DETERMINCIN DE

ANTGENOS
BACTERIANOS

MEDIANTE
INMUNODIFUSIN

CORDERO PALOMINO, Jhordi

QUICA FERNNDEZ, Fidel AYACUCHO-PER
SOLIER SOSA, Mary Cruz 2017
 OBJETIVOS
Conocer el fundamento de tcnica de
precipitacin en fase slida (inmunodifusin).
Determinar la formacin de anticuerpos para
antgenos de bacterias.
Explicar el fundamento de la formacin de
anticuerpos frente al antgeno bacteriano en el
cuerpo del conejo.
 INTRODUCCIN
La reaccin
inmunolgica que
origina el encuentro
de los anticuerpos y
los antgenos generan
una reaccin
especfica para estos;
esta reaccin es la
base de identificacin
en la actualidad sobre
la clnica de las
enfermedades.
 MARCO TERICO
ANTGENO
Es toda sustancia que,
introducida en un organismo
que no la posea, provoca en l
la formacin de un anticuerpo
especfico con el cual puede
combinarse de forma electiva.

ANTICUERPO
Los anticuerpos
(tambin conocidos
como inmunoglobulinas,
abreviado Ig) son
glicoprotenas del tipo
gamma globulina.
 PRECIPITACIN

Un antgeno soluble, al ser puesto en contacto con

su anticuerpo especfico, forma complejos
inmunes que al encontrarse en proporciones
ptimas se insolubilizan dando una reaccin de
precipitacin.

Precipitacin en fase Precipitacin en fase slida:

lquida: se lleva a cabo en se lleva a cabo en un soporte
el medio lquido. de agar.
 INMUNODIFUSIN
Es una tcnica que se utiliza en el laboratorio para la
identificacin y cuantificacin de cualquiera de las
inmunoglobulinas. Su base se encuentra en la presencia de
un precipitado visible, resultado de la combinacin
antgeno-anticuerpo en determinadas circunstancias.
MATERIALES
Instrumentos y Reactivos Otros
equipos o Agar noble al 1% o Mechero
o Matraz de 250- o Solucin buffer o Gradilla
Fosfato o Aguja
500ml o Merthiolate al 1 % o Jeringa
o Placas Petri o Solucin salina o Algodn
o Tubos de ensayo o Frascos de vidri
fisiolgica
o Pipetas o Alcohol o Sacabocado
o Incubadora o Agua destilada o Tijera
o Centrifuga
o Refrigeradora
Materiales biolgicas

o Conejo
o Cepa de Salmonella
tiphy
METODOLOGA
B: PROCESO DE INOCULACION DEL ANTGENO

Depilacin de la ingle
izquierda para la
Antgeno Conejo inoculacin

Carga de jeringa con

Inoculacin del el antgeno de
antgeno al conejo
cisticercosis
C: PREPARACION DEL BUFFER FOSFATO

BALANZA

fosfato monobsico de
sodio fosfato disdico anhidro

80 ml de H2O (d)
15 ml de H2O (d)

100 ml
Agregar 1mL de
Merthiolate al 1%
D: Preparacin del agar tamponado

Pesar 2 gr de agar Disolver en 100 ml de Disolver y llevar a

noble solucin bruffer a pH autoclave a 121c, 15
7.2 lb, 15min

Esperar a que enfri el Una vez esterilizado poner en

agar tamponado placas al lado de un mechero
F: obtencin del anticuerpo

Extraccin de sangre por puncin

cardiaca (10ml)

Centrifugar a 3000 rpm/3 minutos

Una vez centrifugado obtener el suero

sanguneo
 G: Corrida de la prueba de inmunodifusin

Hacer 5 orificios con Colocar el suero Agregar el antgeno

el sacabocado (anticuerpo) en el en los pocillos
pocillo central sobrantes

Incubar a 37C Colocar las palcas en

por 24 horas una cmara hmeda
 RESULTADOS
Una vez transcurrido las 24 hrs de incubacin se obtuvieron el siguiente
resultado
 CONCLUSIONES

Se logr conocer el fundamento general sobre la tcnica de

inmunodifusin.

Se logr desarrollar la preparacin de antgenos para la inoculacin

en animales de experimentacin (conejo) para posterior
produccin de anticuerpos contra cisticercosis.

Se logr demostrar la reaccin antgena anticuerpo mediante la

tcnica de inmunodifusin.

Observamos la Reaccin antgeno-anticuerpo evidenciando por

bandas de precipitacin.