OBSERVACIN DE CLULAS ANIMALES Y VEGETALES A TRAVS DE

MICROSCPICO PTICO

BEGOA QUIRS DE LA PEA Y

NICOLS OLALDE HIGHTOWER
1D Bachillerato Internacional
Fecha: 20/11/2014 - 4/12/2014 - 11/12/2014 - 18/12/2014
NDICE
Materiales
El microscopio
Las partes del microscopio
Partes del microscopio empleado en el laboratorio
Tcnicas de experimentacin citolgicas
La fijacin
Mtodos de fijacin y fijadores
La inclusin
El corte
La tincin
Clulas y tejidos vegetales
Cebolla
Patata
Naranja
Lpiz de cedro
Pltano
Lirio
Tomate
Clula animal
Clulas del interior del carrillo
Dibujo de las clulas del lirio
Dibujo de las clulas de la cebolla
Bibliografa
MATERIALES
Unos guantes.
Un cristal portaobjetos.
Un pocillo.
Un papel de filtro.
Un mechero.
Unas pinzas para no quemarnos al poner la
muestra en la llama del mechero.
Clulas de cebolla, patata, naranja, pera, pltano,
lirio, tomate, lpiz de cedro y del interior del carrillo.
Tintes: Lugol y verde de metilo.
El microscopio
El microscopio es un instrumento que
permite la observacin de objetos
demasiado pequeos como para ser
vistos a simple vista. El microscopio
empleado en el laboratorio es un
microscopio ptico, de dos o ms lentes
que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por
refraccin, la desviacin de la luz al pasar
por una lente de vidrio.
 Las partes del microscopio
El ocular, lente a travs de las que observamos la muestra
aumentada.
El tubo ptico, una cmara oscura que une el ocular con el
objetivo.
El cabezal giratorio, que permite el giro del ocular y el tubo
ptico.
El revlver, una pieza metlica que contiene los objetivos y
permite, al girar, el cambio de uno a otro.
Los objetivos, un conjunto de lentes convergentes situadas
prximas a la muestra que aumentan, junto al ocular, la imagen
de dicha muestra. En ellos radica el poder de resolucin del
microscopio. Se distinguen objetivos secos, normalmente de
4x, 10x y 40x y sin necesidad de colocacin de sustancias
entre ellos y la preparacin, y objetivos de inmersin,
normalmente de 100x y en los que es necesaria la colocacin
de dicha sustancia.
 La platina, el lugar donde se deposita la preparacin. Consta
de un orificio que permite el paso de luz a la preparacin y
puede ser fija o se puede mover mediante tornillos laterales.
La pinzas, situadas sobre la platina, que cumplen una funcin
de sujecin de la muestra.
El condensador, una lente que concentra los rayos luminosos
sobre la preparacin.
El foco, que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
El brazo, una pieza metlica curvada (en forma de C) que
permite la inclinacin del tubo para la mejor captacin de luz.
Une el tubo ptico a la base.
Los tornillos de enfoque, macromtrico y micromtrico, que
mueven el tubo ptico con el fin de enfocar la preparacin,
provocando el primer tornillo un enfoque rpido e impreciso y
el segundo uno de mayor precisin.
La base, cuya funcin es el soporte del microscopio.
Partes del microscopio empleado en el
laboratorio

Imagen 1: Partes del microscopio

Imagen 2: Partes del microscopio
 TCNICAS DE EXPERIMENTACIN CITOLGICAS
Para la realizacin de la prctica hemos empleado
varias tcnicas de experimentacin citolgicas cuyo
objetivo es preparar una muestra de tejido vivo
(animal o vegetal) de forma que posteriormente sea
posible su observacin a travs del microscopio.
Entre las tcnicas empleadas distinguimos cuatro:
Fijacin
Inclusin
Corte
Tincin
 LA FIJACIN
La fijacin de un tejido consiste en la preservacin de
sus caractersticas morfolgicas y moleculares,
mantenindolas similares a las que posea en su
estado vivo. Esta tcnica es necesaria dado que al
extraer un tejido para su observacin ste sufre dos
procesos degradantes: la autolisis, autodigestin por
accin de enzimas intracelulares, y la putrefaccin,
por accin bacteriana.
No existe un fijador que sirva para todo tipo de
muestras, por lo que deberemos emplear un tipo
concreto segn la muestra a observar.
MTODOS DE FIJACIN Y
FIJADORES
Hay dos mtodos de fijacin principales: inmersin y perfusin.
La inmersin consiste en sumergir las piezas de tejido en la
solucin fijadora, recomendada a un volumen 20 veces
mayor al de la pieza y un pH prximo al del tejido.
La perfusin consiste en introducir la solucin fijadora en el
tejido a travs del sistema circulatorio, con el fin de que
acceda a sus clulas a travs de los capilares.

Distinguimos a su vez fijadores fsicos, principalmente

aplicando un calor elevado o fro rpidamente, y qumicos,
como el alcohol etlico, que fija por deshidratacin, y el
glutaraldehdo, que forma puentes entre las molculas del
tejido.
LA INCLUSIN
La inclusin es un mtodo que permite el
endurecimiento de un tejido mediante el empleo de
sustancias lquidas que, tras procesos de enfriamiento o
polimerizacin, se solidifican. Con esto, se facilita el
corte de la muestra y la conservacin de sus
caractersticas.
Dichas sustancias no son hidrosolubles, por lo que es
necesario que previamente haya sido eliminada el agua
de la muestra y sustituida por un lquido miscible con la
sustancia a aadir. En caso de no conseguirse dicha
sustitucin, la muestra quedar deteriorada.
Las sustancias ms empleadas son la parafina, en el
microscopio ptico, y la resina, en el microscopio
electrnico.
EL CORTE
Para que una muestra de tejido o clula pueda ser
observada a travs de un microscopio, es necesario
que sea de poco grosor, ya que de lo contrario la luz no
penetra bien y la muestra no puede ser observada. De
esta forma, las secciones a realizar de los tejidos que
queramos estudiar deben ir desde un grosor de
algunos nanmetros hasta centenas de micras.
Los aparatos empleados para hacer secciones de
micrmetros de grosor se llaman microtomos y, segn
el grosor que deseemos, el medio de inclusin en el
que se encuentre la muestra o el proceso de
endurecimiento de esta, deberemos emplear un
microtomo u otro.
Ejemplos de microtomos son el microtomo para
parafina, el vibratomo, el criostato y el ultramicrotomo.
Imagen 3: Microtomo Imagen 4: Criostato

Imagen 5: Vibratomo Imagen 6: Ultramicrotomo

 LA TINCIN
La tincin es una tcnica cuyo propsito es la mejora del
contraste en la imagen de un tejido vista en el microscopio.
Dado que la mayora de tejidos vegetales tienen una gran
variedad de pigmentos naturales y la presencia de las
paredes celulares, las cuales facilitan la delimitacin celular
y la discriminacin entre diferentes tejidos, la tincin se
emplea con mayor frecuencia en los tejidos animales de los
que todos, excepto aquellos con algn tipo de pigmento,
como la hemoglobina de la sangre, son incoloros.
Se dan desde tinciones generales, en las que sustancias
coloreadas que se unen a componentes tisulares por
afinidad qumica, hasta la histoqumica, que supone la
modificacin qumica de la muestra, o la inmunocitoqumica,
que se basa en la unin a los anticuerpos de una clula.
CLULAS Y TEJIDOS VEGETALES
 CEBOLLA
CEBOLLA
Tincin por verde de metilo.
200 aumentos.
Tamao real ncleo 25m
dada la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real

Ncleo
Pared celular

Imagen 7: Observacin de la cebolla

 Clula medida

CEBOLLA
Tincin por verde de
metilo.
50 aumentos.
Tamao real clula 620m
dada la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real

Ncleo celular
Pared Clulas de la
celular cebolla

Imagen 8: Observacin de la cebolla

 PATATA
PATATA
Tincin por lugol.
50 aumentos.
Tamao real por grano de
almidn es de 40 m dada
la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real

Grano de almidn

Imagen 9: Observacin de la patata

 NARANJA

NARANJA
Sin tincin.
Observamos las glndulas
secretoras de cido ctrico.
50 aumentos.
Tamao real por glndula
secretora es de 60 m.
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real
Glndula secretora

Imagen 10: Observacin de la naranja

 LPIZ DE CEDRO

LPIZ DE CEDRO
Tincin por verde de metilo.
20 aumentos.
Observamos el xilema y clulas
vegetales.
Tamao real del ancho del xilema
es de 150 m dada la frmula:
N Aumentos=Tamao
Xilema
medido/Tamao real

Imagen 11: Observacin del lpiz de cedro

 PLTANO

PLTANO
Frotis, fijacin por calor y
tincin por verde de metilo.
20 aumentos.
Observamos clulas del
mesocarpio del pltano.
Tamao real por clula es de
1350m dada la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real
Clula del
mesocarpio
Imagen 12: Observacin del pltano
LIRIO
LIRIO
Sin tincin.
La 1 foto 20 aumentos, la 2 foto
50 aumentos.
Observamos el xilema y clulas
vegetales.
Tamao real del ancho del xilema
es de 100 m en la primera foto y
de 100 m en la segunda dada la
frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real

Xilema

Imagen 13: Observacin del lirio

 TOMATE
TOMATE
Cromoplasto Sin tincin.
20 aumentos.
Observamos los cromoplastos,
los plastos que almacenan el
pigmento que otorga el color al
tomate.
Tamao real por cromoplasto
es de 150m dada la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real

Imagen 14: Observacin del tomate

CLULA ANIMAL
 CLULA DEL INTERIOR DEL CARRILLO
Primera clula medida Imgenes 15 y 16: Observacin de clulas del
carrillo

CLULA DEL INTERIOR DEL

CARRILLO
Fijacin por calor.
50 aumentos.
Observamos la clula del
interior del carrillo.
Tamao real de la clula es de
60m en la primera foto y de
40m en la segunda foto dada
la frmula:
N Aumentos=Tamao
medido/Tamao real
Segunda clula medida
DIBUJO DE LAS CLULAS DEL LIRIO
Ncleo

Xilema Clulas del

Clulas del Xilema Ncleo
lirio
lirio

Imagen 17: Dibujo del lirio

 DIBUJO DE LAS CLULAS DE LA
CEBOLLA Ncleo celular
Pared celular
Clulas de la cebolla
Ncleo celular
Pared celular

Clulas de
la cebolla

Imagen 18: Dibujo de la cebolla

 BIBLIOGRAFA
Estudio Microscpico. El Rincn del Vago. Consultado el 4 de enero de 2015.
http://html.rincondelvago.com/estudio-microscopico.html
Imgenes empleadas del microscopio y las observacin de clulas(Imgenes 1,
2, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 y 18): Olalde, N.y B. Quirs, (2015)
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http://es.wikipedia.org/wiki/Microtomo
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http://www.immf.uncor.edu/index.php/es/ser/14-sample-data-articles/143
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http://www2.cbm.uam.es/mkfactory.esdomain/webs/CBMSO/plt_Servicio_Equipo.a
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http://www.directindustry.com/prod/rmc-products/microtomes-120015-1295243.ht
ml
LABORATORIO MVIL: Gua de utilizacin. Museo de las Ciencias de Castilla-La
Mancha
Consejera de Educacin y Ciencia. Consultado el 4 de enero de 2015.
http://pagina.jccm.es/museociencias/otras%20actividades%20web/material%20cnr
%20web/guia_laboratorio_movil.pdf
Microscopio compuesto. Wikipedia. Consultado el 4 de enero de 2015.
http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto