Coprocultura

David Bichara
 Infeces do Trato Gastrintestinal

Diarria liberao anormal de fezes. Perda de fluidos e eletrlitos.

Disenteria distrbio inflamatrio, geralmente associado a sangue

e pus (fezes) e acompanhados de dor, febre, clicas.

Gastroenterite - sintomas gastrintestinais como nuseas, vmitos,

diarria e dores abdominais.

Enterocolite inflamao da mucosa do intestino delgado e

grosso.
Diarria, Infecco, Desnutrio e Mortalidade

60 a 70% das mortes por diarria se devem

desidratao
Desidratao aguda

Agravo Nutricional
Diarria

Infecco Desnutrio
 Indicaes de Coprocultura

Diarria sanguinolenta, febre, tenesmo,

sintomas severos e persistentes, presena de
leuccitos fecais e histria de exposio a
agentes bacterianos
 FEZES Intestino delgado Clon
Aparncia Aquosa Muco, pus ou sangue

Volume Volumosas Pouco volumosas

pH < 5,5 > 5,5

Frequncia Poucas vezes ao dia Vrias vezes ao dia

Sintomas Geralmente ausentes Dor anorretal, tenesmo

anorretais
Organismos Vrus, E coli, Clostridium E. coli (enteroinvasiva,
perfringens, V. cholerae, enterohemorrhagica), Shigella,
Giardia, Cryptosporidium Salmonella, Campylobacter,
Yersinia, C. difficile,
Aeromonas, Entamoeba
 Estudo das fezes
1. Exame parasitolgico e coprocultura
2. Sangue oculto nas fezes
3. Leuccitos ou Lactoferrina fecal (marcador de
leuccitos)

4. Gordura fecal
Qualitativa = Sudan III
Quantitativa (esteatcrito): dieta 100g/dia de gordura durante
coleta das fezes (3 dias)
Esteatorria: >7g/dia gordura nas fezes

5. Peso fecal: delgado ou clon?

6. Anlise para laxantes
 Estudo das fezes
7. Eletrlitos e Osmolaridade
Osmolaridade fecal normal = 290mOsm/L
Gap osmolar = 290 - 2 X (Na + K)
Diarria secretria pura < 50
Diarria osmtica > 125
Diarria mista: 50 125
8. pH fecal:
pH < 5,3: diarria por m-absoro de carbohidratos
pH entre 6,0 e 7,0: perdas de aminocidos e cidos graxos
9. Testes para enteropatia perdedora de protenas:
albumina marcada com iodo radioativo parenteral com
medio fecal
 Avaliao Laboratorial
Avaliao do grau de desidratao: Eletrlitos,
bicarbonato, uria e creatinina, Densidade urinria
Avaliao de doena associada/sistmica: Glicemia,
Culturas, outros
Exame das fezes: pH, substncias redutoras, pesquisa
de sangue, muco, pus, parasitolgico de fezes
Pesquisa de leuccitos nas fezes (bacteriana > 5
Leu/C)
Coprocultura
Testes rpidos para identificao de ag. Infecciosos
Avaliao de m absoro
 Coleta e Transporte das fezes

Amostra ideal: uma a duas gramas de fezes, no incio da

fase aguda e, preferentemente, antes da antibioticoterapia.
Preferir as pores mucosas e sanguinolentas.

As fezes sem conservantes devem ser encaminhadas ao

laboratrio em temperatura ambiente e processadas no
mximo dentro de 2 horas aps a coleta
 Coleta e Transporte das fezes

Conservao e transporte: colocar as fezes em um

frasco contendo meio de transporte (Cary & Blair ou
salina glicerinada tamponada).

Quando se tratar de Swab retal, umedecer em

salina estril e inserir no esfncter retal, fazendo
movimentos rotatrios, e enviar ao laboratrio no
prazo de 30 minutos ou utilizar meio de transporte
Motivos para no solicitao de coprocultura
O resultado no alteraria o tratamento.....20,6%
No sugeria patgeno...............................14,7%
Bom estado geral......................................11,8%
Sem diarria sanguinolenta......................11,8%
Agentes que o mdico considera que ser
testado pelo laboratrio quando no
especificado na solicitao:
E.coli O157:H7 (88,7%); Campylobacter jejuni, Salmonella
e Shigella (56,5%).
Taxa de especificao do agente na solicitao de
exames: 16%
 Como Solicitar?

Coprocultura
Antibiograma
ou
Coprocultura automatizada
Antibiograma automatizado
ou
Coprocultura com tipagem sorolgica
 Coprocultura Processamento
Primeira Fase: Semeadura em caldo GN e/ou Caldo
Selenito e meios em placa (Ex: gar MacConKey, SSA,
Hectoen, EMB)
Segunda Fase: Aps 6h de incubao a 35-37C, repique
do caldo GN e/ou Selenito para placas
Incubao de todas as placas a 35-37C por 18-24 h.
Triagem bioqumica: semeadura das colnias suspeitas
em meios de triagem.
Srie bioqumica ou automao
Depende do microbiologista
Coprocultura

O que deve ser

valorizado?
 Etiologia Infecciosa Bacteriana
Enteropatgenos Epidemiologia e Patogenia Diagnstico

Salmonella Gastroenterite; zoonose; S. typhi, Coprocultura/sorologia

S.paratyphi A, B e C

Shigella Disenteria; espcies, fecal-oral, 10- Coprocultura/sorologia

102 Sondas genticas ou PCR

Yersinia Espcies(10); 50 sorotipos, Coprocultura/sorologia

Y.enterocolitica (O3,O8),
Y.pseudotuberculosis

Campylobacter Diarria aquosa e muco Coprocultura/sorologia

sanguinolenta; C.jejuni jejuni, Sondas genticas ou PCR
C.jejuni doylei, C.coli e C. lari

Vibrio Espcies(48); sorogrupos Coprocultura/sorologia

(>200),V.cholerae O1 e O139; Toxina: ELISA,PCR ou sondas
V.cholerae no O1 e no O139; V. genticas
parahaemo-lyticus, V. mimicus
 Etiologia Infecciosa Bacteriana

Enteropatgenos Epidemiologia e Diagnstico

Patogenia

E.coli Diarria aquosa em Coprocultura; toxinas St e LT:

enterotoxignica(ETEC) criana e adulto, ELISA, T.Dean, sondas
d.viajante, toxinas LT I e genticas ou PCR (genes).
LT II, Sta e Stb, envolvem
gens plasmidiais

E.coli Diarria aquosa < 1a, Coprocultura/sorologia.

enteropatognica(EPEC) aderem mucosa do HeLa e Hep-2 (AL); PCR ou
i.delgado, envolvem gens sondas genticas (plasmdio
cromossomais e EAF e gene eae e BFP)
plasmidiais

E.coli Disenteria bacilar, Coprocultura(MCS)/sorologia;

enteroinvasira(EIEC) invaso celular, leo plasmdio Inv, sondas genticas
terminal e colon; genes ou PCR, T. Sreny
Inv
 Etiologia Infecciosa Bacteriana

E.coli enterohemorrgica Diarria leve at colite Coprocultura/sorologia;

(EHEC) ou STEC hemorrgica, Produo sorbitol neg, gene stx por
de citotoxinas: STX-I e sondas genticas ou PCR;
STX-II (bacterifago) (6 Vero (toxina)
sorotipos)

E.coli enteroagregativa (EAEC) Diarria aquosa Coprocultura;

protrada, crianas HEp-2 ou HeLa (AA)
normais; toxinas EAST I PCR ou sondas genticas
(Sta) e hemolisina (EAEC)

E.coli difusamente aderente Papel controvertido Coprocultura, cultura de

(DAEC) clulas HeLa ou HEp-2 (AD)
 Etiologia Infecciosa Bacteriana
Enteropatgenos Epidemiologia e Patogenia Diagnstico

Aeromonas 12 genoespcies; A. hydrophila (GH1); Coprocultura, PCR

enterotoxinas citotnica e citotxicas (beta-
hemolisina), diarria aguda e crnica, disenteria.

Plesiomonas P.shigelloides, diarria aquosa, enterotoxina. Coprocultura

C. difficile Diarria associado ao uso de antimicrobiano e ELISA (toxinas) das fezes,

enterocolite, toxinas (tcdA e tcpB), distribudo na Coprocultura
natureza.

C.perfringens Toxi-infeco alimentar (forma branda), Coprocultura, cultura de

enterotoxina citotxica/CPE (A) com atividade no alimento; toxinas: ELISA ou
leo, diarria aquosa. Ltex, sondas genticas ou
PCR (gene cep)

B. cereus Intoxicao alimentar (vmitos ou diarria/dor), Cultura de alimentos (>=105).

enterotoxina termolbil pr-formada no alimento Coprocultura no suficiente.
ou produzida no intestino, distribudo na gua e
solo.

S. aureus Intoxicao alimentar, enterotoxina Pesquisa de enterotoxinas

estafiloccica (SE), nos alimentos e vmito do
paciente.
 Bacterioscopia das fezes
No h evidncias da utilidade clnica da
bacterioscopia pelo mtodo de Gram em
amostras de fezes
 Coprocultura
No houve crescimento de
enteropatgenos na amostra analisada.

Foram pesquisados: Salmonella spp, Shigella spp, E.

coli enteropatognica (Polivalente A, B e C), E. coli
enteroinvasiva (Polivalente A e B), E.coli
enterohemorrgica (O157) e E. coli enterotoxignica.
Para pesquisa de outros microorganismos solicitar
cultura especfica (Yersinia spp, Campylobacter
spp, Vibrio cholerae, Staphylococcus aureus, etc) ou
pesquisa de toxina de Clostridium difficile, pesquisa
de Rotavrus, Adenovrus, Coronavrus,
Cryptosporidium, Microsporidium e outros.
 Agentes etiolgicos
Bactrias - Vrus - Parasitas - Fungos
Escherichia coli
Salmonella
Shigella
Campylobacter
Yersinia enterocolitica Enterobactrias
Vibrio cholerae

Vibrio parahaemolyticus

Staphylococcus aureus
Bacillus cereus
Clostridium botulinum

Toxi-
infeces
 Outros Agentes No Bacterianos

Vrus Parasitas
Rotavirus Giardia lamblia
Norwalk virus Entamoeba histolytica
Cryptosporidium
Adenovirus
Isospora belli
Astrovirus
Cyclospora cayetanensis
Diarrias agudas em crianas
Distribuio Etiolgica
 Doenas diarricas
Diarria a consequncia mais comum da infeco do trato
gastrintestinal
Principal causa de mortalidade infantil (pases em desenvolvimento)

Varia de branda e auto-limitada at grave, com desidratao e bito.

Transmisso: via fecal-oral

Infeces locais Multiplicao de microrganismos

Infeces sistmicas e produo de toxinas (restrita ao
trato gastrointestinal)

Invaso pelos
microrganismos ou
absoro de toxinas
A quantidade de
microrganismos ingeridos e
seus fatores de virulncia so
fatores crticos no
estabelecimento da infeco
 Doenas diarricas infeces bacterianas

Escherichia coli (maior causa de diarria bacteriana)

06 sorotipos: diferentes mecanismos de patogenicidade

E. coli enteropatognia (EPEC)

E. coli enterotoxignica (ETEC)
E. coli entero-hemorrgica (EHEC/STEC)
E. coli enteroinvasiva (EIEC)
E. coli em gar Macconkey
E. coli enteroagregativa (EAEC)
E. coli produtora de aderncia difusa (DAEC)
 Salmonella (bacilo Gram -)
Causa mais comum de diarria associada a alimentos em pases
desenvolvidos
3 espcies: Salmonella enterica (6 subespcies), Salmonella
bongori e Salmonella subterrnea. Mais de 2.500 sorotipos

Antgenos: O (parede celular) e H (flagelar)

Amplo reservatrio animal
Salmonella em gar SS

Dificuldades na erradicao.

S. enteritidis e S. choleraesuis (podem tornar-se invasivas em

pacientes com predisposies particulares crianas, pacientes
com cncer ou anemia falciforme). OVOS CRS OU CARNE DE
FRANGO MAL PASSADA.

S. typhi e S. paratyphi: humanos nicos reservatrios. Estado de

portador pode durar por vrias semanas, meses ou anos (Mary
Typhoid). Portadores assintomticos: transmisso da doena!!!
 Salmonella typhi

-Febre alta, cefalia, mal-estar geral,

anorexia, bradicardia relativa, tosse
seca.
- Esplenomegalia.
-Manchas rosadas no tronco (rosola
tfica).
-Diarria ou constipao intestinal.
- Pode haver comprometimento do
sistema nervoso central.
- Hemocultura, coprocultura (3 semana).

Maria tifide, 1907/1915

York
Mary Mallon, N.
Ulceraes mltiplas Rosola tfica
(50 casos - 3 de bitos) no leo terminal
 Shigella (bacilo Gram -)
Causa quadros de disenteria bacilar (invaso do intestino grosso, com presena
de pus e sangue nas fezes)
Dose infectante baixa (10-100 microrganismos)
Dependendo da espcie envolvida os sintomas variam de leves a graves:

o S. sonnei (leves) Shigella em gar Macconkey

o S. flexneri e S. boydii (graves)

o S. dysenteriae (produtora da toxina Shiga; desidratao,
convulses, bacteremia, sndrome hemoltica-urmica, obstruo
intestinal, peritonite)
A shigelose primariamente uma doena peditrica
No existem reservatrios animais
Disseminao principal: hdrica, podendo ser pessoa a pessoa, via fecal-oral
Situaes onde saneamento e higiene pessoais so deficientes
Antibiticos no so recomendados (exceto nas infeces graves)
 Campylobacter
Bacilos Gram-negativos em forma de S

Uma das causas mais comuns de diarria em humanos C. jejuni

Amplo reservatrio animal (ovinos, bovinos, roedores, aves).

A diarria causada por Campylobacter clinicamente semelhante quela

causada por Salmonela e Shigella.
Infeces adquiridas atravs de alimentos contaminados (aves, leite, gua).
Perodo de incubao mais prolongado (48h) com microaerofilia.
Crescem bem a 42C; exigem meio de cultura especial.

Bacteremia em neonatos e adultos debilitados so relativamente comuns.

Casos graves de diarria: Eritromicina

 Na Amrica do Sul, a primeira epidemia
Vibrio cholerae aconteceu em 1991 no Peru. Ainda em
1991, o Brasil registrou 2.103 casos de
clera e 33 mortes.

Espcie de maior relevncia do gnero, que pertence famlia Vibrionaceae.

Bacilos Gram negativos, em forma de vrgula; oxidase positivos.
Habitat aqutico (vida livre); tambm encontrados em alimentos.
Produtores de enterotoxina:hipersecreo de eletrlitos e gua.
Gastroenterite - diarria aquosa e vmito (2-3 dias aps ingesto da
bactria) Clera

V. cholarae em TCBS:
Agar Tiossulfato-Citrato- Bile-Sacarose

Sorotipos: O1 (biotipos clssico e El Tor) e O139: (epidemias)

 Perda de 1 litro de fluidos por hora durante o pico da doena
grave
A dose infectante alta (>108 UFC/ml) porque muitos
microrganismos so mortos pelos cidos do estmago
Tratamento: reposio de lquidos e eletrlitos. A terapia
antimicrobiana (tetraciclina) reduz a produo de toxina e elimina
o microrganismo mais rpido - valor secundrio
Sem tratamento:
40-60% mortalidade!

Fezes com aspecto de

gua de arroz,
caracterstica
do paciente com clera
 Yersina enterolitica (Bacilo Gram -)

Causa de infeco associada a alimentao.

Mais comum nos EUA e Europa. Menos frequente no Brasil.

Crescimento entre 22-25C, podendo crescer lentamente a 4C.

Reservatrios animais (roedores, porcos, carneiros, bovinos,

cavalos e animais domsticos).

Diarria sanguinolenta, clicas abdominais e febre (1-2

semanas).
 Clostridium difficile (bacilo Gram +, anaerbio, formador de
esporos)

Uso de antimicrobianos de amplo espectro = Destruio

da microbiota normal

Ingesto de esporos presentes no ambiente hospitalar

Multiplicao do C. difficile:
Colite pseudomembranosa

Pacientes hospitalizados

Diagnstico pela pesquisa das toxinas

 C. difficile

Microbiota intestinal desequilbrio: diarria

associada com uso de antimicrobianos (1 teoria).

TEORIA ATUAL:

Esporos permanecem no ambiente hospitalar e

podem ser ingeridos, proliferarem no intestino
de pacientes em antibioticoterapia = Colite (1/4
sepsis, choque e bito).
 Intoxicao alimentar
Doenas causadas por toxinas produzidas por bactrias
contaminantes presentes no alimento antes do consumo.

S. aureus, B. cereus, C. botulinum Botulismo infantil: os

esporos so ingeridos,
germinam, os
Toxinas microrganismos
resistentes ao multiplicam-se no
intestino imaturo e
calor e a ao
produzem a toxina in
de enzimas Toxinas resistentes vivo
digestivas ao de enzimas
digestivas, porm
podem ser inativadas a
80C aps 30 min
 Helicobacter pylori

Bactria Gram-negativa espiralada

Associado a maioria das lceras gstricas (70-80%) e

duodenais (>90%)

Vrios fatores de virulncia, tais como: citoxina,

adesinas, urease (libera produtos alcalinos)

Diagnstico: exame histolgico em amostras de

biopsia e teste da uria (teste respiratrio/exame no
invasivo)
bichara@amaralcosta.com.br

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