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CONTROL

MICROBIOLOGICO DEL
AGUA

Prof. Mg. J. Salazar D.


Control Microbiolgico
Toda norma nacional internacional,
establecen o recomiendan requisitos
de calidad para el agua de consumo
humano.
El agua es apta bacteriolgicamente
para consumo humano, si es exenta
de microorganismos patgenos de
origen entrico y parasitario
intestinal.
Microorganismos
transmisores
transmiten , Helicobacter pylori,
enfermedades: Campylobacter)
Salmonelosis Giardiasis (Giardia
(Salmonella) lamblia)
Shigelosis (Shigella)
Cristosporidiosis
Colera (Vibrio
(Crystosporidium),.
Cholerae).
Esquistosomiasis
Amebiasis (Entamoeba
histolytica) (Schistosoma).
Alteraciones Desrdenes
gastrointestinales hepticos (virus de
(Aeromonas mesfilas, hepatitis), etc.
Control rutinario de Microorganismos

Controles rutinarios del total de los


microorganismos hdricos, riesgosos
para la salud, son difciles de llevar a
cabo por razones de:
- Gran variedad de bacterias
patgenas cultivables.
- Complejidad de los ensayos de
aislamientos por la baja
concentracin de varias especies
altamente agresivas.
ANLISIS
BACTERIOLGICOS
Los anlisis se centran en la
bsqueda de microorganismos
indicadores de contaminacin fecal y
se centralizan en la cuantificacin de
coliformes.

Los Coliformes est integrado por


enterobacterias, siendo Escherichia
coli el indicador universal de
contaminacin fecal.
MICROBIOLOGA
Estudia seres vivientes de tamao
microscpico que existen como
clulas aisladas o asociadas y tambin
incluye el estudio de virus
(microscpicos no celulares).
Los microorganismos, son capaces de
llevar a cabo procesos de crecimiento,
generacin de energa y reproduccin,
independientemente de otras clulas
sean del mismo tipo o diferentes.
TIPOS DE
MICROORGANISMOS
Las clulas microscpicas pueden pertenecer a dos
grandes grupos:
Eucariotas y Procariotas.
Eucariotas: constituyen la unidad estructural de
protozoarios, hongos y algas.
Son organismos unicelulares o multicelulares que
poseen en su interior estructuras limitadas por
membranas llamadas organelas (ncleo,
mitocondrias y cloroplastos capaces de realizar
fotosntesis).
Procariotas: son bacterias, cuya estructura interna
es sencilla. Etimolgicamente el trmino procariota
significa ausencia de membrana nuclear.
BACTERIAS (1)
Microorganismos unicelulares, se
reproducen por fisin binaria. El
tamao, es menor que el de una clula
eucariota tpica (ej. Escherichia coli 0,5
2 m).
Amplio rango de tamaos segn
especies, varian desde 0,2 m de
dimetro (caso de los micoplasmas)
hasta 40 m (Beggiatoa gigantea).
Las formas de las bacterias son:
esfrica, bastn alargado o espiral.
BACTERIAS (2)
De forma esfrica se denominan COCOS
(redondeados, ovoides o elpticos).
De forma de bastn alargado se
denominan BACILOS (cilndricos,
fusiformes, etc.) .
Las de forma de bastn curvado se
denominan ESPIRILOS.
Las bacterias cuya imagen proyectada
sobre el plano tienen forma de coma, se
llaman VIBRIOS.
CRECIMIENTO MICROBIANO (1)
El crecimiento celular es el aumento
ordenado de todos los componentes
Qumicos, incrementando los
constituyentes y estructuras celulares.

Los nutrientes, estn disueltos en agua,


por tanto el agua es su medio de vida y
razn del crecimiento celular.

Los nutrientes requeridos en grandes


cantidades son denominados
macronutrientes, mientras que los
micronutrientes son necesarios en
CRECIMIENTO MICROBIANO
(2)
Macronutrientes son: C, H, O, N (los
ms abundantes), P, S, K, Ca, Fe y
Na.
Micronutrientes son: Cr, Co, Cu, Mn,
Mo, Ni, Se, W, V, Zn.
Algunos organismos, necesitan muy
pequeas cantidades de nutrientes
orgnicos: vitaminas, aminocidos,
purinas y pirimidinas.
NUTRIENTES MICROBIANOS (1)
La nutricin, proceso donde los seres vivos ,
toman del medio donde habitan, los
nutrientes que necesitan para crecer.
Estos nutrientes son para dos fines:
Energticos (reacciones de mantenimiento)
y
Biosintticos (reacciones plsticas o
anabolismo).
La nutricin presenta un aspecto de
aprovisionamiento de energa y otro de
suministro de materiales para la sntesis
celular.
NUTRIENTES MICROBIANOS
(2)
Segn los fines del aprovisionamiento de energa,
las bacterias se pueden dividir en fottrofas
cuando utilizan la luz como fuente de energa
(algas y cianobacterias) y quimitrofas si utilizan
compuestos qumicos como fuente de energa.
Las quimiolittrofas slo requieren sustancias
inorgnicas sencillas como H2S, S, NH3, NO2 -,
Fe2+, etc. (Nitrosomona, Nitrobacter, Gallionella).
Las quimiorgantrofas requieren compuestos
orgnicos como hidratos de carbono,
hidrocarburos, lpidos, protenas, alcoholes, etc.
(Enterobacter, la mayora de las cultivadas en
laboratorios).
EL OXIGENO COMO FACTOR DE CRECIMIENTO(1)

El oxgeno es un macronutriente, para


unos son esenciales para otros n, se
pueden dividir en:
Bacterias aerobias: Necesitan O2 para
crecer; algunas de ellas requieren
presiones de O2 , inferiores a la
atmosfrica.
Bacterias anaerobias facultativas: realizan
metabolismo energtico aerobio
(respiracin aerobia) o anaerobio
(respiracin anaerobia y fermentacin),
dependiendo del ambiente, disponibilidad
EL OXIGENO COMO FACTOR DE
CRECIMIENTO(2)
Bacterias anaerobias estrictas:
Para ellas el oxgeno resulta txico
(por ejemplo Clostridium).
Bacterias anaerobias aerotolerantes:
Tienen metabolismo energtico
anaerobio (fermentacin), soportan
el O2 debido a que poseen enzimas
detoxificantes (por ej.
Streptococcus).
CONTROL MICROBIANO (1)
La planeacin de un programa efectivo de
control microbiano,en el tratamiento de
agua, requiere:

- Examen de los tipos de organismos


presentes y los problemas asociados que
pueden ocasionar.

- Poblacin de cada tipo de organismo, que


puede ser tolerada antes de que ocasione un
problema significativo.
CONTROL MICROBIANO (2)
Las bacterias es el mas grande de los
organismos perjudiciales, ocasionando
variados problemas.
Cada grupo de bacteria tiene su ambiente
preferido y se desarrolla en reas
especificas de un sistema de agua.
Las bacterias aerbicas, se hallan en aguas
aireadas.
Las bacterias anaerbicas, se encuentran
en reas deficientes de oxigeno, debajo de
depsitos, en rendijas, en lodos, etc.
MTODOS PARA CONTROLAR LA
ACTIVIDAD MICROBIANA
Hay mtodos fsicos para el control (control
de Temperatura, pasteurizacin, radiacin,
smosis, etc.).
En muchos sistemas industriales, solo puede
hacerse un uso limitado de las condiciones
fsicas que afectan la vida microbiana.
Los productos qumicos son la alternativa
para este control, empleado como biocidas.
Hay biocidas oxidantes y no oxidantes.
BIOCIDAS OXIDANTES
Gas Cloro como Biocida:
El gas cloro disuelto se hidroliza rpidamente:
Cl2 + H2O H+ + Cl- + HOCl
El HOCl, es el ingrediente activo, se disocia
parcialmente como:
HOCl H+ + OCl-
El Cl2 en agua existe como cloro libre, acido
hipocloroso in hipoclorito, a pH mayor a 7,5
predomina el hipoclorito, pH mas de 9 el
hipoclorito es exclusivo.
El Cloro libre disponible, es la suma del acido
hipocloroso y los iones hipoclorito.
CLORO COMO BIOCIDA
El mismo equilibrio logramos si empleamos
hipoclorito de calcio, dependiendo del pH.
Ca(OCl)2 <= => Ca2+ + 2OCl-
2OCl- + H2O <= => Ca+2 + 2 OCl-
D lo mismo, clorar con cloro elemental
con hipoclorito.
Otro compuesto distinto al cloro, que libera
iones hipoclorito, se compara
estableciendo el poder oxidante como
Cloro disponible.
Cloro como oxidante fuerte
El Cloro es capaz de reaccionar con muchas
impurezas del agua como NH3, aminocidos,
proteinas, material carbonceo, Fe +2 , Mn+2, S-2 y CN-
La cantidad de cloro que reacciona con estas
sustancias se denomina Demanda de Cloro.
El cloro reacciona con el amoniaco y forma
cloraminas diferentes que tambin tiene
propiedades biocidas, se conoce como Cloro
Residual Combinado.
La Cloracin hasta el punto de equilibrio, logra
adicionar suficiente cloro, para satisfacer la
demanda de cloro y producir cloro residual libre.
Productos qumicos de
cloracin
Gas cloro Cl2 (100% Cl2 disponible)
Dixido de cloro (ClO2) (263% Cl2
dispon.)
Hipoclorito de calcio (70%), de sodio
(15%), de Litio(35%).
Hoy se suele producir insitu el
hipoclorito a partir de agua de mar
de salmuera con celdas electrolticas,
lo que limita la exposicin del
personal a estos compuestos
peligrosos.
Biocida Oxidante: El Ozono
(O3).
Muy utilizado en la desinfeccin del
agua potable.
Empleado en tratamientos de
desechos para evitar las cloraminas
residuales.
El ozono se produce insitu, por una
descarga elctrica a travs del aire
del oxgeno.
Biocidas No Oxidantes
Estos biocidas pueden controlar la actividad
microbiana, en sistemas incompatibles con el
Cloro (Alto contenido de M.O. amoniaco).
Se caracterizan por:
- Actan independientemente del pH
- Son persistentes.
- Controlan organismos como hongos,
bacterias y algas.
Por lo general se formulan productos con
varios ingredientes en aplicaciones muy
especficas.
Algunos Biocidas No
oxidantes
Compuestos organosulfurados:
El MBT(metileno-bis-tiocianato), para
aplicaciones en fbricas de papel y
en sistemas de enfriamiento, para
controlar bacterias formadoras de
Limo.

Una alimentacin de 1 ppm en un


sistema de enfriamiento, controlar
los organismos que entran con el
agua.
Biocidas no oxidantes
Fenoles Clorados:
Muy efectivos contra organismos
como hongos y algas.
Tambien se suelen adicionar como
biocida al agua de enfriamiento.
Se usa tricloro y pentaclorofenol, que
son efectivos y econmicos.
ANLISIS MICROBIOLGICO
En sistemas controlados, no se
requiere esterilizacin completa, solo
se necesita un monitoreo.
A veces solo se corren cuentas
totales para conocer niveles globales
de poblacin microbiana.
Para sistemas especficos, se
requiere anlisis de organismos mas
especficos.
Bacterias indicadoras de contaminacin
Bacterias Indicadoras de Contaminacin
La norma bacteriolgica de calidad indica que el agua
debe estar exenta de patgenos de origen entrico y
parasitario intestinal, responsables de transmitir
enfermedades como salmonelosis, shigelosis, amebiasis,
etc.

Tres tipos de bacterias son importantes determinar:


COLIFORMES FECALES: indican contaminacin fecal.
AEROBIAS MESFILAS: determinan efectividad del
tratamiento de aguas.
PSEUDOMONAS: sealan deterioro en la calidad del agua
o una recontaminacin.
La sensibilidad de las bacterias aerobias msfilas a los
agentes de cloracin, sirven como indicadoras de eficacia
del tratamiento de potabilizacin del agua.
Toma de muestra para el anlisis
La validez de todo examen bacteriolgico se
apoya en una apropiada toma de muestra:
- Recipiente estril de boca ancha y
metodologa precisa.
- Adecuadas condiciones de transporte
desde el lugar de la fuente de agua hacia el
laboratorio (refrigeracin, tiempo).
- La conservacin de la muestra debe ser
confiable, y analizada inmediatamente o al
cabo de un corto perodo entre extraccin y
anlisis.
Metodologas de anlisis
El anlisis cuantitativo de bacterias indicadoras de
contaminacin puede realizarse por dos
metodologas:
Recuento directo de microorganismos cultivables por
siembra de la muestra sobre o en un medio de
cultivo agarizado.
Recuento indirecto (basado en clculos estadsticos)
despus de sembrar diluciones seriadas de la
muestra en medios de cultivos lquidos especficos.
Se considera, al cabo de una incubacin adecuada,
los nmeros de cultivos positivos y negativos.
Esta metodologa se denomina Tcnica de los Tubos
Mltiples y los resultados se expresan como
nmero ms probable (NMP) de microorganismos.
Otros mtodos
Tcnica de la Membrana Filtrante.
Se procede a filtrar normalmente 100 mL de muestra, a
travs de membranas de steres de celulosa
generalmente con dimetro de poros de 0,45 m y en
algunos casos de 0,22 m.
Luego la membrana se deposita sobre un medio de
cultivo selectivo y bajo condiciones favorables
(temperatura y tiempo de incubacin) y sobre la
membrana desarrollan colonias aisladas con aspectos
caractersticos que permiten la identificacin y el
recuento.

Conociendo el volumen de muestra filtrada es posible


determinar el nmero de UFC por unidad de volumen.
FIN

Referencias:
Manual del Agua: Tomo II.Ed. Mc. Graw Hill. 1993.
Microbiologa de agua. Conceptos bsicos, Mara C.
Apella y Paula Z. Araujo,
Centro de Referencia para Lactobacilos, Universidad
Nacional de Tucumn. Argentina.

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