UNIVERSIDAD DE SANTANDER

SEDE CCUTA
FACULTAD DE SALUD
PROGRAMA DE BACTERIOLOGA
Y LABORATORIO CLNICO

RELACIN DE ADIPONECTINA Y EL FACTOR DE NECROSIS TUMORAL

ALFA (TNF) CON LA FUNCIN PANCRETICA EN LOS PACIENTES CON
DIABETES MELLITUS TIPO 2 DEL HOSPITAL ERASMO MEOZ DE CCUTA
EN EL 2015

Autores
MARIA GABRIELA MUOZ
FRANCISCO OHOA

Asesor(a) cientfico (a)

Dra. Jhoalmis Sierra Castrillo

Asesor Metodolgico
Jael Contreras Rangel
Junio 20 de 2016
Contents
CONTENIDO
PROBLEMA

OBJETIVOS

MARCO REFERENCIAL

METODOLOGA

RESULTADOS

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Noviembre 23 de 2011
 PROBLEMA
La diabetes mellitus 2 (DM2) es una Aparece cuando el pncreas
enfermedad crnica de alta no produce insulina suficiente
prevalencia en nuestro pas y en o cuando el organismo no
todo el mundo, alcanzando utiliza eficazmente la insulina
aproximadamente 5% de la que produce.
poblacin.

Dada la interaccin entre el

pncreas endocrino y exocrino,
una complicacin no clsica de
la DM es el desarrollo de
insuficiencia exocrina.
Por otro lado, un porcentaje estimado
de 0,5 a 2% de los pacientes
diabticos corresponde a casos
secundarios a pancreatitis crnica
(PC).
 PROBLEMA
PANCREAS
DM altera secrecin exocrina del pncreas
disminuyendo en el siguiente orden la
cantidad de: amilasa, tripsina, lipasa y
bicarbonato.
La disfuncin exocrina (pacientes
insulinopnicos)
Grado de disfuncin se correlaciona con el
tiempo de diabetes.
somastatina Alteracin, falta de estimulacin acinar que
resulta de la deficiencia de insulina, lo cual
se sugiere que produce una disminucin en
la sensibilidad de las clulas exocrinas a la
colecistoquinina, disfuncin que regresa a
Celulas delta 2
glucagn
Peptido intestinal vasoactiv la normalidad despus de la administracin
Celulas PP o F
Polipeptdo pancreatico de insulina exgena.
Insulina
La DM tambin se caracteriza por aumento
de la secrecin de somastostatina,
glucagn y PP, hormonas que participan en
la secrecin endocrina.

AMILASA
Yadav R, Bhartiya JP, Verma SK, Nandkeoliar MK . The evaluation of serum amylase in the patients of type
2 diabetes mellitus, with a possible correlation with the pancreatic functions. J Clin Diagn R.S 2 .013 PANCREATI
Jul;7(7):1291-4. doi: 10.7860/JCDR/2013/6016.3120. Epub 2013 Jul 1.
CA
 TEJIDO
TEJIDOADIPOSO
ADIPOSO
TAB--- el rgano de almacenamiento de lpido mas eficaz del
cuerpo

Adipocitoquinas secretadas esta:

Adiponectica: Mejora la sensibilidad a la insulina, exhibe

propiedades antiaterognicas, cardioprotectoras y
antiinflamatorias.

FNT-: Disminuye la lipogenesis, aumenta la lipolisis,

induce hiperglucemia y resistencia a la insulina por
interferir con su receptor y activacin de vas de
sealizacin.
 PROBLEMA
Poblacin de pacientes
diagnosticados con diabetes mellitus
E tipo 2 en quienes se busca el
F comportamiento de la Adiponectina
E ,Factor de necrosis tumoral alfa y Conocer el
C comportamiento de
amilasa a nivel pancretico.
T
estos 3 marcadores a
O
S nivel pancretico,
relacionarnos y
Al evidenciar el estudio de marcadores analizar si a largo
pronostico para diabetes mellitus tipo2 a plazo estos nos
nivel renal se genera la necesidad de servirn como
C analizar el comportamiento de nuevas marcadores de dao
A alternativas de marcadores o pruebas no pancretico
U relacionado a
solo a nivel renal , si no tambin en este
S
caso pancretico para as a corto plazo diabetes mellitus tipo
A
S se logre conocer mas acerca de como 2.
es el comportamiento a nivel pancretico
en pacientes con diabetes mellitus tipo
2.

DSPI-03
 FORMULACIN
DEL PROBLEMA

Cmo es el comportamiento de la
Adiponectina , el factor de necrosis
tumoral alfa (TNF) y amilasa a nivel
pancretico en pacientes con diabetes
mellitus tipo 2 del Hospital Erasmo
Meoz de Ccuta?

DSPI 04
 OBJETIVOS
Objetivo General:

Determinar el Comportamiento de la
Adiponectina y el factor de necrosis tumoral
alfa (TNF) en la funcin pancretica de los
pacientes con diabetes mellitus tipo 2 del
Hospital Erasmo Meoz de Ccuta.
 Establecer la conducta de
Adiponectina y el TNF- en
suero de pacientes
diabticos tipo 2 mediante la
tcnica de ELISA.
Objetivo Especficos

Determinar los
niveles de amilasa
srica en pacientes
diabticos tipo 2 por
medio de mtodos
cinticos.
Relacionar el
comportamiento de los
niveles de amilasa srica
con los valores de
Adiponectina y el TNF- en
diabticos tipo 2 mediante
anlisis multivariado.
 JUSTIFICACIN
Terico
Establecer el comportamiento
de Adiponectina, Factor
necrosis de tumoral alfa y
amilasa a nivel pancreatico.
Prctica
Tener conocimiento de la
importancia de estos 3
marcadores en la funcion
pancreatica de pacientes
con diabetes mellitus tipo
2.
Social
Utilizar estas tcnicas como
marcadores de progresin o
pronostico de la diabetes mellitus
tipo 2.
Institucional
Aportara datos importantes al
macroproyecto titulado
CORRELACIN DE LOS NIVELES
DE ADIPONECTINA Y EL FACTOR DE
NECROSIS TUMORAL ALFA (TNF-)
CON ALBUMINURIA EN PACIENTES
DIABTICOS TIPO 2 EN CCUTA,
NORTE DE SANTANDER
 Porque la necesidad?
Porque la necesidad?

De acuerdo con la
La Asociacin
Organizacin Mundial de lala
De acuerdo con
La Asociacin En Ccuta, Norte de
Organizacin Colombiana de En Ccuta, Nortelade
Salud (OMS), Mundial la Diabetes de la
Colombiana de Santander
Salud (DM) (OMS),eslael Diabetes Diabetes ha estimado Santander Mellitusla
Mellitus tercer Diabetes ha estimado Diabetes
Mellitus de (DM) es el tercer que el 7% de la
problema salud pblica que el colombiana
poblacin 7% de la Diabetes
figura entre laMellitus sexta
msproblema importante de salud en pblicael figura entre la sexta
poblacin
mayor de 30 aos tiene colombiana causa de
ms
mundo. importante
Globalmenteen enel
mundo.
mayor de tipo
Diabetes 30 aos 2 tiene
y mortalidad. causa de
1995 la Globalmente
poblacin deen Diabetes de tipo
1995 la adultos
poblacin alrededor un 302 a y mortalidad.
Numero de casos
diabticos en elde alrededor de un 30 a
40% de los afectados
diabticos
mundo era deadultos 135 millones en el
40% de los afectados 166 y una de
Numero tasa casos del
mundo era de 135 millones desconocen su 166 y una tasa del
y se incrementar a 300 desconocen su 27,1%
y se incrementar enfermedad.
millones en el ao 2025a con 300
enfermedad. 27,1% 166 27,1.
Poblacin:
Esta enfermedad se
unmillones
aumento en delel ao 120%,2025del con
Esta enfermedad Poblacin: Instituto 166 27,1.
un aumento del 120%, del encuentra entre lasse Reporte:
cual los pases encuentra Reporte: Instituto
primeras cincoentre causas las Departamental de
desarrollados aportaranpases
cual los el
40%desarrollados
y los pasesaportaran en vas deel
primeras
de muerte en Colombia cinco causas
Salud, N de Sde
Departamental
40% y los pases en vas de y de muerte su en Colombia
morbilidad Salud,
(2012) N de S
desarrollo el 170%.
P. Aschner, Epidemiologyofdiabetes inColombia, Av Diabetol. 2010;26:95-100 y su morbilidad
(disponible en: ) http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revistaAvances/26-
desarrollo el 170%.
2-5-sem2.pdf
tambin es (2012)
tambin
considerable. es
considerable.
Anlisis de Situacin de Salud (ASIS) En Municipios de Frontera Departamento Norte De Santander 2.010. Disponible en: http://www.minsalud.gov.co/plandecenal/mapa/Analisis-de-
Situacion-de-Salud-en-municipios-de-frontera-Departamento-Norte-Santander.pdf
 ADIPONECTINA
ADIPONECTINA
Adipocitocinas secretada
por los adipocitos,
encargada de regular el
metabolismo energtico.
247aminocidos, 30kDa
Cromosoma 3, locus3q27
RECEPTORES
0.01% protenas ADIPONECTINA
plasmticas

AdipoR2
AdipoR1
 Mecanismos: ADIPONECTINA

Adiponectina: un nuevo nexo entre obesidad, resistencia a la insulina y enfermedad cardiovascular Xavier Palomera,b, Antonio Prezb,d y Francisco Blanco-Vacaa,c a Institut de
Recerca. Hospital de la Santa Creu i Sant Pau. Barcelona. bServei dEndocrinologia i Nutrici. Hospital de la Santa Creu i Sant Pau. Barcelona. c Servei de Bioqumica. Hospital
de la Santa Creu i Sant Pau. Barcelona. dUniversitat Autnoma de Barcelona. Barcelona. Espaa.
Factor de necrosis tumoral
alpha-TNF-a
Sintetizado
Sintetizado
como
como
protena
protena
transmembrana 26KDa.
transmembrana
Protelisis produce 26KDa.
un fragmento
Protelisis produce un fragmento
de 14 kDa y uno de 17 kDa es la
de 14circulante
forma kDa y uno comode homodimero
17 kDa es la
forma
unido decirculante
forma no como homodimero
covalente.
185unido
aa de forma no covalente.
cromosoma
185 aa 7 gen p21.
cromosoma
Conforma con 7 gen p21.
otras citocinas, el
Conforma con otras citocinas, el
estmulo en la fase aguda de la
estmuloinflamatoria.
reaccin en la fase aguda de la
reaccin
Efectos inflamatoria.
biolgicos
Efectos biolgicos
-Apoptosis
-Apoptosis de clulas tumorales
-citotoxicidad
-citotoxicidad
-Activacin de y clulas tumoralesde
diferenciacin
-Activacin y diferenciacin de
monocitos
monocitos
Altera la funcin de la barrera
Altera
glomerular la de funcin
la paredde la barrera
capilar y
conduce una mayor permeabilidad a y
glomerular de la pared capilar
laconduce
albuminauna mayor permeabilidad a
 Amilasa
Enzima, se produce principalmente en
las glndulas salivares (glndulas
partidas) y en el pncreas.
Funcin:
Digerir el glucgeno y el almidn para la
sntesis de azucares simples.
Se realiza principalmente para
diagnosticar o controlar enfermedades del
pncreas e igualmentepuede detectar
algunos problemas del tubo digestivo.
 JUSTIFICACIN
Terico
Establecer el comportamiento
de Adiponectina, Factor
necrosis de tumoral alfa y
amilasa en la funcin
pancretica.
Prctica
Tener conocimiento de la
importancia de estos 3
marcadores en la funcion
pancreatica de pacientes
con diabetes mellitus tipo
2.
Social
Utilizar estas tcnicas como
marcadores de progresin o
pronostico de la diabetes mellitus
tipo 2.
Institucional
Aportara datos importantes al
macroproyecto titulado
CORRELACIN DE LOS NIVELES
DE ADIPONECTINA Y EL FACTOR DE
NECROSIS TUMORAL ALFA (TNF-)
CON ALBUMINURIA EN PACIENTES
DIABTICOS TIPO 2 EN CCUTA,
NORTE DE SANTANDER
 MARCO DE
ANTECEDENTES
Leptina srica,
Adiponectina y factor
de necrosis tumoral-
en ratas
Margoni, A. hiperlipidmicos
Grecia, 2011 con / sin diabetes Ramrez, A.
mellitus. Colombia, 2012
El factor de necrosis
tumoral-, la resistencia a
la insulina, el metabolismo
Asociacin de los de lipoprotenas y la
niveles de suero con obesidad en humanos.
adipocitocinas en la
neuropata autonmica
Chan-Hee, J.
cardaca en pacientes
Korea, 2012
diabticos tipo 2.
 MARCO METODOLGICO
M
Tipo de Investigacin
A
Observacional T
transversal. E
R FASE:
I Recoleccin y
A
anlisis de
L
E muestras
S
MARCO FASE
Poblacin y Muestra METODOLGIC
Y :Determinacin
O
de amilasa
M pancretica

T
O FASE
Pacientes con diabetes
D 3:Determinaci
mellitus tipo 2
O n de
Adiponectina y
Probabilstica o no
TNF-
probabilstica FASE :
Anlisis de
resultados
DSPI-08
METODOLOGA
METODOLOGA
PROCEDIMIENTOS
PROCEDIMIENTOS
 Recoleccin y anlisis de muestras
Recoleccin y anlisis de muestras

Pacientes:
Pacientes:
Hospital Universitario
HospitalMeeoz
Erasmo Universitario
y la
Erasmo Meeoz yde la
Universidad Instrumento: Encuesta y el
Universidad
Santander. de Instrumento:informado.
consentimiento Encuesta y el
Santander. consentimiento informado.

Toma de muestra
Toma de muestra

Separacin y
almacenamiento (-80C)
Separacin y
almacenamiento (-80C)
 Determinaci
Determinaci
n de
Determinaci n de
nDeterminaci
de glucosa amilasa
amilasa
n de glucosa pancretica
pancretica
Mtodo Mtodo: inmunoturbidimtrico de la casa
colorimtrico comercial Wiener Lab, utilizando el
Casa comercial equipo CB3500 I.
Wiener Lab,
utilizando el equipo La -amilasa hidroliza el sustrato definido
CB3500 I. 2-cloro-p-nitrofenil- -D-maltotrisido
(CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-
nitrofenol (CNP), formndose 2-cloro-
nitrofenil--D-maltsido (CNPG2),
maltotriosa (G3) y glucosa .

Leer: 500nm
Leer: 405 nm
VR: 70-110mg/dl
>125 mg/dl valores alterados
 Determinacin de
Determinacin
Adiponectina de
y TNF-
Adiponectina y TNF-

24 muestras del estudio Ensayos de

El kit de ELISA
24 muestras del
descongelaron estudio
a TA Ensayos de
inmunoabsorcin
El kit de
empleado fueELISA
de la
descongelaron
20 controoles a TA inmunoabsorcin
ligados a enzimas
empleado
casa fue de la
comercial
20 controoles ligados a enzimas
(ELISA tipo sndwich)
casa comercial
eBioscience
eBioscience Cintica de la reaccin antgenos -anticuerpo (ELISA tipo sndwich)
Anticuerpo + Cintica de+la reaccin
Antgeno Anticuerpo antgenos
-anticuerpo
Complejo Anticuerpo Anti Hu
monoclonal (Muestra, estndar monoclonal K asociacin Adipo 0 TNF-
Anti Hu o control) marcado biotina /Antgeno/Anticuerpo Anti Hu
Adiponectina o TNF- Adipo 0 TNF- biotinilado

K disociacin

Reaccin enzimtica
Complejo antgenos- + Reaccin
Sustrato enzimtica
cromgeno Se lee a 450 nm.
anticuerpo-biotina- tetrametilbenzidina (TMB) H2O2
Estreptavidina- Peroxidasa
de Rbano (HRP)
H+

Chromate 4300
Aplicacin de encuesta y
consentimiento informado
Toma de muestra

Procesamiento de las
muestra del estudio
 RESULTADOS

GNERO
TOTAL
GRUPO MASCULINO FEMENINO
n (% fila) n (% fila) n (% col)
DIABETICOS 10(38,5) 16(61,5) 26(56,5)
CONTROLES 10(50,0) 10(50,0) 20(43,5)
TOTAL 20(43,5) 26(56,5) 46(100,0)

Distribucin de diabticos tipo 2 y controles segn gnero

Estos niveles si estn relacionados positivamente con la edad y el tiempo de diagnostico, los
casos lleva entre 120 y 180 meses con diabetes(45.8%); sin embargo, el 12.6% lleva ms de 240
meses diagnosticados con la enfermedad.
Medidas descriptivas para edad.
Medidas descriptivas para amilasa pancretica,
concentracin de Adiponectina y TNF-
Correlaciones bivariadas entre variables de inters en los pacientes
diabticos
 ANALISIS DE RESULTADOS

No se evidencia correlacin
significativa entre los valores No se evidencia
para concentracin de correlacin
adiponectina y la concentracin significativa entre
de TNF- (p < 0.81). la edad o el
No existe correlacin entre el gnero y los
nivel de amilasa pancretica y niveles de amilasa
la concentracin de pancretica,
adiponectina(p = 0.86). concentracin de
Tampoco se evidencia adiponectina y la
correlacin entre el nivel de concentracin de
amilasa pancretica y la TNF-(p >0.05).
concentracin de TNF- (p =
0.82).
 CONCLUSIONES
El nivel medio de amilasa
pancretica es similar entre
grupos (p = 0.69); el nivel medio
en los casos fue 28.5 10.3U/L,
mientras que en el grupo control
fue 27.1 13.8U/L.
Existe correlacin positiva y
estadsticamente significativa
entre los valores para
concentracin de adiponectina y
la concentracin de TNF- (p <
0.01); A mayor nivel de
concentracin de adiponectina,
mayor nivel de concentracin de
TNF- en este grupo de
pacientes.
No se evidencia correlacin
significativa entre la edad o
el gnero y los niveles de
amilasa pancretica,
concentracin de
adiponectina y la
concentracin de TNF-(p
>0.05). Al contrario que el
estudio realizado por
Margoni, donde refiere que
la adiponectina y el factor
de necrosis tumoral (TNF-
a son diferentes los niveles
en individuos diabticos y
obesos en comparacin con
individuos no diabticos no
obesos.
 RECOMENDACIONES

Desarrollar propuestas de investigacin sobre

la relacin entre factores predisponentes de
Pancreatitis y pacientes con Diabetes mellitus
tipo 2, como estudio presuntivo para poder
aplicar la medicina preventiva.
Estudiar marcadores pero en pacientes que
estn en una fase crnica de la enfermedad o
que tengan enfermedades de base.
 REFERENCIAS BILIOGRAFICAS
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leptin levels and insulin sensitivity in childhood and adolescent obesity: adiponectin is a marker of metabolic syndrome. J Clin
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2. Arroyo, B. y colaboradores. Aspectos epidemiolgicos de la diabetes mellitus y su relacin con los contaminantes ambientales.
2014. Colombia. Recuperado de: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-75182014000100014
3. Bechmann L. P,. Hannivoort R. A,. Gerken G,., and. Canbay A . (2012) The interaction of hepatic lipid and glucose metabolism in
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bin/decsserver/decsserver.xis&task=exact_term&previous_page=homepage&interface_language=e&search_language=e&searc
h_exp=Adipoquinas
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http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs312/es/
7. Chan-Hee, J. y colaboradores. Asociacin de los niveles de suero con adipocitocinas en la neuropata autonmica cardaca en
pacientes diabticos tipo 2. 2012. Korea. Recuperado de: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3353195/pdf/1475-
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8. Colombia. Congreso. Constitucin Poltica de Colombia de 1991 Bogot: El Congreso; 1991.
9. COLPRENSA. 14 de Noviembre de 2014. Recuperado de:
http://www.eluniversal.com.co/salud/colombia-es-el-segundo-pais-con-mas-diabeticos-de-centro-y-suramerica-176806
10. Drucker DJ.(2007) The role of gut hormones in glucose homeostasis. J Clin Invest.;117:2432. [8] Barreto SG, Carati CJ, Toouli
J, Saccone GT.( 2010)The Islet-acinar Axis of Pancreas: More than Just Insulin. Am J Physiol Gastrointest Liver
Physiol.;299:G1022. [9] H.P., H. Zeng, Y. Zhang, R. Jungries and P. Chung et al., (2001)Mol Cell 7(6):1153-63.
11. Elissondo Natalia, Gmez Rosso Leonardo, Maidana Patricia, Brites Fernando. Adiponectin: an adipocytokine with multiple
protective functions. Acta Bioqum Cln Latinoam 2008; 42 (1): 17-33.
Gracias
Elaborado por M.Sc. Jael Contreras
Rangel