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TEMA 4.

NUTRICIN Y
CONDICIONES DE
CRECIMIENTO
BACTERIANO

Introduccin

80 % de agua
20 % de peso seco:

Protenas
cidos Nucleicos
Polisacridos
Lpidos
Peptidoglucano
Otros compuestos de peso molecular mas
bajo

Nutrientes

Substancias necesarias para


asegurar supervivencia.
Proveen energa y
elementos necesarios para
sntesis de estructuras
celulares.
Ingreso por absorcin.
Viabilidad: capacidad de
reproduccin.

Nutrientes esenciales o
Bsicos

Asimilables por simple difusin o por


transporte activo
Agua
Fuentes de Carbono
Compuestos de nitrgeno
Fsforo (fosfatos inorgnicos)

Otros nutrientes

Iones potasio
Iones Magnesio
Factores de Crecimiento u orgnicos

Vitaminas
Aminocidos

Oligoelementos

Hierro
Cobre
Cobalto

Factores Estimulantes

Influyen en el proceso de crecimiento.


No son imprescindibles.
En presencia de factores estimulantes
crecen mas rpido y mejor.

Categoras Nutritivas

Fuente de Carbono

Carbono inorgnico: dixido de carbono


auttrofas o littrofas
Carbono orgnico: Hetertrofas u
organtrofas

Fuente de Energa

Fottrofas: Luz
Quimitrofas: energa suministrada por ATP

Clasificacin de las
Bacterias segn fuentes de
Carbono

Tipos Nutricionales

Tipos Nutricionales

Tipos Nutricionales

Categoras Nutritivas

Crecimiento Bacteriano

Es el incremento ordenado de todos los


componentes de un organismo.
Es de tipo exponencial.
Se produce cada 30 min.

Crecimiento Bacteriano

Aumento de nmero
(no de tamao)
Multiplicacin
bacteriana: fisin
simple o binaria

Elongacin
Auto duplicacin de ADN
cromosmico
Tabicado central
Invaginacin membrana
celular
Sntesis de pared

Tiempo de generacin

Tiempo requerido para que una clula se


divida en dos
Distintiva de cada especie
Puede influirse por factores estimulantes
Varan de 20 minutos (Escherichia coli)
hasta 24 horas

Crecimiento Exponencial

Curva de Crecimiento
Bacteriano
Bacteria en medio
adecuado
Grfico de coordenadas:
nmero de bacterias
(logaritmo) versus lapso de
tiempo.
Distinta para cada bacteria
En todas se identifican
cuatro etapas

Curva de Crecimiento
Bacteriano

Fase de Latencia

El nmero de microorganismos no vara


Adaptacin al medio, produccin de
enzimas
Tiempo variable: entre una hora a das.
Tamao relativo aumentado por divisin

Fase exponencial o de
crecimiento logartmico

Relacin casi lineal entre el


tiempo y el nmero de elementos.
Actividad metablica
incrementada
Depende del tiempo de
generacin de cada bacteria
Los antimicrobianos son mas
activos
Puede haber variaciones entre el
crecimiento in vitro e in vivo.

Fase Estacionaria

En determinado punto el crecimiento disminuye


La poblacin no aumenta
Clulas nuevas reemplazan a las clulas muertas
Actividad metablica mas lenta
Clulas en animacin suspendida
Produccin de metabolitos secundarios

Antibioticos
Toxinas

Fase de Esporogenesis para las especies


productoras de esporas

Fase de declinacin o
muerte

Recuento de clulas disminuye


sensiblemente
El numero de clulas muertas supera al
nmero de clulas vivas
Acumulacin de productos txicos
Disminucin de nutrientes
Aparicin rpida : autolimitar
diseminacin infecciones

Tcnicas para determinar el


nmero y viabilidad de las

clulas
Contar al microscopio el

nmero de clulas en un
volumen conocido
Establecer el nmero de
clulas por turbidimetria
Recuento de elementos
viables por cultivo
(Unidad Formadora de
Colonias o UFC)

Efecto de la Temperatura

Temperatura mnima de crecimiento


Temperatura ptima de crecimiento
Temperatura mxima de crecimiento

Sicrfilos

Requieren bajas temperaturas


15 20 C
La mnima puede ser muy baja
Bacterias en el fondo del mar y en los
polos

Mesfilos

Rango de temperaturas: 25 40 C
Temperatura ptima: 37 C 1 C
Agentes que afectan al hombre y los
animales

Termfilos

Toleran altas temperaturas


Temperatura ptima: 55 C
Temperatura mxima: 80 C o mas.

Temperatura

Condiciones de pH

pH : Potencial Hidrgeno. Va desde 0 a


14.
pH < 6,5 cido
pH > 7,5 bsico o alcalino
pH 6,5 7,5 neutro Mas adecuado para
crecimiento bacteriano
Bacterias que crecen hasta pH 4
Acidfilas (Por ejemplo: Lactobacillus)
Vibrio cholerae : medio alcalino

Presin Osmtica

Los solutos (sales y azcares) disueltos


se desplazan a zonas de menor
concentracin. El agua se desplaza a
zonas de mayor concentracin de solutos
Una presin osmtica alta causa prdida
de agua y plasmlisis de la clula
Halfilas: bacterias que toleran altas
concentraciones salinas
Halfilas facultativas : toleran hasta un 2
% de sales

Condiciones atmsfricas

Potencial de xido-reduccin o Redox


(Eh)
Respiracin bacteriana : reacciones de
xido-reduccin, en cadena
El aceptor final de electrones o
hidrogeniones es variable

Oxgeno

Aerobios

Requieren oxgeno, aceptor final de


hidrgeno
Formacin de H2O y CO2
Produccin de enzima Catalasa :
desdoblamiento del Perxido de
hidrgeno (H2O2) en H2O y oxgeno
Prueba de Catalasa para diferenciar
microroganismos (Staphylococcus de
Streptococcus)

Anaerobios

Viven en ausencia de oxgeno atmosfrico


Aceptor final de hidrgeno : compuesto
inorgnico (NO3 o SO4)
Fermentacin: la fuente de carbono
provee energa, el donador de hidrgeno y
el aceptor final (un compuesto orgnico
como cidos o alcoholes)
Muy frecuente en microorganismos orales

Anaerobios

Anaerobios obligados: no utilizan O2


Anaerobios moderados: toleran de un 2
a un 8 % de O2
Anaerobios aerotolerantes: sobreviven
un tiempo en presencia de O2
Anaerobios facultativos: aceptan
indistintintamente una situacin u otra

Microaerfilos

Requieren bajas concentraciones de O2 para


crecer
Utilizan el O2 como fuente de energa pero a
concentraciones < 15 %
Susceptibles a radicales superxido
Enzima Superxido Dismutasa (SOD) :
transforma radicales superxido en H2O2
Capnofilas: desarrollan mejor con
concentraciones de CO2 elevadas
La cavidad oral presenta todas estas variantes
Las especies capnfilas aumentan en
personas con alteraciones periodontales

Requerimientos de Oxgeno

Control de Microorganismos

Muchos factores estimulantes del


desarrollo bacteriano se usan para
preservar alimentos:

Baja temperatura
Salmueras
Dulces
Salados
Ahumados

Medidas del Crecimiento


Microbiano

Se mide siguiendo los cambios en el nmero


de clulas o el peso de la biomasa celular.
El clculo del nmero de clulas que existen
en una suspensin se puede llevas a cabo
mediante el Recuento celular
(microscopa, n de colonias), Masa celular
(peso seco, turbidimetria) o Actividad
Celular (grado de actividad bioqumica en
relacin la tamao de la poblacin)

Recuentos: Clasificacin

DIRECTOS E INDIRECTOS
VIABLES O TOTALES
Mtodos:
Recuento directo al microscopio
Recuento en placas
Diluciones
Trbidimetria, Nmero mas problable,
filtracin

Medicin del crecimiento


bacteriano

Medios de Cultivo

Sustancias nutritivas que permiten el desarrollo


de microorganismos en el laboratorio
Cultivo: brindar condiciones ptimas de
crecimiento
Fciles de preparar
Permitir el desarrollo de gran variedad de
grmenes
Aportar nutrientes adecuados (aminoacidos,
nucletidos, factores de crecimiento, glucosa,
iones inorganicos)

Medios de Cultivo

Optimo contenido de H2O y correcto pH


Requerimientos de O2
Estril, evitar contaminaciones
Incubacin: temperatura ptima en
estufas

Clasificacin de los medios de


cultivo

Naturales: solo usados para enriquecer


medios (leche, suero, papa)
Artificiales se preparan en el laboratorio

Lquidos: caldos
Slidos: caldos adicionados de substancias
capaces de solidificar (Agar-agar)

Medios Complejos: extractos de carne,


levadura, peptonas. (composicin
qumica desconocida)
Medios Enriquecidos: agregado de suero
o sangre

Clasificacin de los medios de


cultivo

Medios selectivos: permiten crecer un solo


tipo de microorganismo (substancias
inhibidoras)
Medios diferenciales o indicadores:
evidencia alguna actividad metablica por
cambio de estado o color propia de un tipo
determinado de microorganismo
Medios de Transporte: traslado de
muestras biolgicas manteniendo las
bacterias viables

Tipos de Medios de Cultivo

Medios de Cultivo

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