Alberts Johnson Lewis Raff Roberts Walter

Biologa molecular de la clula

Quinta edicin

Chapter 5
Replicacin, reparacin
y recombinacin del DNA

Copyright Garland Science 2008 - Copyright Ediciones Omega, S.A. 2010

 Lneas germinales heredan la informacin por medio de meiosis
y as perpetun la funcionalidad.

Figura 5-1 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Replicacin
Eucariota vs Procariota
-E. coli un solo inicio de
replicacin.
-Eucariota (varios inicios de
replicacin.
-Fragmentos de okazaki en ambos
organismos

Figura 5-25 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Polimerizacin (5-3) al extremo OH de azcar nucleotdico 3, uniones de
desoxirribonuclesido trifosfato, eliminacin de pirofosfato fosfato
inorgnico
Polimerasa acta como guante.

Figura 5-4 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Polimerasa y sus sistema de correccin de errores
(fidelidad).
Exonucleasa en direccin 3-5.
Eliminacin de formas tautomricas.

Figura 5-8 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Fidelidad:
La importancia de la replicacin
y crecimiento de la cadena en
direccin 5-3.

Figura 5-10 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
DNA primasa: Enzima
formadora de pequeos
cebadores de RNA con extremo
OH3 listo para continuar con
la adicin de nucletidos.
Requerimiento especial por
fragmentos de Okazaki

Figura 5-12 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Sistema de eliminacin de cebador RNA y remplazado por DNA. Apoyado por
Ligasas.
Ligasa: enzima que ayudado por ATP para activar el extremo 5 en la hendidura y
formar el nuevo enlace (sellado de enlace fosfodister.

Figura 5-13 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Helicasas:
Lectura y separacin de cadenas en
sentido 5-3, pero tambin en
sentido 3-5

Apoyadas para estabilizar el DNA

separado:
SSB (single-strand DNA binding).
Protenas de unin a DNA de
cadena sencilla.

Figura 5-14 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Efecto de las protenas SSB (Protenas de unin a DNA de cadena sencilla).

Figura 5-16 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Abrazadera deslizante: Mantiene sujeto al DNA a la cadena
doble mientras adiciona nucletidos (hasta encontrar una
cadena doble).
Cargador de la abrazadera: Permite el unir a la abrazadera
(hidrlisis de ATP).

Cadena adelantada: abrazadera y

polimerasa unida hasta topar doble
hlice.
Cadena retrasada: polimerasa se suelta
de la abrazadera al topar extremo 5 de
cada fragmento. Polimerasa se resa y
se une a una nueva abrazadera

Figura 5-18c Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Replicacin y su complejo de protenas
Casi similar en Eucariotas y procaritas: En eucariotas la replicacin se
complica por los nucleosomas.

Figura 5-19a Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
Correccin de errores de apareamiento:
Protenas Muts se unen al DNA.
y MutL elimina los pb mal apareados.
Adeninas no metiladas en regiones (GATC)
en E. coli.

En humanos el dao de correctores de

errores deja acumulacin de mutaciones en
clulas nacientes (puede generar cncer).

Eucariotas no requiere de metilacin para

reconocimiento de errores.

Figura 5-20a Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 En la replicacin se evita el
superenrrollamiento:
Topoisomerasa: protena con una
tirosina en el sitio activo que acta
como nucleasa reversible que se une a
un fosfato del DNA y rompe enlaces
fosfodister.
Enlace roto se recupera al separarse la
topoisomerasa.

Figura 5-21 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Topisomerasa I = rompe el DNA durante la
replicacin y la restauracin del DNA no
necesita ligasas. El enlace fosfodister
mantiene energa.

Topoisomerasa II = Puede sujetar dos cadenas

de DNA doble y permitir restaurar cromosomas
entrelazados: rompimiento y pegado de DNA.

Figura 5-24 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Bacterias controlan mejor su
inicio de replicacin:
Helicasa unida al cargador de
helicasa (similar a la abrazadera
eucariota).
Ambos sentidos se sintetizan
simultneamente:

Los fragmentos de Okazaki se

forman entre 1000 y 2000
nucleotidos.

Figura 5-27 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 ORC (complejos de reconocimiento de origen de replicacin). Tramo rico en A y T.

Complejos de protenas (Cdc6 y Cdt1) helicasas y cargadores de helicasas forman un

complejo Prerreplicativo en la G1. El paso de la G1 hasta la sintesis se media por Cdk.
(Levaduras).

Figura 5-34 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Orgenes de Replicacin en otros organismos
eucariotas:
Mayor dificultad ( Se mantienen activos si se
trasladaran a otros cromosomas), mientras se
localicen en zonas desconectadas.

Los procesos de prerreplicacin se activan

una vez por ciclo celular.

Figura 5-36 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Herencia de dmeros de nucleosomas al
azar. Chaperonas de histonas (NAP-1 y
CAF-1 restaurando los nucleosmas.

Estrategia de herencia de
modificaciones de histonas.
Se siembran en las nuevas cadenas y
por un complejo Lector-escritor se
reconstituyen.
Ejm. Complejo histona metilada
reconoce (N-terminal metilado

Figura 5-38b Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Replicacin del ultimo fragmento de
DNA en la cadena retrasada.

Telomerasa en Eucariotas: Complejo de

protena-RNA que mantiene un patrn
de RNA para sntesis de DNA.

ADN circular en bacterias no requiere

telomerasa.

Figura 5-40 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
 Replicacin del telmero
Alargamiento de la cadena patrn por
medio de la telomerasa.

El extremo de la cadena retrasada se

completa por accin de la polimerasa
alfa la cual contiene una subunidad
primasa.

Qu pasa con el extremo extendido de

la cadena patrn ?

Figura 5-41 Biologa molecular de la clula, quinta edicin ( Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
El extremo extendido de la cadena patrn formara el lazo T de proteccin en cromosomas
en la divisin.