a 1.500 pares de bases de
longitud). Los transposones simples no tienen ms
genes que los necesarios para la transposicin. Los
transposones complejos son muchos mas largos y
pueden
llevar
genes
adicionales.
Los
genes
incorporados en los transposones complejos se
conocen como "genes saltarines" dado que pueden
moverse a lo largo del cromosoma y tambin de
cromosoma en cromosoma.