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CURSO TERICO - PRCTICO

INSTRUMENTACIN Y
ANLISIS

V CICLO
FACULTAD DE FARMACIA Y
BIOQUMICA
Pgina 1 M.Sc. Segundo M. Miranda Leyva 04/08/2017
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Conferencias:
COMPONENTES DE UN
INSTRUMENTO OPTICO
CURSO: INSTRUMENTACIN Y ANLISIS
Profesor:

M.Sc. Q.F. Segundo M. Miranda Leyva

oConfiguracin de los instrumentos pticos


Stima oFuentes de radiacin
oMonocromadores.- Seleccin de la longitud de onda
Semana oRecipientes para la muestra .

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Espectrofotmetro UV-Visible
UV-2401PC / 2501PC

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NATURALEZA Y DISPOSICIN
Los componentes de los instrumentos utilizados
en espectroscopia ptica tienen una
Naturaleza y propiedades que
deben ser descritas.
Disposicin de sus componentes que
Corresponde a una configuracin definida,
Les permite proporcionar la INFORMACIN ANALITICA TIL,
Debe ser detallada.

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CONFIGURACION DE LOS
INSTRUMENTOS ESPECTROSCPICOS
Los mtodos espectroscpicos
se basan en
los fenmenos de emisin, absorcin, fluorescencia, o
dispersin.
Los instrumentos que se basan en estos
fenmenos
difieren algo en su configuracin;
pero sus componentes bsicos son esencialmente
semejantes.
Las propiedades generales de sus componentes son las
mismas independientemente del hecho de que se apliquen a
las regiones ultravioleta, visible o infrarroja del espectro EM.

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Componentes de los instrumentos
para espectroscopia
1) Una fuente estable de energa radiante;
2) Un dispositivo que permite utilizar una regin
de longitud de onda restringida;
3) Un recipiente transparente para colocar la
muestra;
4) Un detector de radiacin o transductor que
convierte la energa radiante en una seal
utilizable, por lo general elctrica y
5) Un dispositivo de procesamiento de la seal y
de LECTURA.

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Diferencias de configuracin
La espectroscopia de emisin
difiere de los otros tres tipos en cuanto
a que
no se necesita una fuente externa de
radiacin ya que la propia muestra es la
emisora.
La muestra, en un arco, chispa o llama, se
energetiza y emite una radiacin
caracterstica.

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Semejanza de configuracin
Los estudios espectroscpicos de absorcin, al
igual que los de fluorescencia y dispersin,
requieren de una
fuente externa de energa radiante.
En el caso de espectroscopia de absorcin,
el haz de luz proveniente de la fuente y que ha
pasado a travs del selector de longitud de onda
atraviesa la muestra.

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ngulo de medicin < 180
En el caso de la fluorescencia y de la
dispersin,
la fuente de radiacin produce en la muestra
contenida en un recipiente adecuado,
radiacin fluorescente o dispersa caracterstica que
se mide bajo un ngulo (por lo general 90) con
respecto a la fuente.

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Regin espectral y uso primario
Los componentes de los instrumentos
difieren en los detalles de acuerdo a
la regin del espectro en la cual se utilizan.
El diseo tambin depende del
uso primario del instrumento; segn sea para
anlisis cualitativo o cuantitativo, o
espectroscopia molecular o atmica.

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Componentes semejantes?
La fuente general y los requerimientos de
utilizacin de cada tipo de componente
son semejantes, independientemente de
la longitud de onda, de la regin del espectro o de
su aplicacin.

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FUENTES DE RADIACIN
Caractersticas
Debe producir un haz de radiacin
cuya potencia sea suficiente para
facilitar la deteccin y medida.
La seal de salida (de la fuente de
radiacin)
debe ser
estable.

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Potencia de la energa radiante
Lo caracterstico es que
la potencia de la energa radiante de una
fuente vare exponencialmente con la
potencia elctrica proporcionada;
por lo que muchas veces debe utilizarse una
fuente de poder regulada para alcanzar la
estabilidad requerida.

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Efecto de las fluctuaciones.- Nulo
En otros instrumentos
la seal de salida se divide en dos haces,
uno de referencia y el otro para la muestra; y
dos transductores apareados
uno para recibir directamente el haz de referencia y
otro para recibir el haz emergente de la muestra.
El parmetro analtico es entonces la relacin de las
dos seales de salida de los dos transductores.
En esta forma se anula casi por completo el efecto de las
fluctuaciones en la salida de la fuente.

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Incidencia alternada
En otros instrumentos
se utiliza slo un transductor que
recibe en forma alternada el haz de la muestra y el
de referencia.

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Fuentes de radiacin.- Tipos
En espectroscopia ptica se utilizan:
Fuentes continas.
Empleadas en los procedimientos de absorcin
molecular.
Fuentes de lneas.
Empleadas en la espectroscopia de fluorescencia y
absorcin atmica.

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Fuentes UV, Vis, IR
Fuentes continas de radiacin
ultravioleta, visible e infrarroja
cercana
La potencia de la radiacin
no vara bruscamente entre
longitudes de onda adyacentes.

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Lmpara de hidrgeno o deuterio
El hidrgeno o deuterio
a baja presin con una descarga elctrica
reproduce un espectro continuo en la regin ULTRAVIOLETA.
Tipos:
De alto voltaje. Emplean potenciales de 2000 a 6000 V
producen una descarga entre electrodos de aluminio.
La lmpara enfriada con agua produce una radiacin de alta
intensidad.
De bajo voltaje. Emplea un potencial aproximado de 40 V.
Un filamento revestido con xido es calentado y proporciona
electrones que mantienen una corriente continua, con un electrodo
metlico.

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Lmpara de hidrgeno o deuterio
Para obtener intensidades constantes,
se requiere
una fuente de poder regulada.
En ambos tipos, la forma de la apertura de los
electrodos,
es una caracterstica importante que limita la descarga a una
trayectoria muy estrecha,
Se produce una intensa bola de radiacin;
si se trata de hidrgeno, el dimetro es de 1 a 1.5 mm, y
algo mayor si es de deuterio.
Ambos tipos (alto y bajo voltaje) producen un espectro continuo
entre 160 y 375 nm.
Deben emplearse ventanas de cuarzo en los tubos,
porque
el vidrio absorbe fuertemente en esta regin de longitud de onda.

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Lmpara de filamento de tungsteno

La fuente ms comn de radiacin visible e infrarroja


cercana
es
la lmpara de filamento de tungsteno.
La distribucin de energa de esta fuente
se aproxima a la de un cuerpo negro,
por lo cual depende de la temperatura.
En muchos instrumentos de absorcin
la temperatura de operacin del filamento es de 2870K;
la mayor parte de la energa se emite en la regin INFRARROJA.
Una lmpara de filamento de tungsteno
es til para
la regin de longitudes de onda entre 320 y 2500 nm.

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Lmpara de filamento de tungsteno

En la regin visible la produccin de energa de


una lmpara de tungsteno
vara aproximadamente como la cuarta potencia del
voltaje de operacin. Como consecuencia,
se requiere un estrecho control del voltaje para una fuente
de radiacin estable.
A menudo se emplean transformadores de voltaje constante
o reguladores de voltaje electrnicos para este objeto.
Una batera de 6 V es una fuente alternativa de voltaje
notablemente estable si se mantiene en buen estado.

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Fuentes continuas de radiacin Infrarroja
La fuente infrarroja comn es un slido inerte calentado
elctricamente a temperatura entre 1500 y 2000K.
Se produce radiacin continua que se aproxima a la de un
cuerpo negro.
La intensidad radiante mxima a estas temperaturas se produce en
1.7 a 2 m (6000 a 5000 cm-1).
En longitudes de onda ms larga la intensidad desciende
continuamente
hasta que llega a ser de 1% del mximo en 15 m (667 cm-1).
En el lado de longitudes de onda corta la reduccin es mucho
ms rpida, y
una reduccin similar en intensidad se observa en 1 m (10000
cm-1).

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La ley del desplazamiento de Wien

La posicin del mximo en el espectro de la radiacin del cuerpo negro


depende de la temperatura del cuerpo negro y est dado por la ley de
desplazamiento de Wien.
Calculando la derivada primera de la funcin de la distribucin de Planck
expresada en trminos de la longitud de onda o de la frecuencia

Obtenemos la ecuacin trascendente

Este resultado constituye la ley de desplazamiento de Wien

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Tabla 2.2 Contribucin de la radiacin infrarroja, visible y ultravioleta a la
radiacin de un cuerpo negro
Temperatura (K) % infrarrojo %visible %ultravioleta

1000 99.999 7.36710-4 3.25810-11

2000 98.593 1.406 7.40010-4

3000 88.393 11.476 0.131

4000 71.776 26.817 1.407

5000 55.705 39.166 5.129

6000 42.661 45.732 11.607

7000 32.852 47.506 19.641

8000 25.565 46.210 28.224

9000 20.154 43.247 36.599

10000 16.091 39.567 44.342

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Figura 2.4 Radiacin del cuerpo negro
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Figura 2.5 Radiacin emitida en el infrarrojo
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Emisor incandescente de Nernst

Consiste de un cilindro de xido de tierras raras,


con un dimetro de 1 a 2 mm y una longitud de unos 20 mm.
En los extremos del cilindro hay alambres de platino para el paso de
corriente.
Tiene un coeficiente de resistencia elctrica en relacin
con la temperatura cuyo valor es muy negativo, por lo
que
debe calentarse externamente hasta el rojo oscuro para que
pueda pasar una corriente suficiente para mantener la
temperatura deseada.
Como la resistencia disminuye con el aumento de la temperatura, el
circuito fuente debe ser diseado para limitar la corriente, evitando
as la destruccin por calentamiento excesivo.

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Fuente globar

Un globar es una barra de carburo de silicio,


generalmente de 5 cm de longitud y 0.5 cm de
dimetro.
Se calienta tambin elctricamente y tiene la ventaja de
poseer un coeficiente de resistencia positivo.
Para evitar la formacin de un arco,
los contactos elctricos se deben enfriar con agua.
Las energas espectrales del globar y del emisor
incandescente de Nernst son semejantes,
excepto en la regin inferior a 5 m (2000 cm-1),
donde el globar se distingue por su rendimiento
considerablemente mayor.

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FUENTES DE LNEAS

En espectroscopia de absorcin atmica,


espectroscopia Raman, refractometra y
polarimetra,
se utilizan fuentes cuya radiacin es en
forma de unas pocas lneas de longitud de
onda definida.
Lmparas de vapor metlico.
Las dos fuentes de lneas ms comunes son
las lmparas de vapor de mercurio y de sodio.

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Lmparas de vapor metlico
Una lmpara de vapor consiste en una envoltura
transparente que contiene un elemento gaseoso
a baja presin.
Cuando se aplica un potencial a travs de dos
electrodos colocados en el interior de la envoltura,
se excita la lnea espectral caracterstica del elemento
correspondiente.
Existe conduccin debido a que se forman electrones
y iones
como consecuencia de la ionizacin del metal.

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Lmparas de vapor metlico

Por lo general, se requiere un calentamiento


inicial para producir suficiente vapor metlico;
una vez logrado sto,
la CORRIENTE SE MANTIENE.
La lmpara de mercurio produce varias lneas
cuya longitud de onda vara
entre 254 y los 734 nm.
En la lmpara de vapor de sodio
predomina el par de lneas
de 589.0 y 589.6 nm.

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Lmparas de ctodo hueco

Estas lmparas producen un espectro de lneas


para un gran nmero de elementos.
Su empleo se limita a
los instrumentos de espectroscopia de absorcin atmica y
de fluorescencia atmica.
Consiste en un nodo de tungsteno y ctodo
cilndrico,
sellados en un tubo de vidrio lleno con Nen o Argn
a una presin de 1 a 5 torr.
El ctodo est construido con el metal cuyo espectro se
desea obtener o bien sirve como soporte para la pelcula de
dicho metal.

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Lmpara de ctodo hueco

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Lmparas de ctodo hueco

La ionizacin del gas se produce


cuando se aplica un potencial a travs de los
electrodos,
lo que da lugar a una corriente de aproximadamente 5 a 10
mA a medida que los iones migran hacia los electrodos.
Si el potencial es suficientemente grande,
los cationes gaseosos adquieren bastante energa cintica
para desalojar algunos de los tomos metlicos de la
superficie del ctodo y producir una nube atmica;
sto se llama CHISPORROTEO.
Una parte de los tomos metlicos separados estn en
estado excitado y emiten en forma usual.

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LASERES
La palabra lser
es una sigla ingls que
significa light amplification by stimulated emission of radiation
(amplificacin de luz por medio de la emisin estimulada de
radiacin).
Debido a su propiedad de amplificacin de la luz
los lseres producen
haces de radiacin estrechos y sumamente intensos.
El proceso de EMISION estimulada produce un haz de radiacin
altamente monocromtico (ancho de banda de 0.01 nm o menos (y
notablemente coherente).
Debido a estas caractersticas
los lseres se han transformado en
una importante fuente de radiacin para las regiones ultravioleta,
visible e infrarroja del espectro.

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SELECCION DE LONGITUD DE ONDA
Monocromador
Dispositivo que dispersa la radiacin policromtica
en bandas que
abarcan un intervalo restringido de longitudes de ONDA.
Los monocromadores para la radiacin ultravioleta,
visible e infrarroja,
son todos semejantes entre s en cuanto a su construccin
mecnica
en el sentido de que en ellos se emplean RANURAS, LENTES,
ESPEJOS, VENTANAS Y PRISMAS o REDES DE DIFRACCION.
Los materiales con los que se construyen estos
componentes,
se escogen de acuerdo a
los intervalos de longitudes de onda para los cuales se utilizan.

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Componentes de un monocromador

1) Ranura de entrada
2) Una lente o espejo colimador
para producir un haz de radiacin paralela.
3) Un prisma o red de difraccin
como elemento dispersor.
4) Un elemento de enfoque
que proyecta una serie de imgenes rectangulares de la ranura
de entrada sobre una superficie plana (EL PLANO FOCAL).
Adems la mayora de los monocromadores
tienen ventanas de entrada y salida
que se colocan para proteger los componentes, del polvo y los
vapores corrosivos del laboratorio.

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ESPECTROMETROS
Estos instrumentos poseen una ranura de salida
fija, localizada en el plano focal.
Se utiliza una fuente de emisin continua y
la longitud de onda en esta ranura, puede variar en forma
continua si se gira el elemento dispersor.
Utilizan monocromadores.
Espectrofotmetro
Es un espectrmetro
que contiene un dispositivo FOTOELECTRICO para
cuantificar la potencia de la radiacin que sale de la ranura.

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Fotmetro

Tambin utiliza un detector Fotoelctrico,


pero no posee monocromador,
en su lugar utiliza filtros
que permiten obtener bandas de radiacin que
abarcan un intervalo limitado de longitudes de
onda.
Con un fotmetro
no es posible obtener una banda de radiacin
variable en forma continua.

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Filtros.- Tipos

Absorcin.
Slo para la regin visible del espectro.
Interferencia.
Existen para las radiaciones ultravioleta,
visible e infrarroja.

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Filtros de absorcin
Estos limitan la radiacin absorbiendo ciertas porciones
del espectro.
El tipo ms comn consiste en
un vidrio coloreado o un colorante suspendido en gelatina y
colocado entre placas de vidrio.
Los filtros de vidrio de color
tienen la ventaja de
su mayor estabilidad trmica.
Los filtros de absorcin
poseen anchos de banda efectivos que varan de 30 a 250 nm.
Los filtros de absorcin
tienen un rendimiento
significativamente inferior si se comparan con los filtros de
interferencia: ANCHOS DE BANDA MAYORES y FRACCION DE LUZ
TRANSMITIDA MENOR.

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Filtros de interferencia

Se basan en un fenmeno de interferencia


ptica
para producir
bandas relativamente estrechas de radiacin.
Consisten en
un dielctrico transparente (frecuentemente
fluoruro de calcio o de magnesio)
que ocupa el espacio comprendido entre dos pelculas
metlicas semitransparentes que revisten las superficies
interiores de dos placas de vidrio.
El espesor de la placa dielctrica se controla
cuidadosamente, y determina la longitud de onda de la
radiacin transmitida.

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RECIPIENTES PARA LA MUESTRA

A excepcin de la espectroscopia de emisin,


en todas las tcnicas espectroscpicas,
se requiere recipientes para colocar la muestra.
Celdas o cubetas
Construidas de un material que permite el pasaje de
la regin espectral que interesa.
Cuarzo o slice fundida en la regin ultravioleta (por debajo
de 350 nm);
ambas sustancias son transparentes en la regin visible y
hasta aproximadamente 3 m en el infrarrojo.

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Celdas o cubetas
Los vidrios de silicatos para la regin entre 350 y 2000 nm.
Los recipientes de plstico para la regin visible.
El cloruro de sodio cristalino para ventanas de las celdas para la regin
del infrarrojo.
Hay materiales que pueden ser tiles en la fabricacin de celdas
por ser transparentes en el infrarrojo.
Las celdas deben tener ventanas perpendiculares a la direccin del
haz,
para reducir al mnimo la reflexin.
La trayectoria ptica de una celda para el ultravioleta-visible,
comnmente es 1 cm, tambin existen las de 0.1 cm (o menos) hasta de
10 cm.
Las celdas para lquidos y soluciones para el infrarrojo
tienen por lo general trayectorias menores de 1 mm.

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DETECTORES DE LA RADIACION

Propiedades de los detectores fotoelctricos


Debe responder a la energa radiante en un
amplio intervalo de longitudes de onda.
Debe ser sensible a bajos niveles de potencia
radiante.
Responder rpidamente a la radiacin.
Producir una seal elctrica que
pueda amplificarse fcilmente y
tener un nivel de ruido relativamente bajo (para
estabilidad).

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Detectores fotoelctricos.- Propiedades

La seal producida debe ser directamente proporcional a


la potencia del haz que incide en el detector:
G = KP + K'
G; respuesta elctrica; en unidades de CORRIENTE,
RESISTENCIA o FUERZA ELECTROMOTRIZ (fem),
K; constante que mide la sensibilidad del detector en
trminos de respuesta elctrica por unidad de potencia
radiante,
K'; CORRIENTE OBSCURA; pequea respuesta constante,
que exhiben los detectores an cuando no incide
radiacin en sus superficies.

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Detectores fotoelctricos.- Propiedades

Instrumentos que tienen una pequea


respuesta de corriente obscura
estn equipados con un circuito compensador
para aplicar una seal contraria para reducir K' a
cero.
Tipos:
RESPUESTA A FOTONES
RESPUESTA AL CALOR

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Fotoemisin y fotoconduccin
Todos los detectores de fotones
se basan en la interaccin de la radiacin con una superficie reactiva
que produce electrones (FOTOEMISION) o
promueva electrones a estados energticos en los que
puede conducir la electricidad (FOTOCONDUCCION).
Slo la radiacin ULTRAVIOLETA, VISIBLE o INFRARROJA CERCANA
poseen energa suficiente
como para dar lugar a estos procesos.
El funcionamiento de los detectores FOTOELECTRICOS se ve
limitado
por el RUIDO DE DISPARO,
Mientras que los detectores trmicos,
por el de JOHNSON.
As los errores indeterminados son diferentes.

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Detectores de Fotones

1) CELDAS FOTOVOLTAICAS
2) FOTOTUBOS
3) TUBOS FOTOMULTIPLICADORES
4) DETECTORES SEMICONDUCTORES
5) DIODOS DE SILICIO.

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Fotoceldas

Las Fotoceldas son pequeos dispositivos


que producen una variacin elctrica
en respuesta a
un cambio en la intensidad de la luz.
Clasificacin:
Fotovoltaicas (Laidler Meiser 1997)
(Rodgers 1995) (Skoog et al 2001) o
celdas solares
Fotoconductivas (Cicardo 1951) (Sears et al
1999).
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Celda fotovoltaica

Una celda fotovoltaica es una fuente de


energa cuyo
voltaje de salida vara en relacin con la intensidad
de la luz en superficie.
Sinonimia:
Celdas solares, celdas fotovoltaicas o clulas
fotovoltaicas
Ventaja principal:
Produccin de energa constante, su larga vida y su
mnimo mantenimiento (Sears et al 1999).

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Efecto fotovoltaico

Las celdas solares estn basadas en el


efecto fotovoltaico
que consiste en la conversin directa de luz
en electricidad a nivel atmico (Rau 1984).
Pares electrn-hueco
Algunos materiales presentan la propiedad
conocida como efecto fotovoltaico que
hace que absorban fotones de luz y emitan
electrones tras la creacin de pares electrn-
hueco.

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Efecto fotovoltaico

Generacin de corriente elctrica


Los pares que se crean en la unin p-n o
suficientemente cerca para migrar a sta sin
recombinarse;
cuando estos electrones libres son capturados en
el lado n y los huecos en el lado p, el resultado
es una corriente elctrica que puede ser utilizada
como electricidad.

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CFV fuente de FEM y Potencia

El dispositivo conectado a un circuito


externo, constituye una fuente de fem y
potencia;
no requiere de luz solar,
cualquier luz con energa en sus fotones mayor
que la banda prohibida del material
semiconductor ser adecuada (Chang 1992)
(Laidler Meiser 1997) (Sears et al 1999)
(Smart Moore 1995).

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Celda fotovoltaica

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Celdas fotoconductivas

Una celda fotoconductiva es un


dispositivo pasivo,
incapaz de producir energa.
Su resistencia vara en relacin con la intensidad
de la luz en su superficie (Cicardo 1951) (Sears
et al 1999) (Smart Moore 1995).

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FOTOTUBOS

Efecto fotoelctrico
Es importante distinguir entre efecto
fotovoltaico y efecto fotoelctrico,
ste fue descubierto por Heinrich R. Hertz, en
1887 (Babor Ibarz 1979) (Pauling 1971) (Sears
et al 1999).

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Efecto fotoelctrico

Emisin de electrones
Cuando incide luz sobre el metal, un
electrn absorbe la energa h de un fotn
que choca contra l y se desprende,
saliendo expulsado.
As, ciertos materiales producen pequeas
cantidades de corriente elctrica cuando son
expuestos a la luz (Atkins 1991) (Levine 1981)
(Strobel 1979).

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Fototubos al vaco

En 1905, Albert Einstein describi la naturaleza


de la luz y el efecto fotoelctrico (Babor
Ibarz 1979) (Castellan 1976) (Levine 1981)
(Pauling 1971) ,
en el cual est basada la tecnologa de fototubos al
vaco (Sears et al 1999) (Skoog et al 2001) o tubos
fotoemisores (Willard et al 1991).
Por este trabajo, se le otorg en 1921 el premio Nobel de
fsica (Cicardo 1951).

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Photomultiplier Tubes (PMT)

Single Channel Detectors


Photomultiplier Tubes (PMT)
Los detectores de PMT ofrecen tpicamente
mucho ms alta sensibilidad que los
detectores de estado slidos y operan
eficazmente en el UV/ VIS y NIR.
Sin embargo su alcance espectral est
tpicamente limitado a alrededor de 950 nm.
Los detectores de PMT tambin necesitan
suministros de poder de alto voltaje.

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Detectores semiconductores

Detectores de Matriz Lineales (CCD


y PDA)
Sistema lineal compacto de deteccin que
ofrece sensibilidad y rapidez de adquisicin.
Es idealmente adaptado a absorcin de UV- VIS-
NIR, colorimetria, emisin y muchas mediciones
de fluorescencia.

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Detectores de Matriz Lineales

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Detectores semiconductores

Matrices de InGaAs
La HORIBA Jobin Yvon familia de detectores de
matriz de NIR, la Serie Synphony presentan
detectores InGaAs grado espectroscpico en una
matriz lineal de 512 o 1024 pxeles.
Alcance espectral de 0.8 a 1.7 micras son estndares.
Con alta eficiencia cuntica sobre 85% y ruido oscuro
bajo,
estos detectores son ideales para aplicaciones exigentes
en el NIR.

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Matrices de InGaAs

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Detectores de Estado slidos

Los detectores de estado slidos son


dispositivos opto-electrnicos
utilizados para convertir fotones incidentes
a seales electrnicas.
Disponible con rangos de longitudes de onda
desde menos de 200 nm hasta ms all de 20
m,
los detectores de estado slido ofrecen
sensibilidad, seguridad, coste y eficacia.

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Espectro electromagntico

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A todos ustedes
Si crees que ests muy lejos;

Piensa en la inmensidad!

Muchas Gracias
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