DEMOSTRACION DE GRASAS

NEUTRAS EN UN CORTE
HISTOLOGICO

COLORACIONES ESPECIALES
II
ALUMNA: MARIBEL ARONNE AGUADO
 HISTOQUMICA

ESTUDIO de las SUSTANCIAS o COMPOSICION

QUIMICAS de los TEJIDOS O CORTES (Glucgeno,
cationes, lpido, etc.) utilizando Mtodos de anlisis Variado
( Tcnicas Histolgicas); sea permite la identificacin y
localizacin en las clulas y tejidos de compuestos radicales
qumicas, formando productos insolubles que son
coloreados y visualizados por el microscopio.
 PRINCIPIOS BASICOS DE
LA HISTOQUIMICA:

1. Los COMPUESTOS que deben ser analizados NO SON DIFUSIBLES. Proceso de

insolubilizacin del compuesto que va a ser estudiado.
2. El PRODUCTO DE LA REACCION debe ser INSOLUBLE. Evita su difusin en la
solucin de los reactivos o migracin.
3. El METODO utilizado es ESPECIFICO PARA LA SUSTANCIA o grupo qumico que
se va analizando. Favoreciendo la interpretacin de los resultados obtenidos.
* En algunas Reacciones Histoqumicas la INTENSIDAD del COLOR producido es
PROPORCIONAL a la CC. de la sustancia analizada.
LIPIDOS
Por su clasificacion
Grasas neutras
Son lpidos simples formados por glicerol esterificado por uno, dos, tres
cidos grasos, en cuyo
caso: monoacilglicrido, diacilglicrido o triacilglicrido respectivamente.
La funcin principal de los triacilglicridos es almacenar energa qumica.
Si la demanda energtica de los seres vivos es tal que se consumen ms
nutrientes ricos en energa que los necesarios para el proceso metablico,
gran parte de este exceso de energa se almacena en los enlaces de las
molculas de triacilglicridos localizadas dentro de clulas especializadas
en el almacenamiento de grasa, que se denominan clulas adiposas. Las
grasas ms abundantes dentro de nuestra dieta son las llamadas grasas
neutras, tambin conocidas como TRIGLICERIDOS. Las grasas neutras
son uno de los mayores constituyentes en los alimentos de procedencia
animal.
Sudn III o IV
Los colorantes para grasas son ms solubles en
las propias grasas que en el medio en el que van
disueltos. As, al baar la grasa con la solucin
del colorante ste tiende a disolverse en la grasa
que se va cargando del colorante. Por regla
general estos colorantes siempre van en solucin
alcohlica o bien en una mezcla de
alcohol/acetona o alcohol/agua. El Sudn III o
IV produce una coloracin progresiva, es decir,
que a ms tiempo de exposicin al colorante
mayor es la intensidad de tincin.
 COLORACION SUDAN III O IV

I.- OBJETIVOS: DEMOSTRACION de GRASA

NEUTRA en CORTES DE TEJIDOS
HISTOLOGICOS.

II.- FIJACION: Tejidos frescos o fijadas por el

Liquido de Backer.
III.- MICROTOMIA: 4 8 u (congelacin)
PROCEDIMIENTO DE SUDAN III O IV
1. Desparafinado. Estufa durante 30 min. a 60. Sumergimos
en xilol durante 10 o 15 min.
2. Hidratacin :Alcohol absoluto-5min
3. Lavar con agua corriente.
4. Hematoxilina o carmn (para el contraste)--5-10 min.
5. Lavar en H2O destilada.
6. Lavar en agua corriente 5 min.
7. Sudan III + 40 gotas de rojo escarlata -24 horas.
8. Montaje en glicerina levulosa, gelatina, etc.

Resultado
Las Grasas neutras se tien
IV.- REACTIVOS
- Solucin colorante de sudan
- Alcohol al 70%
- Alcohol al 50 %
- Solucin colorante de hematoxilina de Harris
- Gelatina Glicerinada.

V.- RESULTADOS:
GRASAS NEUTRAS....ROJO (Sudan III o IV )
NUCLEOS ..AZUL
COLORACION SUDAN III - IV
COLORACION SUDAN III o VI
Dao celular reversible. Corte por congelacin de
hgado teido con Sudan III O IV, colorante
liposoluble, que tie de rojo las grasas neutras, aqu
en forma de gotas pequeas y medianas. 500x
Tincin de una placa en un Ateroma con sudan III o IV
Tej. Adip. Clulas adiposas obtenidas de secciones histolgicas
realizadas por congelacin. Las clulas se colorearon con Sudan III o
IV respectivamente; los ncleos se colorearon con hematoxilina. 200x
Gracias