PROYECTO DE INVESTIGACIN

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA IN
VITRO DE LOS ACEITES
ESENCIALES DE CYMBOPOGON
CITRATUS (HIERBA LUISA),
MINTHOSTACHYS MOLLIS (MUA)
Y TAGETES PUSILLA LAG. (ANS
SERRANO) SOBRE CNDIDA
ALBICANS, STAPHYLOCOCCUS Y
ESCHERICHIA COLI.
MINTHOSTACHYS
MOLLIS
Etimologa
El nombre comn deMinthostachys mollis,
"mua", proviene delquechua.
Distribucin y hbitat
Crece entre los 2.700 y los 3.400msnm. Su
cultivo es muy difundido en las
regionesandinas,
especialmenteenApurmac,Ayacucho,Cuzco,H
uancavelicayPuno, donde se la conoce con
diversos nombres comohuaycho,coaoismua.
Usos
Minthostachys mollises de considerable
importancia para los pueblos andinos, debido a
los aceites esenciales que se encuentran en
sus hojas. Su uso se extiende su uso en
lamedicina tradicionala nivel local. Sus
propiedades han dado lugar a muchos estudios
recientes en el campo de la medicina y la
farmacologa.
CYMBOPOGON CITRATUS
La Hierba luisa es una planta aromtica,
que crece en climas templados y clidos.
Fue utilizada durante siglos para regular
el sistema nervioso y el tratamiento de
indigestiones.
Sus hojas tienen propiedades
antiespasmdicas, digestivas, sedantes y
carminativas.

El aceite esencial posee propiedades

antibiticas.
Se prepara en infusin, como un tnico
aromtico y febrfugo.
TAGETES PUSILLA Nombre cientfico:

Tagetes pusilla / T. filifolia / T. dichotoma.

Distribucin:
Se desarrolla en los valles interandinos y ha
sido reportada desde Mxico hasta el
noroeste de Argentina. En el Per: Sierra y
Selva alta. Hasta 3,800 m.s.n.m. En Hunuco,
Cusco, Puno, Huaraz-Caraz.
Usos:
Alivia problemas estomacales, diurtico,
carminativo, clicos (dolor de estomago),
alivia males intestinales,, digestivo,
antihemorrgico, antiinflamatorio; diurtico.
Las partes areas se usan como saborizante
alimenticio, y la infusin de sus partes areas
como diurtico, antiespasmdico,
antiinflamatorio, antihemorrgico. Lucha
contra las enterobacterias.
 CANDIDA
ALBICANS
Es unhongodiploideasexual(forma delevadura).

PATOLOGAS CONOCIDAS
Candida albicanspuede asumir patogeneidad,
provocando lacandidiasis; en ese caso, se
presenta como una afeccinvaginal(vaginitis),
de la cavidad oral (muguet), delintestinoo de
lapiel. Tambin puede provocarhongos
vaginales.
ECHERICHIA COLI
Escherichia colies un bacilogramnegativode la familia
de lasenterobacteriasque se encuentra en el tracto
gastrointestinal de humanos y animales de sangre caliente.

PATOLOGAS
CONOCIDAS
Escherichia colipuede causar
infecciones intestinales y extra
intestinales generalmente graves,
tales como infecciones delaparato
excretor, vas
urinarias,cistitis,Uretritis,meningit
is,peritonitis,mastitis,septicemiay
neumonaGram-negativa.
 STAPHYLOCOCCU
S AUREUS
Staphylococcus aureuses
unabacteriaanaerobia facultativa,grampositiva,
productora decoagulasa,catalasa, inmvil y
noesporulada.

PATOLOGAS CONOCIDAS
1.infecciones cutneas
2.Mucosas relativamente benignas, tales comofoliculitis,
forunculosis o conjuntivitis
3.Enfermedades de riesgo vital, como celulitis, abscesos
profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o
neumona.
Adems, tambin puede afectar al aparato
gastrointestinal, ya sea por presencia fsica
deStaphylococcus aureus.
DESTILACIN POR
ARRASTRE DE VAPOR

NOMBRE CANTIDAD Ml de aceite

esencial
M.Mollis 400g 2ml
Cymbopogon citratus 400g 4ml
Tagetes pusilla 400g 6ml
FIGURA1. EQUIPO LAB 20
MTODO KIRBY-BAUER
Elmtodo Kirby-Bauer(mtodo
dedifusinenagar) es empleado
para determinar la sensibilidad de
unagente microbianofrente a
unantibiticooquimioterpico.
Este mtodo comprende lo que se
denomina unantibiogramao prueba
de susceptibilidad bacteriana frente
a drogas especficas.
FIGURA 2. PREPARACIN DE MEDIOS

AGAR TSA ( 10 PLACAS )

STHAPYLOCOCCUS
ECHERICHIA COLI

AGAR SABORUOU ( 5 PLACAS )

CANDIDA
ESTANDARES DE TUBIDEZ
MCFARLAND
Se usan como referencia en
suspensiones bacteriolgicas para
saber que el nmero de bacterias por
mililitro.
Suspensin directa de la colonia en los
agares respectivos solucin salina al
0.9 % ( agua esterilizada ) a partir de
un cultivo en agar no selectivo de 18
24 h de incubacin. Ajustar a la
turbidez equivalente al estndar 5 de
la escala de Mc. Farland.
FIGURA 4. PREPARACIN DE LOS INCULOS :

E. COLI
S. AUREUS
ALBICANS .
TURBIDEZ EQUIVALENTE AL ESTNDAR 5 DE LA ESCALA
DE MC. FARLAND.
 FIGURA 5
Sobre la superficie de una
placa deagarTSA (medio
de cultivorico) se inocula
una cantidad estandarizada
debacterias, sembrndolas
de forma uniforme para
obtener despus de la
inoculacin un "csped"
bacteriano.
FIGURA 6

A continuacin se colocan discos

depapel de filtro embebidos con los
aceites esenciales DE CYMBOPOGON
CITRATUS (HIERBA LUISA),
MINTHOSTACHYS MOLLIS (MUA) Y
TAGETES PUSILLA LAG. (ANS
SERRANO) .
La eleccin de los antibiticos a
probar dependen delgermeny del
foco deinfeccin.

Controles positivos.- Se empleo

discos de antibiticos comerciales
trados de UNMSM :
CIP Ciprofloxanina E.coli

AMC- Amoxicilina S.Aureus

TE- Tetraciclina C. Albicans
FIGURA 7
Luego de sembrar se les incubo a
37 por 24 horas a 48 horas.
 Los aceites esenciales y los antibiticos difundirn
desde el papel filtro al agar de forma radial. Se incuba
la placa durante 18-24 horas a 37C (respetar este
parmetro ,porquetemperaturasmenores pueden
disminuir la velocidad del crecimiento del germen y la
difusin del antibitico, dando halos irregulares
difciles de medir).

Luego se miden los halos de inhibicin de desarrollo,

interpretndose de acuerdo a tablas confeccionadas
previamente.

Los resultados se expresan

como:Sensible(S),IntermediooModeradamente
sensible(I) yResistente(R)

FIGURA 8
 FIGURA 10. E.COLI FRENTE AL ACEITE
FIGURA 9. E.COLI FRENTE AL ACEITE ESENCIAL HIERBA LUISA, MUA,
ESENCIAL HIERBA LUISA . ANS . ANTIBIOTICO : CIP
ANTIBIOTICO : AMC

c
FIGURA 11 C.ALBICANS FRENTE AL ACEITE
ESENCIAL ANS. ANTIBIOTICO : TE
FIGURA 12. S. AUREUS FRENTE A
ANS, HIERBA LUISA Y MUA.
ANTIBITICO: AMC
RESULTADOS
CONCLUSIONES
TABLA 1:
MORALES L. ESTUDIO IN VITRO DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LOS ACEITES
ESENCIALES DE TRES PLANTAS DEL PER. TESIS. UNMSM. FAC. BIOLOGA. 1995.
ACTIVIDAD ANTIMICTICA IN VITRO Y METABOLITOS DEL ACEITE
ESENCIAL DE LAS HOJAS DE MINTHOSTACHYS MOLLIS (MUA)
ACTIVIDAD ANTIMICTICA
C. albicans. Se observ un halo inhibitorio de 10 mm con el aceite esencial
de mua al 100% y de 15 mm al 50%. No se observ halo en las placas
control.
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEMOSTRADA EN LOS EXTRACTOS FLUIDOS
DE LAS ESPECIES OCIMUM BASILICUM L., OCIMUM TENUIFLORUM L. Y
CYMBOPOGON CITRATUS (DC) STAPF.
Tabla 2.

O. basilicum O. tenuiflorum C. Citratus

Microorganismo Halos de inhibicin (mm)
Escherichia coliATCC 25922 - 22 15

Klebsiella pneumoniaeATCC 13883 - 22 -

Serratia marcescensATCC 8100 - 11 -

Enterobacter aerogenesATCC
- 11 -
13048

Proteus vulgarisATCC 13315 - - 15

Pseudomona aeruginosaATCC
16 22 -
27853
Shigella flexneriATCC 1202 - - -
Staphylococcus aureusATCC
8 11 22
25923
Staphylococcus epidermidisATCC
10 6 15
12228

Candida albicansATCC 10231 9 11 10

Trichophyton mentagrophytes(a.
8 11 7
clnico)