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Infecciones de cavidades

estriles

TM Alejandra Soto Labra


Tecnologa Mdica
Infecciones de cavidades estriles
Cavidades estriles o serosas: normalmente no hay
microorganismos.

Lquido cefalorraqudeo
Asctico o peritoneal
Articular
Pleural
Pericrdico

Cuando hay aumento de lquido en estos espacios, se deben


obtener estas muestras frente a la sospecha clnica de
infeccin (meningitis, ascitis, artritis supurada, empiema
pleural, pericarditis)
Infecciones de cavidades estriles
Estudio microbiolgico

Toma de muestras
Estas muestras se obtienen generalmente por puncin
percutnea, por lo tanto, se debe realizar un riguroso aseo
y desinfeccin de la zona que se va a puncionar, para
evitar la contaminacin con flora de piel. La muestra debe
ser obtenida por un mdico experimentado en la tcnica.

Transporte:
Deben ser llevadas al laboratorio inmediatamente a
temperatura ambiente
Infecciones de cavidades estriles
Estudio microbiolgico
Procedimiento
-Centrifugacin de la muestra.
-Se siembran en medios enriquecidos (agar sangre, agar
chocolate, caldo thioglicolato). Incubacin en atmsfera de
CO2 3-5%
-Se realiza tincin de Gram de la muestra
-Deteccin de antgenos con el sobrenadante si corresponde

Interpretacin de resultados: por tratarse de lquidos


normalmente estriles, cualquier desarrollo bacteriano
puede tener importancia clnica. Debe correlacionarse con
los antecedentes clnicos del paciente y a las caractersticas
citoqumicas del lquido.
Utilidad clnica de la tincin de Gram

La informacin que entrega este examen permite al clnico


plantear una hiptesis del agente causal, lo que sirve de base
para iniciar un tratamiento antibitico
La sensibilidad clnica vara segn el tipo de muestra:
LCR 75%
Lquido pleural 50-80%
Lquido peritoneal 25-50%
Lquido articular 50%

(Abarca K, Garca P., Vial P. Microbiologa clnica, Ed Universidad


Catlica de Chile 2001)
INFECCIONES ARTICULARES Y
OSEAS
ARTRITIS SPTICA
DEFINICIN: infeccin bacteriana aguda de articulaciones
Generalmente es monoarticular
Ms frecuente en nios que en adultos
En adultos se asocia a:
cirugas
traumatismos
enfermedades de base como Diabetes
Mellitus, Artritis Reumatoide
Prtesis articulares
ARTRITIS SPTICA
PATOGNESIS

Va hematgena
Inoculacin directa
Trauma
Ciruga
inyeccin
Por contiguidad
ARTRITIS SPTICA
ETIOLOGA
NIOS ADULTOS

< 5 AOS > 5 AOS

Staphylococcus aureus +++ ++++ ++++


Haemophilus influenzae +/-
Streptococcus pyogenes + + +
Streptococcus pneumoniae + + +
Bacilos Gram (-) + +
Neisseria gonorrhoeae +
Anaerobios +
ARTRITIS SPTICA
DIAGNSTICO

Manifestaciones clnicas:
Fiebre
Compromiso del estado general
Sntomas locales:
Dolor
Eritema
aumento de volumen
impotencia funcional
ARTRITIS SPTICA.
DIAGNSTICO de Laboratorio:

Muestra: lquido articular


Exmenes:
Tincin de Gram (sensibilidad 50%)

Cultivo

Citoqumico
recuento clulas ( alto, predominio de polimorfonucleares)
protenas ( elevada)
glucosa (< 40% glicemia)
Meningitis bacteriana

El LCR es la muestra clnica que con mayor urgencia debe


ser procesada, ya que habitualmente proviene de un
paciente grave en el que se ha sospechado el diagnstico
de meningitis.

Los microorganismos presentes suelen ser escasos y son


sensibles a las condiciones ambientales ( fro y sequedad),
por lo que se les debe proporcionar rpidamente un medio
de cultivo ptimo para que se desarrollen
Meningitis bacteriana:

Inflamacin de leptomeninges (piamadre y aracnoides)


con efecto sobre LCR que se encuentra en espacio
subaracnodeo.
Meningitis bacteriana
Principales agentes causales:
Neisseria meningitidis
Haemophilus influenzae
Streptococcus pneumoniae

En recin nacido:
Streptococcus beta hemoltico grupo B
Escherichia coli
Listeria monocytogenes

Meningitis crnica: Mycobacterium


tuberculosis
Meningitis bacteriana:
meningitis meningoccica

Agente: Neisseria meningitidis


Es un diplococo gram negativo
Reservorio humano. Portacin asintomtica
20% a nivel nasofarngeo.
Transmisin: por contacto a travs de
gotitas (secreciones respiratorias)
Afecta principalmente a nios y
adolescentes
Perodo de incubacin: 1 a 3 das
Neisseria meningitidis
Patogenia

Factores de virulencia:
Pili: adherencia en mucosa de nasofaringe y orofaringe.

Cpsula: protege de fagocitosis.


Segn tipo de polisacrido de la cpsula se diferencian
en serogrupos: los ms comunes son A, B y C

Lipooligosacrido: acta como endotoxina, es muy


potente. Es responsable de las manifestaciones clnicas.

Proteasa IgA: degrada IgA a nivel epitelio.


Neisseria meningitidis
Patogenia

1. Adherencia: en epitelio nasofaringeo


2. Colonizacin
3. Invasividad: (< 1% de los que han colonizado)
La bacteria es fagocitada por las clulas epiteliales
de nasofaringe, pasando a va linftica y de ah al
torrente circulatorio.
4. Toxigenicidad: por accin de la endotoxina que
produce efectos generalizado en todos los rganos
pero especialmente SNC.
Meningitis bacteriana
Neisseria meningitidis

Manifestaciones clnicas: fiebre, cefalea,


somnolencia, irritabilidad, rigidez de nuca.
Exantema cutneo (meningococcemia)
Mortalidad sin tratamiento casi 100%
Mortalidad con tratamiento 10%
Secuelas graves < 1%
Tratamiento: Penicilina
Quimioprofilaxis a contactos
Meningitis bacteriana
Neisseria meningitidis
Meningitis bacteriana
Neisseria meningitidis
Meningitis bacteriana
Haemophilus influenzae
Bacilo gram negativo pleomrfico, exigente en sus
requerimientos nutricionales.
Las cepas capsuladas producen cuadros invasivos,
especialmente el serotipo b
Ms frecuente en nios < 5 aos
Perodo de incubacin 5 a 6 das
Mortalidad 5% con tratamiento. Secuelas 10%
Prevencin y tratamiento:
Vacuna anti H.influenzae tipo b (incorporada al
programa de vacunacin)
Tratamiento: cefalosporina de 3 generacin
Meningitis bacteriana
Streptococcus pneumoniae
Cocos gram positivos agrupados en pares o
cadenas
Afecta a todas las edades, pero
especialmente a < 2 aos y >65 aos
Mortalidad 20%
Secuelas 15-20%
Tratamiento:
penicilina o cefalosporina
vacuna
Diagnstico
Clnico: signos y sntomas
examen fsico
Laboratorio:
Puncin lumbar: se obtiene
LCR para realizar :
citoqumico
gram
cultivo
reacciones de aglutinacin
Deteccin de antgenos bacterianos por
reaccin de aglutinacin en ltex

Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae tipo b
Neisseria meningitidis A, C, Y, W135
Neisseria meningitidis B /E coli K1
Streptococcus agalactiae
Recoleccin de la muestra

Antisepsia de piel

Tubo estril con tapa rosca

Enviar Microbiologa: el ms turbio

Idealmente min 2 ml
TRANSPORTE MUESTRA

Lo antes posible, antes 15 minutos

T ambiente

No refrigerar

CRITERIOS DE RECHAZO

Relativos

Muestra en recipientes rotos, procesar y con alerta a


medico tratante de posible contaminacin
PROCESAMIENTO DE MUESTRA PARA
GRAM Y CULTIVO SEGN CANTIDAD DE
MUESTRA

<0.5 ml Gram y cultivo directo

>1 ml Centrifugacin convencional


Gram y cultivo de sedimento
Gram con centrifugado convencional

Centrifugacin a 3000 rpm / 10- 15 min

Sensibilidad: 60%
Especificidad: 97%

Posibilidad de visualizar bacteria se correlaciona


concentracin en LCR

103ufc/ml 25% de positividad


103- 105ufc/ml 60% de positividad
>105 ufc/ml 97% de positividad
Procesamiento de la muestra:

Cultivo:
Sensibilidad de hasta 90%

Medios de cultivo
Agar sangre cordero al 5%
Agar chocolate
Medios lquidos : Cuestionados

Thioglicolato no recomendado

Viales de hemocultivo: No existe recomendacin

Incubacin 2-3 das en CO2


Deteccin de Antgenos bacterianos

Costo/beneficio bajo

Ms utilizados:

Aglutinacin de Partculas de ltex sensibilizadas con Ac


especficos
PERITONITIS BACTERIANA
PERITONITIS BACTERIANA

PERITONITIS PRIMARIA:
Peritonitis bacteriana sin evidencia de ruptura
de vscera
PERITONITIS SECUNDARIA:
Hay ruptura de vscera (apendicitis, trauma
abdominal)
PERITONITIS TERCIARIA:
Complicacin de una peritonitis 2aria,
postquirrgica (agentes IIH)
PERITONITIS BACTERIANA
PERITONITIS BACTERIANA
ESPONTNEA O PRIMARIA (PBE)

Etiologa

Enterobacterias (Escherichia coli)


Streptococcus pneumoniae
Enterococcus
PBE
DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

Cultivos : 30-40% negativos

Diagnstico:
Recuento de PMN >250/mm3
PBE
DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

Toma de muestra:

Tcnica asptica
En frasco sin anticoagulante
Tomar suficiente volumen ( +/- 10 ml)
PBE
DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

Procesamiento
Inocular un frasco de hemocultivo
Aparte muestra para Gram directo
(centrifugar)

Si volumen es bajo:
Sedimento se siembra en medios
enriquecidos (agar chocolate y agar sangre),
incubacin 5% CO2, ideal mnimo 72 hrs
Sedimento: Tincin de Gram
HEMOCULTIVO
Cuando y por qu se solicitan
hemocultivos?
Los hemocultivos se realizan ante una sospecha de
que el torrente sanguneo ha sido invadido por
bacterias (Bacteremia o Septicemia)
Bacteremia o Septicemia (sepsis) implica cada de
las defensas naturales del husped
Si est presente en la sangre, la bacteria podra
ganar un fcil acceso a todos los rganos vitales
Podra llevar a serias complicaciones y/o muerte del
paciente
Casos ms frecuentes en los que se pide
un Hemocultivo
Fiebre
Neumona
Infeccin severa del tracto urinario.
Sospecha de infeccin intra-abdominal severa.
Sospecha de infeccin de vlvulas cardacas.
Sospecha de infeccin producida por prtesis
quirrgicas
Sospecha de meningitis.
Recuento de Blancos muy elevado (> 12.000) o muy
bajo (<3.000)
Presin arterial aumentada o disminuida sin causa
aparente.
HEMOCULTIVOS

El hemocultivo es clave para ayudar el mdico a diagnosticar


la septicemia

Se toma en caso de fiebre o de infeccin


grave

Se toma un mnimo de 2 cultivos


Cul es el valor de un hemocultivo
negativo?

El torrente sanguneo no ha sido invadido y el


pronstico es BUENO.

Se puede pasar de antibiticos IV o IM a una


terapia oral.

Avala la decisin del alta del paciente.


SISTEMAS DE HEMOCULTIVOS

Manual

Automatizado
Hemocultivos Mtodo Manual

Toma muestra cateter venoso


central, periferico
Hemocultivos Mtodo Manual

Tiempo de Protocolo: 7 das


Procedimiento
Inoculacin en frasco.

Incubacin en estufa.

Observacin diaria de los frascos.

A las 24 horas: Primer Repique

Coloracin de Gram

Agar chocolate

Agar sangre

Incubacin en estufa.
Hemocultivos Mtodo
Manual
Procedimiento (Cont)
A las 48 horas: Segundo Repique

Coloracin de Gram

Agar chocolate

Agar sangre

Incubacin en estufa

A los 7 das: Repique Final

Coloracin de Gram

Agar chocolate
Hemocultivos
Mtodo Manual Desventajas
Propias del sistema
Complejidad prctica
Excesivo trabajo manual - Numerosos repiques

Rapidez
Demoras para la obtencin de resultados

Bioseguridad
Riesgos para el operador - Formacin de aerosoles
Uso de material cortante
Hemocultivos
Mtodo Manual Desventajas
Salud del paciente
Rapidez del diagnstico
Costos fijos de internacin (das/cama)
Antibioticoterapia incorrecta (costo y riesgos)
Aumento de resistencia de los microorganismos
Tiempo y energa para la esterilizacin de los
materiales
Riesgos de juicios por falta de bioseguridad
Prestigio del laboratorio
Equipos Automatizados
para Hemocultivos
TECNOLOGIA AUTOMATIZADA

Tecnologa de fluorescencia no invasiva


Deteccin de produccin de CO2
Lectura permanente cada 10 minutos
Positividad a partir de las 2 hrs.
Alarmas de positividad, luminosas y sonoras
METODOLOGA
El sensor es un compuesto sensible al CO2.
El sensor responde con una seal fluorescente que
es detectada por el instrumento.
La fluorescencia en el sensor se modifica con
los cambios en CO2
La fluorescencia se incrementa a medida que se
incrementa el CO2.
METODOLOGA

Lectura cada 10 minutos


Permite una deteccin Precocidad en el
ms temprana y diagnstico del paciente
rpida

Viales con resinas


Aumenta rendimiento
para neutralizacin de
antibiticos
Resinas

Los Viales Contienen Resinas que tienen las


siguientes Ventajas :

Neutralizacin de los antibiticos

Lisis de los Leucocitos por accin mecnica


Resinas
Dos tipos de Resinas :

Resinas de intercambio catinico: Se unen


inicamente a los antimicrobianos cargados
positivamente como los aminoglucsidos.

Resinas absorbentes polimricas (Hidrofbicas):


Se unen a las porciones hidrofbicas de
prcticamente cualquier antimicrobiano.
Resinas
VIALES
Viales
Adultos
Con resinas que neutralizan los antibiticos

Gran volumen de Sangre 8 - 10 mL mximo


(3 - 10 mL rango)

Mayor Volumen de Muestra


Mejor recuperacin
Viales
Peditricos: Medio Aerbico especial
Con resinas que neutralizan los antibiticos
1 - 3 mL volumen ptimo
(0.5 3 mL rango)
La formulacin del medio y los algoritmos
especficos mejoran la deteccin de los
patgenos de los nios
(Haemophilus sp., Neisseria sp.)
CONSIDERACIONES GENERALES
No escribir sobre el cdigo de barras de los viales.

No escribir los datos del paciente con lpiz que se


borre.

En cada toma de muestra de hemocultivos se debe


elegir un sitio de puncin diferente.

No exponer los viales a la luz directa del sol y


mantenerlos a temp. amb.
CONSIDERACIONES GENERALES

Nunca sobrepasar el volumen mximo de llenado .

Siempre llegar al volumen mnimo.

Lo ideal es completar el volumen ptimo.


Resumen Principales Ventajas

Lectura cada 10 minutos

Lector de cdigo de barras en cada unidad


.
-Fcil carga y descarga de frascos.

Resinas neutralizadoras de antibiticos

Medios de cultivo de alta calidad (BBL/Difco).

Posibilidad de toma de muestra con sistema


VACUTAINER.
LABORATORIO

TINCION DE GRAM

AGAR CHOCOLATE